EQUIPO 4 Química Analítica III PROBLEMARIO DE

CROMATOGRAFIA

Problema 1

Se coloca una mezcla de los compuestos 1 al 6 formando una mancha a 2.0cm

a la derecha y 2.0 cm por encima del borde inferior izquierdo de una placa
para cromatogafía de capa fina. Se permite que el Cromatograma se
desarrolle en el disolvente A, hasta que el frente del disolvente llega a una
distancia de 12.0cm del borde inferior de la placa. Después de esta operación
se observan 2 manchas, una a 4.5 cm y la otra a 10cm del borde inferior del
placa. Tras dejar secar la placa se gira 90° en sentido contrario a las manecillas
del reloj y se corre el Cromatograma en el disolvente B hasta que el frente del
disolvente se encuentre a 12cm del borde sumergido de la placa. La primer
mancha de izquierda a derecha se separa en 4 manchas: a 2.7,5.1,6.5 y 9.9
cm del borde inferior; la segunda manca se separó en dos, a los 4.7 y 10.6 m
del borde inferior, Dibuje la apariencia de la placa (a escala aproximada)
después de la primera etapa y después de la segunda etapa de la separación, y
calcule los valores de Rf de cada mach en cada etapa.

En el disolvente “A”

Primera banda:
4.5
Rf = =0.375 Segunda
12

10
banda:
Rf = =0.83
12

A B
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CROMATOGRAFIA

Primer macha sus cuatro manchas:

1)Rf=2.7/12=.225

2)Rf=5.1/12=.425

3)Rf=6.5/12=.541

4)Rf=9.9/12=.825

Segunda mancha con dos manchas:

1)Rf=4.7/12=.391

2)Rf=10,6/12=.883

Problema 2.

Una mezcla de dos compuestos (A y B) migra desde el origen, generando dos

manchas con las siguientes características (distancia de migración desde el
origen x y diámetro de la mancha w).

xA = 49 mm wA = 2.0 mm

xB = 33 mm wB = 2.5 mm

El frente de la fase móvil fue de 61 mm, desde el inicio. Calcule los valores de
Rf para los compuestos A y B.

49 mm 33 mm
Rf = =0.8032 Rf = =0.5409
61 mm 61mm

Problema 3.

Una mezcla de dos compuestos (A y B) migra desde el origen, generando dos

manchas con las siguientes características (distancia de migración x y diámetro
de la mancha w).

xA = 27 mm wA = 2.0 mm

xB = 33 mm wB = 2.5 mm

El frente de la fase móvil fue de 60 mm, desde el inicio.

a) Calcule el factor de retardo Rf, la eficiencia N, y la altura equivalente de un

plato teórico HETP para cada compuesto.
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CROMATOGRAFIA

b) Calcule la resolución entre los compuestos A y B

c) Establezca la relación entre el factor de selectividad y el Rf de los dos

compuestos. Calcule su valor numérico

a)

27 mm+1 mm 33 mm+ 1.25 mm

Rfa= =0.433 Rfb= =0.5708
60 mm 60 mm

2
Tr L
N=16 H=
w N

Tr 2 Tr 2
N=16 =0.8711 N=16 =0.834
2.0 mm 2.5 mm

60 60
Ha= =68.878 Hb= =71.935
0.8711 0.834

Tr 1−Tr 2 0.5708−0.466
Rs= Rs= =0 .0465
b) wb prom 2.25

Problema 4.

La siguiente figura representa los resultados de una placa de CCF en fase

normal (fase móvil: hexano: acetona, 80:20). Los compuestos tienen las
estructuras A, B, y C.
EQUIPO 4 Química Analítica III PROBLEMARIO DE
CROMATOGRAFIA

a) Indique en el registro, a cuales picos corresponden los compuestos A, B,

y C.

El primer pico a la izquierda corresponde al compuesto “C”, el segundo a

“B” y el de la derecha es “A”

b) ¿Cuál debería ser el orden de elución de estos compuestos si se

examinaran por columna de HPLC utilizando los mismos tipos de fases
móvil y estacionaria? El orden de elución seria: “A”, “B”, “C”.
c) ¿Cuál debería ser el orden de elución de estos compuestos si se
examinaran por columna de HPLC conteniendo una fase de tipo RP-18,
con una mezcla binaria de acetonitrilo: metanol (80:20) como eluente?
El orden de elución debería ser: “C”, “B”, “A”.
d) Calcule Rf y HETP para el compuesto que migra más rápidamente sobre
la placa

