E.M.B. Agar.

Este medio (también denominado E.A.M.) es utilizado para el aislamiento selectivo de

bacilos Gram negativos de rápido desarrollo y escasas exigencias nutricionales. Permite
el desarrollo de todas las especies de la familia Enterobacteriaceae.

Este medio combina las fórmulas de Holt-Harris y Teague con la de Levine, para obtener
un mejor rendimiento en el aislamiento selectivo de enterobacterias y otras especies de
bacilos Gram negativos. La diferenciación entre organismos capaces de utilizar la lactosa
y/o sacarosa, y aquellos que son incapaces de hacerlo, está dada por los indicadores
eosina y azul de metileno; éstos ejercen un efecto inhibitorio sobre muchas bacterias
Gram positivas. Muchas cepas de Escherichia coli y Citrobacter spp. presentan un
característico brillo metálico. Las cepas que utilizan la lactosa poseen centro oscuro con
periferia azulada o rosada, mientras que las que no lo hacen son incoloras. Este medio
permite el crecimiento de Candida spp. como colonias rosadas y puntiformes; la siembra
en profundidad permite el desarrollo de clamidosporas en C. albicans. Enterococcus spp.
crece en este medio como colonias puntiformes y transparentes, mientras que
Acinetobacter spp. y otras bacterias oxidativas pueden dar colonias de color azul lavanda;
esto puede ocurrir aunque las cepas no sean capaces de acidificar a partir de lactosa al
0.5% y ello se debe a la incorporación de azul de metileno a sus membranas. En este
medio se obtiene además, un buen desarrollo de especies de Salmonella y Shigella.

Fórmula (en gramos por litro) Instrucciones

  Peptona  10.0 Suspender 36 g del polvo en un
  Lactosa 5.0 litro de agua destilada. Reposar 5
  Sacarosa 5.0 minutos; mezclar, calentando a
  Fosfato dipotásico 2.0 ebullición durante 1 o 2 minutos
hasta su disolución. Esterilizar en
  Agar 13.5
autoclave a no más de 121°C
  Eosina 0.4 durante 15 minutos. Enfriar a 45°C
  Azul de metileno 0.065 y distribuir agitando suavemente.
pH final: 7.2 ± 0.2

Siembra
En superficie, por estriado a partir de un inóculo poco denso, para obtener colonias
aisladas. 
En profundidad, para favorecer el desarrollo de clamidosporas.

Incubación
De 24 a 48 horas a 35-37 °C, en aerobiosis.

Resultados
Microorganismos Tipo de Colonia
Verdosas con brillo metálico y centro
Escherichia coli ATCC 25922
negro azulado
Klebsiella pneumoniae ATCC 700603 Mucosas, rosa púrpura, confluentes
Proteus mirabilis ATCC 43071 Incoloras
Enterococcus faecalis ATCC 29212 Incoloras, pequeñas, puntiformes
Shigella flexneri ATCC 12022 Incoloras
Salmonella typhimurium ATCC 14028 Incoloras
Violeta Rojo y Bilis Agar.
Este es un medio selectivo para la investigación presuntiva y recuento de coliformes en
alimentos y productos lácteos. 

Fundamento
En el medio de cultivo, la peptona y el extracto de levadura aportan los nutrientes
necesarios para el crecimiento bacteriano,las sales biliares y el cristal violeta inhiben el
desarrollo de la flora Gram positiva, la lactosa es el hidrato de carbono fermentable, y el
rojo neutro es el indicador de pH.
Los coliformes son bacterias que fermentan la lactosa, acidifican el medio y producen un
viraje del indicador de pH al color rojo intenso. Debido a esto, se observan como colonias
de color rojo púrpura, de 1 a2 mm de diámetro, rodeadas, generalmente, de una zona
rojiza de bilis precipitada.

