​

​ GOTERO
​ FOSFORO
​ ALCOHOL
​ ALGODÓN
​ JABON
​ DETERGENTE
​ PAPEL TOALLA
​ PAPELES FILTRO
​ AGUA OXIGENADA
 PRÁCTICA N°1

BIOSEGURIDAD.

INTRODUCCIÓN
Las normas de bioseguridad en el laboratorio de química orgánica o de bilogía son un
conjunto de medidas y normas preventivas, destinadas a mantener el control de
riesgos laborales procedentes de agentes biológicos, físicos o químicos, logrando la
prevención de impactos nocivos frente a riesgos propios de su actividad diaria,
asegurando que el desarrollo o resultado final de dichos procedimientos no atente
contra la seguridad del trabajador. La Organización Mundial de la Salud (OMS)
reconoce que la seguridad, y en particular la seguridad biológica son importantes
cuestiones de interés internacional, es así como la OMS público en 1983 el primer
Manual de bioseguridad en el laboratorio, en el que se mostraba a todos los países la
importancia de aceptar y aplicar conceptos básicos de seguridad biológica y a elaborar
códigos nacionales para la manipulación sin riesgo de microorganismos patógenos en
el laboratorio que se encontraban dentro de las barreras nacionales. Desde 1983
muchos países han seguido la orientación presente en el manual para elaborar estos
códigos de prácticas. El propósito más importante de la bioseguridad es promover la
salud ocupacional de los trabajadores expuestos a riesgos biológicos: mediante
medidas tendientes a su protección, creación de barreras, la vigilancia epidemiológica
de las actividades específicas de cada área hospitalaria.
 OBJETIVOS
1. Conjunto de medidas, normas y procedimientos destinados a minimizar
y controlar dicho riesgo biológico.
2. Reconocimiento de los símbolos de riesgos y peligrosidad
3. Mejorar la bioseguridad en las prácticas para disminuir el riesgo de
cada participante en cuanto a la Salud.
4. Proteger la Salud Integra de cada participante en el laboratorio frente a riesgos
Biológicos,Químicos,Físicos a los que se expuesto en el desempeño de las
funciones practicas.
5. Mejorar la bioseguridad en las practicas para disminuir el riesgo de cada participante en
cuanto a la Salud.

MATERIALES
UTILIZADOS
Guardapolvo para la protección.
.
Gorrita para proteger el cabello. Guantes para la protección de
la mano

Zapatos cerrados para la protección de los p.

.
 ROCEDIMIENTO
PREVENCION DEL RIESGO DE LABORATORIO

● Hacer una lectura crítica del procedimiento a seguir

● Asegurarse de disponer del material adecuado..
● Manipular siempre la cantidad mínima de producto químico.
● Llevar las prendas y accesorios de protección adecuados.
● Tener previsto un plan de actuación en caso de incidente o accidente.
NORMAS GENERALES DE TRABAJO EN EL LABORATORIO
Organización
● El laboratorio debe disponer de los equipos de protección individual
● El laboratorio debe mantenerse ordenado y en elevado estado de limpieza.
● No deben realizarse experiencias nuevas sin autorización expresa del
responsable.

Normas generales de conducta

● Como norma higiénica básica, el personal debe lavarse las manos al entrar y
al salir del Laboratorio.
● Usar en todo momento los materiales de seguridad(guardapolvo,
gorro,mascarilla,etc).
● Está prohibido fumar e ingerir alimentos en el laboratorio.
● Se debe evitar llevar lentes de contacto, sobre todo si no se emplearan gafas
de seguridad de manera obligatoria.
● La mesa de trabajo debe de estar limpia en todo momento.

o Utilización de productos y materiales

● Comprobar la garantías de buen estado de los productos y materiales a

utilizar.
● Debe comprobarse el correcto etiquetado de los productos químicos.
● Antes de utilizar de manipular los reactivos leer la etiqueta.
● Los productos químicos deben manipularse cuidadosamente, no
llevándolos en los bolsillos, ni
● tocándolos o probándolos y no pipeteando con la boca.
● Los productos inflamables no deben estar cerca de fuentes de calor.
● Cuando se vierta cualquier producto químico se debe actuar con
rapidez.
● En caso de proyección o accidente, avisar inmediatamente al profesor.
● Los tubos de ensayo no deben llenarse más de 2 ó 3 cm.
● Los productos químicos de desecho se verterán sobre los recipientes
dispuestos en el laboratorio para recogida de residuos (ácidos, bases,
disolventes clorados, disolventes no clorados, acetona de lavar).

LOS PRICIPIOS Y PROPÓSITOS DE LA BIOSEGURIDAD

• Uso de barreras: comprende el concepto de evitar la exposición directa

a sangre y a otros fluidos orgánicos potencialmente contaminantes mediante la
utilización de materiales adecuados que impidan el contacto directo con estos.
La utilización de barreras (ej. guantes, bata, gafas) no evita los accidentes de
exposición a estos fluidos, pero disminuyen las consecuencias de dicho
accidente.

