PRÀCTICA 1.

26-1-2021
PREPARACIÒN DEL MATERIAL DE
MICROBIOLOGÌA PARA
ESTERILIZAR

ALUMNO: Alan Ramon Villalba Soriano

UTIM PROCESOS ALIMENTARIOS. 2. CUATRIMESTRE
OBJETIVO

El alumno será capaz de preparar el material del laboratorio de microbiología para

esterilización.

INTRODUCCIÓN

La destrucción de los microorganismos por el calor se debe a la coagulación

de sus proteínas y especialmente a la inactivación de las enzimas necesarias
para su metabolismo. El tratamiento calórico necesario para destruir los
microorganismos o sus esporas varía con la clase de organismos, su estado
y las condiciones ambientales. Según el tratamiento térmico empleado se
destruirán todas las células vegetativas o sólo una parte de ellas, todas las
esporas bacterianas o solo una parte. El tratamiento térmico elegido depende
de la clase de microorganismos que van a destruirse, de otros métodos de
conservación que se vayan a emplearse y de los efectos del calor sobre el
alimento.

MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS

Tubos de ensaye de 16x150 mm.

Pipetas graduadas de 10 ml.
Pipetas graduadas de 5 ml.
Pipetas graduadas de 1 ml.
Cajas de Petri.
Matraz Erlen- Meyer de 250 ml.
Espátula

1
Frascos para muestra de 250 ml.

METODOLOGÍA

Tubos de ensaye de 16x150 mm con solución tampón fosfato

a) Colocar 9 ml. de agua destilada en cada uno de los 15 tubos de 16x150 mm.
b) Colocar las tapas a cada tubo (si son tubos sin roscas colocar un tapón de
algodón)
c) Colocar los tubos en una canastilla para su esterilización.

El tubo de ensayo es parte del material de vidrio de un laboratorio de química.

Consiste en un pequeño tubo cilíndrico de vidrio con un extremo abierto y el otro
cerrado y redondeado, que se utiliza

PIPETAS
a) Poner a cada pipeta un filtro de algodón de tal manera que el aire pase
libremente a través de él.
b) Flamear el extremo de la pipeta para quemar el exceso de algodón.
c) Envolver con papel estraza cada pipeta con las instrucciones del profesor.
d) Marcar en la envoltura el volumen de cada pipeta.

La pipeta es un instrumento volumétrico usado en los laboratorios de ciencias

químicas y de ciencias de la vida y la salud que permite medir la alícuota de un
líquido con mucha precisión. Suelen ser de vidrio o plástico.
Tubo de vidrio, generalmente graduado y más ancho por la parte central, usado en
los laboratorios para transvasar pequeñas porciones de líquido; el tubo, que se llena
de líquido por succión, se vacía cuando se saca el dedo que obstruye la parte
superior

2
CAJA PETRI.
a) Envolver con papel conjuntos de 10 cajas Petri limpias
b) Colocarlas con la tapa hacia abajo.
La caja o placa de Petri es un recipiente redondo de cristal, para que se pueda
colocar encima y cerrar el recipiente, aunque no de forma hermética. Es parte
de la colección conocida como «material de vidrio» La caja o placa de Petri es
un recipiente redondo de cristal, para que se pueda colocar encima y cerrar el
recipiente, aunque no de forma hermética. Es parte de la colección conocida
como «material de vidrio»

MATRACES
a) En el caso de que el matraz no sea roscado colocar a cada matraz un tapón de
algodón.
b) Cubrir el tapón de algodón con un gorro de papel.
1. m. Vaso de vidrio o de cristal, de forma generalmente esférica y
terminado en un tubo estrecho y recto, que se emplea en los laboratorios
químicos

ESTERILIZACIÓN
1) Verificar el nivel del agua de la autoclave, este nivel debe estar ligeramente por
encima de las resistencias de la autoclave.
2) Colocar el material a esterilizar en las canastillas de la autoclave.
3) Cerrar correctamente la autoclave y mantener abierta la válvula de escape para
asegurar sacar el aire contenido en el recipiente.
4) Cuando se detecta que empieza a salir vapor por la válvula de escape se cierra
esta válvula para empezar a generar presión dentro de la autoclave.
5) Se lleva el control de encendido gradualmente hasta la posición más alta de
temperatura hasta que el manómetro marque las 15 psi de presión.

3
6) Una vez llegando la presión hasta la indicada se toma un tiempo de 15 minutos
para llevar a cabo la esterilización del material contenido en la autoclave.
7) Una vez transcurrido este tiempo se apaga la autoclave y se espera que
descienda la presión lo máximo posible.
8) Antes de proceder a abrir la autoclave se abre gradualmente la válvula de
escape para sacar la presión contenida en el interior de la autoclave, de lo
contrario es muy peligroso intentar abrir el equipo sin antes sacar el vapor.

RESULTADOS

Describa la importancia de la esterilización de los materiales en microbiología

de alimentos.
La esterilización del material de laboratorio es un proceso que permite eliminar la
carga microbiana patógena y no patógena, incluidas las esporas, de productos e
instrumentos que lo requieran como el instrumental médico o los medios de cultivo.