Fórmula (en gramos por litro) Instrucciones

  Extracto de levadura 3.0
  Peptona 7.0 Suspender 41,5 g del polvo por litro
  Sales biliares 1.5 de agua destilada. Reposar 5 minutos
  Lactosa 10.0 y mezclar, calentando a ebullición 1 o
2 minutos. Enfriar a 45°C y verter en
  Cloruro de sodio 5.0
placas. Una vez preparado debe
  Agar 15.0 usarse de inmediato. NO
  Rojo neutro 0.03 AUTOCLAVAR.
  Cristal violeta 0.002
pH final: 7.4 ± 0.2

Siembra
-Para recuento bacteriano: sembrar en profundidad 1ml de la muestra directa o de la
dilución apropiada, agregar aproximadamente 12-15 ml de medio de cultivo enfriado a 45
ºC, agitar por rotación y dejar solidificar.
Luego, agregar una sobre capa de medio de cultivo para crear condiciones anaeróbicas
de manera que se evite el crecimiento de microorganismos Gram negativos no
fermentadores de azúcares y el crecimiento en forma invasiva de Proteus spp. 
-Para propósitos generales: sembrar en superficie, una ansada a partir de los tubos con
gas de un medio para coliformes (por ejemplo de Verde Brillante Caldo y Bilis 2% ó Mac
Conkey Caldo ó Lauril Sulfato Caldo)

Incubación
Para la detección de Enterobacterias mesófilas, incubar a 30ºC durante 24 horas. Se
puede aumentar la selectividad incubando a 42 ºC.

Resultados
Microorganismos Colonias
Enterobacterias fermentadoras de Rojas, de 1 a 2 mm de diámetro, con halo de
lactosa precipitación rojizo
Enterobacterias no fermentadoras de
Incoloras
lactosa
Enterococcus spp. Rosadas como punta de alfiler (puntiformes)
Características del medio
Medio preparado: púrpura rojizo.
Mac Conkey Agar.
Este medio se utiliza para el aislamiento de bacilos Gram negativos de fácil desarrollo,
aerobios y anaerobios facultativos. Permite diferenciar bacterias que utilizan o no, lactosa
en muestras clínicas, de agua y alimentos. Todas las especies de la familia
Enterobacteriaceae desarrollan en el mismo.

Fundamento 
En el medio de cultivo, las peptonas, aportan los nutrientes necesarios para el desarrollo
bacteriano, la lactosa es el hidrato de carbono fermentable, y la mezcla de sales biliares y
el cristal violeta son los agentes selectivos que inhiben el desarrollo de gran parte de la
flora Gram positiva. 
Por fermentación de la lactosa, disminuye el pH alrededor de la colonia. Esto produce un
viraje del color del indicador de pH (rojo neutro), la absorción en las colonias, y la
precipitación de las sales biliares. 
Los microorganismos no fermentadores de lactosa producen colonias incoloras.

Fórmula (en gramos por litro) Instrucciones

  Peptona 17.0
  Pluripeptona 3.0 Suspender 50 g del polvo por litro de
  Lactosa 10.0 agua destilada. Reposar 5 minutos y
  Mezcla de sales biliares 1.5 mezclar hasta uniformar. Calentar
suavemente y hervir 1 a 2 minutos
  Cloruro de sodio 5.0
hasta disolver. Esterilizar en
  Agar 13.5 autoclave a 121°C durante 15
  Rojo neutro 0.03 minutos.
  Cristal violeta 0.001
pH final: 7.1 ± 0.2

Siembra
- Sembrar en superficie. 
- Utilizando la técnica de Pour Plate: sembrar 1 ml de muestra y agregar
aproximadamente 15 ml de medio de cultivo fundido y enfriado a 45-50 ºC.

