Siembra de Microorganismos
structures of various bacteria, fungi and yeasts and thus be
SIEMBRA DE
MICROORGANISMOS
Luzón John; Paz Raúl 2; Vargas Dagmar3   
1,2, 3 
Escuela Politécnica Nacional, Facultad de Ingeniería
Química y Agroindustrial, Quito, Ecuador 
Resumen: Con la preparación de un medio de cultivo casero
para microorganismos mediante el uso de insumos de cocina
como agua, gelatina, entre otros se puede observar después
de un cierto periodo el tamaño, forma, colores y estructuras
macroscópicas de diversos microorganismos. Dicho medio de
cultivo ayuda a proveer a los microorganismos de nutrientes
básicos que ayuden a su desarrollo y crecimiento. El cultivo
de organismos microscópicos se la elaboro aplicando
distintos tipos de siembra junto con una técnica aséptica muy
básica, la cual consiste en desinfectar toda el área de trabajo y
realizar la siembra en los alrededores de un mechero o vela.
Con la experimentación realizada se tomaron muestras de
frutas ya en estado de descomposición y carne de res podrida
obteniendo principalmente organismos como Aspergillus
niguer y Aspergillus glaucus, que son hongos comunes que
se presentan en vegetales y frutas mientras que en la carne se
pudo haber obtenido bacterias que son de color blancas en
formas esféricas las cuales pueden ser:
Salmonella, Escherichia coli O157:H7, Campylobacter
jejuni, Listeria monocytogenes y Staphylococcus, la
temperatura aproximada manejada en este cultivo fue de 20-
25 °C. con los resultados obtenidos se puede apreciar
estructuras de forma compleja y visible a simple vista de
diversas bacterias, hongos y levaduras y de esta manera poder
realizar un análisis cualitativo.
Palabras clave: técnica aséptica, microorganismos, tipos
de siembra.
MICROBIAL CULTURE
Abstract: the preparation of a homemade culture medium for
microorganisms with the use of kitchen supplies such as
water, gelatin, among others, the size, shape, colors and
macroscopic structures of various microorganisms can be
observed after a certain period. This medium helps to provide
microorganisms with basic nutrients for their development
and growth. The culture of microscopic organisms was done
by applying different types with a pretty basic aseptic
technique, which consists of disinfecting the whole work area
and culturing around a burner flame. In the experimentation
carried out spoilage fruits and beef samples were taken to
obtain organisms such as Aspergillus niguer and Aspergillus
glaucus, both are common fungi that occur in vegetables and
fruits, while bacteria could be appeared in meat which are
white in spherical shapes, these can be: Salmonella,
Escherichia coli O157: H7, Campylobacter jejuni, Listeria
monocytogenes and Staphylococcus, the approximate
temperature managed in this culture was 20 to 25 ° C. With
these results, it is possible to observe complex and visible
able to carry out a qualitative analysis.
Keywords: aseptic technique, microorganisms, types of
culture.
1. INTRODUCCIÓN
La identificación de microorganismos de manera visual es
fundamental para tener una primera idea sobre el crecimiento
de estos, además de conseguir una clasificación ajustada
sobre los microorganismos presentes en determinados
productos, sobre todo en los alimentos, y a su vez evidenciar
si los microorganismos presentes tienen algún efecto
significativo sobre la salud o sobre los alimentos en los que
están presentes. Dentro de la clasificación de
microorganismos se pueden definir tres clases de interés, las
bacterias, los hongos y las levaduras (Caballero A., 2008, p.
7).
Las bacterias están compuestas por células procariotas, su
estructura externa está conformada por flagelos, fimbrias y
cápsulas. A la gran parte de bacterias se las puede clasificar
como grampositivas o gramnegativas de acuerdo a la
coloración de Gram. Dependiendo del grupo en el que se
encuentren las bacterias, su pared celular puede estar
compuesta por péptidoglicano en el caso de las
grampositivas, y lipopolisacáridos en el caso de las
gramnegativas. Generalmente la forma en la que se
