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Diseño de Biorreactor F
Diseño de Biorreactor F
Ramón Gonzales, Jesús Núñez, Luis Salcedo, Andrés Núñez, Angélica Arias, Alejandra
Hoyos, Universidad De Sucre, Facultad De Ingeniería, Ingeniería Agroindustrial, (2020)
RESUMEN
ABSTRACT
The objective of this work was to carry out the design and sizing of a laboratory-scale stirred
tank bioreactor to obtain bioactive compounds from avocado seed (Persea americana), for
this the corresponding values of the microorganism used were taken. Aspergillus niger, and
the optimal conditions for its growth, from works previously carried out by reliable sources,
and with the help of this determine the corresponding measures for the agitation system and
the bioreactor, as well as the energy expenditure to be occupied in it, taking some
thermodynamic and physically logical considerations, the power required by the stirrer and
the heat transfer per unit time were determined
1. INTRODUCCIÓN
Aguacate (Persea americana Mill.) es una fruta subtropical / tropical originaria de México y
América Central, y se produce y consume ampliamente en todo el mundo. Pertenece a la
familia Lauraceae y el género Persea, de las cuales existen más de 150 especies conocidas
(Araújo, Rodriguez-Jasso, Ruiz, Pintado, & Aguilar, 2018). Su consumo es principalmente
en frescos, pero también se procesan para extraer aceite y otros productos. Sin embargo,
componentes de la fruta, incluida la cáscara, la semilla y la pasta desgrasada, no se utilizan
comúnmente y, en cambio, se descartan (Rodríguez-Carpena, Morcuende, Andrade, Kylli, &
Estévez, 2011). De hecho, del 39.6 al 42.4% del aguacate termina como subproducto
descartado y desperdiciado, por lo que buscar alternativas para su uso minimizaría los
desperdicios y problemas ambientales, y genera importantes beneficios nutricionales,
sanitarios e industriales (Yepes, y otros, 2020).
El objetivo de este trabajo es diseñar un biorreactor tipo tanque agitado de cultivo sumergido
a escala laboratorio, para la obtención de compuestos polifenólicos (bioactivos) a partir de la
semilla de aguacate usando Aspergillus Níger como agente biológico en dicho proceso.
2. MATERIALES Y METODOS
Basándonos en el trabajo realizado por Serrat & Mendez (2015), se tomaron en cuenta las
medidas más adaptables para un biorreactor a escala de laboratorio, En el diseño de este
biorreactor se enfatizó en tres cuestiones esenciales de su funcionamiento: capacidad de
garantizar la esterilidad en su interior durante un intervalo de tiempo relativamente largo y la
realización de muestreos periódicos, buena transferencia de oxígeno y mezclado uniforme de
la suspensión celular. Los dos últimos aspectos se relacionan muy estrechamente con los
procesos de agitación y aireación.
Sistema de agitación
La agitación del sistema se realizará por medio de un agitador mecánico de 150 W de potencia
y rango de agitación de 50-2000 min-1, el cual constará de 4 placas planas, similar al usado
por (Rolon, Acevedo , & Villamizar, 2017) y estará ubicado a una distancia del dispersor de
2.5 cm (Serrat & Mendez, 2015). se colocarán 2 deflectores equidistanciados para garantizar
la no formación de vórtice, cuyas medidas serán brindadas a partir del diseño de la parte
interna del biorreactor.
Suministro de oxigeno
El suministro de aire, estará constituido por una bomba de vacío (Sartorius, Alemana)
operando en reversa, con capacidad máxima de bombeo de 0.67 L·min -1, acoplada a un
rotámetro de gas el que estará conectado mediante una manguera de silicona a un filtro
microbiológico (Midisart® 2000, Alemania) de membrana hidrofóbica (0.2 µm de tamaño
de poro y 20 cm2 de área de filtrado), para garantizar la esterilidad del aire. El filtro se unió
mediante una manguera a la tubería de vidrio que se introduce al biorreactor por la parte
superior y que termina en un dispersor de vidrio horadado, de extremo en forma de espiral
(diámetro de orificios ≈ 3 mm) situado a 2,5 cm por debajo del sistema de agitación (Serrat
& Mendez , 2015).
