PROGRAMA DE

VIGENTE DESDE 05 de Septiembre de 2014

REPRODUCCION
7. PLAN DE REPRODUCCION FECHA VERSION
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NO SE PERMITE SU MODIFICACION SIN LA INTERVENCION DEL AREA RESPONSABLE, NI

SU USO FUERA DE LA EMPRESA. EL ORIGINAL FIRMADO POR LOS RESPONSABLES
REPOSA EN EL AREA ADMINISTRATIVA

TABLA DE CONTENIDO

Pág.
1. Descripción 1
2. Objetivo 1
3. Alcance 1
4. Definiciones 1
5. Normativa 2
6. Responsables 2
7. Flujograma 3
8. Procedimientos 4
9. Control 10
10. Anexos 10

1. Descripción
Proceso descriptivo de los diferentes sistemas de reproducción para la obtención de larvas
y alevinos para el suministro propio y/o comercialización.

2. Objetivo
Definir claramente el proceso de reproducción de las especies manejadas y estandarizar
procesos y procedimientos para todas las especies producidas en laboratorio en la
empresa.

3. Alcance
El PROGRAMA DE REPRODUCCION está dirigido a los procedimientos de selección de
reproductores, proceso de inducción, desove, limpieza y control en las áreas de
laboratorio, sistemas de incubación, tanques circulares, incubadoras, depósitos de agua,
biofiltros, sistemas de bombeo y aireación del laboratorio de reproducción y tuberías de
aire y agua e involucra a todos los operarios que tengan acceso al laboratorio y al personal
técnico encargado de la reproducción.

4. Definiciones
Reproductor maduro: Adulto identificado como en estado óptimo para iniciar proceso de
inducción para desovar de manera controlada en laboratorio de reproducción.
Desove: Momento de ovulación de la hembra donde se obtienen los huevos para fertilizar
ya sea de manera natural o seminatural.
Líquido Serra: Preparación a base de Formol, Alcohol y Ácido Acético que permite
detectar el grado de maduración de los ovocitos para determinar si es viable el inicio de la
inducción de esa hembra para obtener un desove efectivo.

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Huevo:
Eclosión: Nacimiento de la larva cuando rompe el huevo y queda libre en el medio
acuático.
Larva: Priemr estadio
Japa: Encierro en malla que se instala en los estanques de tierra y que contiene
reproductores, larvas o alevinos para su fácil pesca, traslado y/o manipulación.
Hormona: Sustancia química de origen natural que desencadena la fase final de
maduración sexual de los adultos aptos y lleva a la ovulación en las hembras y a la
presencia de semen de buena calidad en los machos. Se inyecta a cada reproductor según
el protocolo de inducción.
Anestésico: Sustancia usada para adormecer los reproductores para su manipulación o
desoves artificiales fuera del agua donde se requiere hacer presión abdominal a machos
para obtener su semen o a hembras para obtener sus huevos al momento de la ovulación.
Grados Hora: Medida de referencia que calcula el tiempo que tarda un proceso biológico
en completarse de acuerdo con la temperatura del medio acuático.
Desaglutinador: Sustancia con la que se hacen baños a los huevos de algunas especies y
que elimina la adhesión de los huevos entre sí y con algún sustrato presente.
Endogamia: Reproducción entre peces de la misma familia que puede generar anomalías
genéticas
Papila genital: Abertura entre el ano y la aleta anal por donde los peces expulsan sus
huevos o semen y que en las hembras evidencia el grado de maduración sexual.

5. Normativa
No está permitido el uso de reproductores Genéticamente Modificados OGM ni hacer
reproducción con animales capturados del medio.

6. Responsables
Gerencia: Directiva de la empresa que planifica y prioriza las especies a trabajar y el
manejo para cada una de ellas.
Técnico de reproducción: Profesional encargado de coordinar los procesos reproductivos
para la obtención de larvas y alevinos.
Personal de apoyo: Todo el personal involucrado en el manejo y mantenimiento del
laboratorio durante desoves y proceso de incubación.

7. Flujograma
Aplica la zona clara del diagrama de flujo.

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8. Procedimientos

a. Materiales y equipos: Hay materiales y procesos diferentes para tres tipos de

sistemas reproductivos si son Desoves Naturales, Desoves Seminaturales
Inducidos y Desoves en seco.