Lomgitud de lacolumna 3.2

HETP= RfA= =0.524
Numeto de etapas de equilibrio 6.1

Problema 5. Para conocer la presencia de trimetoprima y sulfametoxazol en

diferentes productos farmacéuticos se emplea la técnica de capa fina. Se utiliza
una Cromatoplaca de sílica gel con indicador. Como fase móvil Mezcla de
cloroformometanol- hidróxido de amonio. Después de realizar el tratamiento
adecuado a las muestras y estándares e identificarlos como:

se aplicó a la placa de gel de sílice cromatográfica, 10 µl de las soluciones A y

B de la preparación de referencia y 10 µl de la preparación de la muestra. Se
dejó correr la fase móvil hasta 12 cm arriba de la línea de aplicación. Al retirar
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CROMATOGRAFIA

la cromatoplaca de la cámara, se marcó el frente de la fase móvil, se secó con

aire seco, localizando las bandas por observación bajo luz ultravioleta de onda
corta, rociando con la solución reveladora y obtuvimos lo siguiente:

a) Determinar la identidad de trimetoprima y Sulfametozaxol en cada

producto según su Rf.

-La muestra 1 de Pfizer presenta Sulfametazol.

-La muestra 2 de Collins presenta Trimetoprima y

Sulfametozaxol.

- La muestra 3 PiSA presenta solo impurezas.

-La muestra 4 Liferpal presenta Trimetoprima.

b) Identificar los compuestos relacionados de cada producto: NOTA:

Cualquier mancha obtenida con la preparación de la muestra diferente
de la mancha principal, con valores Rf de aproximadamente de 0.6 a
0.7, corresponderan a las impurezas de Sulfametoxazol. De 0.8 a 0.9 a
las impurezas de trimetoprima y las que sean inferiores a 0.5 se
consideran excipientes.

-La muestra 1 de Pfizer contiene un Rf similar al STD de Sulfametazol

,presenta impurezas del mismo fármaco y se detecta excipientes menor de 5.

-La muestra 2 Collins tiene un Rf similar al STD deSulfametazol y trimetoprima

e impurezas de trimetoprima no manifiesta excipientes.

-La muestra 3 PiSA tiene un Rf similar al de impurezas de sulfametoxazol y

trimetoprima y manifiesta una cantidad de excipiente.
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CROMATOGRAFIA

-La muestra 4 Liferpal tiene un Rf presentando Trimetoprima e impurezas de

sulfametoxazol también se detecta presencia de excipiente.

c) De acuerdo a lo obtenido según criterios de a) y b), ¿cuál sería el

mejor producto (*)? Collins por que se acerca más a los valores STD de
Trimetoprima y Sulfametoxazol contiene menos impurezas.

Problema 6.

Con un CG y una columna de relleno de 40 cm se obtuvieron los siguientes

datos:

Compuesto tR [min] W1/2 [min]

Aire 1.9
Metilciclohexano 10.0 0.76
Metilciclohexeno 10.9 0.82
13.4 1.06

Calcular:

a) El número de platos teóricos promedio b) La altura del plato promedio

para la columna.
2
tR L
a) N =
16 ( )
W b) H
¿
N

10.0 2 40 cm
NA = 16 ( )
0.76
=2270.08 H=
2551.37
=0.0156

10.9 2
NB = 16 ( )
0.82
=2827.12
EQUIPO 4 Química Analítica III PROBLEMARIO DE
CROMATOGRAFIA

2
13.4
NC = 16 ( )
1.06
=2556.92

Ň = 2551.37

Problema 7.

En una columna de 122 cm de longitud y a una temperatura de 160ºC se

obtuvieron los siguientes tiempos de retención en minutos: pico del aire 0.90,
heptano 1.22 y octano 1.43. El ancho en la base de los picos fue de 0.14 min
para el heptano y de 0.20 min para el octano.

a) Calcular la retención relativa y la resolución para estos picos.

b) ¿Qué longitud debería tener la columna para obtener una resolución de 1.5?

(Trb )−Tm 2(trb−tra)

∝= Rs=
( Tra )−Tm Wb+Wa

(1.43 )−0.90 2 (1.43−1.22 )

∝= =1.6562 Rs= =1.2352
a) ( 122 )−0.90 0.20−0.14

TrB−TrA tR 2 L
b)
R=
W prom
N=16
W ( )
H=
N

1.43−1.22 1.325 2
Wprom=
1.5
=0.14 N=16 (
0.14 )
=1433.16

1.22 2
N=16 ( )
0.14
=¿ 1215.02
L = (N)(H)
L = (0.12002) (1433.16)
1.43 2
L = 172.08 cm N=16 ( )
0.20
=¿ 817.96

Ň = 1016.49

122
H= =0.12002
1016.49
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CROMATOGRAFIA

Problema 8

Considerando una columna con una altura de plato de 1.5 mm y con número de platos de
333, por la que fluye el gas portador a un caudal de 3 ml/min, y sabiendo que el volumen
muerto es de 1.0 ml:

a.- ¿Cuáles son el tiempo de retención y el volumen de retención cuando k es 1, 2 ,5 y

10?

b.- ¿Cuál sería la anchura en la base de los picos a cada uno de los valores anteriores de
k?