• Medidas de eliminación de material contaminado: comprende el

conjunto de dispositivos y procedimientos adecuados para el depósito y
eliminación de los materiales utilizados en la atención a los pacientes.

CLASIFICACIÓN SEGÚN PELIGROSIDAD DE LOS PRODUCTOS QUÍMICOS.

CLASIFICACIÓN DE PELIGROSIDAD

A. Mecánicos: Objetos en movimiento: centrifugas, vortex Objetos con

energía potencial: tanques de gas.

B. Térmicos: Altas temperaturas: preparación o uso de sustancias como

HCL, H2SO4 Bajas temperaturas: uso de cámaras frías o de congelación
Eléctricos: Incluye la posibilidad de sufrir un schok, emisión de vapores y gases
inflamables, el uso inadecuado del espectrofotómetro, uso de instalaciones
eléctricas.
 C. Radiaciones: Ionizantes: rayos X y microscopia electrónica No
ionizantes: la luz ultravioleta y microscopia de fluorescencia.

RIESGO QUÍMICO

Probabilidad de que un contaminante químico entre en contacto con un

receptor, con consecuencias adversas para las personas o el medio ambiente.
Un contaminante químico es cualquier sustancia que posea características
químicas peligrosas tanto para el receptor como para el medio ambiente. Entre
las características químicas peligrosas se pueden mencionar: tóxico, corrosivo,
irritante, inflamable, explosivo, genotóxico, reactivo, radiactivo, etc.

CLASIFICACIÓN SEGÚN EL RIESGO QUÍMICO

a. Explosivas: son las más peligrosas e incluyen no solo los explosivos,

sino sustancias tales como sales metálicas que por sí mismas o en mezcla, o
exposición al calor, o al choque pueden explotar y provocar quemaduras o
incendio en el local de trabajo.

b. Inflamables: usualmente líquidos de alto punto de fusión y ebullición.

c. Tóxicas: pueden causar trastornos agudos o crónicos incluyendo la

muerte, cuando son inhalados, ingeridos o absorbidos a través de la piel.

d. Dañinos: Son efectos limitados en la salud si son absorbidos, inhalados

o ingeridos

RESULTADOS Y
OBSERVACION
La aplicación de las normas de bioseguridad, es importante para obtener unos
resultados óptimos durante cada práctica y no presentar accidentes inesperados
en los procesos analíticos, relacionados con el uso de los materiales adecuados
 y de la forma adecuada.
La aplicación de las normas de bioseguridad, es importante para obtener unos
resultados óptimos durante cada práctica y no presentar accidentes inesperados en
los procesos analíticos, relacionados con el uso de los materiales adecuados y de la
forma adecuada.

ANEXOS
 PRACTICA N°2
MATERIALES DE LABORATORIO,
LIMPIEZA Y CALIBRACIÓN

INTRODUCCIÓ
N
Los material de laboratorio son aquellos emplean en un laboratorio para
realizar las típicas actividades que en este tipo de lugares se llevan a cabo,
como ser: investigaciones, experimentos, estudios especiales sobre animales,
partículas u otros En un laboratorio de química analítica se utilizan diversos
materiales de laboratorio; a aquellos que están constituidos principalmente por
vidrio, se los denomina material de vidrio o vidriería de laboratorio. Ciertos
materiales son creados y graduados para poder medir volúmenes con mayor
precisión; en estos casos se habla de material volumétrico. Balanza electrónica
un instrumento muy sensible, ya que mediante la misma es posible conocer la
masa destinada al análisis, la masa de sustancias para preparar soluciones de
concentración exacta. La balanza analítica es una clase de balanza utilizada
principalmente para medir pequeñas masas. Este tipo de balanza es uno de los
instrumentos de medida más usados en laboratorio y de la cual dependen
básicamente todos los resultados analíticos.

OBJETIVOS
● Conocer y diferenciar cada uno de los materiales de laboratorio
● Comprender la Utilidad, Función y manera correcto de utilizar cada uno de
ellos.
● Aprender a Manipular de una manera correcta los equipos de laborator
o Aplicar los conceptos en el desarrollo de actividades
experimentales.
o Adquirir destrezas básicas relacionadas con la calibración de material
volumétrico.
MATERIALES

Bal
a
 PROCEDIMIENTO
● Se reconocieron los instrumentos que había en el laboratorio
● Se hablo sobre la utilización de cada uno de ellos.
● Con el apoyo de la guía de laboratorio se identificaron algunos
materiales.
● Se colocó el uso de cada uno de los materiales A continuación,
especificaremos algunos de los materiales.