Describa los pasos a seguir durante la esterilización del material

de alimentos

La esterilización de alimentos es una técnica de conservación por calor que

consiste en someter los productos a temperaturas de entre 115 y 127 grados
centígrados durante un tiempo determinado

El proceso de esterilización en los productos en conserva se puede subdividir en

tres fases por medio de vapor:

1. Fase de calentamiento: la temperatura del producto aumenta desde

ambiente hasta la temperatura de esterilización requerida
2. Fase de mantenimiento: la temperatura se mantiene durante un tiempo
definido

4
 3. Fase de enfriamiento: la temperatura en el envase disminuye

CUESTIONARIO

Defina el concepto de “Esterilización”.

La esterilización es el procedimiento mediante el cual se persigue destruir a todos

los microorganismos, incluyendo a las esporas.

ESTERILIZACION: es el proceso mediante el cual se alcanza la muerte de todas

las formas de vida microbianas, incluyendo bacterias y sus formas espatuladas
altamente resistentes, hongos y sus esporos, y virus.

Esterilización al proceso por el cual se obtiene un producto libre de microorganismos

viables. El proceso de esterilización debe ser diseñado, validado y llevado a cabo
para asegurar que es capaz de eliminar la carga microbiana del producto o un
microorganismo más resistente.

Investigue otros equipos utilizados para Esterilizar materiales.

Autoclave. Es el método de referencia, utiliza calor húmedo en equipos que se

denominan autoclaves, formados por un recipiente o
cámara de esterilización de paredes gruesas y cierre hermético que permite
usar vapor a presión y temperatura elevada. El fundamento físico es el de una
olla a presión.
Una autoclave es un recipiente metálico de paredes gruesas con cierre
hermético que permite trabajar con vapor de agua a alta presión y alta

5
 temperatura que sirve para esterilizar instrumental (material médico, de
laboratorio, etc.) o alimentos.

• Gas óxido de etileno.

La esterilización por óxido de etileno (EtO) se utiliza principalmente

para esterilizar productos médicos y farmacéuticos que no soportan
la esterilización convencional a alta temperatura, como dispositivos que incorporan
componentes electrónicos, envases o recipientes de plástico.

Gas y solución de formaldehído.

Para la esterilización existe como solución de formalina o como hidrato polimérico
(paraformaldehído). El formaldehído es un alérgeno potente con un olor penetrante
e irritante a muy bajas concentraciones. ... El paraformaldehído se vaporiza
gradualmente, generando gas de formaldehído monomérico

• Plasma/vapor peróxido de hidrógeno.

El sistema de esterilización que transforma el peróxido de hidrógeno en

un plasma de baja temperatura y logra una esterilización rápida.
El plasma gaseoso se describe en general como el cuarto estado de la materia
consistente en un conjunto de iones, electrones y partículas atómicas neutras.

• Ozono.

6
 El ozono (O3) es una sustancia cuya molécula está compuesta por tres átomos de
oxígeno, formada al disociarse los dos átomos que componen el gas oxígeno. Cada
átomo de oxígeno liberado se une a otra molécula de oxígeno gaseoso (O2),
formando moléculas de ozono (O3).

• Soluciones: Ácido acético, ácido peracético, glutaraldehído y cloroxidante

electrolítico.

El ácido acético (también llamado ácido metilcarboxílico o ácido etanoico)

puede encontrarse en forma de ion acetato. Se encuentra en el vinagre, y es el
principal responsable de su sabor y olor agrios. Su fórmula es CH3-COOH
(C2H4O2). De acuerdo con la IUPAC, se denomina
sistemáticamente ácido etanoico.

El ácido peracético es un desinfectante de superficies de alto nivel. Presenta

eficacia biosida frente a bacterias, hongos, levaduras, endosporas y virus a
concentraciones inferiores a 100 ppm en 5 minutos o incluso menos

El glutaraldehído es un compuesto químico de la familia de los aldehídos que

se usa principalmente como desinfectante de equipos médicos, odontológicos y
de laboratorio.

El cloroxidante electrolítico en solución hipertónica de cloruro de sodio es un

desinfectante a base de cloro obtenido por vía electrolítica, utilizando una
solución salina de agua y cloruro de sodio

¿Porque es necesario mantener la presión a temperatura

constante en la autoclave?

7
La presión elevada permite que el agua alcance temperaturas superiores a los 100
°C. La acción conjunta de la temperatura y el vapor produce la desnaturalización de
las proteínas de los microorganismos, entre ellas las esenciales para la vida y la
reproducción de estos, hecho que lleva a su destrucción.

¿Cuál es la máxima temperatura que resisten los

microorganismos y mencione un proceso industrial que lo
realice?

TEMPERATURA. El factor ambiental que más afecta el desarrollo de

los microorganismos es la temperatura, a pesar de que
los microorganismos existentes son capaces de proliferar a diferentes intervalos.
Desde -8° a +90°C (17,6 a 194°F), la temperatura óptima para casi todos los
patógenos es 35°C (95°F).

Links de los videos para conocer el material de

laboratorio:

• https://www.youtube.com/watch?v=GToxFlGczB0

• https://www.youtube.com/watch?v=oPtUzrluQhI