Para Desoves Naturales (Tilapia Roja y Nilótica) se requieren los siguientes equipos:

Japas instaladas para separación de reproductores por desovar, desovados a descanso y machos.
Transportadores para reproductores de tilapia para su separación después de la colecta de
huevos.
Vasijas con flotador para la selección de huevos según su color – estado de madurez
Desinfectante para huevos antes de iniciar proceso de incubación. (Sal y Formol)
Bolsas para traslado de huevos al laboratorio
Incubadoras de flujo descendente de 3.5 Litros desinfectadas e instaladas con el flujo requerido
Bandejas receptoras, una por incubadora desinfectada e instalada

Para Desoves Seminaturales Inducidos (Cachama) se requieren los siguientes equipos:

Sonda para hacer la biopsia de los ovocitos (Cánula No. 6)

Caja de Petri para depositar la muestra de huevos
Líquido Serra para aclarar los huevos
Transportador de reproductores
Sal profilaxis
Formol
Hormona
Microscopio o Estereoscopio

Para Desoves en Seco (Carpa, Bocachico, Yamú y Bagres) se requieren todos los elementos
anteriores y además los siguientes equipos:

Mesa de trabajo acolchada

Tranquilizante
Sutura
Bisturí
Bolsa de adormecimiento
Bolsa de manipulación
Vasijas desinfectadas
Elementos de mezcla (Plumas o espátulas)
Desaglutinador

b. Referencias y/o protocolo: El protocolo de inducción será el dispuesto por el

técnico de reproducción.

Dosis inicial de hormona EPC (Extracto de Pituitaria de Carpa) de 0.5 mg por Kilo de peso de la
hembra y a las 24 horas 5.0 mg por Kilo de peso de la hembra. Inyección intramuscular en sentido

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opuesto a la disposición de las escamas. Inyectar el macho con el 20% de la segunda dosis al
momento de esta si es requerido.

Cada una de las dosis debe ser pesada en balanza analítica verificando que esta se encuentre
calibrada y en el rango de tiempo de vida útil de la última calibración. Debe tener visible el sticker
que así lo demuestra.

PROTOCOLO ESTANDAR DE INDUCCION

ESPECIE DOSIS INTERVALO HORAS TIPO DE DESOVE

mg/Kg Horas GRADO
Tilapia Roja y Nilótica N/A N/A 6.700 – 8.500 Natural
10 a 12 días
Bagre Rayado 0.5 - 5 12 210 – 230 Seco
Yaque 0.5 - 5 12 230 – 260 Seco
Cachama 0.5 - 5 12 – 16 240 – 270 Seminatural
Yamú 0.5 - 5 12 120 – 150 Seco
Bocachico 2–6 12 240 – 270 Seco o Seminatural
Carpa 5 Una sola dosis 240 – 260 Seco o Seminatural

c. Procedimientos Operacionales

Desoves Naturales – TILAPIAS

Los lotes de reproductores se obtienen de la misma genética propia, haciendo selección masal y
reemplazándolos cuando cumplen 12 a 14 meses de su etapa productiva, o su equivalente a 18 a
20 meses de edad total. Se hacen levantes para obtener machos y hembras de lotes diferentes
para disminuir la endogamia.

Se tienen reproductores en proporción de 3 a 4 hembras por cada macho en las japas de

reproducción a una densidad máxima de 2.5 reproductores por metro 2 de japa. REGISTRO
REPRODUCTORES DE TILAPIA REPTIL-01
Se inicia el ciclo de reproducción en japa y a los 10 días se inicia la revisión de hembras.
Se colectan los huevos separándolos según su color en tres estados:
Amarillo pálido - 0 a 24 horas de fertilizados
Amarillo oscuro – 24 a 48 horas de fertilizados
Marrón – más de 48 horas de fertilizados, próximos a eclosionar o recién eclosionados
Se separan las hembras a las que se les extraen huevos a una japa nueva de reposo. Las que no
han mostrado huevos se regresan a la misma japa y los machos se pasan a japa de descanso en
proporción de 1 por cada 3 a 4 hembras que pasan a descanso, quedando en la japa de
producción las hembras que no han desovado con su proporción respectiva de machos.
Si se detectan animales enfermos, con hemorragias o malformaciones se deben retirar a la japa de
enfermería para valoración veterinaria para determinar su tratamiento y manejo.