PROBETA

Es un Cilindro de vidrio alargado y graduado, cerrado

por un extremo, usado como recipiente de líquidos o
gases, el cual tiene como finalidad medir el volumen
de los mismos. La probeta es un instrumento
volumétrico, que permite medir volúmenes superiores,
y de forma más rápida que las pipetas, aunque con
menor precisión. Tiene una graduación indicando
distintos volúmenes: generalmente mide volúmenes
de 25 o 50 mL, pero existen probetas de distintos
tamaños, incluso algunas que pueden medir un
volumen hasta de 2000 mL. Puede estar fabricado de
vidrio o de plástico

Bureta

Se utiliza para medir cantidades variables de líquido

con gran exactitud y precisión. La bureta es un tubo
graduado de gran longitud, generalmente construido
de vidrio. Posee un diámetro interno uniforme en toda
su extensión y está provista de una llave , que permite
verter líquidos gota a gota. Los dos tipos principales
de buretas son:
 ● Buretas de Geissler, la llave es de vidrio

esmerilado.

● Bureta de Mohr, la llave ha sido sustituida por

un tubo de goma con una bola de vidrio en su
interior, que actúa como una válvula.

Matraz Erlenmeyer

El matraz Erlenmeyer es un recipiente de

vidrio, con forma de cono y un cuello
cilíndrico, plano por la base. Se utiliza
para calentar líquidos cuando hay peligro
de pérdida por evaporación. Fue creado
en el año 1861 por el químico alemán
Emil Erlenmeyer. Una de las ventajas de
su utilización es que su estructura evita
pérdidas de la sustancia o solución
contenida, ya sea por evaporación o por
agitación. Por lo que es perfecto para
agitar soluciones (por ejemplo en el caso
de titulaciones donde el medio líquido
debe ser agitado constantemente) y, al
disponer de un cuello estrecho, es posible
taparlo con un tapón esmerilado. No se
utiliza para la medición de líquidos, ya que
sus medidas son imprecisas.

Vaso PrecipitadoZ

Tiene forma cilíndrica y posee un fondo plano. Su

capacidad varía desde el mililitro hasta varios litros.
Se encuentran graduados pero no calibrados, por
lo que no es recomendable utilizarlo para medir
 volúmenes de sustancias. Es un material que se
somete a cambios bruscos de temperatura, lo que
lo descalibra y en consecuencia nos entrega una

medida errónea. Pueden estar fabricados tanto de

vidrio como de plástico.

● Su objetivo principal es contener

líquidos o sustancias químicas diversas de distinto tipo.
● Como su nombre nos adelanta, permite obtener precipitados a partir
de la reacción de otras sustancias.
● Normalmente es utilizado para trasportar líquidos a otros
recipientes.
● También se puede utilizar para calentar, disolver, o preparar
reacciones químicas.

Es un instrumento sencillo de manipular y tiene la

capacidad de conservar, almacenar y medir el
volumen exacto de líquido que dentro de él se coloca

​ Clase A: se utilizan en química analítica

para contener soluciones estandarizadas de
reactivos químicos para realizar valoraciones
químicas. Estos matraces se presentan en
volúmenes que van desde 1 mL hasta 2 L. Su
principal utilidad es preparar mezclas o
disoluciones de concentración conocida y
exacta.

​Clase B: son de menor precisión volumétrica y el material de vidrio de menor

calidad. Se usan para preparación de soluciones de química analítica no
estandarizadas de uso diario en laboratorio. Los matraces aforados también
pueden distinguirse entre incoloros o de color ámbar. Los de color ámbar son
usados para preservar soluciones que son lábiles a la luz ambiente
 Pipeta

Permiten la transferencia de un volumen de un recipiente a otro de forma exacta.

Además, permite medir alícuotas de líquido con bastante precisión. Suelen ser
de vidrio. Está formado por un tubo transparente que termina en una de sus

puntas de forma cónica, y tiene una graduación indicando distintos volúmenes.

Clasificación de las pipetas:

​ Pipetas automáticas: son dispositivos que se caracterizan por carecer de

depósito y se utilizan principalmente para medir o transvasar
pequeños volúmenes de líquido de un recipiente a otro con gran exactitud. Se
coloca una punta nueva cada vez que se usa.

​ Pipetas graduadas: están calibradas en unidades convenientes para permitir la

transferencia de cualquier volumen desde 0,1 a 25 ml. Hacen posible la entrega
de volúmenes fraccionados.
Pipetas volumétricas o aforadas: están hecha para contener un volumen

Propipeta

Utensilio de goma, creado especialmente para

asegurar la transferencia de líquidos de todo tipo,
especialmente los que poseen propiedades
específicas (infecciosos, corrosivos, tóxicos,
radiactivos o estériles). Se utiliza en conjunto con la
pipeta. Forma de uso:

​Para expeler el aire se debe presionar la válvula

“A” sobre la parte superior del bulbo.

​Succione el líquido hacia arriba presionando la

válvula “S” ubicada en la parte inferior.

​ Para descargar presione la válvula “E” que se encuentra al costado de

la válvula “S”. Las tres válvulas poseen bolas de vidrio que controlan el vacío
para un preciso trabajo de llenado y vaciado de las pipetas.

​Para expeler el aire se debe presionar la válvula “A” sobre la parte superior del
bulbo.

​Succione el líquido hacia arriba presionando la válvula “S” ubicada en la parte

inferior.

