PRACTICA 7.

“MODULACIÓN DE UNA FUNCIÓN

CELULAR POR SEÑALES QUIMICAS. “
OBJETIVO
o Evaluar el efecto de señales químicas (estrógenos y oxitocina) sobre la contractilidad
uterina en rata.

FUNDAMENTO

El estradiol es una hormona que al ser aplicada en las ratas prepuberes (ratas problema)
produce la maduración de los órganos reproductores; de ahí por qué se tiene que administrar
la hormona semanas antes a la rata problema, para la completa maduración del útero y la
activación y síntesis de los receptores de oxitocina. Por lo cual tendremos que al aplicar
oxitocina en diferentes concentraciones donde obtendremos variaciones de
contractibilidad uterina bajo los cambios de diferentes concentraciones de oxitocina.
Las ratas control fueron inyectadas con aceite ya que el estradiol esta disuelto en aceite y de
esta manera se comprueba que el aceite no es el agente que produce que se formen los
receptores de oxitocina.
La solución García de Jalón es hipocálcica y fisiológica, es decir, es un medio iónico y
enérgico, con presencia de glucosa; con estas características asemeja el medio donde se
encuentra el útero. La temperatura de esta solución (de entre 31-32 °C), al igual que
la característica hipocálcica, son con el fin de evitar contracciones espontáneas. El cuerno
uterino se colocó en una cámara de órgano aislado con aireación constante pues es
importante porque permite que el músculo pueda producir ATP y se pueda llevar a cabo el
proceso de contracción

Resultados

Basal

Control: 1 contracción/minuto, Fuerza= 0.25g Problema: 2 contracciones7minuto. Fuerza 3g

Oxitocina 2.5 nM

Control: 1.25 contracción/min, Fuerza= 0.35 g Problema: 2 contracciones/min, Fuerza 4g

Oxitocina 25 nM

Control: 1.25 contracciones/min, Fuerza: 0.4g Problema: 1 contracción/min, Fuerza: 3g

Oxitocina 50 nM

Control: 1.25 contracciones/min, Fuerza: 0.4g Problema: 1 contracción/min, Fuerza: 4g

Oxitocina 100 nM

Control: 1.25 contracciones/min, Fuerza: 0.35g Problema: 1 contracción/min, Fuerza: 4.3g

Oxitocina 200 nM

Control: 1.25 contracciones/min, Fuerza: 0.35g Problema: 1 contracción/min, Fuerza: 4.7g

Grafica 1. Relación del %Fuerza contra la [oxitocina] en la rata control

 Gráfico 2 Relación del %Fuerza contra la [oxitocina] en la rata problema.

Gráfico 3 Comparación de ambas ratas en relación del %Fuerza contra el log [oxitocina]
Discusión

El útero al sintetizar los receptores de oxitocina debido a la aplicación constante de la

hormona estradiol dando como resultado la contracción que varia dependiendo la cantidad de
oxitocina aplicada. Como se puede ver en la Grafica 1 en la rata control a la concentración de
25nM y 50nM se tiene el mayor porcentaje de fuerza teniendo desde ahí un descenso donde
se mantendrá estable hasta el final esto se debe a que los receptores de oxitocina se
encuentran ocupados por el ligando. En la Grafica 2 se puede ver la variabilidad del %Fuerza
con respecto a la concentración teniendo un aumento significativo cada que se aumentaba la
concentración ya que a estas ratas se les administro el estradiol tienen un numero mayor de
receptores de oxitocina generando un mayor efecto de contracción hasta la saturación de los
receptores. En la Grafica 3 se puede ver la diferencia entre las ratas utilizadas como en una
se mantiene estale las contracciones y como en la otra van en aumento hasta la fatiga del
musculo.

La activación del receptor de oxitocina (receptores específicos de oxitocina) conduce a tres