Problema 9.

Calcular a) el factor de capacidad o de retención k, y b) la resolución Rs, de los siguientes

analitos en un sistema cromatográfico por HPLC, con los datos que figuran en la siguiente
tabla:

to= 1.12 min

c) Indicar si los picos cromatográficos de los componentes de la muestra están bien

resueltos; d) calcular el número de platos teóricos efectivos para el 1-naftol.
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CROMATOGRAFIA

t
(¿ ¿ R−t M)
a) tM
k =¿

(1.72−1.12) (5.52−1.12)
k= =0.5357 k= =3.9285
1.12 1.12

(7.34−1.12)
k= =5.5535
1.12

(7.70−1.12)
k= =5.875
1.12

A
W B+ W ¿
¿
b) ¿
2(t RB−t RA )
Rs =
¿

2(5.52−1.72) 2(7.34−5.52)
Rs = =0.6 .7078 Rs = =3.165
( 0.65+ 0.483) (0.5+0.65)

2(7.70−7.34)
Rs = =0.455
(1.083+0.5)

tR 2
d) N=16 ( )
W

7.34 2
N=16 ( ) =3448.04
0.5

Problema 10.

En un cromatograma, los tiempos de retención de los picos A, B y C, donde A es una

sustancia no retenida, son 0.84, 10.60 y 11.08 minutos, respectivamente.

a) Calcular los tiempos de retención corregidos y los factores de capacidad para B y C.

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CROMATOGRAFIA

b) Sabiendo que los anchos de banda en la base para B y C son 1.21 y 2.10 segundos
respectivamente, calcular la resolución entre estos dos picos.

Sustancia TR (min) W (seg)

No retenida 0.84 -------------------------------------
B 10.60 1.21
C 11.08 2.10

t ' R =t R−t M

t ' R =10.60−0.84=9.76 min

Para B Para C

t ' R =11.08−0.84=10.24 min

t 'R
k'=
t 'M

Para B Para C

' 9.76 min ' 10.24 min

k= =8.92min k = =12.19 min
0.84 min 0.84 min

A
W B+ W ¿
¿
¿
2(t RB−t RA )
Rs =
¿

2(11.08−10.60)
Para B y C Rs = =17.45
(0.035+ 0.020)

Problema 11.

En una columna tubular abierta de paredes recubiertas de 15 m de longitud y 0.25 mm de

diámetro interno, el gas portador circula a un caudal de 3 ml/min. Sabiendo que los
tiempos de retención para el heptanoato de metilo y para el octanoato de metilo son de 60
y 89 s respectivamente, y que el número de platos teóricos de la columna es de 3000,
calcular:

a) El tiempo muerto (suponer despreciable el espesor de la fase estacionaria)

b) El factor de capacidad o de retención

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CROMATOGRAFIA

c) La anchura en la base de cada compuesto

d) La resolución entre picos e indicar si están resueltos hasta línea base

L= 15 m

Diametro= 0.25 mm

F=3 mL/min

Heptanoato de metilo t R=60 seg

Octanoatode metilo t R=89 seg

N=3000

F=(u 0)(π r 2)
3
F 3 cm /min 6,111.55cm
u0= = 2
=
2
( π r ) (3.1416 )( 0.0125 cm ) min

u0 6,111.55 cm/min
a t M= = =4.074 min=14.73 seg
L 1500 cm

t
(¿ ¿ R−t M )
b tM
k =¿

Para Heptanoato Para Octanoato

(60−14.73) (89−14.73)
k= =3.073 k= =5.042
14.73 14.73

tR 60
W= = =4.38
c
√ √ N
16
3000
16
89
=6.50
W=
√ 3000
16
EQUIPO 4 Química Analítica III PROBLEMARIO DE
CROMATOGRAFIA

A
W B+ W ¿
¿ 2(89−60)
d = =5.33
¿ 6.5+ 4.38
2(t RB−t RA )
Rs =
¿

Problema 12.