​Para descargar presione la válvula “E” que se encuentra al costado de la

válvula “S”. Las tres válvulas poseen bolas de vidrio que controlan el vacío para
un preciso trabajo de llenado y vaciado
 CALIBRACION
La calibración material volumétrico es una operación
propia de un sistema de calidad.
Los materiales volumétricos son elementos
normalmente de vidrio para facilitar una dosificación o
formulación apropiada. Es un material muy utilizado en
laboratorios físico-químicos, clínicos y en laboratorios de
I+D

MATERIALES UTILIZADOS
PROCEDIMIENTO
BURETA
​ lenar la bureta con agua destilada a temperatura
L
ambiente evitando que queden atrapadas burbujas de
aire en la punta; para eliminarlas se deja que el agua
escurra por la bureta con la llave abierta. Además,
comprobar que no escape agua por la llave para lo
cual debe observarse que no varíe el menisco el cual
 deberá quedar en la marca de 0.00mL.
​ ransferir lentamente 1 mL de agua al matraz aforado
T
de 50 mL, previamente pesado, y tapar rápidamente
para evitar pérdidas por evaporación. Pesar el matraz
y su contenido; la diferencia
entre esta masa y el valor del matraz vacío proporciona la masa del agua
transferida. Se repite el procedimiento extrayendo otros dos volúmenes de
agua (hasta un volumen total de 10ml).

la corrección) y el volumen leído en las marcas de la bureta.

Una bureta de 50.00mL de clase A realizada a una temperatura de 20°C la
tolerancia marcada por el Fabricante es de 0. 05mL.Calcular la diferencia entre
el volumen medio y el corregido y la desviación estándar de los valores
obtenidos en la repetición efectuadas.

mL de agua Masas de agua Volumen Diferencia entre

medidos corregido a 20°C los
(Factor=1.0028) volúmenes
(medidos y
corregido)
9 8.9844 9.0096 0.096
10 9.9484 9.9763 0.0237
11 10.9775 11.0082 0.0082
DESVIACION ESTANDAR S=0.0579
RESULTADOS Y OBSERVACIONES
“CALIBRACION DE MATERIALES DE VIDRIO”

1. CALIBRACION DE UNA PIPETA

Se desea calibrar una pipeta de 25.0 mL. La pipeta vacía tiene una masa de
10.105 g y después de llenarlo con el agua contenida en la pipeta la masa fue
de 35.211 mL. Si la temperatura del laboratorio era de 28°C, encontrar el
volumen vertido por la pipeta.
Volumen de la pipeta: 25 ml

Peso de pipeta vacía: 10.105g

Peso de pipeta con agua: 35.211 ml

T° de laboratorio: 28°C
SOLUCIÓN:

Masa de agua: 35.211-10.105=25.106g

Volumen de agua: (25.106g)(1.0048 ml/g)

=25.226 ml a 28°C
RESPUESTA: 25.168 ml A 28°C

2. CALIBRACIÓN DE UNA PIPETA DE CLASE B

A continuación, se muestra, los resultados obtenidos para una pipeta clase B

de 25 mL calibrada a 20 °C. La tolerancia marcada por el fabricante es de 0.10
mL. Calcular la diferencia entre el volumen medido y el corregido y la
desviación estándar de los valores obtenidos en las repeticiones efectuadas.

mL de agua Masas de agua Volumen Diferencia entre

medidos corregido a 20°C los volúmenes
(Factor=1.0028) (medidos y
corregido)
25 24.9733 25.0432 -0.0432
25 24.8754 24.9450 0.055
25 24.9992 25.0691 -0.0692
DESVIACION ESTANDAR S=-0.0574
3. CALIBRACION DE UNA BURETA
Una bureta de 50.00 mL de clase A realizada a una temperatura de 20° C. La
tolerancia marcada por el fabricante es de 0.05 mL. Calcular la diferencia entre
el volumen medido y el corregido y la desviación estándar de los valores
obtenidos en las repeticiones efectuadas.

mL de agua Masas de agua Volumen Diferencia entre

medidos corregido a 20°C los volúmenes
(Factor=1.0028) (medidos y
corregido)
2 1.9854 1.9909 0.0091
4 3.9905 4.0017 -0.0013
6 5.8999 5.9164 0.0836
8 7.9790 8.0013 -0.0013
10 9.7589 9.7862 0.2138
DESVIACION ESTANDAR S=0.3035

4.CALIBRACION DE UNA FIOLA

Una FIOLA de 100.00 mL de clase A realizada a una temperatura de 20° C. La
tolerancia marcada por el fabricante es de 0.03 mL. Calcular la diferencia entre
el volumen medido y el corregido y la desviación estándar de los valores
obtenidos en las repeticiones efectuadas.

mL de agua Masas de agua Volumen Diferencia entre

medidos corregido a 20°C los volúmenes
(Factor=1.0028) (medidos y
corregido)
100 97.9854 98.2597 1.7403
100 97.9905 98.2649 1.7351
100 97.8999 98.1740 1.8225
DESVIACION ESTANDAR 5.3012
 LAVADO DE MATERIALES

Para desarrollar correctamente cualquier trabajo en el laboratorio es necesario mantener

siempre limpio el material y la mesa de trabajo. El material debe estar limpio y seco antes de
empezar el experimento.

