CUARTO SEMESTRE

ALUMNO
VICENTE RIVERA RODRIGUEZ

MATERIA
MICROBIOLOGIA

UNIDAD 2
MICROORGANISMO

MAESTRO
ZAIDA CRISPIN DEL RIO
Pseudomonas spp.
CARACTERISTICAS
Los miembros de este género generalmente son móviles gracias a uno o más
flagelos polares que poseen, son catalasa positivos y no forman esporas.4
Algunas especies sintetizan una cápsula de exopolisacáridos que facilita la
adhesión celular, la formación de biopelículas y protege de la fagocitosis, de los
anticuerpos o del complemento aumentando así su patogenicidad.
Otras características que tienden a ser asociadas con las especies de
Pseudomonas -con algunas excepciones- incluye la secreción de pioverdina
(fluorescein), un sideróforo fluorescente de color amarillo verdoso5 bajo
condiciones limitadas de hierro. Algunas especies pueden producir otros
sideróforos, tales como la piocianina por la Pseudomonas aeruginosa6 y
tioquinolobactina por Pseudomonas fluorescens.7 Las especies de Pseudomonas
son típicamente oxidasa positivas, con ausencia de formación de gas a partir de
glucosa, son hemolíticas (en agar sangre), prueba del indol negativas, rojo de
metilo negativas y Voges Proskauer negativas.
El género demuestra una gran diversidad metabólica, y consecuentemente son
capaces de colonizar un amplio rango de nichos.8 Son de fácil cultivo in vitro y
ampliamente disponibles en número, por lo que ciertas cepas son excelentes para
investigaciones científicas, por ejemplo, P. aeruginosa y su rol como patógeno
oportunista de humanos, el patógeno de plantas P. syringae, la bacteria de tierra
P. putida y la P. fluorescens que promueve el crecimiento de plantas.
ESTRUCTURA ANTIGENICA
Los factores de virulencia de la estructura celular incluyen antígenos somáticos O9
y flagelares H, fimbrias y cápsula de polisacáridos. Producen enzimas
extracelulares como elastasas, proteasas y dos hemolisinas: fosfolipasa C
termolábil y un lipopolisacárido termoestable.10 La exotoxina A bloquea la síntesis
de proteínas responsable de la necrosis tisular. En aves se refiere al uso
contaminado de agua.
CULTIVO
Las Pseudomonas crecen en medios simples. En caldo crecen abundantemente
formando un anillo y un sedimento de color verde azulado. En agar simple forman
colonias brillantes, confluentes, de borde continuo y a veces ondulado con un
centro opaco. El pigmento (piocianina) se difunde en el medio dándole una
tonalidad azul verdosa. Este pigmento tiene cualidades bactericidas sobre otras
bacterias Gram positivas y Gram negativas.
HABITAT
Las especies del género Pseudomonas son organismos ubicuos, bacterias gram
negativas que se encuadran dentro del grupo γ de las proteobacterias. Se han
aislado bacterias de este género tanto en suelos limpios como en suelos
contaminados por productos biogénicos y xenobióticos. También son microbiota
predominante en la rizosfera y en la filosfera de plantas; del mismo modo, se han
aislado de ambientes acuáticos, tanto de agua dulce como de aguas marinas. En
general inocuas para el hombre también existen: patógenos oportunistas como
P.aeruginosa; patógenos de animales y patógenos de plantas como P.syringae.