Sistema de enchaquetado
El sistema de enchaquetado constara de una camisa de agua líquida similar a la usada por
Montesinos (2009), con un espesor de chaqueta (Xchaqueta) de 5 cm con una velocidad de
0,2 m/s, y una temperatura promedio de 40°C, ya que según Revelo et al. (2018) la
temperatura optima de trabajo para el microorganismo usado en este diseño varia entre 30 y
32 °C.
Volumen de trabajo
Con base en el estudio realizado por Serrat & Mendez (2015) y en las recomendaciones dadas
por (Doran, 1998) el volumen del trabajo será correspondiente al 80% del volumen total, por
tanto, a continuacion se calcula el volumen de trabajo,
Para tomar las muestras en los tiempos dispuestos por el operario en ensayos futuros, se
dispondrá de un orificio con la dimensión del diámetro externo de una pipeta milimetrada, la
cual será usada en la toma de muestra con un extractor manual, cabe mencionar que dicho
orificio estará herméticamente sellado en todo momento a excepción del pequeño intervalo
correspondiente a las tomas de muestra (Ortega, Perez, & Lopez , 2016)
𝐷𝑡 = 16 𝑐𝑚 = 0,16 𝑚
𝐻𝑐 = 21 𝑐𝑚 = 0,21 𝑚
𝑥 = 5 𝑚𝑚
𝑥 = 0,005 𝑚
𝐻𝑓𝑡 = 0,193 ∗ 𝐷𝑡 + ℎ
𝐻𝑓𝑡 = 0,193 ∗ (0,16 𝑚) + 0,0175 𝑚
𝐻𝑓𝑡 = 0,04838 𝑚
𝑉𝑓𝑡 = 0,1 ∗ 𝐷𝑡3
𝑉𝑓𝑡 = 0,1 ∗ (0,16 𝑚)3
𝑉𝑓𝑡 = 0,00041𝑚3
𝐷𝑡
𝑉𝑐 = 𝜋 ∗ 𝑟 2 ∗ 𝐻𝑐 = 𝜋 ∗ ∗ 𝐻𝑐
2
0,16
𝑉𝑐 = 𝜋 ∗ ( 𝑚) ∗ (0,21 𝑚)
2
𝑉𝑐 = 0,00422 𝑚3
𝐴𝑐 = 𝜋 ∗ 𝐷𝑡 ∗ 𝐻𝑐
𝐴𝑐 = 𝜋 ∗ (0,16 𝑚) ∗ (0,21 𝑚)
𝐴𝑐 = 0,105 𝑚2
𝑉𝑓𝑡
𝐴𝑓𝑡 =
𝐻𝑓𝑡
0,00422 𝑚3
𝐴𝑓𝑡 =
0,04838 𝑚
𝐴𝑓𝑡 = 0,00936 𝑚2
𝐶𝑖 = 0,33 ∗ 𝐷𝑡
𝐶𝑖 = 0,33 ∗ (0,16 𝑚)
𝐶𝑖 = 0,0528 𝑚
𝑊𝐵 = 0,2 ∗ 𝐷𝑖
𝑊𝐵 = 0,2 ∗ (0,0528 𝑚)
𝑊𝐵 = 0,01056 𝑚
𝐿𝐵 = 0,25 ∗ 𝐷𝑖
𝐿𝐵 = 0,25 ∗ (0,0528 𝑚)
𝐿𝐵 = 0,0132 𝑚
𝑉𝐵 = 𝑉𝑐 + 𝑉𝑓𝑡
𝑉𝐵 = 0,00422 𝑚3 + 0,00041𝑚3
𝑉𝐵 = 0,00463 𝑚3
𝐴𝐵𝐼𝑂 = 𝐴𝑐 + 𝐴𝑓𝑡
𝐴𝐵𝐼𝑂 = 0,105 𝑚2 + 0,00936 𝑚2
𝐴𝐵𝐼𝑂 = 0,11436 𝑚2
𝑑𝑑𝑖𝑓𝑢𝑠𝑜𝑟 = 0,003 𝑚
Necesidades energéticas
𝑅𝑒𝐻2 𝑂 = 15192,95
1
ℎ∗𝑥
𝑁𝑢 = = 0,0296 ∗ 𝑅𝑒0,8 ∗ 𝑃𝑟3
𝑘
1
𝑁𝑢 = 0,0296 ∗ (15192,95)0,8 ∗ (4,32)3 = 106,78
𝑊
𝑁𝑢 ∗ 𝑘 (106,78) ∗ (0,631 𝑚𝐾 ) 𝑊