Los datos de la tabla se obtuvieron a partir de un cromatograma de una

muestra con tres componentes:

Con estos datos, sabiendo que el caudal de fase móvil fue de 1.0 ml/min y
teniendo en cuenta que el cromatograma no es ideal, calcular:

a) Volumen muerto de la columna y factor de retención de A. ¿Qué indica el

tr−tM 2.8−1
resultado obtenido?
k= k= =1.8
tM 1

k (Vs)
Vm=
k´

b) Ancho en la base de los picos.

w=
N
√
16
Tr

w=
√
13204
16
2.8
=10.25 w=
21897
16
5.7
√
=6.49 w=
30115
16
6.7
=6.48
√
c) Resolución entre los picos de Ay B y entre los picos de B y C.

2(Trb−Tra)
R=
wa+wb
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CROMATOGRAFIA

2(5.7−2.8) 2(6.7−5.7)
R= =0.3465 R= =0.1542
6.49+10.25 6.48+6.49

d) ¿Qué eficacia mínima se requiere para que un cuarto componente,

D, con tiempo de retención de 4.5 min salga resuelto, al menos
aceptablemente de B (Rs=1).

Problema 13.

Utilizando el Cromatograma calcule:

a El factor de retención para cada pico

3−.8 4.5−.8 5.8−.8
k 1= =2.75 k 2= =4.625 k 3= =6.25
.8 .8 .8

7−.8 8.4−.8
k 4= =7.75 k 5= =9.5
.8 .8

b El factor de selectividad para los picos 3 y 4

(trb)−tM
∝=
( tra )−tM
EQUIPO 4 Química Analítica III PROBLEMARIO DE
CROMATOGRAFIA

(7 )−0.8
∝= =1.24
(5.8 )−0.8

c El número de platos teóricos para el pico número 3 empleando el

valor de W½

tr 5.8
N=5.545 N=5.545 =24.73
( w .5 ) ( 1.3 ) d) La resolución entre

los picos 1 y 2

2(Trb−Tra)
R=
wb+wa

2( 4.5−3)
R= =1.36
1.2+1

Problema 14.

Solución:

Pico 1
2 2
TR 2.8
N= 16 ( )
w N=16 ( )
.3

N=1393.77
 EQUIPO 4 Química Analítica III PROBLEMARIO DE
CROMATOGRAFIA

Resolución pico 3 y 4

2( TRb−TRa) 2( 6.4−6.1)
R= Wb+ Wa R= .3+.3

R= 1

III. METODOS DE CUANTIFICACIÓN EMPLEADOS EN CROMATOGRAFÍA

Problema 15.

Se separó una mezcla con teofilina y materiales relacionados por HPLC

empleando THF 1%, Acetronitrilo 20%, H3PO4 0.1% y el resto de agua. Se
identificaron sus componentes mediante loa tiempos de retención. Empleando las
mismas condiciones de la separación, al inyectar una mezcla estándar y una
muestra problema con teofilína, se presentaron los siguientes datos:

Calcular el % de cada componente de las muestra.

uL
10
ml uL
Teobromina=3578941 x =14390.5951
2487 ml
 EQUIPO 4 Química Analítica III PROBLEMARIO DE
CROMATOGRAFIA

20uL/ml
Teofilina=2113847 =1648.5451uL/ml
25645

uL
10
ml uL
B hidroxilpropil teofilina=1654872 =12405.3373
1334 ml

20 uL/ml
Cafeína=22456 =307.8273uL /ml
1459
 EQUIPO 4 Química Analítica III PROBLEMARIO DE
CROMATOGRAFIA

uL 100
Suma Total=28752.3048uL /m
Teobromina=14390.5951
ml
( 28752.3048
uL
ml )
=50.05

uL
Teofilina=1648.5451 =5.73
100
ml
( 28752.3048
uL
ml )
uL 100
B hidroxi …=12405.3373
ml
( 28752.3048
uL
ml )
=43.14

uL 100
Cafeína=307.8273
ml
( 28752.3048
uL
ml )
=1.07

Problema 16.

Se desea conocer la composición porcentual de contaminantes presentes en el

aire de una zona de la ciudad. Para ello, se muestra adecuadamente el aire y
somete a análisis cromatográfico; se obtiene lo siguiente:
EQUIPO 4 Química Analítica III PROBLEMARIO DE
CROMATOGRAFIA

Suponiendo que los compuestos de la tabla son los únicos contaminantes del aire
de la muestra y además que el detector presenta igual sensibilidad para todos los
componentes ¿Cuál es la composición porcentual de los contaminates?

tr es mi factor de respuesta

39540/3.1= 12754.83

19320/3.9= 4953.84

62220/ 5.5=11312.72

59300/6.8= 8720.58

722770/ 8.7=45141.37

18200/11.6=1568.96

17050/ 18.30= 931.69 Ʃ = 186622.07 U.A.

19030/ 22.3 = 853.36

% sulfuro de hidrógeno 12754.83 =6.9%

(100)
186622.