Incubación
Durante 18-48 horas, a 35-37 ºC, en atmósfera aeróbica

Resultados
Microorganismos
Escherichia coli ATCC 25922
Klebsiella pneumoniae ATCC 700603
Salmonella typhimurium ATCC 14028
Shigella flexneri ATCC 12022
Proteus mirabilis ATCC 43071
Enterococcus faecalis ATCC 29212
Características del medio
Medio preparado: rojo púrpura
Colonias
Rojas con halo turbio
Rosadas mucosas
Incoloras, transparentes
Incoloras, transparentes
Incoloras, transparentes
Diminutas, incoloras,
opacas
BD Endo Agar es un medio ligeramente selectivo y de diferenciación para el aislamiento
y la diferenciación de la familia Enterobacteriaceae y diversos otros bacilos gram
negativos a partir de muestras clínicas.

El medio se utiliza aún en microbiología clínica y en otros sectores para el aislamiento y la

diferenciación de la familia Enterobacteriaceae . La selectividad del agar Endo se debe a
la combinación del sulfito de sodio con fucsina básica, lo cual ocasiona la supresión
parcial de los microorganismos gram-positivos. Los coliformes fermentan la lactosa,
produciendo colonias color rosa oscuro a rojizo con un brillo metálico verdoso iridiscente y
una coloración similar en el medio. Las colonias de microorganismos que no fermentan la
lactosa son incoloras o de color rosa pálido en contraste con el fondo rosa claro del
medio.

En este medio crecerán microorganismos de la familia Enterobacteriaceae y una

diversidad de otros bacilos gram-negativos, p. ej. Pseudomonas y Aeromonas6 . En el BD
Endo Agar, no se inhibe la proliferación de Proteus. El agar Endo no inhibe
completamente las bacterias gram-positivas como enterococos o estafilococos y ni las
levaduras.

REACTIVOS BD Endo Agar

Fórmula* por litro de agua destilada
Digerido péptico de tejido animal 10,0
Lactosa 10,0
Fosfato dipotásico de hidrógeno 3,5 g
Sulfito sódico 2,5
Fucsina básica 0,5
Agar 15,0
pH 7,4 ± 0,2

GENERALES DE USO para obtener instrucciones detalladas). Incubar las placas en un

lugar oscuro durante un período de 18 a 24 horas a una temperatura de 35 ± 2 °C en un
ambiente aerobio.

Cepas Resultados del crecimiento

E. coli Colonias de rosa oscuro a rojizo, brillo verde metálico
Enterobacter/Klebsiella Colonias grandes, mucoides, de color rosa
ProteusProteus Colonias desde incoloras hasta rosa muy pálido, proliferativas
Salmonella Colonias desde incoloras hasta rosa muy pálido
Shigella Colonias desde incoloras hasta rosa pálido
Pseudomonas Colonias irregulares, incoloras
Bacterias grampositivas Crecimiento nulo o escaso
 CALDO FLUOROGENICO PARA COLIFORMES Y E.COLI LMX X 500 g

Denominación CALDO FLUOROGENICO PARA COLIFORMES Y E.COLI LMX

Principal
Presentación Frasco x 500 g

Temperatura de Documento(s):
Almacenamiento 15 a 25 ºC   Certificado de Análisis

PH 6.6-7

Características

Composición : Triptosa 5.0 g, Cloruro de sodio 5,0 g, Sorbitol 1.0 g, Triptofano 1.0 g, Fosfato di hidrógeno di
potasio 2.7 g, fosfato di-hidrogeno potasio 2.0 g, Lauril sulfato de sodio sal 0.1g, 5 Bromo 4 Cloro 3 indolyl Beta
D-galactopiranosida (X-GAL) 0.08g, 4 Metil umbeliferil –B-D-glucoronide (MUG) 0.05 g, 1 isopropil B-D-1-tio-
  galactoriranoside (IPTG) 0.1g. Agar para la enumeración de Escherichia coli y de los coliformes totales en
alimentos y otros productos por medio de la fluorescencia. Lo compone el glucoronide metílico-umbelliferyl-BD
4 para detectar la actividad de la enzima glucoronidasa.

Para el ensayo de agua potable y agua a temperatura ambiente. Coliformes totales y E.  colidetección.
pH 7
T: 35° por 24 horas