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TABLA DE CONTENIDO

ANÁLISIS CUALITATIVO DE LOS PRINCIPALES ANTIOXIDANTES DEL ACEITE ESENCIAL DE MOLLE

(SCHINUS MOLLE L.) SOMETIDO A VARIACIONES DE TEMPERATURA Y PRESENCIA DE LUZ
MEDIANTE FT-IR 4

1. FUNDAMENTACIÓN DEL PROYECTO 4

1.1. PROBLEMA DE INVESTIGACIÓN 4
1.2. OBJETIVOS 4
1.2.1. Objetivo general 4
1.2.2. Objetivos específicos 4
1.3. JUSTIFICACIÓN 4
1.3.1. Justificación técnica 4
1.3.2. Justificación social 5
1.4. ANÁLISIS DE PROCESOS, SISTEMAS Y VARIABLES 6
1.4.1. Sistemas Y Procesos Evaluados 6
1.5. HIPÓTESIS 6
2. MARCO CONCEPTUAL 6
2.1. INTRODUCCIÓN 6
2.2. COMPONENTES DEL MARCO CONCEPTUAL 8
2.2.1. Marco Contextual 8
2.2.2. Marco Conceptual 9
2.2.2.1. Aceite Esencial de Molle 9
2.2.2.2. Composición química general de los aceites esenciales 10
2.2.2.3. Propiedades Físicas Del Aceite Esencial De Molle 10
2.2.2.4. Parámetros Fisicoquímicos De La Calidad Del Aceite Esencial Del Molle 11
2.2.2.5. Antioxidante 12
2.2.2.6. Acción de los Antioxidantes Al Interaccionar Con Las Rl (Radicales Libres) 12
2.2.2.7. Antioxidantes Presentes En El Aceite Esencial De Molle 12
2.2.3. MARCO TEÓRICO 14
2.2.3.1. Destilación Por Arrastre De Vapor 15
2.2.3.2. Método de FT-IR 15
2.2.4. ESTADO DEL ARTE 16
2.3. ASPECTOS PARTICULARES DEL PROBLEMA 17
 2

2.4. DISCUSIÓN DEL MARCO CONCEPTUAL 18

2.4.1. Interrelación de los componentes conceptuales 18
2.4.2. Identificación de vacíos del conocimiento 18
2.4.3. Elementos sobre la formulación de hipótesis 19
3. ESTRATEGIA EXPERIMENTAL 19
3.1. PROTOCOLOS 19
3.2. EQUIPOS E INSTRUMENTOS 21
4. BIBLIOGRAFIA 22
 3

TABLA DE FIGURAS
Ilustración 1:Representación esquemática del principio de funcionamiento de la técnica_________________16

TABLA DE TABLAS

Tabla 1:Análisis de variables en la degradación de los antioxidantes del aceite esencial de molle 6
Tabla 2:Grupos funcionales de las moléculas constituyentes de los aceites esenciales 10
Tabla 3:Propiedades físicas del aceite esencial registrada en Perú 10
Tabla 4:Parámetros Fisicoquímicos De La Calidad Del Aceite Esencial Del Molle 11
Tabla 5:Componentes porcentualmente mayoritarios del aceite esencial de Schinus molle L. en el perú. 13
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ANÁLISIS CUALITATIVO DE LOS PRINCIPALES ANTIOXIDANTES

DEL ACEITE ESENCIAL DE MOLLE (SCHINUS MOLLE L.)
SOMETIDO A VARIACIONES DE TEMPERATURA Y PRESENCIA
DE LUZ MEDIANTE FT-IR
1. FUNDAMENTACIÓN DEL PROYECTO

1.1. PROBLEMA DE INVESTIGACIÓN

Los antioxidantes se definen como las sustancias que pueden utilizarse para impedir,
retrasar o inhibir las oxidaciones catalíticas y los procesos que inducen la oxidación
natural originada por la presencia de luz, aire y metales. (Ha˛c-Wydro, 2017)

Según el estudio de Llanos (2012) menciona que los componentes mayoritarios del
aceite esencial de molle proveniente de los frutos secos son: α-felandreno (30,9%); β
-pineno (14,4%); limoneno (15,3%); β-felandreno (12,5%).