% carbonil sulfuro 4953.84 (100) =2.65%

186622.

% metil mercapto 11312.72 (100) =6.06%

186622.

% dimetil sulfuro 8720.58 (100) =4.67%

186622.

% disulfuro de carbono 100384.72 (100) =53.8%

186622.

% bromo cloro metano 45141.37 (100) =24.2%

186622.
EQUIPO 4 Química Analítica III PROBLEMARIO DE
CROMATOGRAFIA

% 1,4- difluorobenceno 1568.96 (100) =0.84%

186622.

% clorobenceno 931.69 (100) =4.99x10-3%

186622.

% 4-bromo fluorobenceno 853.36 (100) =4.57x10-3%

186622.

Problema 17.

La buprenafina es un derivado de la tebaína que produce efectos típicos de

agonistas opioides mu de larga duración y potentes efectos antagonistas. Una
enfermera prepara 5 mL. de solución de buprenofina y procedió a administrar 3
mL. al paciente que pesa 81 kg. Los 2 mL. restantes fueron guardados en
refrigeración para utilizarlos al día siguiente. Sin embargo el paciente murió a las
pocas horas, y ahora la enfermera presenta cargos legales por negligencia
médica.

Para resolver este delicado asunto, se preparó un estándar pesando 11.8 mg. de
estándar de clorhidrato de buprenorfina puro, exactamente pesado y transferido a
un matraz volumétrico de 25 mL. se añadieron 20 mL.de fase móvil, se disolvió y
se llevó a volumen con fase móvil. Luego se tomó 3 mL. de esta solución y se
llevó a 100 mL. con fase móvil. Los 2 mL. de solución preparada por la enfermera
se pasaron a un matraz volumétrico de 50 mL. y se llevaron a volumen con fase
móvil. Se inyecto por separado 20 microlitros de la preparación del estándar y de
la preparación de la muestra al cromatógrafo HPLC.

Para la solución estándar se obtuvo un área de 60325 U.A. para el pico de

buprenorfina.

Por otra parte para la muestra preparada, el área del pico de buprenorfina fue de
54477 U.A.

a) ¿Cuál es la concentración (en mg. de buprenorfina/ mL) de la solución

preparada por la enfermera.
Pesos moleculares son 467.65 y 504.11 para la buprenorfina y el clorhidrato
de buprenorfina respectivamente.
b) Si la dosis máxima permitida de este medicamento es de 10 μg/ kg de
peso, ¿Se excedió esta dosis?
 EQUIPO 4 Química Analítica III PROBLEMARIO DE
CROMATOGRAFIA

Buprenorfina 5 ml. 2 ml. inyección: 20 µl.

A= 54477 U.A.

50 ml.

Estándar 11.8 mg. clorhidrato de buprenorfina

Inyección= 20 µl

20 ml. 3 ml. A= 60325 U.A.

100 20 µl inyección

11.8 mg clorhid. 3ml. 0.0177 mg clorhid. 1 ml. x 20 µl. = 3.5x10-4 mg

= clorhid.
20ml. 100 ml. ml. 1000 µl.

FRASTD= conc. STD 3.54X10-4 mg clorhid. 5.86x10-9 mg clorhid./ U.A.

= =
Área STD 60325 U.A.

3.19x10-4
CONC.prob.= (FRASTD) (Área prob.) = 5.86x10-9 mg clorhid. X 54477 U.A.=
U.A mg clorhid./ U.A.

Buprenorf a)
na. 100 1
100
3.19x10 -4
mg clorhid. 50 ml. 1g 467.65 g
µl mol
mg = …..
20 µl. 1 ml. 5 ml. 504.11 g clorh. 1000 mg 1 mol 1
g

….= 0.1479 mg buprenorfina/ ml.

EQUIPO 4 Química Analítica III PROBLEMARIO DE
CROMATOGRAFIA

b)
5.47 µg
0.1479 mg. buprenorfina 1000 µg buprenorfina 3 ml. = buprenorfina/ kg.
1 ml. 1 mg 81 kg. Peso

Por lo tanto no se excedió la dosis

Problema 18.

Para determinar la cantidad de cocaína presente en una “grapa” decomisada a

un sujeto, se preparó primero un estándar pesando 0.050g de cocaína pura y
diluyendo hasta 100 mL en un solvente apropiado (HCl diluido). Se tomaron 5
mL de esta solución, se diluyeron nuevamente hasta 50 mL y se inyectaron 20
μL de esta última dilución al cromatógrafo, obteniéndose un área de 9705 UA.

