INSTITUTO POLITÉCNICO

NACIONAL

ESCUELA NACIONAL DE
CIENCIAS BIOLÓGICAS

ASIGNATURA: BIOTECNOLOGÍA

PRÁCTICA 6:
MICROPROPAGACIÓN

ALUMNO: ÁVILA MARTÍNEZ

KENIA

GRUPO:4QM2
INTROCUCCIÓN
La micropropagación consiste en la propagación de un genotipo a gran escala a través del empleo de
técnicas de Cultivo de Tejidos. Es una herramienta muy útil en los programas de mejoramiento, ya que
tiene el potencial de producir plantas de calidad uniforme a escala comercial, a partir de un genotipo
selecto y con una tasa de multiplicación ilimitada.

Esto es posible gracias a la propiedad de totipotencia que tienen las células vegetales; esto es la
capacidad de regenerar una planta completa cuando están sujetas a los estímulos adecuados. Así,
las células somáticas de cualquier tejido podrían formar tallos, raíces o embriones somáticos de
acuerdo con la competencia que posean y al estímulo que reciban.

Esta regeneración ocurre en fases consecutivas:

• Fase de desdiferenciación, donde las células se vuelven competentes para responder

ante cualquier estímulo organogénico o embriogénico.
• Fase de inducción, donde las células se determinan para formar un órgano o embrión.
• Fase de realización, donde se forma el órgano o embrión propiamente dicho.

Estas fases están directamente afectadas por el balance hormonal del medio de cultivo, por lo cual la
optimización de los protocolos de regeneración debe realizarse teniendo en cuenta los requerimientos
de cada genotipo en cada fase del cultivo. Así, en general, puede decirse que el proceso de
desdiferenciación generalmente es promovido por una Auxina, la fase de inducción por un balance
hormonal específico del órgano o embrión a formarse y la fase de realización, por una disminución de
la concentración hormonal en el medio de cultivo.

DISCUSIÓN
La micropropagación constituye una alternativa viable para la propagación del Coleus. La
embriogénesis somática y la organogénesis a partir de yemas axilares podría también ser
una buena alternativa. Los pasos críticos del procedimiento son el lavado con hipoclorito de
sodio y el corte de tallo, ya que es el inicio de la técnica de micropropagación que
empleamos, con el hipoclorito de sodio debemos tomar el tiempo exacto ya que puede
oxidar la planta o bien puede estar aun contaminada nuestra muestra y esto evitara que
crezca un cultivo sano o bien que crezca, y si se daña el nodo esto evitara que las células
se propaguen para dar nuevos cultivos.

ACTIVIDAD
Cultivo de tejidos (Clonación in-vitro) de Epidendrum falcatum.

Las orquídeas son plantas que pertenecen a la familia Orchidaceae, con aproximadamente 700 a 800
géneros y 25 000 a 35 000 especies. Algunas especies se encuentran amenazadas o en peligro de
erradicación, debido al saqueo indiscriminado, destrucción de espacios, contaminación ambiental y
deforestación, aunado a los problemas de lento crecimiento y baja tasa de germinación en condiciones
naturales. Los explantes utilizados fueron semillas, las cuales se cultivaron en medio MS (Murashige
y Skoog), el cual es a base de minerales y nutrientes que el explante necesitó para desarrollarse; de
la misma manera fueron agregados reguladores de crecimiento, en diferentes dosis (0.1/0.5, 0.1/1
AnA y BaP respectivamente).

DESARROLLO

Se realizaron cortes de plántulas de Epidendrum falcatum en la parte media para obtener la parte
apical y basal de las semillas. Se utilizó tres tipos de medio a dos de los cuales se les agrego diferentes
cantidades de reguladores de crecimiento:

Testigo - sin reguladores de crecimiento

Experimental 1, con dosis de 0.5 mg de BaP (Ácido Benzylamino Purina) y 0.1 mg de AnA
(Ácido Naftalenacetico)
Experimental 2, con 1 mg de BaP y 0.1 mg de AnA.