No se cuenta con estudios sobre análisis cualitativo acerca de la cinética de

degradación de los principales antioxidantes del aceite esencial de molle bajo
diferentes condiciones de temperatura e iluminación.

1.2. OBJETIVOS
1.2.1. Objetivo general
Determinar la cinética de degradación de los antioxidantes presentes en el
aceite esencial de molle sometido a cambios de temperatura e iluminación.

1.2.2. Objetivos específicos

● Determinar los antioxidantes presentes en el aceite esencial del molle

● Determinar la degradación de los antioxidantes presentes en el aceite

esencial molle bajo condiciones de temperatura e iluminación.

1.3. JUSTIFICACIÓN
1.3.1. Justificación técnica
Esta técnica (FTIR) presenta ventajas porque es sencilla, rápida, confiable y
exacta en comparación con las técnicas químicas convencionales. (Bañuelos-
Valenzuela, 2017). Debido a que podemos identificar a un compuesto por su
 5

peso molecular, número CAS, índice de refracción, densidad, punto de

ebullición y otras propiedades que nos brinda el software.

1.3.2. Justificación social

La actividad antioxidante tiene una función importante en los síndromes
neurodegenerativos porque contribuye a la disminución de los radicales libres
al actuar inhibiendo las reacciones en cadena que destruyen las células
(Migliore L, Coppedè F. 2009). Actualmente las investigaciones sobre aceites
esenciales están enfocadas en sus antioxidantes, siendo estos una tendencia
mundial en la preferencia del consumidor.

El Perú es uno de los países con mayor biodiversidad en el mundo, muchas

de sus especies vegetales pueden ser aprovechadas de forma sostenible por la
industria, una clara alternativa es el Schinus molle L., un árbol nativo con
aplicaciones medicinales, cuyo aceite esencial presenta propiedades
insecticidas, antibacterianas y antifúngicas, demostradas con un amplio
espectro (Chirino et al., 2001; Zeng Yueqin, 2006).

De esta manera se pretende usar el aceite esencial de molle como aditivo para
la producción de fármacos naturales propios de nuestra biodiversidad,
permitiendo que la población pueda acceder a alternativas naturales y de
menor costo para el control de los efectos que provocan los radicales libres.
 6

1.4. ANÁLISIS DE PROCESOS, SISTEMAS Y VARIABLES

1.4.1. Sistemas Y Procesos Evaluados
Tabla 1:Análisis de variables en la degradación de los antioxidantes del aceite esencial de molle

OBJETIVO SISTEMA PROCESO VARIABLES

EXPERIMENTAL
INDEPENDI DEPENDIEN
ENTE TES

Determinar los Aceite Espectroscopia Absorbancia Tipo de

antioxidantes esencial de infrarroja Antioxidante..
presentes en el molle
aceite esencial del
molle. Espectros de
antioxidantes

Determinar la aceite Cambio estructural de Temperatu

degradación de los esencial de los antioxidantes ra
antioxidantes molle presentes en el aceite Espectros de
Intensidad antioxidantes
presentes en el esencial de molle
Luminosa
aceite esencial
molle
Fuente: Elaboración Propia

1.5. HIPÓTESIS
Los monoterpenos: α-felandreno (30,9%); β -pineno (14,4%); limoneno (15,3%); β-
felandreno (12,5%) son los componentes más abundantes en el aceite esencial de S.
molle, según estudios los monoterpenos son susceptibles a cambios de temperatura
(50 y 60°C) y presencia de luz durante diferentes periodos de tiempo (60, 85, 110 y
230 horas) (Carmona, 2015); de esta manera el aceite será envejecido artificialmente.
A partir de este conocimiento se pretende determinar la degradación de los
antioxidantes mediante la técnica de FTIR.

2. MARCO CONCEPTUAL
2.1. INTRODUCCIÓN
Los aceites esenciales son mezclas complejas de componentes volátiles, que resultan
del metabolismo secundario de plantas; están compuestos por hidrocarburos del
grupo de los terpenos, y por compuestos oxigenados de bajo peso molecular como
 7

los son los alcoholes, aldehídos, cetonas, ésteres y ácidos, éstos son los que le dan a
los aceites esenciales el aroma que los caracteriza (Díaz, 2007).