Posteriormente se preparó la muestra pesando 605 mg de cocaína decomisada

y diluyendo a 100 mL. Se tomaron 10 mL de esta solución y se llevaron a 100
mL, luego se tomaron 10 mL de esta solución y se llevaron nuevamente a 100
mL. Al inyectar 20 μL de la última dilución al cromatógrafo se obtuvo un área
de 6130 UA para el pico de cocaína. ¿Cuál es el porcentaje de pureza en la
“grapa” decomisada?

( 0.050 g ) ( 5 mL ) ( 5 x 10−5 ) ( 1mL) −3

STD Cocaina 3
x 20 μL=1 x 10 μg
( 100 mL )( 50 mL )( 1 mL )(1 x 10 mL)

−3
1 x 10 μg
FRA STD = =1.0303 x 10−7 μ g /U . A .
9705U . A .

Concentración Del Problema = (1.0303x10-7) (3065 U.A.) = 3.15x10-4 μg

( 3.15 x 10−4 μg ) ( 100 mL ) (100 mL)(100 mL)

( 0.010 mL )( 10 mL )( 10 mL ) (605 μg) = 0.5219

(0.5219) (100) = 52.19%

EQUIPO 4 Química Analítica III PROBLEMARIO DE
CROMATOGRAFIA

Problema 19.

Una muestra se analiza por cromatografía de líquidos con la fnalidad de

cuantifcar los componentes que la forman. Después de inyectar una serie de
estándares se encontraron los siguientes compuestos en la muestra:

( 654 ) (100)
% Analito 1 ¿ 3066 = 21.3307%

( 533 )( 100)
% Analito 2 = 3066 = 17.3842%

( 205 ) (100)
% Analito 3 = 3066 =6.6862%

( 268 ) (100)
% Analito 4 = 3066 = 8.7410%

( 918 ) (100)
% Analito 5 = 3066 = 29.9412%

( 488 ) (100)
% Analito 6 = 3066 =15.9165 %

Problema 20.
Para realizar un análisis de drogas, se parte de 3mL de orina, se somete a una extracción en fase sólida,
se eluye con un disolvente orgánico, se lleva a sequedad y finalmente se redisuelve en 0.5 mL de
metanol y se añade dionina hasta una concentración final de 10mg/L. Se inyecta 1[L de esta disolución
EQUIPO 4 Química Analítica III PROBLEMARIO DE
CROMATOGRAFIA

en un cromatógrafo de gases con detector de nitrógeno-fósforo. Los datos obtenidos se encuentran en la

tabla de muestras.

Se hace un calibrado preparando una mezcla de estándares de cocaína, cafeína y su patrón interno
dionína. Se inyecta 1[L en el cromatógrafo de gases y se obtienen los resultados que se muestran en la
tabla de calibrado. Los promedios de las recuperaciones obtenidas son 82% para cafeína y 92% para
cocaína. Calcular la concentración en mg/L y los mg por 100mL de estas drogas en la orina.

Cafeína
5
FRA Ca= =2.05104 x 10−6 ppm/ UA
2437783

10
FRA D = =6.5669 x 10−6 ppm/UA
1522794

2.05104 x 10−6
FRR= =0.3123
6.5669 x 10−6

10
Concentración de lacafeína=( 0.3123 ) ( 1736698 ) ( 1578336 )=3.4363 ppm
( 100 ) x ( 3.436382 ppm )=4.1906 ppm

( 4.1906
1000mL
mg
) x
0.5 mL
( 3 x 10 L )=0.6984
−3 mg cafeína /L orina

( 4.1906
1000mL
mg
) x(
0.5 mL
3 mL )
x 100 mL=0.06984 mg cafeína/100 mL orina
EQUIPO 4 Química Analítica III PROBLEMARIO DE
CROMATOGRAFIA

Cocaína

5
FRA Co= =5.9162 x 10−6 ppm/UA
845129

10
FRA D = =6.5669 x 10−6 ppm/UA
1522794

5.9162 x 10−6
FRR= =0.9009
6.5669 x 10−6

10
Concentración de lacocaína= ( 0.9009 )( 435122 ) ( 1578336 )=2.4836 ppm
( 100 ) x ( 2.483692 ppm )=2.6996 ppm

( 2.6996 mg
1000 mL ) x
( 0.5 mL
3 x 10 L )
−3
=0.4499
mg cocaína /L orina

( 2.6996 mg 0.5 mL
1000 mL ) ( 3 mL )
x x 100 mL=0.04499 mg cocaína/100 mL orina

Problema 21.
Se obtuvieron los siguientes datos por cromatografía de gases con una columna cromatográfica de 1.25
m

Calcular:
a) El factor de capacidad o retención para cada amina
EQUIPO 4 Química Analítica III PROBLEMARIO DE
CROMATOGRAFIA

