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DO S
E RVA
R E S
HO S
E REC
D
CALIDAD MICROBIOLÓGICA Y FÍSICO QUÍMICA DE
QUESOS ELABORADOS ARTESANALMENTE EN EL
MUNICIPIO PÁEZ DEL ESTADO ZULIA.
Presentado por:
DO S
VA
A mi novio por estar siempre a mi lado, ayudarme y
apoyarme en todo.
S E R
S R E
EC HO
A mi padrino que se tuvo que ir antes de tiempo y no pudo
E R
disfrutar esta ocasión tan importante.
D
AGRADECIMIENTO
DO S
E RVA
R E S
HO S
E REC
D
Pinto Márquez, Hilde Aurels. CALIDAD MICROBIOLÓGICA Y
FÍSICO QUÍMICA DE QUESOS ELABORADOS
ARTESANALMENTE EN EL MUNICIPIO PÁEZ DEL ESTADO
ZULIA. Universidad Rafael Urdaneta. Facultad de Ciencias
Agropecuarias. Escuela de Ingeniería de Producción Animal.
Maracaibo. 2006.
RESUMEN
DO S
Con el objetivo de caracterizar desde el punto de vista de la calidad
VA
microbiológica y físico química los quesos elaborados
S E R
artesanalmente en el Municipio Páez del Estado Zulia se realizó un
S R E
ensayo en los laboratorios de Microbiología de la Facultad de
EC HO
Ciencias Veterinarias de la Universidad del Zulia, para lo cual se
E R
tomaron 3 muestras semanales, durante 12 semanas, en tres
D
queseras artesanales ubicadas en el Municipio Paéz del Estado
Zulia. Se utilizó la metodología definida en las Normas Venezolanas
COVENIN 1813-81 para queso y sus requisitos. Norma 1126-89,
que contempla el procedimiento para análisis microbiológico. Norma
1104-84, referida al método de ensayo para la determinación del
Número Más Probable (NMP) de bacterias coliformes, de coliformes
fecales y de Escherichia coli en alimentos, mediante la utilización de
medios líquidos y la Norma 1292-89 que contempla el método de
ensayo para la determinación cuantitativa de Staphylococcus
aureus. Los resultados indicaron que la calidad microbiológica de
las muestras de las tres queseras artesanales del Municipio Páez es
baja, arrojando valores positivos de CT, considerados permisibles
según las normas para la leche pasteurizada. Los valores positivos
a CF, fueron excedidos sobre los límites permisibles. Las muestras
provenientes de las tres queseras presentaron valores de E. coli
que exceden los límites permisibles establecidos en las normas. Los
valores de ufc/gr de S. aureus, resultaron elevados por lo que se
considera que el número de ufc/gr de S. aureus exceden lo
permitido por las normas. Respecto a la calidad físico-química de
las muestras de queso, los valores de humedad, grasas (% base
húmeda y % GBS) y HSMG, cenizas, cenizas, grasa, acidez y
proteínas detectados en las muestras estuvieron dentro de los
límites establecidos en la Norma COVENIN 1813 para quesos. Los
valores de ClNa encontrados en las muestras fueron altos en
comparación con lo establecido en la Norma 1538.
v
ÍNDICE GENERAL
Pág.
Dedicatoria ............................................................... iii
Agradecimiento ......................................................... v
Resumen .................................................................. vi
INTRODUCCIÓN 1
O S
Objetivos de la investigación .....................................
D
5
E RVA
R E S
REVISIÓN DE LITERATURA
HO S
E REC
Calidad del queso……………………………………………………………. 7
D
Salud e Higiene del personal………………………………………….. 11
Rendimiento quesero………………………………………………………. 13
Deterioro microbiano………………………………………………………. 13
Fuentes de contaminación………………………………………………. 15
Factores que influyen en el desarrollo microbiano en
Alimentos………………………………………………………………………….. 21
Normas que regulan la elaboración de queso en
Venezuela…………………………………………………………………………. 26
Reglamento General de Alimentos………………………………….. 26
Norma COVENIN 1813-81……………………………………………….. 27
Calidad microbiológica del queso…………………………………….. 29
Calidad físico-química del queso…………………………………….. 35
MATERIALES Y MÉTODOS
Localización del ensayo ............................................. 41
Metodología empleada. ............................................. 41
Variables evaluadas……………………………………………………….. 42
Procedimientos para el análisis……………………………………… 42
Determinación del NMP de coliformes (1104-84)………… 43
Determinación del NMP de coliformes fecales
(1104-84)……………………………………………………………………….. 44
Determinación del NMP de Escherichia coli (1104-84)…. 45
Determinación de Staphylococcus aureus (1292-89)…… 48
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
D O S
RVA
1. Identificación de los tipos bacterianos presentes en
E
R E S
H S físico-química de las
las muestras de queso…………………………………………………….
