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PRACTICA Nº 1. PROPIEDADES FÍSICAS Y QUÍMICAS DE LOS AMINOÁCIDOS.

Jonathan Janna Merlano, Sebastian Ospina Hernandez.
Universidad de Córdoba.
Departamento de Ingeniería Ambiental.
__________________________________ LB02-Bioquimica.___________________________________

RESULTADOS Y OBSERVACIONES.

Muestra I.

Prueba o test Resultado Observación

Se da un cambio de color;
Ninhidrina + de incoloro a una tonalidad
violeta.
Xantoproteica - No cambia la coloración.
Formación de un
Sulfuro de Plomo + precipitado oscuro de
sulfuro de plomo (PbS↓).

Por medio de la prueba de Ninhidrina logramos confirmar que nuestra muestra es un

α-aminoácido, esto se logra al obtener una coloración violenta generada por la reacción de la
Ninhidrina con sustancias que presenten por lo menos un grupo amino y un grupo carboxilo libre
(se descarta la prolina, la cual no cuenta con grupo amino libre). luego se realizó la prueba
Xantoproeica obteniendo un resultado negativo al no presentarse cambios en la coloración, con
esto se descartaron los aminoácidos aromáticos (tirosina, Triptófano, y fenilalanina), y
consideramos la muestra como un aminoácido alifático. Al desarrollar la muestra de sulfuro de
plomo obtenemos la formación de un precipitado plateado, el cual se genera como reacción del
acetato de plomo con azufre en soluciones alcalinas. Teniendo en cuenta lo anterior se deduce
que nuestra muestra es cisteína, debido la presencia de azufre en su cadena lateral.

Muestra II.

Prueba o test Resultado Observación

Se da un cambio de color;
Ninhidrina + de incoloro a una tonalidad
amarilla.

En el desarrollo de la prueba con Ninhidrina obtenemos un tono amarillo característico de cuando

nuestro aminoácido es prolina, esta tonalidad se da de manera particular con la prolina debido a
que esta no presenta grupo amino libre que pueda reaccionar con la ninhidrina y liberar amonio.
se concluye que nuestra muestra es prolina.
Muestra III.

Prueba o test Resultado Observación

Se da un cambio de color;
Ninhidrina + de incoloro a una tonalidad
violeta.
Se da un cambio de color;
Xantoproteica + de amarillo a una tonalidad
naranjada.
Pauly´s Diazo - No cambia la coloración.
Se da un cambio de color;
Ácido Glioxilico + de incoloro a una tonalidad
purpura.

La coloración violeta resultado de la prueba con Ninhidrina nos muestra que nuestra muestra
efectivamente es un α-aminoácido distinto de la prolina. En la prueba Xantoproteica se observa
un cambio en la coloración producto de la sustitución electrofílica que se da entre ácido nítrico y
el grupo aromático presente en algunos aminoácidos, por tanto, consideramos que nuestra
muestra debe tratarse de tirosina, Triptófano ó fenilalanina. Al no presentarse cambio de
coloración durante la prueba Pauly´s Diazo se descarta tirosina y se procede al desarrollo del test
con ácido Glioxilico, el cual se considera positivo al presentar una coloración purpura,
concluyendo que nuestra muestra se trata de triptófano.
 CUESTIONARIO.

1. Escriba la reacción de cada prueba realizada.

2. De acuerdo con las pruebas realizadas en esta práctica proponga una clasificación para
los aminoácidos.
Teniendo en cuenta las pruebas realizadas en el laboratorio y las explicadas la guía, podemos
clasificar a los α-aminoácidos de la siguiente forma:
α -aminoácidos: todos aquellos que muestran una coloración violeta (o amarilla en el caso de
la prolina) en la reacción con la ninhidrina, entre estos aminoácidos están: Glicina,
Triptófano, Arginina.
Aminoácidos aromáticos: Triptófano, fenilalanina y Tirosina. Esta clasificación se hace de
acuerdo a la reacción Xantoproteica, ya que esta solo de un valor positivo con todos los α-
aminoácidos que tengan núcleos aromáticos.
Aminoácidos alifáticos: todos aquellos aminoácidos que dan positivo a la prueba con ninhidrina,
pero negativo para la prueba xantoproteica.
Aminoácidos con grupo hidroxibenceno: Tirosina y sus derivados, ya que son los únicos α-
aminoácido que reaccionan a la prueba de Millon.
Aminoácidos con grupo Guadinino: aquí se encuentra la Arginina ya que es el único α-
aminoácido que tiene reacción con el reactivo de Sakaguchi gracias a su grupo guadinino.
Aminoácidos con grupo Indólico: aquí se encuentra el Triptófano y sus derivados ya que es el
único α-aminoácido que reacciona en la prueba de Ácido Glioxilico gracias a su grupo Indólico.
3. Indique los grupos químicos que caracterizan a los aminoácidos.
Estos se caracterizan gracias a los grupos amino y carboxilo, que se encuentran unidos a un
mismo carbono el cual se encuentra en posición alfa respecto a un segundo carbono que hace
parte de la cadena lateral, la cual puede ser un radical alquílico, arilo o heterocíclico.
4. Explique cómo se encuentran estructuralmente los aminoácidos en el plasma sanguíneo
líquido intracelular cuyo pH es de 7.4 y 7.1 respectivamente.
Los aminoácidos son soluciones con pH neutro, son sobre todo iones dipolares, que es la forma
en que, por lo general, están presentes los aminoácidos en el pH celular. Cada grupo carboxilo (-
COOH) dona un protón y se disocia (-COO-), mientras que cada grupo amino (-NH2) acepta un
protón y se convierte en (-NH3). Debido a sus grupos aminos y carboxilos, los aminoácidos en
soluciones resisten los cambios de acidez y alcalinidad, de tal suerte que son amortiguadores
biológicos importantes.
5. Cuáles son las explicaciones prácticas de las pruebas realizadas.
La ninhidrina reacciona rápidamente con el grupo amino, lo oxida y libera amonio el cual se
condensa con la ninhidrina reducida y con otra molécula de un hidruro libre para producir un
color violeta.
 La reacción Xantoproteica se produce cuando una solución de HNO3 con un aminoácido que
posea un anillo aromático, mediante calentamiento gradual se produce la nitración del anillo. El
tratamiento posterior con NaOH al 20% forma una sal amarilla o naranja. La fenilalanina, tirosina
y triptófano son aminoácidos característicos de ésta.
En el test de sulfuro de plomo el acetato de plomo reacciona en medio alcalino con el azufre de la
cisteína formando un precipitado de sulfuro de plomo claramente visible por su tono oscuro.
La reacción de Pauly´s Diazo hace reaccionar la tirosina con ácido sulfanílico diazotizado en
condiciones alcalinas.

El test de Ácido Glioxilico hace que el grupo indólico del triptófano reaccione con ácido
glioxÌlico en presencia del ácido sulfúrico concentrado.