Los antioxidantes derivados de las plantas desde el punto de vista fitoquímico pueden
ser taninos, lignanos, estilbenos, cumarinas, quinonas, xantonas, ácidos fenólicos,
flavones, flavonoles, los cuales debido a sus propiedades redox pueden actuar como
donadores de hidrógenos y de esta manera prevenir o retrasar el desarrollo de
enfermedades degenerativas.

El Perú posee una alta diversidad de especies vegetales que presentan una amplia
gama de moléculas orgánicas, estas moléculas entre las que se encuentran los
antioxidantes; compuestos fitoquímicos como los terpenos que muestran una gran
capacidad para captar radicales libres causantes del estrés oxidativo atribuyéndoseles
la prevención de enfermedades cardiovasculares, circulatorias, cancerígenas y
neurológicas

Los radicales libres son moléculas o fragmentos de moléculas caracterizadas por

tener uno o más electrones desapareados en su orbital externo, condición que los
torna altamente reactivos. (Granados Conde, Yáñez Rueda, & Santafé Patiño, 2012)

ALGORITMO CONCEPTUAL
 8

Fuente: Elaboración Propia

Fuente: Elaboración Propia

2.2. COMPONENTES DEL MARCO CONCEPTUAL

2.2.1. Marco Contextual
Los componentes mayoritarios del aceite esencial de molle varían de acuerdo
al lugar de procedencia de la planta de molle, según el estudio de Llanos
2012 en el cual caracteriza aceites esenciales de molle de distintas partes del
sur del Perú los compuestos mayoritarios del aceite esencial de molle en
promedio fueron α-felandreno; β -pineno; limoneno; β-felandreno. De los
cuales posteriormente fueron estudiados por Carmona 2015 para demostrar
cuales si son lábiles cuando son sometidos a cambios de temperatura y
presencia de luz.

Los antioxidantes sufren degradación química en presencia de la luz solar, del

aire, del calor, de ácidos y álcalis fuertes, generando oligómeros de naturaleza
indeterminada (Albarracín y Gallo, 2003). Esto es una característica
 9

importante en la industria farmacéutica por la capacidad de los antioxidantes

de contrarrestar la formación de radicales, cuya influencia se ve reflejada en
las propiedades que poseen, así como antivirales, antialérgicas,
antiinflamatorias, antimicrobianas, etc. (Díaz, 2007).

2.2.2. Marco Conceptual

El “molle”Schinus molle L. (Linnaeus, 1753) es una planta de la Familia
Anacardiaceae. muy difundida en el Perú según Yelasco - Negueruela (1995),
el análisis fitoquímico del molle revela que la planta contiene taninos,
alcaloides, flavonoides, saponinas esteroidales, esteroles, terpenos, gomas,
resinas y aceites esenciales.La composición química del aceite esencial del
molle es compleja y varía en función del órgano o parte estudiada. Zeng
Yueqin (2006) encontró que el aceite esencial de los frutos, presentaba como
componentes predominantes a los compuestos α- y β-felandreno, β-
espatuleno, D-limoneno, mirceno, silvestreno, α- y β-pineno, perillaldehído,
carvacrol, canfeno, o-etil-fenol, p-cimeno y p-cimol. (Llanos Arapa , 2012)

3. Aceite Esencial de Molle

De acuerdo con la séptima edición de la Farmacopea Europea, los aceites
esenciales (AE) se definen como: producto odorante, generalmente de una
composición compleja, obtenido a partir de una materia prima vegetal
botánicamente definida, ya sea por conducción por el vapor de agua, por
destilación en seco o mediante un método mecánico adecuado sin
calentamiento. Un aceite esencial está generalmente separado de la fase
acuosa por un método físico que no conduce a un cambio significativo en su
composición química (El Asbahani, Miladi, Bradi, Sala, & Casabianca, 2015)

Los AE son mezclas líquidas de compuestos volátiles obtenidos a partir de

plantas aromáticas como metabolitos secundarios, que pueden contener entre
20 y 60 componentes en concentraciones muy diferentes. (Londoño J.). Se
caracterizan por dos o tres componentes principales que pueden constituir
desde 20 hasta 70 % de la proporción total de los componentes, mientras que
el resto pueden estar presentes sólo en cantidades traza. (Bakkali, Averbeck,
Averbeck, & Idaomar, 2007)
 10

4. Composición química general de los aceites esenciales

Los metabolitos secundarios volátiles que componen los aceites esenciales se
pueden clasificar en base a los grupos funcionales que contienen sus
moléculas, los cuales se clasifican en el siguiente cuadro:

Tabla 2:Grupos funcionales de las moléculas constituyentes de los aceites esenciales

Fuente: Díaz (2007).