Ocalidad
54
R E
2. DeterminaciónC de la
D E
muestras de queso………………………………………………………….. 60
Conclusiones y Recomendaciones………………………………………. 64
vii
ÍNDICE DE TABLAS
Tabla Pág.
E RVA
R E S
HO S
E REC
D
viii
ÍNDICE DE GRÁFICAS
Gráfica Pág.
R E S
4
S
Promedios físico-químicos
HO
de las muestras de
E C
queso…………………………………………………………………… 62
DER
ix
INTRODUCCIÓN
INTRODUCCIÓN
exigentes, toda empresa por grande o pequeña que sea debe estar
DO S
en subsistencia.
E RVA
R ES
En el sector C
S
HO el productor debe conocer cuales son
E R E ganadero,
D
sus alternativas para colocar su producto a un mejor precio, en este
alrededor del precio justo que deben pagar los productores, lo que
vulnerables de la población.
O S
distintas especies como materia prima. La leche y la nata son
D
R V A
E S
medios óptimos para el crecimientoEde microorganismos. Entre
R
OS gérmenes patógenos que pueden
E C H
DER
éstos pueden encontrarse
de transmisión alimentaria.
O S
queso producido en este estado se caracteriza por ser fresco, graso
D
A
RVleche
E E
y semiduro y para su elaboraciónSse usa de vaca, cruda,
R
S metodología sencilla. Actualmente se
Ouna
E C H
DER
entera y fresca, mediante
(Oyón, 1981).
de contaminación.
E
estandarizados, a los que se añadeSuna
VA calidad sanitaria y
Rpobre
S R E
E C HOlos convierten en fuentes probables de
DER
ausencia de controles,
Staphylococcus aureus.
alimentos.
Estado Zulia.
OBJETIVOS DE LA INVESTIGACIÓN
OBJETIVO GENERAL
D O S
R A
Vvista
E
Caracterizar desde el punto S E de de la calidad
R
OS química los quesos elaborados
yCH
ERE
microbiológica físico
D
artesanalmente en el Municipio Páez del Estado Zulia.
OBJETIVOS ESPECÍFICOS
quesos.
REVISIÓN DE LITERATURA
D O S
cuanto al mejoramiento de la calidad. Aunque la calidad es siempre
E R VA hay un atributo
multidimensional, en la industria alimentaria
R E S
C H OS
particular de calidad que es indispensable: la inocuidad. Todo es
E R E
D
importante, la presentación, los atributos sensoriales, el valor
7
REVISIÓN DE LITERATURA 8
D O S
De hecho, aún en sociedades industriales avanzadas, la mayoría de
E R VA básicos y una
los consumidores no tiene suficientes conocimientos
R E S
alta proporción manejaO
H Salimentos sin las prácticas adecuadas
los
E C
DER las incidencias de enfermedades transmitidas por
para minimizar
1999).
REVISIÓN DE LITERATURA 9
D O S
y de su mejoramiento, incluyendo los aspectos relacionados con la
E R VesAgrande y, a manera
inocuidad, el sistema de causas de variación
R E S
de ilustración, aquí se O
H S solamente algunas de las causas
señalan
E C
DER
más importantes:
D O S
VA
4. La filosofía gerencial de la empresa. Toda empresa tiene políticas
E R
S a quién contratar, cómo
R E
sobre cómo comprar, cómo vender,
S
C H O
E recompensar, cómo reducir costos, etc. Por
DER
capacitar, cómo
- Riesgos
dichos alimentos.
- Medidas preventivas
D O S
E R VApuede ser evitada o,
La contaminación microbiana del queso
R E S
H OSmínimos tomando medidas preventivas
al menos, reducida a unos
C
E
DER
tales cuando se manipulan alimentos.
médicos periódicos.
REVISIÓN DE LITERATURA 13
RENDIMIENTO QUESERO
los kilos de queso obtenido con los kilos o litros de leche empleada.