La limpieza del material se debe realizar inmediatamente después de cada operación ya que
es mucho más fácil y además se conoce la naturaleza de los residuos que contiene.

Para limpiar un objeto, en primer lugar se quitan los residuos (que se tiran en el recipiente
adecuado) con una espátula o varilla y después se limpia con el disolvente apropiado. El agua
con jabón es uno de los mejores métodos de limpieza. Ocasionalmente, se utilizan ácidos,
bases o disolventes orgánicos para eliminar todos los residuos difíciles.

Lavado manual de instrumentos de laboratorio

1. Los remojos, que suelen hacerse en un detergente.

2. Fregado manual con esponja o cepillo.
3. Ácidos suaves, acetona u otros disolventes para disolver grasas o contaminantes
insolubles en agua.
4. Aclarado final.
5. Secado en bastidor o en horno.
6. Eliminación de disolventes.
CONCLUSION
● Aprendimos a calibrar los diferentes materiales de vidrio que se nos
dio.
● Aprendimos el proceso que se debe hacer para calibrar un material.
● Se realizo de una forma pausa y bien explicada
● Se reconoció los materiales de que se usan en el laboratorio y que
usos tienen
● Observamos que existen tipos y del material que lo componen de
algunos de ellos.
● También se supo la forma adecuada de utilizar los materiales
 PRÁCTICA N°3
ESPECTROSCOPIA UV VISIBLE
DETERMINACIÓN DE IBUPROFENO EN UN FÁRMACO COMERCIAL
POR EL MÉTODO DE ESPECTROSCOPIA UV

INTRODUCCIÓN

La espectroscopía UV-Vis está basada en el proceso de absorción de la radiación

ultravioleta-visible (radiación con longitud de onda comprendida entre los 160 y
780 nm) por una molécula. La absorción de esta radiación causa la promoción de
un electrón a un estado excitado. Los electrones que se excitan al absorber
radiación de esta frecuencia son los electrones de enlace de las moléculas, por lo
que los picos de absorción se pueden correlacionar con los distintos tipos de
enlace presentes en el compuesto. Debido a ello, la espectroscopía UV-Vis se
utiliza para la identificación de los grupos funcionales presentes en una molécula.
Las bandas que aparecen en un espectro UV-Vis son anchas debido a la
superposición de transiciones vibracionales y electrónicas. Todas las técnicas de
absorción suponen que cuando una radiación incide sobre una muestra se
produce una absorción parcial de esta radiación, lo que hace que se produzca
una transición entre los niveles energéticos de la sustancia: átomo, molécula o
ión, X, pasando esta al estado excitado, X, el resto de radiación es transmitida.
Así analizando una u otra podemos relacionar la cantidad de especie activa
presente en la muestra. El ibuprofeno forma parte de la familia de los
antiinflamatorios no esteroides o AINES que se caracterizan por su actividad
antiinflamatoria, antipirética y analgésica.
 OBJETIVOS

• Determinar el espectro de absorción y la curva patrón de un analito.

• Seleccionar la longitud de onda apropiada para la determinación de absorbancia.

MATERIALES

• 5 matraces volumétricos de 100 ml. • Balanza analítica sensible.

• 1 matraz volumétrico de 250 ml. • 1 pipeta graduada de 1 ml, 5 ml, 10 ml

• 1 espátula. 28 • Espectrofotómetro Genesys

• Agitador de vidrio. 29 • 6 Tubos de ensayo y gradilla

• Propipeta
 REACTIVOS

• Patrón Ibuprofeno10 g • Agua destilada

• n-hexano 31 • Etanol absoluto

• Na2CO3 anhidro
 PROCEDIMIENTO

•
• Pesar 10 tabletas de ibuprofeno obteniendo 6.8827g.
• Colocar las tabletas en un mortero, para ser pulverizadas hasta obtener un polvo fino.
• El polvo obtenido colocar en un vaso de precipitados de 100mL, el cuál añadir
nhexano 25 ml aproximadamente.
• Calentar la mezcla hasta evaporación durante 40 minutos, se debe apreciar
disolución completa del ibuprofeno, pero no del excipiente.
• Filtrar a vacío, separando así el excipiente del ibuprofeno. El excipiente quedará
retenido en el papel filtro.
• El ibuprofeno obtenido (puro), debe ser recristalizado de la solución que quedó en el
matraz Kitasato a 0-5°C.
• El producto de la recristalización fue nuevamente filtrado, pero ahora el ibuprofeno es el
que va a quedar retenido en el papel filtro y el n-hexano pasará a través del filtro.
• El ibuprofeno aislado se dejará secar durante 1 semana a temperatura ambiente.

SOLUCIONES ESTÁNDAR:
• Preparar 4 estándares en fiolas de 10 mL a partir del stock de 1000 ppm.