' 4.59−0.395
k I= =10.6202
0.395

' 4.91−0.395
k P= =11.4304
0.395

b) El factor de selectividad
4.91−0.395
α= =1.0763
4.59−0.395

c) El número de platos y la altura de plato para la n-propilamina

4.91 2
N P =16 (
0.382 )
=2643.3596

1.25
H P= =4−7288 x 10−4 m
2643.3596

d) La resolución entre las dos aminas

4.91−4.59
R= =0.8568
0.5 ( 0.382+0.365 )

e) La longitud de la columna necesaria para conseguir una resolución de 1.5 y el tiempo necesario para
que se eluya la n-propilamina suponiendo la misma velocidad lineal de flujo
4.59 2
N I =16 (
0.365 )
=2530.2278 N P =2643.3596

5173.5874
Promedio de N = =2586.7937
2

( R s )1 √ N 1 √ N 1 ( R s )2 50.8605 (1.5 )
= → √ N 2= → =89.0415
( R s )2 √ N 2 ( R s )1 0.8568

N 2=7928.3887

1.25 −4
H= =4.8322 x 10 m
2586.7937
EQUIPO 4 Química Analítica III PROBLEMARIO DE
CROMATOGRAFIA

L=7928.3887 ( 4.8322 x 10−4 )=3.8311 m

f) Si se utiliza isopropilamina como patrón interno en una concentración de 1 mg/L y en un

cromatograma de una muestra se obtienen áreas de 23220 para la isopropilamina y de 35421 para
la n-propilamina, ¿cuál será la concentración de n-propilamina en dicha muestra?
1
FRA i= =4.9407 x 10−5 ppm/UA
20240

2.5
FRA p= =6.1683 x 10−5 ppm /UA
40530

6.1683 x 10−5
FRR= =1.2485
4.9407 x 10−5

1
Concentración del problema=( 1.2485 ) ( 35421 ) ( 23220 )=1.9045 ppm(mg /L)

Isómero Área/0.5 uL
o-Xileno 1200
m-Xileno 1300
p-Xileno 1150
 EQUIPO 4 Química Analítica III PROBLEMARIO DE
CROMATOGRAFIA

UA∗0.5 uL uL∗100
540 =0.225uL 0.225 =45
1200 UA 0.5 uL

UA∗0.5 uL uL∗100
450 =0.173 uL 0.173 =34.6
1300 UA 0.5uL

UA∗0.5 uL uL∗100
240 =0.104 uL 0.104 =20
1150 UA 0.5 uL
 EQUIPO 4 Química Analítica III PROBLEMARIO DE
CROMATOGRAFIA

Tomate Fresco
50 ug / ml
FRA std= =6.59E-3 ug UA /ml
7587 UA

UA
(
Conc . Prob .= 6.59E-3ug
ml )
( 23205 UA )=152.92 ug/ml

( 152.92ug
1 ml )( 6 ml
1g )
=917.51ug /g

Polvo de Tomate
UA ug
(
Conc . Prob .= 6.59E-3ug
ml )
( 14163 UA )=93.33
ml

( 93.33 ug 6 ml
1ml )( 1 g )
=560 ug/ g

( 302mlng )=15 ng /ml

 EQUIPO 4 Química Analítica III PROBLEMARIO DE
CROMATOGRAFIA

Muestra
Componente Concentración (ng/ml) Área
Serotonina x 2573832
N-Metil-Serotonina 15 ng/ml 171981

Estándar interno
Componente Concentración (ng) Área
Serotonina 5 ng 3088598
N-Metil-Serotonina 5 ng 3095672

5 ng 5 ng
FRA std= =1.61E-6 ng FRA prob.= =1.61E-6 ng
3095672 3088598

ng
FRR=
1.61E-6 ng
1.61E-6 ng
=1Conc . prob.=( 1 )( 2573832 )
ml
( )
171981
15
=224.48 ng /ml

(224.48 ngml ) ( 2 ml)=448.96 ng en la muestra

 EQUIPO 4 Química Analítica III PROBLEMARIO DE
CROMATOGRAFIA

6 ng
=17.14 ug /Kg
.35 Kg

133ug 48 ug
FRA std= =2.85E-4 ug FRA prob .= =1.313E-4 ug
465461 365463
 EQUIPO 4 Química Analítica III PROBLEMARIO DE
CROMATOGRAFIA

ug
FRR=
1.313E-4 ug
2.85E-4 ug
=0.4595 Conc . prob .=( 0.4595 ) ( 12157 ) ( 17.14
Kg
86532 )
= 1.1ug /Kg

