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ELECTROFORESIS
1, Curso de Biofísica
Universidad de la Salle
Bogotá, 2020
Contenido
1 Principio Físico
3 Electroforesis de Proteínas
4 Electroforesis de ADN
Campo Gravitacional
Campo Gravitacional
Campo Gravitacional
Campo Gravitacional
Campo Gravitacional
Campo Gravitacional
Fr + FE − mg = −ma
Campo Gravitacional
d 2 ( ρesf − ρf )
!
U =v = g = Sg (2)
18η
Donde S es la movilidad que en este caso se llama coeficiente de
sedimentación
Campo Gravitacional
Simulación de la velocidad en función del tiempo de una partícula que
cae en un fluido.
Campo Eléctrico
Fe = qE
Donde q es la carga y E la intensidad del campo eléctrico. La
partícula al moverse en un medio experimenta una fuerza de fricción,
que esta asociada con su velocidad, entonces:
Fe − Fr = ma
Al alcanzar su velocidad limite la aceleración es cero (a = 0):
qE − 6πRηv = 0 (3)
Campo Eléctrico
Ze
µ=
6πRη
Donde Z es el número de electrones y e la carga del electrón. Es
importante tener en cuenta que en el caso de las proteínas su carga
depende del pH del medio, por lo tanto un cambio de pH en el medio
puede afectar la movilidad de la proteína.
Movilidad
Velocidad Inducida
U= m ζ (5)
Movilidad
Movilidad
Velocidad Inducida
U= m ζ (5)
Movilidad
Movilidad
q q
Eléctrico Ue = 6πRη E µ = 6πRη ; Movilidad electroforetica
!
d 2 |4ρ| d 2 |4ρ|
Centrifugo Uc = 18η
r ω2 S = 18η ; Coeficiente de sedimentación
d4χ d4χ
Magnético Um = 48η 4H 2 m = 48η
Movimiento Browniano
Montaje
q Ze
µ= =
6πRη 6πRη
Montaje
q Ze
µ= =
6πRη 6πRη
Montaje
Montaje
Montaje
Montaje
Montaje
Montaje
Montaje
Montaje
Montaje
Montaje
Montaje
Montaje
Montaje
La adición del SDS hace que la mayoría de las proteínas adopten una
forma similar, separando, así, en función de la masa molecular (los
péptidos pequeños se desplazan rápidamente).
Montaje
Las proteínas se visualizan añadiendo un colorante como azul de
Commassie que se fija a las proteínas pero no al gel.
Electroforesis Bidimensional
Electroforesis Bidimensional
Electroforesis Bidimensional
Electroforesis Bidimensional
Electroforesis Bidimensional
Electroforesis Bidimensional
Electroforesis Bidimensional
Electroforesis Bidimensional
Electroforesis Bidimensional
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Bibliografía
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