Entre los microorganismos beneficiosos más importantes se han descrito las

diferentes especies de bacterias del género Pseudomonas capaces de favorecer
activamente el crecimiento de las plantas aun en presencia de suelos infectados
de hongos y bacterias patógenos responsables de numerosas enfermedades
radiculares.
La eficacia de estas bacterias depende muy directamente de la cepa por lo que
durante las dos últimas décadas se están aislando y produciendo para la
agricultura aquellas que mejor y más rápidamente se asocian al sistema radicular
y manifiestan un mejor comportamiento antagonista frente a al amplio rango de
hongos patógenos del suelo.
Las Pseudomonas actúan de una doble manera sobre el cultivo: promueven el
crecimiento vegetal y suprimen a los microorganismos patógenos. Hay quien ha
sugerido que estimulan el establecimiento de otros microorganismos beneficiosos
asociados a las raíces como las micorrizas. Las Pseudomonas producen un
incremento de la disponibilidad de Fósforo y nitrógeno en forma asimilable para la
planta debido a la producción de fitohormonas estimuladoras de la actividad
vegetativa, así como la degradación de precursores del etileno.
La supresión de enfermedades parece estar relacionadas con la secreción de
metabolitos antimicrobianos, la competencia por el hierro, la mayor facilidad para
colonizar la rizosfera, la inactivación de la germinación de las esporas de otras
especies de hongos, la inactivación de toxinas, la inducción de los mecanismos
propios de defensa que poseen los vegetales a través de exudados radiculares
inmunoprotectores y la producción de enzimas extracelulares (quitinasa,
glucanasa, laminarasa, etc.) capaces de digerir las paredes celulares de los
hongos patógenos.
Un buen agente de biocontrol, como las Pseudomonas, debe tener una alta tasa
de reproducción, un alto poder competitivo frente a otros microorganismos
autóctonos, un cierto grado de inmunización frente a los exudados radiculares, ser
poco exigente en cuanto a sus necesidades nutricionales, producir metabolitos
supresivos para sus competidores y capaz de sobrevivir en un amplio rango de
valores de temperatura, humedad, salinidad, textura y PH del suelo.
Una de las consecuencias de colonizar la rizosfera de los cultivos con
Pseudomonas es la reducción en el uso de sustancias fungicidas en línea con las
nuevas estrategias marcadas por la directiva europea en materia de lucha
integrada que prioriza aquellas técnicas de lucha que minimicen el empleo de
materias activas residuales.
Estas bacterias pueden ejercer un efecto benéfico directo, a través de la síntesis
de fitohormonas y de vitaminas, estimulación de la germinación de semillas y
emergencia de plántulas, inhibición de la síntesis de etileno, solubilización de
fósforo (P) inorgánico. De manera indirecta, por medio de síntesis de antibióticos y
fungicidas, competencia por nutrientes, producción de sideróforos o por la
inducción de la resistencia sistémica a patógenos. Pueden también actuar como
BCA, capaces de proteger a las plantas de la infección, causadas por agentes
fitopatógenos.
En virtud de su capacidad de adaptación fisiológica y versatilidad metabólica, las
bacterias en las zonas de raíces de las plantas son un agente clave del cambio del
suelo en los agro ecosistemas, con efectos positivos, en cuanto a tolerancia de
altos contenidos de sales, aumento en los rendimientos de los cultivos y mejoras
en la calidad del suelo, respecto a la disponibilidad de nutrientes; sin embargo,
esta regulación está mediada por el quórum sensing de las bacterias, las cuales,
se deben adaptar para alcanzar una alta proliferación y, de esta manera, se
estimulan, se activan y se mantienen en la zona radicular, por medio de la
liberación selectiva de los exudados y lixiviados, por parte de las plantas y otros
microorganismos. A su vez, las bacterias de la rizófora son capaces de generar
una amplia variedad de metabolitos secundarios, que pueden tener una influencia
positiva, sobre:
- El crecimiento y desarrollo de las plantas.
- Mejoran la disponibilidad de minerales y nutrientes en el suelo.
- Mejoran la capacidad de fijación de nitrógeno.
- Disminuyen la susceptibilidad a las heladas.
- Mejoran la sanidad vegetal, a través del control biológico de fitopatógenos.
- Inducen en las plantas la resistencia sistémica a las enfermedades.
- Facilitan el establecimiento de plantas.
De acuerdo a lo anterior, son muchos los beneficios que se le atribuyen a este tipo
de microorganismos, cuando son estudiados de forma individual, ya que cada
especie presenta capacidades específicas para ser utilizadas como PGPM y BCA;
no obstante, esto no quiere decir que cada función se cumpla por separado. Las
tres especies en estudio muestran la multifuncionalidad de sus bondades
expresadas en los efectos benéficos, en cuanto a la estimulación del crecimiento
vegetal y la protección directa contra patógenos edáficos, principal e
indirectamente, contra patógenos aéreos.

TIPOS DE EFECTOS ANTAGONICOS

Algunas cepas de Pseudomonas colonizan de manera efectiva los órganos

subterráneos de las plantas y promueven el crecimiento de la planta de manera
consistente, reduciendo también la incidencia de enfermedades causadas, sobre
todo, por un amplio rango de hongos patógenos del suelo.
Está generalmente aceptado que uno de los mecanismos más importantes, por el
que las pseudomonas fluorescentes promueven el crecimiento vegetal, es
mediante la supresión de microorganismos patógenos más o menos importantes.
También se ha sugerido que las pseudomonas pueden manifestar sus efectos
promotores del crecimiento indirectamente, estimulando la acción beneficiosa de
otros microorganismos asociados a las raíces, como las micorrizas. Cuando la
estimulación del crecimiento vegetal se produce en ausencia de otros
microorganismos, ésta se ha atribuido al incremento de la disponibilidad de
nutrientes minerales, como el fosfato o el nitrógeno, debido a la producción de
fitohormonas estimuladoras del crecimiento vegetal o a la degradación de
precursores del etileno en la raíz por parte de estas bacterias.
Recuento de Pseudomonas totales en suelo libre y en rizoplano de las especies
cultivadas

Muestra Carga de Pseudomonas (log10 UFC/g)*

Suelo 7,2 ± 0,1c
Maíz 5,4 ± 0,3a
Trigo 6,2 ± 0,3b
Soja 5,7 ± 0,4a
Se muestran los valores promedio de las 3 réplicas por grupo de estudio y
triplicados de los plaqueos de cada suspensión (n = 9). Letras diferentes en
superíndice indican diferencias estadísticamente significativas entre la carga de
Pseudomonas, según ANOVA seguido de test de comparaciones múltiples de
Tukey (p < 0,05).
*UFC: unidades formadoras de colonias por gramo de peso fresco de raíz o de
suelo, según corresponda.

Independientemente de las diferencias en los valores de carga ya comentados

(tabla 1), se destaca que la densidad de Pseudomonas en el rizoplano fue
notablemente inferior, en varios órdenes de magnitud que la determinada para la
rizosfera de maíz (8,9 log10 UFC/g de raíz fresca) y soja (9,6 log10 UFC/g de raíz
fresca) en plantas cultivadas a campo2. Tal diferencia se atribuye al procedimiento
de aislamiento de Pseudomonas, ya que las suspensiones rizosféricas se obtienen
a partir de raíces sin remoción del material particulado de suelo que se encuentra
naturalmente adherido1, 2, mientras que en este trabajo se lavaron
exhaustivamente las raíces antes de proceder a recuperar las bacterias
firmemente adheridas, de manera de recuperar aquellos genotipos con mayor
competitividad para colonizar solo el rizoplano. La densidad de Pseudomonas
registrada en el rizoplano de plántulas de trigo, maíz y soja (tabla 1) es
comparable con la carga de Pseudomonas comunicada por otros grupos en el
rizoplano de maíz en suelo natural3.