Los huevos se llevan con agua fresca, separados por su estado, al laboratorio y se hace un
proceso de limpieza y retiro de impurezas y luego desinfección combinando en la misma
preparación Formol y Sal en las concentraciones que se describen en la siguiente tabla:

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TRATAMIENTO CONCENTRACION TIEMPO

Formol 25 ppm Baño por 2 a 3 minutos con aireación
Sal 3 gramos por Litro de agua (3 Baño por 2 a 3 minutos con aireación
ppt)

La desinfección se debe hacer con un sistema de aireación moderada que evite que baje el
oxígeno por debajo de 5 ppm durante ese proceso para evitar la muerte del huevo.

Se deben poner unos 700 a 800 ml por cada incubadora de 3.5 Litros y se regula el flujo
garantizando una total movilidad de todos los huevos de la incubadora al menor flujo posible.
REGISTRO DE ENTRADA A INCUBACION TILAPIA INCTIL-01
Se deben constatar los flujos permanentemente para evitar es estrés mecánico o la falta de
movimiento.
Se deben monitorear los parámetros de calidad de agua del sistema de incubación máximo 24
horas después de cada ingreso para evidenciar el correcto funcionamiento de los sistemas de
biofiltración y los correctivos.

PARAMETRO VALOR OBSERVACIONES FRECUENCIA

Amonio 0 – 0.04 ppm Como valor máximo 2 veces por semana
Oxígeno 4 ppm Como valor mínimo 2 veces al día
Alcalinidad 80 ppm Como valor mínimo 1 vez por semana
Temperatura 26º C – 32º C Rango ideal 2 veces al día
pH 6.5 a 7.5 Rango ideal 1 vez al día

REGISTRO DE AGUA EN LABORATORIO AGUALAB-01

Cumplido el ciclo, eclosionan las larvas y van siendo recogidas de manera automática en las
bandejas receptoras, donde no se debe supera las 12.000 a 15.000 larvas. En caso de llegar a esa
cantidad, se retira la bandeja y se instala una nueva como receptora de esa incubadora y la
bandeja retirada pasa a las canales de recambio donde las larvas terminarán su proceso de
reabsorción de saco vitelino.
Una vez terminado el proceso de reabsorción unas 72 horas después de la eclosión, las larvas
reciben su primera alimentación exógena con concentrado del 50% de proteína en polvo y con
hormona masculinizante 17 Alfa Metil Testosterona. Para esa primera alimentación se suspende la
entrada a las bandejas a alimentar y se espolvorea la cantidad de 5 gramos por bandeja y luego de
1 minuto se reactiva la entrada de agua al flujo requerido.

Las larvas con diferencias de nacimiento de menos de 8 horas, se consideran de un solo lote y van
a japas sin mezclarse con lotes con horas diferentes de eclosión. REGISTRO DE SIEMBRA DE
LARVAS SIEMBRA-01

Desoves Seminaturales Inducidos – CACHAMA y otros

Manejo de Reproductores: Los reproductores deben ser tenidos con dietas alternativas desde
Agosto – Septiembre hasta el mes de Marzo para contrarrestar los efectos climáticos de la
temporada de verano que va de Diciembre a Abril y donde se presenta una drástica disminución en

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los peces maduros lo que dificulta y disminuye la obtención de alevinos de Cachama en cerca de
un 85 %.