DO S
VA
Varios factores afectan el rendimiento a saber:
S E R
S R E
HO
• La composición de la leche: una leche rica en sólidos totales
EC
ofrecerá D E R
un mayor rendimiento al igual que un mayor contenido de
caseínas.
rendimiento.
DETERIORO MICROBIANO
D O S
VA
Entre los principales cambios que puede presentar un
E C H
DER
encuentran:
_ Cambio de color.
_ Disminución de la viscosidad.
REVISIÓN DE LITERATURA 15
FUENTES DE CONTAMINACIÓN
D O S
VA
proceso; una vez que estos productos salen a la calle, el
consumidor y el ambiente en E el S E R
O S R que son utilizados, son otras
E C H
DER
fuentes de contaminación que deben ser tomadas en cuenta en el
Pedrique, 2003).
a) Materia prima
producto.
- Origen
VA DOS
E R
proveniente de fuentes animales puede estar contaminada con
S R ES
CH O
microorganismos patógenos presentes en los animales de los cuales
E
DER
ha sido extraída. La de origen vegetal puede contener una gran
Pedrique, 2003).
pocos microorganismos.
adecuado tratamiento.
D O S
- Susceptibilidad al crecimientoR
E VA
microbiano
R E S
H S
Ocategorías
R E C
D E
Existen diferentes de materias primas tomando en
microorganismos.
microorganismos.
REVISIÓN DE LITERATURA 18
- Almacenamiento
D O S
VA
Para el correcto almacenamiento de la materia prima debe
S E R
R E
tenerse en cuenta el diseño y mantenimiento
S
de los almacenes, así
C H O
E de almacenamiento y las características del
DER
como las condiciones
b) Ambiente
et.al., 1999)
DO S
c) Equipos
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R E S
HO S
Cada uno de los equipos empleados en la elaboración y
R E C
E
Dde un producto tiene áreas particulares donde se pueden
empaque
d) Envase y empaque
DO S
factor que incrementa el número de contaminantes. (Gutiérrez y
Pedrique, 2003).
E RVA
R E S
HO S
E REC
D
e) Personal
DO S
VA
FACTORES QUE INFLUYEN EN EL DESARROLLO MICROBIANO
EN ALIMENTOS
S E R
S R E
HO
Son muchos los factores que influyen en el establecimiento de
EC
una D E R
contaminación en un producto. (Alais, 1991). Entre estos
factores se citan:
- La temperatura de almacenamiento
- El proceso de fabricación
DO S
VA
de una formulación están:
S E R
S R E
HO
- La disponibilidad de agua (Aw)
EC
D E R
- El contenido de nutrientes
- El pH
- La presión osmótica
a) Disponibilidad de agua
DO S
VA
microorganismos.
S E R
S R E
E C HO
La presencia de elevadas concentraciones de sales, azúcares
u otros D E R
sustratos, al igual que la desecación, pueden producir una
b) Contenido de nutrientes
crecimiento.
c) pH
D O S
VA
establecimiento de una determinada contaminación microbiana, ya
E R
S del medio afecta el grado de
R E
que el grado de acidez o alcalinidad
S
C H O
E materiales utilizados como nutrientes y por lo
DER
ionización de los
D O S
influencia en este factor. De esta forma, cualquier formulación que
2003).
e) Presión osmótica
Pedrique, 2003).
E R
SALIMENTOS
R E
REGLAMENTO GENERAL DE
C H OS
E
DER
De acuerdo con el Reglamento General de Alimentos vigente
el producto
DO S
VA
que su contenido en grasa no sea inferior al 40% sobre materia
E C H
DER
NORMA COVENIN 1813-81
definido en (a).
REQUISITOS GENERALES.
3. Aditivos.
D O S
VA
1538-85, establece para el queso amarillo venezolano, no así para
S E R
R E
el queso blanco fresco, lo siguiente:
C H OS
E
DER LIMITE
UNIDAD Min Max
GRASA % (m/m) 45 -
(Expresado en base seca)
HUMEDAD
% (m/m) - 63
Sin materia grasa
EXTRACTO SECO % (m/m) 55 -
CLORURO DE SODIO % (m/m) - 3
Coli fue aislada del 58% (11/19) de las muestras, pero la E.coli
ambientes de procesamiento.