encuentran las bacterias son cocos, bacilos y espirilos. A su
vez estas formas pueden integrar agrupaciones pares
(diplococos, diplobacilos), racimos (estafilococos), cadenas
(estreptococos, estreptobacilos), etc. (Madigan et al., 2015, p.
34).
Los hongos son organismos formadores de esporas carentes
de clorofila, presentan células con todas las características de
las células eucariotas. Ciertos hongos se encuentran como
parásitos en plantas y animales; gran parte de estos necesitan
oxígeno para desarrollarse (aerobios), sin embargo, en ciertas
ocasiones bajo ciertas condiciones suelen desarrollarse en
medios sin oxígeno (anaerobios), como las levaduras. La
clasificación de los hongos según la forma de crecimientos se
presenta de dos maneras en forma de hongos filamentosos o
levaduras (Caballero A., 2008, p. 9).
Los hongos filamentosos durante su crecimiento presentan
forma de hifas que son estructuras en forma de cilindros.
Determinados hongos presentan hifas septadas o no septadas;
a partir de las hifas se forman diferentes estructuras que
cumplen diferentes funciones. A la unión de hifas se las
denomina micelios, y estos a su vez pueden ser vegetativos o
reproductivos, son considerados como organismos adaptables
ya que pueden desarrollarse en cualquier medio que se
encuentren. Por otro lado, las levaduras son hongos
unicelulares de una variedad de formas integrando colonias
de manera cremosa, suave y con pigmentos de varios colores
según la especie. Finalmente, los hongos tienen un ciclo
reproductivo asexual, es decir, por gemación o fragmentación
del talo; y sexual por la formación de esporas (Caballero A.,
2008, p. 10).
 Luzón John; Paz Raúl 2; Vargas Dagmar3
Para la siembra de microorganismos un buen inóculo es
fundamental para el crecimiento viable de microorganismos;
el inóculo es una población de microorganismos que están
listos para crecer y reproducirse en un determinado medio
con el fin de producir metabolitos de interés. Además, para la
siembra de microorganismos se deben tener en cuentas
ciertas formas para preparar el inóculo, entre las más
importantes son la manera en la que se recupera la cepa, la
forma en la que va a crecer en un medio específico, la
cantidad de inóculo, la concentración de microorganismos,
etc. (Hernández A., 2013, p. 27).
Otro factor fundamental para la siembra de microorganismos
es el medio en el que se van a desarrollar; el medio de cultivo
es una solución nutritiva donde los microorganismos van a
crecer con el fin de garantizar que el cultivo prospere durante
su desarrollo. Existen dos tipos de medio dentro de
microbiología que son los medios definidos y medios
complejos; los medios definidos son aquellos que se elaboran
con las cantidades exactas de productos orgánicos e
inorgánicos junto con agua destilada, por otro lado, un medio
complejo es aquel que no se conoce su composición exacta
siendo un medio altamente nutritivo hechos a partir de
productos microbianos, animales o vegetales (Madigan et al.,
2015, p. 80.)
El objetivo principal de la práctica fue preparar un medio
casero a partir de dos tipos de medios complejos, uno hecho a
partir de gelatina con sabor y otro hecho a partir de gelatina
sin sabor con caldo de gallina. En el caso de la gelatina con
sabor es un medio compuesto por proteínas obtenida de la
hidrólisis parcial del colágeno de animales, azúcar y
vitaminas; la gelatina sin sabor igualmente es un compuesto
proteico conformado por un 92 % por colágeno y el resto por
sales minerales (Instituto Ecuatoriano de Normalización,
2014), además el caldo de gallina, es un caldo deshidratado
constituido por verduras y/o mezclas de carne, grasas, sal,
especies y condimentos. El caldo también suele contener
proteínas hidrolizadas, extractos de levaduras y aditivos
lícitos (INEN, 2012).
Sin embargo cuando se trabaja con medios complejos, y en el
caso de medios caseros, se puede asegurar que los
microorganismos van a crecer, no con la misma eficiencia
que en un medio específico para el microorganismo, pero si
para lograr visualizar el desarrollo del cultivo, ya que el