• Tomar 6 ml de la muestra patrón, echar a la fiola de 10ml y lo enrasa con 4 ml de

etanol.
• Tomar 7 ml de la muestra patrón, echar a la fiola de 10ml y lo enrasa con 3 ml de
etanol.
• Tomar 8 ml de la muestra patrón, echar a la fiola de 10ml y lo enrasa con 2 ml de
etanol.
• Tomar 9 ml de la muestra patrón, echar a la fiola de 10ml y lo enrasa con 1 ml de eta
PREPARACIÓN DE SOLUCIÓN PATRÓN:

• Pesar 50 mg de ibuprofeno en un vaso de precipitados, agregar 25 ml de etanol,

agitar hasta disolución completa, trasvasar a un matraz volumétrico de 50 ml.
• Enjuagar 2 veces el vaso de precipitados con etanol y finalmente aforar hasta 50 ml.
 CONCLUSIÓN

Se logró determinar y demostrar que el método analítico de cuantificación de

IBUPROFENO por espectroscopia Ultra Visible, se desempeña de manera efectiva.
Además de Comparar el valor con el teórico y estándar.

El espectrofotómetro sirve para medir en función a la longitud de onda la relación entre

valores de una isma longitud.
 PRACTICA N°4
ESPECTROMETRÍA IR- RMN

ANÁLISIS DE UN FÁRMACO COMERCIAL POR ESPECTROMETRÍA IR CON

TRANSFORMADA DE FOURIER (FT-IR)

INTRODUCCIÓN

Es una técnica de análisis de sustancias en el estado gaseoso, liquido o sólido, tanto

cristalinas como amorfas, mediante su espectro de absorción o reflexión en el rango IR
del espectro electromagnético, permitiendo así la identificación de compuestos
químicos a través de la determinación de la frecuencia a la que los distintos grupos
funcionales presentan bandas de absorción en la región IR.

La función de las técnicas espectroscópicas es detectar y analizar la radiación

electromagnética que proviene de una muestra. Esta radiación puede resultar de la
transmisión o dispersión de un haz incidente u originarse en la propia muestra. Cada
región del espectro electromagnético interacciona de forma distinta con la materia: la
radiación infrarroja puede estimular vibraciones y rotaciones moleculares.

OBJETIVOS

● Aprender a utilizar un espectrómetro de infrarrojo, a interpretar un espectro y a

predecir a prioridad q moléculas son susceptibles de ser detectadas por esta
técnica y cuáles no.
● Analizar el espectro de absorción infrarrojo del ácido acetilsalicílico y acido salicílico
 MATERIALES

● Un mortero de ágata
● Una espátula de acero
● Un espectrofotómetro FTIR

REACTIVOS

● KBr
● Acido salicílico
● Acido Acetil salicílico
● Muestra comercial (Aspirina)

PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

Para realizar el comprimido, emplearemos 1-2 mg de ácido acetilsalicílico (AAS) y unos

300mg de bromuro potásico (BrK), para dispersar la muestra. Debe ser secada en una
mufla. Para pesar la muestra se debe tener las precauciones correspondientes:

1.- Introducimos un pesa sustancias, en el interior de la

balanza: 2.- Encendemos la balanza, pulsando el botón On.
3.- Pesamos 300 mg (aproximadamente) de bromuro potásico. Apagamos la balanza
(botón On/Off) Colocamos el KBr en el mortero de ágata.
4.- Ponemos de nuevo el pesa sustancias vacío en la balanza y la encendemos
(Botón On/Off) Î la balanza vuelve a marcar 0. Pesamos 1-2 mg (aproximadamente)
de AAS y lo colocamos en el mortero de ágata, junto con el KBr.

Molturaremos la muestra hasta obtener un polvo fino, con textura similar a la de los
polvos de talco:

Todo este proceso debemos hacerlo bajo el flexo, para evitar que la muestra tome
humedad y altere el espectro Insertar la goma de la bomba de vacío en la pieza
metálica negra: Esta operación puede también efectuarse más adelante. Montaje del
sistema de piezas metálicas.

1.- Introducimos uno de los cilindros pequeños (con la parte más brillante hacia el
interior) en la matriz.
2.- Ajustar las piezas metálicas como se muestra.

3.-Introducimos la muestra molturada (AAS + KBr) en el interior del dispositivo.

4.- Colocamos el otro cilindro pequeño en la matriz, con la parte brillante hacia el
interior.
 5.- Insertamos el cilindro de acero de mayor tamaño, en la forma que se indica:

Introducimos las piezas en la prensa. 37 En este momento podríamos ajustar la goma

de la bomba de vacío, de no haberlo hecho con anterioridad. Presionaremos el cilindro
mayor con la rosca de la prensa, hasta que no gire más.