5. Propiedades Físicas Del Aceite Esencial De Molle 

Las propiedades comúnmente estudiadas son rendimiento, densidad relativa e
índice de refracción, ya que son indicadores que permiten identificar al aceite
y fomentar la aplicación de esta especie aromática, además de contribuir al
proceso de normalización, el ajuste de la producción y la valorización del
aceite. (Elechosa, Di leo Lira, Juarez, & Viturro, 2017)

En el siguiente cuadro se evaluaron las propiedades físicas más importantes

de los aceites esenciales de molle obtenidos de ejemplares de Perú.

Tabla 3:Propiedades físicas del aceite esencial registrada en Perú

País Partes de la Rendimiento Índice de refracción Densidad (g/cm3 )

planta (%) 20ºC 20ºC

Hojas 1,8 1,4951 a 1,5032 0,810-0,905

Perú
Frutos 5,15 1,4951 a 1,4980 0,810-0,905

Fuente: Viturro et al., 2010

 11

6. Parámetros Fisicoquímicos De La Calidad Del Aceite Esencial Del Molle 

Es importante conocer algunos parámetros de control de calidad físico-
químicos de aceites esenciales del fruto seco del  Schinus molle ,esto con el
fin de definir la calidad del aceite y así poder utilizarlo en diversos productos .
La principal actividad de la esencia del molle es como sustancia rubefaciente,
astringente, emoliente, fungicida, apreciado también por su aroma en la
industria cosmetológica.

Tabla 4:Parámetros Fisicoquímicos De La Calidad Del Aceite Esencial Del Molle

DETERMINACIONES PARÁMETROS DE REFERENCIA EN PERÚ

Densidad a 20°C g/cm3 0,81-0,905

Índice de refracción 1,49

Residuos por evaporación 82,84

Índice de yodo promedio 116,92

Aspecto a 20°C Líquido oleoso

Olor Cálido ,especiado

pH 4,489-5,315

Estabilidad y Almacenaje

Guardar en recipientes bien llenos y cerrados en un lugar fresco y seco, a una temperatura
que no exceda los 35°C, y al abrigo de la luz.Utilizar frascos de vidrio, con tapa rosca, no
plástica, ni corcho (llegando a producir reacción con el material).

Pasado 24 meses de almacenaje , se aconseja realizar un control de calidad antes de usar .

Fuente: (Plaza & Ricalde, 2015)

7. Antioxidante
Un antioxidante es una sustancia natural o sintética que, cuando está presente
a baja concentración comparada con la de un sustrato oxidable, previene o
retrasa significativamente la oxidación del sustrato (HUANG, D., OU, B. y
 12

PRIOR, RL.), la actividad antioxidante del extracto o del aceite esencial de

una planta está relacionada directamente con la cantidad de compuestos
fenólicos y terpenos. (Miguel et al., 2004)

Los antioxidantes de las plantas están relacionados específicamente con

oxidrilos fenólicos, que tienen efecto en los radicales libres y las moléculas
mediadoras en la regulación de procesos fisiológicos. (Dröge, 2002)

8. Acción de los Antioxidantes Al Interaccionar Con Las Rl (Radicales

Libres)
Los radicales libres son átomos o grupos de átomos que tienen un electrón
desapareado o libre. por lo que son muy reactivos ya que tienden a captar un
electrón de moléculas estables con el fin de alcanzar su estabilidad
electroquímica.(Avello y Suwalsky, 2006).

El antioxidante al colisionar con el RL le cede un e- oxidándose y a

su transformándose en un RL débil no tóxico. (RAMOS IBARRA, BATISTA
GONZÁLEZ, GÓMEZ MEDA, & ZAMORA PÉREZ, 2006)

Los antioxidantes pueden inhibir o retardar la oxidación de dos maneras:

eliminando los radicales libres, en cuyo caso el compuesto se describe como
un antioxidante primario, o mediante un mecanismo que no implica la
eliminación directa de los radicales libres, en cuyo caso el compuesto se
denomina antioxidante secundario.