Se preparó litro y medio de medio de cultivo MS en cantidades específicas de cada sustancia que se
agregaron conforme el siguiente orden.

Macronutrientes (15 ml)

Calcio (15 ml)

Micronutrientes (7.5 ml)
Hierro (15 ml)
Vitaminas (10 ml)
Inositol (10 ml)
Glicina (10 ml)
Azúcar refinada (45 gramos)
Agar (1.75 ml por cada concentración)

Manteniéndolo en constante movimiento, al terminar de agregar el azúcar se dividió el medio en 3

porciones iguales (500 ml. cada una) y al final se añadió el agar. Con una balanza electrónica se pesan
10 mg de AnA (Ácido Naftalenacético) y se agregan 5 gotas de Etanol 70 %, una vez disuelto el AnA,
se afora a 10 ml con agua destilada. De igual manera se hace con el BaP (Benzylamino Purina) pero
en lugar de usar Etanol se usó Hidróxido de Sodio.

Una vez agregados los reguladores de crecimiento se separaron en 3 frascos de 500 ml de medio con
sus respectivas concentraciones. Se midió el PH, el cual debe estar en un rango de: 5.7 - 5.75. Se
calentó en un horno de microondas de 4 a 5 minutos por cada concentración y posteriormente se vació
25 ml de medio en cada frasco, colocando su tapa y dejando enfriar hasta obtener una forma de gel,
por último, se llevaron los frascos a la autoclave un tiempo típico de esterilización de 15 a 20 minutos.
Se obtuvieron 30 frascos, 10 por medio, una vez esterilizados los medios que ocuparemos para el
proceso, en una caja se encuentran las semillas de las orquídeas, se colocaron en la campana de flujo
laminar. Se abrieron las cajas de Petri y los frascos con medio, con la ayuda de un bisturí se partieron
las semillas por la mitad para obtener los cortes apical y basal, con unas pinzas, se tomaron los cortes
y se colocaron cuidadosamente sobre el gel, procurando que quedaran fijos en el medio sin
sumergirlos. Se colocaron 1 corte basal en 5 frascos y 1 corte apical en los otros 5, esto se repitió con
los 3 tipos de medio, por lo tanto, de los 10 frascos que le correspondían a cada medio, 5 fueron de
cortes basal y 5 de cortes apical. Una vez cerrados los frascos se sellaron con plástico hermético, con
un marcador se anotó en la tapa el nombre de la especie, la fecha y el nombre de quien sembró los
explantes. Los frascos ya con los cortes se llevarán a la incubadora, la cual debe tener ciertas medidas
específicas como tener el cuarto de cultivo bien acondicionado: 16 horas de fotoperiodo y un rango de
temperatura entre 22-25°C. 8 horas de oscuridad

VENTAJAS
La micropropagación vegetal nos permite propagar masivamente material vegetal ano en
cualquier época del año y en corto tiempo conservando su potencial genético y calidad
sanitaria
Permite obtener plantas libres de enfermedades
En este permite propagar especies en peligro de extinción

BIBLIOGRAFÍA

EcuRed. (s. f.). Micropropagación de plantas - EcuRed. Recuperado 28 de noviembre de 2020,

de https://www.ecured.cu/Micropropagaci%C3%B3n_de_plantas

Vences C. (2016) Manual de Prácticas de micropropagación vegetal. México. Recuperado de

http://ri.uaemex.mx/bitstream/handle/20.500.11799/64552/secme-12254.pdf?sequence=1

https://feriadelasciencias.unam.mx/anteriores/feria22/feria335_01_cultivo_de_tejidos_clonaci

on_invitro_de_epidendrum.pdf

Micropropagación de plantas. (s. f.). Bioplan In Vitro. Recuperado 28 de noviembre de 2020,

de http://www.bioplaninvitro.com/micropropagacion-de-plantas