Revisión de Reproductores: Para revisar reproductores para desove se debe suspender totalmente
la alimentación al estanque donde se van a revisar los reproductores 36 a 48 horas previas a dicha
revisión.
Para buscar adultos aptos para la inducción al desove, se capturan con redes de ojo ancho sin
nudo y se encierran a la entrada de agua del estanque para mantener los niveles adecuados de
oxígeno mientras se hace la revisión de los ejemplares.
Las hembras que deben ser revisadas se detectan por el abultamiento abdominal que indica la
presencia de huevos en los ovarios, la blandura del abdomen y la dilatación de su papila genital.
Estas hembras que presenten estos signos primarios son revisadas en detalle haciéndoles una
biopsia ovárica mediante una cánula No. 6 que se introduce por el oviducto hasta encontrar
huevos. Luego de una suave succión se obtiene una muestra que se deposita en una caja de Petri
para su apropiada observación. Al determinar que se encuentran sueltos, que la presencia de
ovocitos en estados primarios en casi nula, su color azul grisáceo y que son parejos se les aplica
líquido Serra para evidenciar el estado del núcleo y su migración a la periferia, que determinan el
grado de madurez de la hembra y sus óvulos.

Los machos con un simple masaje desde el tórax hacia la parte posterior de su papila genital
muestran expulsión de semen el cual se debe valorar según su viscosidad, color y cantidad para
determinar que es un macho apto para fecundar los óvulos en el momento apropiado.

Inducción y desove: Los reproductores a los que se les inicia el protocolo de reproducción, son
identificados por el microchip o son marcados de manera temporal en su aleta caudal con hilos de
colores e ingresados al laboratorio. REGISTRO DE REPRODUCTORES REPOT-01
Para los reproductores marcados con chip, y los que sean marcados con microchip en ese
momento, se diligencia o abre el registro individual respectivo.
REGISTRO HOJA DE VIDA DE REPRODUCTOR IDENTIFICADO REPHV-01
Se determina el protocolo de inducción por parte del técnico a cargo y se calculan tiempos de
inyección de la hormona y día y hora previstos para el desove.
Se alistan las trampas de huevos lavadas y desinfectadas al igual que las incubadoras previendo
un adelanto del desove.
Llegada la ovulación se debe verificar el correcto comportamiento de los machos realizando el
cortejo y la fertilización de los óvulos que expulsa la hembra.
Los huevos colectados en la trampa son retirados y se calcula su volumen en Litros y se ingresan a
las incubadoras a razón de máximo 3 Litros por incubadora de flujo ascendente de 200 Litros.
REGISTRO ENTRADA A INCUBACION OTRAS ESPECIES INCOT-01
A las 8 horas se hace un conteo del porcentaje de fertilización. Con macropipeta se retira una
cantidad de huevos entre 100 y 200 huevos y se cuentan los que no presentan fertilización y que
están blanqueados. Se registra el porcentaje de fertilización.
18 a 24 horas después del inicio de la incubación se presenta la eclosión, terminado este paso se
debe hacer limpieza de las incubadoras. Se suspende el flujo y por gravedad con manguera se
aspiran todas las impurezas y restos de los huevos que se han aglutinado en las paredes de la
incubadora y se almacena esa agua en un tanque bajito de 100 Litros. Allí se hace otro aspirado
con cánula No.10 para capturar las larvas que han salido de la incubadora y se regresan de nuevo
al sistema de incubación donde se restablece el flujo y se mantienen las larvas allí.

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Incubación de Artemia: Luego de 72 horas después de la eclosión las larvas terminan la absorción
de su saco vitelino y se procede a entregarles su primera alimentación exógena. Para ellos 24
horas previas se ha puesto quistes de artemia a eclosionar.
Se agregar 25 gramos de huevos de artemia en 20 Litros de agua en las incubadoras previstas
para tal fin, con aireación fuerte e iluminación permanente en la superficie del agua. Se sube la
salinidad a 30 ppt (partes por mil) equivalentes a 600 gramos de sal para los 20 Litros de agua, se
le agregan 10 gramos de Bicarbonato (0.5 gramos por Litro de agua) para mejorar el pH y la
alcalinidad y a las 20 horas inicia la eclosión de la artemia. Solo se utiliza artemia certificada
GLOBALG.A.P. marca INVE del tipo Premium Quality GSL.