Los antioxidantes secundarios operan mediante una variedad de mecanismos

que incluyen la unión de iones metálicos, la eliminación de oxígeno, la
conversión de hidroperóxidos en especies no radicales, la absorción de
radiación UV o la desactivación de oxígeno singlete.

9. Antioxidantes Presentes En El Aceite Esencial De Molle 

En la siguiente tabla, se hace un resumen de los componentes encontrados por
Viturro et al. (2010) en muestras de aceite esencial de molle en Perú.

Tabla 5:Componentes porcentualmente mayoritarios del aceite esencial de Schinus molle L. en el perú.

           
Parte de la planta Componentes mayoritarios (%)
          País
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Frutos secos α-felandreno (30,9%),

β-pineno (27,5%), limoneno (15,3%),

Perú
β-felandreno (12,5%)

Hojas Sabineno (19,1%),

Δ-cadineno (8,2%), p-cimeno (7,9%),

β-felandreno (7,2%)

Fuente: Viturro et al. (2010).

Principales Antioxidantes Terpénicos Mayoritarios en el AE de Molle

1- α y β- felandreno      

El alfa-felandreno es uno de un par de isómeros de doble enlace monoterpeno cíclicos de

felandreno en los que ambos enlaces dobles son endocíclicos .Es un monoterpeno pequeño
muy volátil y se evapora a temperaturas elevadas , es fácilmente absorbible, lo que convierte
a este terpeno en un aditivo común para una gran cantidad de productos cosmético,.también
posee propiedades antiinflamatorias .

Es el nombre para un par de compuestos orgánicos que tienen una estructura molecular
similar y propiedades químicas similares. α-y β-felandreno son monoterpenos cíclicos de
isómeros con doble enlace. En α-felandreno, ambos dobles enlaces son endocíclico y en β-
felandreno, uno de ellos es exocíclico. Ambos son insolubles en agua, pero miscibles con
éter.

Los felandrenos se utilizan en fragancias debido a sus agradables aromas. El olor de β-

felandreno ha sido descrito como picante-menta y ligeramente cítrico. (Jacobs, S.W.L.,
Pickard, J 1981).

2- Limoneno

El limoneno es un monoterpenos de sustancias aromáticas utilizado en la industria de 

alimentos , perfumes como de medicamentos o detergentes.Estudios realizados evidenciaron
que el nivel de este terpeno disminuye en el tiempo, y adicionalmente la evaporación y
volatilización aumenta visiblemente con la temperatura.(Hac-Wydro, Flasinski, &
Romanczuk, 2017)
 14

3- α-Pineno

El α-pineno es una de las especies principales de monoterpenos , se emiten en cantidades

sustanciales por la vegetación, y estas emisiones se ven afectados por la temperatura y la
intensidad de la luz. https://es.wikipedia.org/wiki/Alfa-pineno

Es el ingrediente principal de la trementina, puede jugar un papel importante en la actividad

de las bacterias degradantes de hidrocarburos en la naturaleza (Trudgill, 1994; Hylemon y
Harder, 1998).

9.1.1. MARCO TEÓRICO

Auto oxidación Del Limoneno

Se considera el proceso de envejecimiento de aceites esenciales como un fenómeno de

polimerización y autooxidación que podría atenuarse mediante algunas sustancias dadoras
de hidrógenos en forma de radicales. Algunos productos de oxidación del aceite son el
carveol, carvona, óxido de limoneno-1,2.

Algunos trabajos como el de Bernhard (1960) y Schenck (1990) tratan del estudio sobre la
autooxidación del limoneno, operando a una temperatura de 50°C en la oscuridad y a la luz,
en ausencia de sensibilizadores. Los autores pudieron identificar nueve de los productos
formados; sin embargo, los mencionados trabajos omiten el mecanismo de formación de los
óxidos de limoneno.

Los terpenos reaccionan con la luz disminuyendo sus hidroxilos, generando ácidos y otros
compuestos no atribuibles a la banda original de las especies iniciales, lo que indica que
estos componentes son lábiles (Carmona, 2015). 