ℎ= = = 1347,31 2
𝑥 0,058 𝑚 𝑚 𝐾
En este mismo orden de ideas desarrollamos los cálculos necesarios para determinar el
coeficiente convectivo de transferencia de calor para el lado de la pared en contacto con el
medio de trabajo
𝑁𝑠 𝑘𝑔
𝜇 = 0,00085 = 0,00085
𝑚2 𝑚𝑠
𝑊
𝑘 = 0,614
𝑚𝐾
𝑃𝑟 = 5,77
𝐶𝑝 ∗𝜇 𝑃𝑟 ∗𝑘
Como 𝑃𝑟 = ; entonces 𝐶𝑝 =
𝑘 𝜇
𝑊
(5,77) ∗ (0,614 𝑚𝐾 ) 𝐽
𝐶𝑝 = = 4167,97
𝑘𝑔 𝑘𝑔𝐾
0,00085 𝑚𝑠
𝑣 = 1,33 𝑟𝑝𝑠
𝑣 ∗ 𝐷𝑖 ∗ 𝜌
𝑅𝑒 =
𝜇
La densidad del fluido fue determinada mediante la correlación de Okos Choi (1986),
𝜌 = 9,2559 × 102 + 4,1757 × 10−1 𝑇, donde T es la temperatura promedio.
(32 + 30)°𝐶
𝑇𝑝𝑟𝑜 = = 31°𝐶 = 304,15 𝐾
2
𝑘𝑔
𝜌 = 1052,59
𝑚3
El número de Reynolds de 86961,59 nos indica que el flujo es turbulento. Para determinar
2
el número de Nusselt, se usó la formula dada en clase 𝑁𝑢 = 0,44 ∗ 𝑅𝑒3 ∗ (𝜇/𝜇𝑝 )0,24,
asumiendo que 𝜇𝑝 ≅ 𝜇.
2
1/3
𝑁𝑢 = 0,44 ∗ 𝑅𝑒3 ∗ 𝑃𝑟
2 1
𝑁𝑢 = 0,44 ∗ (86961,59)3 ∗ (5,77)3 = 1549,04
𝑊
𝑁𝑢 ∗ 𝑘 (1549,04) ∗ (0,614 𝑚𝐾 )
ℎ= =
𝑥 0,0528 𝑚
𝑊
ℎ = 18013,47
𝑚2 𝐾
según (De Dietrich, 2020), la conductividad del material de conducción entre 20 – 200°C es
𝑊
𝑘 = 1,2 𝑚𝐾.
1 1 𝑥 1
= + +
𝑈 ℎ1 𝑘 ℎ2
1 1 0,005 𝑚 1
= + +
𝑈 18013,47 𝑊 𝑊 𝑊
1,2 𝑚𝐾 1347,31 2
𝑚2 𝐾 𝑚 𝐾
𝑊
𝑈 = 201,43
𝑚2 𝐾
𝐴𝑡𝑟𝑎𝑏 = 0,091488 𝑚2
𝑊
𝑄 = (201,43 ) ∗ (0,091488 𝑚2 )(40°𝐶 − 30°𝐶)
𝑚2 𝐾
𝑄 = 184,28 𝑊
𝑘𝑔
𝑃 = (5,9) ∗ (1,33)3 ∗ (0,0528 𝑚)5 ∗ (1052,59 )
𝑚3
𝑃 = 0,010 𝑊
Partiendo de los resultados anteriores podemos decir que el gasto energético para mantener
la temperatura del sistema en un rango optimo en el cual el agente biológico usado se
mantenga trabajando de la mejor manera posible, según Revelo et al. (2018), es de 184,28
W, el valor relativamente bajo de este calor requerido viene afectado por las condiciones de
trabajo, al igual que las dimensiones del biorreactor en cuestion y la cantidad de medio de
trabajo (Doran, 1998).
4. CONCLUSIONES
Araújo, R. G., Rodriguez-Jasso, R. M., Ruiz, H. A., Pintado, M. E., & Aguilar, C. N.