Movemos la palanca lentamente hasta conseguir una presión de 10 atmósferas. Dejamos

la muestra sometida a presión y al vacío durante aproximadamente 5 minutos, tiempo
suficiente para obtener el Comprimido. Mientras esperamos podemos aprovechar para
limpiar el mortero de ágata, con acetona. El espectrofotómetro: se enciende pulsando el
botón verde. Debemos esperar hasta escuchar tres pitidos.
 PRACTICA N°05

E - MS
EVALUACIÓN DE RESIDUOS DE PESTICIDAS EN FRUTAS POR GC-MS

INTRODUCCION

En la Espectrometría de masas la muestra es ionizada (y por tanto destruida) usando

diversos procedimientos para ello. De todos ellos el más usual y/o utilizado es la técnica
denominada de Impacto Electrónico consistente en el bombardeo de la muestra
(previamente vaporizada mediante el uso de alto vacío y una fuente de calor) con una
corriente de electrones a alta velocidad. Mediante este proceso, la sustancia pierde
algunos electrones y se fragmenta dando diferentes iones, radicales y moléculas neutras.
Los iones (moléculas o fragmentos cargados) son entonces conducidos mediante un
acelerador de iones a un tubo analizador curvado sobre el que existe un fuerte campo
magnético y conducidos a un colector/analizador sobre el que se recogen los impactos de
dichos iones en función de la relación carga/masa de los mismos.
Cada compuesto es único, y cada uno de los compuestos se ionizará y fragmentará
de una determinada manera, y en este principio se basa la espectrometría de masas
para identificar cada analito

OBJETIVOS

• Elaborar muestras orgánicas para el estudio por E.M.

• Aplicar la técnica de espectroscopia de masas.

 MATERIALES

- Acetonitrilo calidad HPLC

- Patrones de pesticidas organofosforados y órganos clorados

• Patrón interno
• Trifosfato
 PROCEDIMIENTO

1.- pesar 4g de sulfato de magnesio.

2.-depositar en un tubo falco 50ml.

3.-Pesar lo mismo casa muestra 1g NaCl,1g de citrato sódico 0.5g citrato de sódico
dibásico.
PREPARACION DE LA CURVA DE CALIBRADO

1.-Se toma para cada uno del alícuota patrón multicomponentes con el fin de cubrir los
interlineales.

2.-Acontinuacion se añade patrón interno.

3.-Por último, a todos los matraces se aforan con acetilo nitrilo y se homogenizan.

PREPARACION DE LAS MUESTRAS

1.-Se introduce las fresas a la picadora hasta su homogenización.

2.-Se produce igual con el resto de las frutas.

3.-Se pesa 10g de la muestra en la balanza.

4.-A cada muestra se le añade 10ml de acético al 1% en ACN se tapa y se agita.

5.-Se lleva a la centrifugar y se programa 4000 revoluciones por min.

6.-Despues de la centrifugadora se toma 6ml de la muestra que se trasfiere el kit de

dispersión los tubos se tapan y se agitan por 30seg.

7.-Se lleva a la centrifugadora y se programa 4000 revoluciones por 65min.

RESULTADOS
 RACTICA N°05

E - MS
EVALUACIÓN DE RESIDUOS DE PESTICIDAS EN FRUTAS POR GC-MS

INTRODUCCION

En la Espectrometría de masas la muestra es ionizada (y por tanto destruida) usando

diversos procedimientos para ello. De todos ellos el más usual y/o utilizado es la
técnica denominada de Impacto Electrónico consistente en el bombardeo de la
muestra (previamente vaporizada mediante el uso de alto vacío y una fuente de calor)
con una corriente de electrones a alta velocidad. Mediante este proceso, la sustancia
pierde algunos electrones y se fragmenta dando diferentes iones, radicales y
moléculas neutras. Los iones (moléculas o fragmentos cargados) son entonces
conducidos mediante un acelerador de iones a un tubo analizador curvado sobre el
que existe un fuerte campo magnético y conducidos a un colector/analizador sobre el
que se recogen los impactos de dichos iones en función de la relación carga/masa de
los mismos.
Cada compuesto es único, y cada uno de los compuestos se ionizará y fragmentará
de una determinada manera, y en este principio se basa la espectrometría de masas
para identificar cada analito.
 OBJETIVOS

• Elaborar muestras orgánicas para el estudio por E.M.

• Aplicar la técnica de espectroscopia de masas.

MATERIALES

- Acetonitrilo calidad HPLC

- Patrones de pesticidas organofosforados y órganos clorados

 - Patrón interno
- Trifosfato

PROCEDIMIENTO

1.- pesar 4g de sulfato de magnesio.

2.-depositar en un tubo falco 50ml.

3.-Pesar lo mismo casa muestra 1g NaCl,1g de citrato sódico 0.5g citrato de sódico
dibásico.
PREPARACION DE LA CURVA DE CALIBRADO

1.-Se toma para cada uno del alícuota patrón multicomponentes con el fin de cubrir los
interlineales.

2.-Acontinuacion se añade patrón interno.

3.-Por último, a todos los matraces se aforan con acetilo nitrilo y se homogenizan.

PREPARACION DE LAS MUESTRAS

1.-Se introduce las fresas a la picadora hasta su homogenización.

2.-Se produce igual con el resto de las frutas.