Según el estudio de Carmona 2015 el limoneno sigue un mecanismo de oxidaciôn por el

cual los óxidos de este compuesto se forman por adiciôn de un átomo de oxígeno procedente
de un radical peróxido.

10. Destilación Por Arrastre De Vapor

Es el método más usado a nivel industrial, permite obtener aceite esencial con
buenos rendimientos; para los frutos secos de molle el rendimiento es
alrededor del 6% (Llanos, 2012). La materia prima vegetal es cargada de
manera que forme un lecho fijo compactado; su estado puede ser molido,
 15

cortado, entero o la combinación de éstos. La generación del vapor puede ser

local (hervidor), remota (caldera) o interna (base del recipiente). Conforme el
vapor entra en contacto con el lecho, la materia prima se calienta y va
liberando el aceite esencial, el cual debido a su alta volatilidad se evapora y al
ser soluble en el vapor circundante es “arrastrado” corriente arriba hacia el
tope del destilador  La mezcla, vapor saturado y aceite esencial, fluye hacia un
condensador mediante una prolongación curvada del conducto de salida del
destilador. En el condensador, la mezcla es enfriada hasta la temperatura
ambiental, a su salida, se obtiene una emulsión líquida inestable la cual es
separada en un decantador dinámico o florentino, éste equipo está lleno de
agua fría al inicio de la operación y el aceite esencial se va acumulando
debido a su casi inmiscibilidad en el agua y a la diferencia de densidad con la
misma (Cerpa, 2007). 

11. Método de FT-IR

Espectroscopia de Transmisión de Infrarrojo con Transformada de Fourier
(FTIR), cuando la radiación IR pasa a través de una muestra, la muestra
absorbe parte de la radiación y otra parte la transmite (se transmite). La señal
resultante en el detector es un espectro que representa una 'huella digital'
molecular de la muestra. La utilidad de la espectroscopía infrarroja surge
porque diferentes estructuras químicas (moléculas) producen diferentes
huellas espectrales (ThermoFisher CIENTIFIC, 2013.), pudiendo así
determinar grupos funcionaales de compuestos orgánicos

Además a través de esta técnica se puede interpretar el espectro y compararlo

con bases de datos especializadas para determinar la presencia de grupos
funcionales definidos en la estructura molecular .
 16

Ilustración 1:Representación esquemática del principio de funcionamiento de la técnica

Fuentes: (González Castillo, 2015)

11.1.1. ESTADO DEL ARTE

Schinus molle L. ha sido utilizado en la medicina como una sustancia
antibacteriana, antiviral, antiséptico, antifúngico, analgésico, antiinflamatorio
y antioxidante.

En el siguiente trabajo de investigación: Antioxidante, antimicrobial and

toxicológica properties of Schinus molle L. essential oils (Maria do Rosário
Martins, Silvia Arantes, Fátima Candeias, Maria Teresa Tinoco, Júlio Cruz-
Morais), se detallan los materiales y métodos para determinar la actividad
antioxidante, antimicrobiana y toxicidad del aceite esencial del molle,
determinando los compuestos encontrados en las hojas y los frutos   

El interés por los aceites esenciales, actualmente está centrado en la actividad

antioxidante, sin embargo, estos presentan las siguientes desventajas (i.e. alta
volatilidad y sensibilidad a la luz) por lo que su actividad biológica es
disminuida. Una solución es la técnica de nanoencapsulación que consiste en
aumentar la estabilidad física y química de los aceites esenciales, este trabajo
se desarrolla en: Aceites esenciales libres y encapsulados como potenciales
antioxidantes en piel (Perla Giovanna Silva-Flores, Sergio Arturo Galindo-
Rodríguez, Luis Alejandro Pérez-López, Rocío Álvarez-Román)

Extracción y caracterización del aceite esencial de molle (schinus molle l.),

bach. shepanie karen llanos arapa, Tacna 2012 El estudio estuvo orientado a la
 17

extracción de aceite esencial del fruto del Schinus molle L. de la Región

Tacna, así como a la caracterización físico-química e identificación de los
componentes principales de dicho aceite; probándose también su actividad
antimicótica ante Penicillium italicum. También hace referencia al
acondicionamiento que tienen las bayas antes de la extracción son trituradas
gruesamente también hace referencia que el lugar de recolección de origen no
tiene influencia significativamente en el rendimiento del aceite esencial.