D O S
E R VA
R
Consentino y Palmas (1997)E S recolectaron en fábricas de
H O S
queso de leche E C
DER
de oveja, muestras de leche de oveja, leche tratada
D O S
VA
fueron evaluadas para la capacidad de soportar el crecimiento de
S E R
R E
Listeria monocytogenes, S.aureus,
S
serotipos de Salmonella y E.coli
C H O
E cuatro días de almacenamiento a 30°C, por Glass
DER
0157:H7, durante
restantes 60 horas.
DO S
poblaciones de L.monocytogenes, E.coli 0157:H7 y los serotipos de
y mecanismos de prevención.
REVISIÓN DE LITERATURA 33
DO S
que son expendidos al consumidor. Se determinó la presencia de
R A semiduros, no
Vblancos
E S E
esta bacteria a nivel de detallista en quesos
pasteurizados por la O S R
E C H metodología establecida por la Comisión
DER
Venezolana de Normas Industriales (COVENIN) 1291 (1988);
D O S
VA
efectuar su identificación, obteniéndose el grado de contaminación
S E R
R E
fecal por medio del contaje y del
S
NMP. El contaje obtenido indicó
C H O
mayor grado deEcontaminación para el queso semi-duro y para el
DER
duro, y en menor escala para el pasteurizado, comprobándose así
del consumidor.
de S. aureus.
D O S
VA
revelaron una correlación positiva entre la humedad (r = 0,2022; p
E R
S p = 0,0023) y la carga
= 0,025), contenido de sal (r =E0,4919;
O S R
E C H
DER
bacteriana respectivamente, mientras que la acidez total y el pH no
consumidores.
D O S
VA
En 21 muestras de queso evaluadas por Digrak et.al. (1996)
C H
pentadecanoico,Epalmítico, oléico, linoléico, linolénico, araquídico,
DER
araquidónico, y eicosapentaenoico. Se concluyó que los quesos
DO S
VA
características físico- químicas de los quesos blancos expendidos en
E R
S Durante 12 semanas, se
R E
el Municipio Valera, Estado Trujillo,
S
C H O
E
DER
tomaron 5 muestras semanales en diferentes expendios,
Gerber (%) X:17 Rango (8-24); Cloruros (%) X: 3.25 Rango (0,96-
Rango (20.54-42.26).
sólidos totales.
REVISIÓN DE LITERATURA 39
DO S
E RVA
R E S
HO S
E REC
D
MATERIALES Y MÉTODOS
MATERIALES Y MÉTODOS
D O S
VA
Se tomaron 3 muestras semanales, durante 12 semanas, en
E R
Sen el Municipio Paéz del Estado
R E
tres queseras artesanales ubicadas
C H OS
E
DER
Zulia.
METODOLOGÍA EMPLEADA
41
MATERIALES Y MÉTODOS 42
VARIABLES EVALUADAS
siguientes:
DO S
• Calidad bacteriológica: número y tipos de bacterias coliformes
E RVA
R E S
HO S
• Calidad físico-química: porcentaje de humedad, cloruros, grasas,
RE C
E
D acidez y cenizas.
proteínas,
por 24 a 48 horas.
24 a 48 horas.
MATERIALES Y MÉTODOS 44
de Coliformes.
correspondiente.
D O S
E RVA
DETERMINACIÓN DEL
R E
NMP S
DE COLIFORMES FECALES
O S
CH
(1104-84)
R E
DEla realización
Para de este ensayo, se utilizó el siguiente
método:
horas.
respectivamente:
capa alcohólica.
D O S
VA
S. Se consideran positivos los cultivos que den gas e indol. Estos
E R
Sllevan a la tabla
S R E
resultados (tubos positivos) se del NMP
C H O
E
DER
correspondiente.
D O S
E R
6. Se incuban a 35±1°C durante el tiempo VqueAcorresponda a cada
R E S
prueba.
C H OS
E
DER
7. La lectura se efectúa de la siguiente manera:
negativa.
D O S
VA
Simmons, después de 24 h a 5 días de incubación, indica la
E R
S de la prueba.
R E
utilización del citrato y la positividad
C H OS
E
8. DER col¡ típico debe dar los siguientes resultados
Escheríchia
(Prueba IMVIC)
INDOL RM VP CITRATO
+ + - -
Gram negativos)
siguiente observación:
DO S
E RVA
R E S
HO S
DETERMINACIÓN DE STAPHYLOCOCCUS AUREUS (1292-89)
E REC
D
La preparación de la muestra se realiza según la Norma
COVENIN 1126-89.
previamente secadas.