Inicio de Larvicultura: Las larvas ya comiendo se mantienen por 24 a 72 horas más en las
incubadoras recibiendo artemia viva cada dos horas durante el día y la noche y cuando se van a
sembrar, son aspiradas de nuevo a un tanque con malla fina que las captura y son puestas en
bolsas con oxígeno a una densidad media de unas 100.000 larvas por bolsa de 10 litros de agua
con un tiempo de autonomía de 1 hora, pero siendo transportadas a estanque de manera
inmediata. Se registra la cantidad de larvas salidas por incubadora y se hace la salida del
laboratorio. REGISTRO DE SIEMBRA DE LARVAS SIEMBRA-01

Desoves en Seco – YAMÚ, BAGRES y otros

Manejo de Reproductores: Los reproductores deben ser tenidos con las dietas apropiadas para
cada especie según la tabla anexa:

ESPECIE TIPO DE DIETA

Bagre Rayado Alimento vivo. Alevinos de Tilapia descartados pro manchas.
Larvas y alevinos de Bocachico.
Yaque Concentrado del 32% de proteína.
Yamú Concentrado del 32% de proteína. Soya hidratada
Bocachico Concentrado del 32% de proteína.
Carpa Concentrado del 32% de proteína. Soya hidratada

Revisión de Reproductores: Es el mismo proceso que el de Desoves Seminaturales Inducidos.

Inducción y desove: Los reproductores a los que se les inicia el protocolo de reproducción, son
identificados por el microchip o son marcados de manera temporal en su aleta caudal con hilos de
colores e ingresados al laboratorio. REGISTRO DE REPRODUCTORES REPOT-01
Para los reproductores marcados con chip, y los que sean marcados con microchip en ese
momento, se diligencia o abre el registro individual respectivo.
REGISTRO HOJA DE VIDA DE REPRODUCTOR IDENTIFICADO REPHV-01
Se determina el protocolo de inducción por parte del técnico a cargo y se calculan tiempos de
inyección de la hormona y día y hora previstos para el desove. Se alistan las incubadoras y se
mantienen machos aparte de las hembras
En caso de tener que suturar la papila genital de las hembras, el proceso se hace anestesiando el
ejemplar para evitar estrés y se anuda de tal forma que se pueda soltar la sutura solo cortando una
punta y halando sin causar traumatismos al reproductor. El proceso de anestesia se explica en el
siguiente paso.

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Cumplido el tiempo para la ovulación de la hembra de acuerdo con los grados / hora, se procede a
retirarla del estanque, poniéndola en la Bolsa de adormecimiento con 10 Litros de agua y una
concentración de Tranquilizante (Eugenol) a razón de 100 mg/Litro, 1 gramo de Eugenol para los
10 Litros de agua. En solo 2 minutos el reproductor se encuentra anestesiado. Se retira de la bolsa
de anestesia y se introduce a la bolsa de tela para su manipulación en la mesa acolchada para
hacer el desove.
Se seca muy bien la superficie de trabajo y los alrededores de la paila genital, así como el
recipiente donde se colectan los huevos que debe estar perfectamente limpio desinfectado y seco.
Se hace el proceso de extrusión para obtener los gametos y se depositan en el recipiente
destinado para ello.
Simultáneamente los machos han sido anestesiados y son retirados de la bolsa de anestesia y
secados para hacer la extrusión para obtener el semen que caerá sobre los huevos recién
recolectados. Este proceso desde la extracción de huevos y la inoculación del semen no debe su
erar los 2 a 3 minutos de tiempo. Luego con el elemento mezclador (Pluma o espátula) se
homogeniza la mezcla muy suavemente y se agregan unos 10 a20 mililitros de agua que sirven
como activador de los espermatozoides. Luego de un minuto de estar mezclando se inicia la
hidratación de los huevos con el agua del sistema de incubación haciendo recambios permanentes
para mantener un buen nivel de oxígeno hasta que el huevo quede hidratado.

En ese momento se mide volumétricamente y se disponen no más de 2 litros de huevos por

incubadora de flujo ascendente de 200 Litros. REGISTRO ENTRADA A INCUBACION OTRAS
ESPECIES INCOT-01
A las 8 horas se hace un conteo del porcentaje de fertilización. Con macropipeta se retira una
cantidad de huevos entre 100 y 200 huevos y se cuentan los que no presentan fertilización y que
están blanqueados. Se registra el porcentaje de fertilización.
12 a 24 horas después del inicio de la incubación y dependiendo de la especie, se presenta la
eclosión, terminado este paso se debe hacer limpieza de las incubadoras. Se suspende el flujo y
por gravedad con manguera se aspiran todas las impurezas y restos de los huevos que se han
aglutinado en las paredes de la incubadora y se almacena esa agua en un tanque bajito de 100
Litros. Allí se hace otro aspirado con cánula No.10 para capturar las larvas que han salido de la
incubadora y se regresan de nuevo al sistema de incubación donde se restablece el flujo y se
mantienen las larvas allí.