3.-Se pesa 10g de la muestra en la balanza.

4.-A cada muestra se le añade 10ml de acético al 1% en ACN se tapa y se agita.

5.-Se lleva a la centrifugar y se programa 4000 revoluciones por min.

6.-Despues de la centrifugadora se toma 6ml de la muestra que se trasfiere el kit de

dispersión los tubos se tapan y se agitan por 30seg.

7.-Se lleva a la centrifugadora y se programa 4000 revoluciones por 65min.

 CONCLUSIONES

• Se aplicó la espectroscopia de masas en la práctica mediante la muestra de videos.

 PRACTICA N°6

RAMAN
APLICACIÓN DE LA ESPECTROSCOPÍA RAMAN PARA LA CARACTERIZACIÓN
DE PESTICIDAS ORGÁNICOS

INTRODUCCIÓN

La espectroscopia Raman es una técnica espectroscópica molecular que usa la

interacción de la luz con la materia para obtener información sobre la composición o las
características de un material, como FTIR. La información proporcionada por la
espectroscopia Raman es el resultado de un proceso de dispersión de la luz, mientras
que la espectroscopia IR se basa en la absorción de la luz. La espectroscopia Raman
proporciona información sobre las vibraciones intramoleculares e intermoleculares y
puede proporcionar una comprensión adicional sobre una reacción. Tanto la
espectroscopia FTIR como Raman proporcionan un espectro característico de las
vibraciones específicas de una molécula (“huella molecular”) y son valiosas para
identificar una sustancia. Sin embargo, la espectroscopia Raman puede proporcionar
información adicional sobre los modos de frecuencia más baja y las vibraciones que
permiten comprender la red cristalina y la estructura molecular de la columna vertebral.

OBJETIVOS
● Analizar una mezcla de dos pesticidas en una solución que contiene β-caroteno,
extraído de la cáscara de tomate
 MATERIALES

Espectrómetro MicroRaman Renishaw, modelo 1000B

REACTIVOS

Pesticidas de alta pureza, como:

- Paratión metílico 98.1 %,

- Malatión 96.4 %,
- Fentión 100 %,
- Di bromuro monohidratado de diquat 99 %
- Dicloruro tetrahidratado de paraquat 98 %,
- Dieldrina 98 %,
- Lindano 99 % y 4,4’-(dicloro-difenilo) diclorometano fueron suspendidos en
metanol de grado cromatográfico (J.T Baker, México) a concentración de 1000
mg/L.

Los pesticidas fueron analizados con los dos sistemas Raman

1. El primero es convencional y fue ensamblado en este laboratorio, consta de los

siguientes elementos: un láser de HeNe (Melles Griot) como fuente de excitación, que
tiene una línea de emisión en 632.8 nm y la potencia máxima es de 17 mW; un filtro de
interferencia (Edmund ScientificFWHM ± 2 nm); un filtro holográfico (Super Notch–
PlusTM); un monocromador Jobin-Yvon (modelo HR 460, con resolución espectral de
0.05 nm), con una rejilla de difracción de 1200 líneas/mm; una cámara CCD (256x1024
pixeles) enfriada por aire y el programa SpectraMax (Galactic).
2. El segundo sistema es un espectrometro MicroRaman Renishaw, modelo 1000B,
que está equipado con un diodo láser (Renishaw serie HPNIR) con excitación en 830
nm y una potencia máxima de 500 mW; un monocromador con una rejilla de 600
líneas/mm, resolución de 4 cm-1; un filtro holográfico; una cámara CCD (RenCam)
enfriada termoeléctricamente a –70 ºC, con 576x384 pixeles; programa GRAMS/32 y
tiene acoplado un microscopio Leica (modelo DMLM) con una cámara de video para
la visualización de las muestras

3. Se realizó una extracción simple de cáscara de tomate usando metanol como

disolvente. La cáscara de tomate, previamente secada a temperatura ambiente, se
colocó en un vial de vidrio en contacto con metanol.
Después de 24 horas se observó que el disolvente adquiere la coloración rojiza del
tomate. Luego, se procedió a separar las dos fases, se desechó el material sólido y se
colocó la fase líquida en otro vial.
Este extracto sirvió como referencia en el análisis y, además:

1. Se tomó del mismo extracto 0.5 mL para ser contaminado con 0.5 mL de la
solución de malatión y 0.2 mL de la solución de paratión metílico.

2. Después de agitar brevemente las muestras, una pequeña porción de cada

una de ellas se colocó en el substrato de aluminio para su análisis en el sistema
1000B

. 3. Los espectros fueron obtenidos después de que el metanol se evaporó a

temperatura ambiente.

Resultados
 Los resultados obtenidos para los pesticidas aquí considerados demuestran que las bandas Raman son
fácilmente discernibles y que cada espectro Raman individual puede servir como una huella digital para
cada compuesto. Es de notar que uno o unos pocos picos característicos son suficientes para
proporcionar identificación espectral de un compuesto químico.

Conclusión

La espectroscopia de raman proporciona información química y estructural de cualquier

materia