mecanismos diferentes de
unión a las proteínas GTP. El mecanismo principal está mediado por el camino de ida Gq
/PLC/InsP3 . Cuando la
oxitocina se une a receptores específicos de oxitocina, se activa Gαq /11 y luego fosfolipasa C
(PLC), que induce la
escisión de PIP2 a inositotrifosfato (IP3 ) y diacilglicerol (DAG). InsP3 induce la liberación de
Ca2+ de los depósitos de
Ca2+ a través de InsP3 R y, en algunas células, a causa del Ca2+ induce la liberación de
Ca2+ (CICR) a través del
receptor de rianodina (RyR). La activación de Gq también provoca la despolarización de la
membrana*, que, a su vez,
activa canales de calcio (VGCCs) y luego da la entrada a Ca2+ a través VGCCs. Así, el
aumento de Ca2+ citosólico
([Ca2+]i ) estimula CaMK después de la unión a la proteína de unión de Ca2+ Calmodulina. El
complejo Ca2+/CaM activa
entonces CaMK y provoca diversas respuestas celulares, tales como las contracciones del
músculo liso, o induce la
activación de varios tipos de enzimas, tales como NOS o de PI3K. DAG causa la activación de
la proteína cinasa C
(PKC) y también diversas respuestas celulares por lo cual en la rata control no se observo
dicha activación del receptor
de oxitocina.
La activación del receptor de oxitocina (receptores específicos de oxitocina) conduce a tres
mecanismos diferentes de
unión a las proteínas GTP. El mecanismo principal está mediado por el camino de ida Gq
/PLC/InsP3 . Cuando la
oxitocina se une a receptores específicos de oxitocina, se activa Gαq /11 y luego fosfolipasa C
(PLC), que induce la
escisión de PIP2 a inositotrifosfato (IP3 ) y diacilglicerol (DAG). InsP3 induce la liberación de
Ca2+ de los depósitos de
Ca2+ a través de InsP3 R y, en algunas células, a causa del Ca2+ induce la liberación de
Ca2+ (CICR) a través del
receptor de rianodina (RyR). La activación de Gq también provoca la despolarización de la
membrana*, que, a su vez,
activa canales de calcio (VGCCs) y luego da la entrada a Ca2+ a través VGCCs. Así, el
aumento de Ca2+ citosólico
([Ca2+]i ) estimula CaMK después de la unión a la proteína de unión de Ca2+ Calmodulina. El
complejo Ca2+/CaM activa
entonces CaMK y provoca diversas respuestas celulares, tales como las contracciones del
músculo liso, o induce la
activación de varios tipos de enzimas, tales como NOS o de PI3K. DAG causa la activación de
la proteína cinasa C
(PKC) y también diversas respuestas celulares por lo cual en la rata control no se observo
dicha activación del receptor
de oxitocina.
La activación del receptor de oxitocina (receptores específicos de oxitocina) conduce a tres
mecanismos diferentes de unión a las proteínas GTP. El mecanismo principal está mediado
por el camino de ida Gq /PLC/InsP3. Cuando la oxitocina se une a receptores específicos de
oxitocina, se activa Gαq /11 y luego fosfolipasa C (PLC), que induce la escisión de PIP2 a
inositotrifosfato (IP3) y diacilglicerol (DAG). InsP3 induce la liberación de Ca2+ de los
depósitos de Ca2+ a través de InsP3 R y, en algunas células, a causa del Ca2+ induce la
liberación de Ca2+ (CICR) a través del receptor de rianodina (RyR). La activación de Gq
también provoca la despolarización de la membrana, que, a su vez, activas canales de calcio
(VGCCs) y luego da la entrada a Ca2+ a través VGCCs. Así, el aumento de Ca2+ citosólico
([Ca2+]i) estimula CaMK después de la unión a la proteína de unión de Ca2+ Calmodulina. El
complejo Ca2+/CaM activaentonces CaMK y provocando las contracciones del músculo liso.
DAG causa la activación de la proteína cinasa C (PKC).

Se obtuvieron contracciones en las señales químicas con estradiol se observaron respuestas

mediante la síntesis de oxitocina que se realiza en el aparato de Golgi donde es empaquetada
la hormona junto con su neurofosina y así viajan por el axón hacia el terminal axónico, estas
vesículas son almacenadas (cuerpos de Herring) en las terminales nerviosas en botones
axónicos terminales y no terminales, cuando llega el potencial de acción se produce
despolarización de la membrana del terminal e influjo de sodio con la consiguiente apertura de
canales dependientes de calcio, esta entrada de calcio es el estímulo y una vez liberado el
contenido vesicular la membrana vesicular es reutilizada, restaurándose a la vez el potencial
de membrana de la terminal, en el proceso de exocitosis normalmente se produce la
separación de la hormona de su neurofosina.

Conclusiones

Se comprobó que el efecto De la oxitocina es mayor en las ratas administradas con estradiol
que en las ratas administradas con aceite ya que el estradiol provoca la producción de
receptores de oxitocina.
Bibliografía

 Lehninger principios de bioquímica, david l. Nelson, michael m. Cox, editorial omega,

5ta edición 2009.
 Anon., 2012. Estradiol, Hormona esteroide sexual femenina. [En línea]
Available at: http://estradiolmv.blogspot.mx/2012/07/mecanismo-de-accion-el-
estradiol-e2.html
 Arce, V., Catalina, P. & Federico, M., 2006. Endocrinología. Primera ed. Santiago
de Compostela: Univ Santiago de Compostela. Págs.: 35-36
 Carrasco, A., Camacho, M., Pacheco, P., & Carrillo, P. (2008). Estudio de la actividad
contráctil uterina basal durante el ciclo estral de la rata. 2007, de Revista Médica de
la Universidad Veracruzana