Incubación de Artemia: Es el mismo proceso que el descrito en Desoves Seminaturales

Inducidos. La variación es que las larvas de Bagre Rayado y Yaque se mantienen en laboratorio 3
a 4 semanas pero la artemia solo se les da los primeros 3 días.

Inicio de Larvicultura: Las larvas ya comiendo se mantienen por 24 a 72 horas más en las
incubadoras recibiendo artemia viva cada dos horas durante el día y la noche y cuando se van a
sembrar, son aspiradas de nuevo a un tanque con malla fina que las captura y son puestas en
bolsas con oxígeno a una densidad media de unas 100.000 larvas por bolsa de 10 litros de agua
con un tiempo de autonomía de 1 hora, pero siendo transportadas a estanque de manera
inmediata. Se registra la cantidad de larvas salidas por incubadora y se hace la salida del
laboratorio. REGISTRO DE SIEMBRA DE LARVAS SIEMBRA-01

Las larvas de Bagre Rayado y Yaque se mantienen en las canaletas o tanque para su proceso de
larvicultura en laboratorio. Deben estar cubiertas en su totalidad con plásticos negros las 24 horas
y todos los días se deben seleccionar por tamaño para tener grupos homogéneos evitando el
canibalismo. Deben ser alimentadas las 24 horas mínimo una vez cada hora. 24 a 30 veces por
día.

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Las larvas de Bagre Rayado y Yaque son alimentadas adicionalmente con plancton nativo, larvas
de otros desoves disponibles, preferiblemente Bocachico durante la primera semana y en ese
mismo momento se inicia el acostumbramiento a alimento concentrado haciendo papillas húmedas
con 90% de vísceras e hígado de pollo y 10 % concentrado en harina con el 50% de proteína.
Cada 3 días se cambia la proporción en un 10% disminuyendo las vísceras e hígado de pollo y
aumentando el concentrado del 50% de proteína.
Cumplidas las 3 semanas las larvas ya se alimentan con concentrado seco y se pasan a los
estanques para su crecimiento, siendo alimentadas al atardecer de 5 a 7 p.m. y al amanecer de 5 a
7 a.m.. Día tras día se les corre el horario hasta que solo se alimentan de 6 a.m. a 5 p.m. con 6
raciones al día.

El P.V.S. Plan Veterinario de Sanidad estipula los controles sanitarios que se deben realizar
regularmente a los reproductores así como a los individuos que son llevados a laboratorio para su
desove. También para los nuevos reproductores que ingresen al sistema productivo. El P.V.S.
también debe contemplar todos los eventos sanitarios presentados con los hembriones y larvas
mientras estén en el laboratorio y deben quedar consignados en le REGISTRO DE SANIDAD EN
LABORATORIO SANILAB-01

9. Control

CODIGO NOMBRE RESPONSABLES VERISON FECHA

REPTIL-01 Reproductores de Tilapia Gerencia y Producción 1 Sep – 2014
INCTIL-01 Incubación Tilapia Gerencia y Producción 1 Sep – 2014
AGUALAB-01 Agua en Laboratorio Gerencia y Producción 1 Sep – 2014
REPOT Reproductores de otras especies Gerencia y Producción 1 Sep – 2014
REPHV Hoja de Vida Individual de Reproductor Gerencia y Producción 1 Sep – 2014
INCOT Entrada a Incubación Otras Especies Gerencia y Producción 1 Sep – 2014
SIEMBRA Siembra de larvas para larvicultura Gerencia y Producción 1 Sep – 2014
SANILAB-01 Sanidad en Laboratorio Gerencia y Producción 1 Sep – 2014

10. Anexos

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