medio casero elaborado contiene lo básico para que el
microrganismo se desarrolle sin ningún inconveniente, es
decir, existe una fuente de carbono en ambos medios, con el
fin de elaborar nuevo material celular por parte del
microorganismo (Madigan et al., 2015, p. 80).
2. METODOLOGÍA
Los materiales utilizados para la elaboración de medios de
cultivos caseros fueron: gelatina sin sabor, cubitos de caldo
de gallina, agua, envases de vidrio o cajas Petri y gelatina con
sabor. En primera instancia se procedió a hervir agua hasta
llegar a la temperatura de ebullición en la cuidad de Quito
(aprox 90°C) por la que se mantuvo esa temperatura durante
20 min para tratar de eliminar cualquier microorganismo que
pudiese estar presente en dicho líquido, simultáneamente se
procedió a hervir agua en la cual se dejó reposar los
instrumentos y envases a utilizar para poder esterilizar y
eliminar microorganismos presentes en ellos.
Después de haber hervido el agua que se utilizó para la
preparación del medio de cultivo, se colocó en un primer
recipiente la gelatina sin sabor y el cubito de caldo de gallina
mientras que en otro recipiente con agua hervida se colocó la
gelatina con sabor homogeneizando las dos soluciones y
finalmente fueron llevadas a su respectivo envase ya
esterilizado para posteriormente entrar a refrigeración, de esta
manera se tenían dos medios de cultivo para poder observar
cual es el más óptimo para el crecimiento de
microorganismos.
Al momento de tomar una muestra de hongos, levaduras o
bacterias se procedió con una técnica aséptica la cual se la
realizo de la siguiente manera:
Se procedió inicialmente a desinfectar toda el área de trabajo,
para poder laborar alrededor de una vela y eliminar los
microorganismos circundantes que no sean de nuestro interés,
después con la ayuda de cotonetes se tomaron las muestras de
hongos y bacterias que se encontraban en las frutas podridas
y llevándolas al medio de cultivo seleccionado.
En el caso de utilizar un aza de siembra esta deber ser
esterilizada antes de tomar la muestra de microorganismos, se
lo realizó llevándola al “rojo vivo” frente a la vela y
enfriándola cuidadosamente sobre nuestro medio de cultivo,
posterior a eso se toma la muestra de microorganismos y se
realizó diversas técnicas de siembra como son: básica,
múltiple estría y por cuadrantes.
Cabe destacar que las personas que contaban con cajas Petri,
al momento de realizar la siembra, la caja Petri debe ser
colocada boca abajo para evitar cualquier contaminación
posible con el medio al momento de estar realizando la
siembra y de igual manera deben ser almacenadas boca abajo
para permitir la aireación dentro de la caja Petri.
De manera similar se tomaron las muestras presentes en la
carne podrida con una particularidad inicial, mezclando la
carne junto con agua para que los microorganismos presentes
se puedan desprender de la materia sólida y se adjunte con la
fase liquida y así poder obtener un fácil manejo al momento
de tomar la muestra.
3. DISCUSIÓN Y RESULTADOS
Los alimentos forman parte de la nutrición humana, pero no
son los únicos que los aprovechan, debido a que algunos
microorganismos se alimentan de ellos como hongos,
bacterias y levaduras (Lacely, 1989).
En la figura 1 se puede observar a los microorganismos
obtenidos a los tres días de haberse cultivado utilizando carne
y fruta. La fruta presentaba una visible capa de moho y la
carne obtenida a partir de un trozo de hígado fue expuesta al
ambiente por cinco días.
 Siembra de Microorganismos
Figura 1.- Cultivo de microorganismos en el día 3.
En base a las observaciones, se tiene que el crecimiento con
mayor masa microbiana corresponde al del tomate de árbol
mientras que el de la carne tiene un crecimiento lento, en
ambas se aprecia las masas blanquecinas.
A los 7 días de realizar el cultivo se encontraba una gran
masa de hongos como se observa en la figura 2.
Figura 2.- Cultivo de microorganismos en el día 7
Se puede visualizar una red ramificada de color verde-
blanquecino y negro en la sección del tomate, mientras en la