11.2. ASPECTOS PARTICULARES DEL PROBLEMA 

Nuestro problema de investigación vendría ser un problema descriptivo, ya que en la
investigación se detallarán los principales antioxidantes terpénicos mayoritarios
presentes en el aceite esencial del molle, además se definirá la estructura de cada
antioxidante, precisando sus propiedades.

También vendría ser de tipo explicativo ya que se identificará la degradación de

algunos antioxidantes bajo condiciones de temperatura e iluminación. 

Para determinar los antioxidantes presentes en el aceite esencial del molle , el

proceso vendría  hacer la espectroscopia infrarroja ,siendo los sistemas y variables
los siguientes : 

Variables independientes                                                Variables dependientes

Absorbancia                                                                                 Tipo de

Antioxidante.

                                                                                              Espectros de antioxidantes.

Para determinar la degradación de los antioxidantes presentes en el aceite esencial de

molle, el proceso vendría hacer el cambio estructural de los antioxidantes presentes
en el aceite esencial de molle, siendo los sistemas y variables los siguientes: 
 18

independientes                                              Variable Dependiente

Temperatura                                                                       Espectros de antioxidantes

 Intensidad Luminosa                                                     

11.3. DISCUSIÓN DEL MARCO CONCEPTUAL 

11.3.1. Interrelación de los componentes conceptuales
Primero tenemos que conocer qué compuestos son los más representativos del
molle y cuales son los mayoritarios en el aceite esencial del fruto seco de
molle, en este caso elegimos el fruto porque tiene mas rendimiento en su
extracción en comparación a los tallos y hojas del mismo según el estudio
realizado por Llanos (2012). Al conocer los componentes mayoritarios
podemos a partir de ellos saber cuáles podrían ser susceptibles a cambios de
temperatura y presencia de iluminación, en este caso la bibliografía nos dice
que los hidrocarburos terpénicos presentes en el aceite esencial de molle como
los monoterpenos: α-felandreno; β -pineno; limoneno; β-felandreno sufren
reacciones de polimerización y auto oxidación cuando son sometidos a dichas
condiciones como nos explica Carmona (2015) en su investigación en la cual
también usa la técnica de FTIR para determinar estos cambios y comparar las
muestras durante el tiempo que son expuestas a dichas condiciones.

11.3.2. Identificación de vacíos del conocimiento

Los aceites esenciales son sustancias complejas que requieren para su
obtención unos cuidados muy particulares.

La calidad de los distintos aceites esenciales dependerá de las condiciones de

almacenamiento, ya que algunos antioxidantes que lo componen son volátiles
y tienden a degradarse con el tiempo o bajo distintas factores como
temperatura o luz, esto provoca que se deterioren y que pierdan sus
 19

cualidades aromáticas y, por tanto, su valor terapéutico si algunos principios

básicos de almacenamiento no son respetados.

11.3.3. Elementos sobre la formulación de hipótesis

Algunos hidrocarburos terpénicos como α-felandreno; β -pineno; limoneno;
β-felandreno son los componentes más abundantes en el aceite esencial de S.
molle (sistema) sufrirán cambios químicos (proceso) cuando sean sometidos
a temperatura e iluminación en distintos intervalos de tiempo (variables
independientes y controlables) cambiando su estructura química y dando un
espectro distinto al sufrir reacciones de autooxidación y polimerización.

12. ESTRATEGIA EXPERIMENTAL

12.1. PROTOCOLOS   
Extracción Del Aceite Esencial
1- Colección de la muestra vegetal. Se colectaron 20 Kg de hojas de Schinus molle L.
en el departamento de Arequipa, a 3500 msnm.
2- Secado. Después de la cosecha de semillas (frutos maduros) se hará un lavado y
secado a temperatura ambiente sin estar expuestas a rayos solares; luego se
seleccionará las semillas maduras y aptas.
3- Molienda. El fruto pasará por un proceso de molienda moderada con propósito de
facilitar el paso del vapor y mayor área de contacto; liberando el aceite en su interior,
siendo favorable para la extracción.
4- Destilado. Para la destilación del aceite esencial de molle se pesará la muestra y se
cargará el material, finamente triturado y dividido por pisos en bandejas de metal las
cuales serán cerradas herméticamente (en caso las tuvieran); en la base del destilador
se adiciona agua; esta fue calentada hasta que el contenido empiece a bullir.
5- Condensado. El vapor resultante es guiado al condensador donde es enfriado y
convertido en forma líquida; En esta etapa la micela (vapor de agua – aceite) se
condensa utilizando tubos de vidrio por medio del cual circula agua de enfriamiento.
6- Separación. La separación de la mezcla condensada se lleva a cabo en un vaso
florentino que contiene un capilar sobresaliente por donde se extrae el agua,
quedando sobre la superficie el aceite. Este forma una capa separadora que
usualmente flota en la superficie del agua, para proceder a la medición de la cantidad
obtenida.
 20