DO S
VA
por una zona de aclaración que se extiende en el medio opaco.
S E R
S R E
E C HO
5. Se marca la posición de estas colonias y se reincuban las placas
duranteD E R
18 horas más.
la prueba de la coagulasa.
Prueba de la coagulasa:
Prueba de la termonucleasa:
DO S
VA
cerebro corazón previamente calentado en Baño María a 100°C por
S E R
15 minutos.
S R E
E C HO
3. E R
D las láminas en una cámara húmeda durante 4 horas
Se incuban
de Staphylococcus aureus.
DO S
VA
recuento y aislamiento de S. aureus, los resultados se expresan
S E R
R E
como menos de 100 gérmenes/g.
S
EC HO
D E R
RESULTADOS
RESULTADOS
DO S
calidad microbiológica.
E RVA
R E S
1. IdentificaciónC HO S
R E de los tipos bacterianos presentes en las
DEde quesos.
muestras
54
RESULTADOS 55
28000
27000
26000
DO S
C/10gr 25000
E RVA
R E S
HO S
EC
24000
D E R
23000
22000
CT CF
Quesera 1 Quesera 2 Quesera 3
D O S
VA
encuentra prácticamente excediendo los límites permisibles para la
deS
norma que establece un máximo E E R
OS R 30.000 C/10 gr.
C H
AlD EREla presencia de E. coli se detectó un
evaluar elevado
D O S
VA
y diferentes tipos, encontraron quesos con una alta calidad
S E R
S R E
microbiológica del material crudo y en algunos casos muy bajos
C H O
E
DER
recuentos microbiológicos.
35
30
25
20
Porcentaje
15
10
0
Porcentaje
muestras
positivas a
E.coli
D O S
leche cruda que establece un límite de hasta 500.000 ufc/ml para la
R la A
V
E S E
categoría A, y hasta 1.500.000 ufc/ml para categoría B.
S R
E C HO
DER
Las muestras provenientes de las queseras 2 y 3, presentaron
S. aureus.
cuales hay que considerar el calor, la calidad potable del agua, los
D O S
esta puede servir como nutrientes para los microorganismos,
E R VAen el establecimiento
asimismo, el pH es un factor muy importante
R E S
H OS
de una determinada contaminación
C
microbiana, dado que permite
RE que los microorganismos asimilen los nutrientes
DEfacilidad
con mayor
presentes.
3000000
2500000
2000000
1500000
1000000
DO S
E RVA
500000
R E S
HO S
0
E REC
D ufc/gr S.aureus
Pruebas físico-químicas 1 2 3
Humedad 51.23 49.56 53.16
D O S
HSMG 6%*
E RVA
65.23
64.96 69.75
R E S
Cloruros (% como ClNa)
HO S 3.26 3.41 3.56
E REC
D
Acidez iónica (pH) 6.48 6.32 6.75
DO S
E RVA
R E S
HO S
E R EC
D
70
60
50
40
Porcentaje
30
20
10
0
Cenizas GBS HSMG ClNa Acidez Proteínas
titulable
DO S
mismos reportaron mucha variabilidad en las muestras analizadas
CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES
pasteurizada.
DO S
VA
dentro de los requisitos mínimos exigidos establecidos en las
S E R
normas COVENIN.
S R E
E C HO
E R
D de ClNa encontrados en las muestras fueron altos en
- Los valores
amarillo.
causas.
por lo que podría considerarse fuera del marco legal. Está muy
D O S
VA
- En función de estas conclusiones, se recomienda que dada la
deS
deficiente calidad microbiológica E E R
O S R los quesos examinados lo cual
C H
E para la salud pública, se deben establecer
DER
constituye un riesgo
DO S
RVA
Ansay S.E., C.W. Kaspar (1997). Informe de quesos de venta,
E
E S
ambientes de procesamiento de lácteos y leche cruda por
R
HO S
Escherichia coli 0157:H7. Instituto de Investigación de Comida,
E REC
Departamento de Microbiología de Comida y Toxicología.
D
Universidad de Wisconsin, Madison, WI, EEUU. Cartas en
Microbiología Aplicada 25:2 131-134, 26 ref.
DO S
E RVA
R E S
HO S
E REC
D