Una fábrica

en Paracas
(APROPISCO)
Las muestras RECOLECCIÓN DE
MUESTRA DE
provienen de efluentes MUESTRAS
EFLUENTES
emitidos por El terminal
Pesquero de
Ventanilla

Procesamiento de las Recolección de 30

muestras a diluciones AISALMIENTO DE Refrigeración
muestras de agua de
seriadas al décimo con BACTERIAS y transporte
mar contaminadas en
agua de mar esterilizada de muestras
frascos de 250ml
al laboratorio

Toma de 10ml de cultivo

Siembra de alícuotas de Incubar las ELECCIÓN DE CEPAS
de 48 horas y se repicaron
0,1 mL de las diluciones en diluciones a PROTEOLÍTICAS en AM suplementado con
Agar Marino (AM) a pH 8,0 25°C por 5 días
caseína 1%, ph 8,0

Mantenimiento de las Reconocimiento de la capacidad

Mediciones cada 24 Incubación de de
cepas en AM hidrolítica de las cepas mediante la
horas hasta por un cultivos a 25°C
semisólido con adición medición de halos transparentes
periodo de 5 días hasta por 5 días
de 10% de glicerol formados alrededor.

Siembra en Caldo
Selección de 5 cepas Sometimiento a
OPTIMIZACIÓN DE Marino (CM)
CM43, CM44, CM45, diferentes
LOS PARÁMTEROS DE suplementados
CM46, CM48 temperaturas y ph
CRECIMIENTO con caseína 1%
Por 5 dias

Toma de sobrenadantes Siembra de 1 mL de cultivo Reactivación EVALUACIÓN DE LA

de cultivos obtenidos por en frascos conteniendo 100 de las cepas ACTIVIDAD
centrifugación a 2500 rpm mL de CM suplementados en CM PROTEOLÍTICA
por 10 minutos a 4 °C con caseína al 1%,

Preparación de la mezcla Incubación de la Centrifugación a 2500

de reacción en tubos
conteniendo 1mL de la
solución de caseína
Adición de 2 mL de
mezcla en baño maría rpm por 10 minutos a
Ácido Tricloroacético
por 20 minutos a 25ºC temperatura ambiente
(ATC) al 10% (p/v)
agitando suavemente

Sometimiento de las CARACTERIZACIÓN Realizar el mismo Medición de

cepas a observaciones FENOTÍPICA DE LAS experimento a Densidad Óptica
microscópicas y pruebas BACTERIAS AISLADAS cada cepa a 280 nm a los
conducentes a la caracte- sobrenadantes
rización

Como medio base La temperatura de

para todas las incubación fue en
pruebas se utilizó el todos los casos a 25°C
CM o AM a pH 8,0 hasta por 5 días