FT-IR

1. Ingrese una ID de muestra única y una Descripción en la barra de herramientas de

Configuración del instrumento.
2. Recoja un escaneo de fondo despejando la trayectoria del haz del instrumento y luego
haciendo clic en Fondo. El espectro de fondo será visible temporalmente a medida
que se promedien cuatro escaneos.
3. Coloque su muestra en la placa ATR universal, gire el brazo y gire la perilla en el
sentido de las agujas del reloj para bajar la punta y establecer un buen contacto con la
muestra. Haz clic en Escanear. Se mostrará una vista previa de su escaneo en la
pestaña en vivo en el área de visualización. Este espectro en vivo se actualiza
automáticamente, pero no se recopilarán datos. Ajuste la perilla de presión del ATR
mientras observa el indicador de fuerza, que debería mostrar 50-93. Cuando esté
satisfecho con el espectro, haga clic en Escanear nuevamente para recopilar un
espectro final. Cuatro espectros serán adquiridos y promediados.
4. Compare su espectro con una biblioteca espectral haciendo clic en el icono Buscar en
el Área de visualización. Se mostrará la lista de resultados de búsqueda, junto con un
puntaje de búsqueda. El espectro de la biblioteca de referencia del Best Hit de su
búsqueda también se superpondrá en su espectro de muestra.
5. Cuando se usan muestras en polvo o líquidas, la punta del ATR debe limpiarse con
isopropanol entre las muestras.
6. Cuando esté listo para adquirir el siguiente espectro de muestra, afloje la perilla de
presión y gire el brazo hacia la posición de almacenamiento. Coloque su nueva
muestra en el accesorio ATR e ingrese una nueva ID de muestra y descripción. Repita
el paso 3 de estas instrucciones.
7. Para eliminar el espectro anterior del área de visualización, simplemente haga clic en
el espectro que ya no desea ver en el panel Explorador de datos a la izquierda y
presione Eliminar. El espectro ya no será visible, sino que se almacenará en la
computadora.

Procesamiento espectral opcional:

A. Para etiquetar picos, haga clic en el icono Etiquetas.

B. Para mostrar un cursor vertical en el espectro, haga clic en el icono del cursor.

C. Para agregar texto a un espectro, haga clic en el icono Texto y escriba su texto.
 21

D. Tenga en cuenta que todos los espectros se guardan automáticamente en C: \ pel_data \

spectra y se pueden recuperar en la computadora en cualquier momento.

12.2. EQUIPOS E INSTRUMENTOS

EQUIPOS

● FT-IR Spectrum Two ; PerkinElmer

● Destilador por arrastre de vapor.
● Espectrofotómetro-Rango de Ultravioleta

INSTRUMENTOS

● Pera de Decantación
● Probeta de 100 ml
● Vasos precipitados
● Frascos de vidrio color ambar y transparentes de 5 ml
● Pipeta de 1 ml 

MATERIALES

● Fruto seco del molle 2 kilos 

● Agua destilada   

PLANIFICACIÓN DE EXPERIMENTOS 

1. Extracción del aceite esencial de molle por arrastre de vapor.

2. Análisis del aceite esencial de molle mediante de la técnica de FTIR para identificar
la estructura inicial.
3. Dividir la muestra en diferentes frascos.
4. Llevar las muestras a diferentes temperaturas (40, 50 y 60°C) durante diferentes
periodos de tiempo (60, 85, 110 y 230 horas) y presencia de luz.
 22

13. BIBLIOGRAFIA
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ANEXO 1