(2018). Avocado by-products: Nutritional and functional properties. Trends in Food
Science and Technology, 51–60. doi:https://doi.org/10.1016/j.tifs.2018.07.027
Martins, S., Mussato, S., Martínez, G., Aguilar, C., & Teixeira, J. (2011). Martins, S.,
Mussatto, S., Martínez, G., Montañez, J., Aguilar, C., TeixeiBioactive phenolic
compounds: Production and extraction by solid-state fermentation. A review.
Biotechnology Advances 29, 365-373.
doi:https://doi.org/10.1016/j.biotechadv.2011.01.008
Meza, L., Graterol, E., Rodriguez , S., Araujo, K., Clamens, C., & Leon, G. (2007).
Desarrollo de Aspergillus niger ATCC 11414 en un sustrato con base en la goma de
Anacardium occidentale. Producción de -D-galactosidasa. Kasmera, 146-155.
Okos, M., & Choi, Y. (1986). Effect of temperature and compositions on the thermal
properties of fods. Department of of food science and tecnology.
Ortega, F., Perez, O., & Lopez , E. (2016). Modelo Semifísico de Base Fenomenológica del
Proceso Continuo de Fermentación Alcohólica. Información Tecnológica, 21-32.
Perez, G., & Guerra, G. (2014). Escalado Del Tamaño De Pellet Obtenido En La
Fermentación Sumergida De Sacarosa Con Aspergillus Niger Desde Un Reactor De
2 L Hasta Uno De 14 L, Con El Coeficiente KLA De Transferencia De Masa
Constante. Revista EPN, #-#.
Revelo , G., Cujilema , M., Baryolo, L., Rosero , E., Cordoba , J., & Ramos, L. (2018).
DETERMINACIÓN DE LA TEMPERATURA ÓPTIMA PARA LA
PRODUCCIÓN DE CELULASAS CON ASPERGILLUS NIGER EN
FERMENTACIÓN SÓLIDA. Revista Centro Azucar , 1-13.
Rodríguez-Carpena, J., Morcuende, D., Andrade, M. J., Kylli, P., & Estévez, M. (2011).
Avocado (Persea americana Mill.) phenolics, in vitro antioxidant and antimicrobial
activities, and inhibition of lipid and protein oxidation in porcine patties. Journal of
Agricultural and Food Chemistry, 5625-5635.
Rolon, H., Acevedo , C., & Villamizar, Y. (2017). Análisis térmico, modelamiento
matemático y simulación de un reactor de agitación discontinuo para volumen
específico. Revista UIS ingeniería , 39-48.
Soccol, R., Pandey, A., & Larroche, C. (2013). Fermentation Processes Engineering in the
Food Industry. Taylor & Francis Group, LLC.
Soong, Y. Y., & Barlow, P. J. (2004). Antioxidant activity and phenolic content of selected
fruit seeds. Food Chemistry, 411-417.
doi:https://doi.org/10.1016/j.foodchem.2004.02.003
Torres-León, C., Ramirez, G., Ascacio, J., Serna, L., Dos Santos, M. T., & Aguilar, C. N.
(2019). Solid-state fermentation with Aspergillus niger to enhance the phenolic
contents and antioxidative activity of Mexican mango seed: A promising source of
natural antioxidants. LWT - Food Science and Technology 112.
doi:https://doi.org/10.1016/j.lwt.2019.06.003
Wen, L., Zhang, Z., Sun, D., & Sivagnanam, S. P. (2020). Combination of emerging
technologies for the extraction of bioactive compounds. Critical Reviews in Food
Science and Nutrition, 1–5.
Yepes, D. P., Márquez, C. J., Cadena, E. M., Martinez, J., Torres, C., Ascacio, A., &
Aguilar, C. (2020). Solid-state fermentation – assisted extraction of bioactive
compounds from Hass avocado seeds. Food and Bioproducts Processing.
doi:https://doi.org/10.1016/j.fbp.2020.10.012
Yepez , D., Marquez, C., Cadena, E., Martinez, J., Torres, C., Ascacio , A., & Aguilar, C.
(2020). Fermentación en estado sólido: extracción asistida de compuestos bioactivos
de semillas de aguacate Hass. Procesamiento de alimentos y bioproductos.