zona correspondiente a la del cultivo de microorganismos de
la carne presenta pequeñas acumulaciones en forma esféricas
de manera dispersa y la presencia de hongos acumulados en
tres partes de esta zona.
Las características presentadas por parte del moho
posiblemente correspondan a las del Aspergillus niguer y
Aspergillus glaucus, que son hongos comunes que se
presentan en vegetales y frutas, tiene una singular cadena de
hifas y su aspecto es como un polvo blanquecino que cambia
a un marrón o negro oscuro y un verde oscuro (Lacely,
1989).
En el caso de las posibles bacterias que fueron de color
blancas en formas esféricas pueden ser:
Salmonella, Escherichia coli O157:H7, Campylobacter
jejuni, Listeria monocytogenes y Staphylococcus que son las
más comunes en la carne de res (USDA, 2013).
Los hongos presentan una mayor velocidad de crecimiento
debido a que su potencial nutritivo está basado en la glucosa
y sales, y su temperatura de incubación se encuentra desde
los 25ºC hasta los 32º C, sin embargo su actividad empieza a
partir de los 6 hasta 45ºC, por lo que en las temperaturas
presentadas en Quito se encuentran dentro del rango de
actividad requeridas (Lacey, 1989), mientras que en el caso
de las bacterias requieren una temperatura de 22 a 37ºC para
iniciar su actividad de manera óptima, por lo que la
temperatura para las bacterias de la carne si influye en su
crecimiento, por otra parte su base nutritiva es por medio de
minerales por lo que el medio de cultivo a partir de caldo de
pollo concentrado si cumple con los requerimientos básicos
de nutrición para las bacterias y hongos (USDA, 2013).
A pesar de las técnicas de asepsia utilizados al momento de
realizar el cultivo, se observó una contaminación por parte de
los hongos dirigidos al lado de la carne, esto pudo ser
ocasionado en el momento del cultivo, debido a que los
hongos se reproducen por esporas y una brisa o agitación del
hisopo pudo ver ocasionado que llegue una parte de estas
esporas a la zona de la carne contaminándola.
CONCLUSIONES
Los microorganismos, a pesar de estar en medios que no son
específicos para ellos, van a desarrollarse sin ningún
inconveniente, siempre y cuando tenga una fuente
imprescindible de carbono para su crecimiento.
Con las practicas caseras implementadas al cultivo de
microorganismos podemos realizar un análisis cualitativo
sobre la forma, estructura y posiblemente cantidad de
microorganismos presentes en las diversas muestras
realizadas.
RECOMENDACIONES
Tener muye en cuenta la desinfección y el lugar de trabajo
debido a que se pueden presentar contaminantes indeseables
en los cultivos.
Siempre lavar y esterilizar los instrumentos y envases con los
que se va a trabajar para que no existan ningún residuo o
factor que altere a nuestro crecimiento de microorganismos.
REFERENCIAS
Caballero A. (2008). Temas de Higiene de los Alimentos
(1era ed.). La Habana: Ciencias Médicas.
Hernández A. (2013). Microbiología Industrial (1era ed.).
San José: Universidad Estatal a Distancia.
Instituto Ecuatoriano de Normalización. (2012). Sopas,
Caldos y Cremas. Requisitos. (NTE INEN 2602).
https://181.112.149.204/buzon/normas/nte_inen_2602.pdf
 Luzón John; Paz Raúl 2; Vargas Dagmar3

Instituto Ecuatoriano de Normalización. (2014). Postre de

Gelatina. Requisitos (NTE INEN 1521, Segunda revisión).
https://www.normalizacion.gob.ec/buzon/normas/nte_inen_1
521.pdf

Lacey J. (1989). Ecología de hongos antes y después de la

cosecha que dañan los alimentos y otros productos
almacenados. Journal of Aplied Bacteriology. FAO.

Madigan et al. (2015). BrocK: Biología de los

microorganismos (14va ed.). Madrid: Pearson/Prentice Hall.

USDA. (2013). Carne Molida de Res e Inocuidad de

alimentos. EEUU. Food Safety and Inspections Service.
Encuéntrese en:
https://www.fsis.usda.gov/wps/portal/informational/en-
espanol/hojasinformativas/preparacion-de-las-
carnes/enfoque-carne-molida-de-res/carne-molida-
res#:~:text=Las%20bacterias%20patog%C3%A9nicas%2C
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