Método de cuantificación de Biomoléculas

Preparar los 6 tubos

con BSA
Volumen de cada
tubo debe ser de
1300microlitros

Vaciar de uno en uno el

Tubo 1 adicionar 300 microlitros de tubo en la celda y leer.
Adicionar 300microlitros a cada tubo
R.Bradford se vaciara a la celda del
(2 a 7) y se procede a hacer la lectura (en el orden anterior,
espectrofotómetro y calibrar a cero
(2 a 6 ) así no se enjuaga)

Lectura a
595 nm

Se realiza la lectura de
Anotar todas las lecturas teniendo la muestra problema
en cuenta el orden de lectura. en una celda limpia

Realizar la curva estándar con las

lecturas del tubo 1 al 6, graficando
ug/ul de BSA (X), Absorbancia (Y) e
interpolar para obtener
concentración. Hacer una curva estándar en una
Registrar
hoja de cálculo, para obtener
valor
concentración de la prot.
obtenido
Muestra por regresión lineal
En papel
milimétrico,

Fórmula=Y-b/m Si se diluyo, el
X: concentración de proteína, y: valor obtenido
absorbancia. B: ordenada al origen. de deberá
m: pendiente multiplicar por
la dilución.