10 uL/ml uL 20 uL/ml
Acetona= =160429.4049 Etanol= =19309.6286uL /ml
2134 ml 23455

10 uL/ml 20 uL/ml
Agua= =475361.3675 uL/ml Xileno= =777.1153 uL/ml
234 312
 uL 100
Suma Total=665877.5164 uL/ml
Acetona=160429.4049
ml
( 665877.5164
uL
ml )
=24.09

100
Etanol=19309.6286uL/ml
( 665877.5164
uL
ml )
=2.9

100
Agua=475361.3675uL/ml
( 665877.5164
uL
ml )=71.38

100
Xileno=777.1153 uL/ml
( 665877.5164
uL
ml )
=0.11

mg
5E-5
ml mg
FRA= =1.54E-9
32357 ml

Conc . prob .=( 1.54E-9 mg /ml ) ( 37515 )=5.79E-5 mg /ml

( 5.79E-5
1 ml
mg 500 ml 500 ml
)( 0.5 ml )( 1.0312 g )=28.07 mg/ g
( 28.07g mg )( 1.032 g)=29.95 mg /1.0312 g
100
29.95 mg ( 1031.2 mg )
=2.8

Conc . std .= ( 17.4 mg

25 ml )
=0.696 mg/ml 41284 Área

Conc . 0 hrs .=45389 ( 0.69641284

mg/ml
)=0.765 mg/ml
 Conc .12 hrs .=42093 ( 0.69641284
mg/ml
)=0.7096 mg/ml
Conc .24 hrs .=39840 ( 0.69641284
mg/ml
)=0.671 mg/ml
Conc .36 hrs .=36927 ( 0.69641284
mg/ml
)=0.622 mg/ml

0.765 mg 100 100

0 hrs=
m
l
( 0.696
mg
)
ml
=109.9 12 hrs=0.7096 mg/ml
(
0.696
mg
ml )
=101.9

100 100
24 hrs=0.671 mg /ml
( 0.696
mg
)
ml
=96.4 36 hrs0.622 mg /ml
(
0.696
mg
ml
=89.36
)
Problema 29. Calcular la concentración de Ciprofloxacino, Benzocaína e
Hidrocortisona en la muestra, en g/100 mL y reportar si está dentro o fuera de
especificaciones.

-Concentración del estándar de ciprofloxacino

( 12mg CCM 331.34 g Ciprof . 5 mL

25 mL )( 385.84 g CCM )( )( 2mL
50 mL 50 mL )
=1.6487 x 10 −3
mg/mL

-Concentración de benzocaína

( 2050 mg 2 mL
mL 50 mL )
)( =0.016 mg/mL

-Concentración de hidrocortisona

( 1050 mg 2 mL
mL )( 50 mL )
=8 x 10 −3
mg/mL

-Estándar externo

Pic Sustancia Área Área Concentració FRA= C=(FRA)

o muestr n C (A
a A

1 CCM 608 5836 1.6487x10-3 2.7069x10 1.5797x10-

-7 3
8
-3
2 Hidrocortison 562 6041 8x10 1.4234x10 8.5987x10-
-6 5
a 0
3 Benzocaína 7115 6876 0.016 2.2487x10 0.0154
 -6
mg/mL

1. Clorhidrato de ciprofloxacino

mg 50 mL
1.5797 x 10−3 (
mL 2 mL )( 1002 mLmL )=1.9746 mL
mg −3
=1.9746 x 10 g / mL

−3
1.9746 x 10 g ( g
100 )=0.1974
mL 100 mL

Especificaciones: 0.180 a 0.220 g/100mL. Por lo tanto, sí cumple.

2. Hidrocortisona
−3
8.5987 x 10 mg 50 mL 100 mL 10.7483 mg
mL (
2 mL 2 mL
=)( mL ) =0.01074 g/mL

0.01074 g 1.0748 g
( 100 )=
mL 100 mL

Especificaciones: 0.900 a 1.200 g/100mL. Por lo tanto, sí cumple.

3. Benzocaína

0.0154 mg 50 mL 100 mL 19.25 mg 0.0192 g

mL (
2 mL 2mL
=)( mL
= ) mL

0.0192 g 1.925 g
( 100 )=
mL 100 mL

Especificaciones: 1.800 a 2.200 g/100mL. Por lo tanto, sí cumple.

SE ENCUENTRA DENTRO DE LAS ESPECIFICACIONES

Composición porcentual

Σ= 0.1974 g/100 mL + 1.0748 g/100mL + 1.925 g/100mL

Σ= 3.1972 = 100%

1. Clorhidrato de ciprofloxacino
3.1972 100%

0.1974 6.1678
 % 2. Hidrocortisona

3.1972 100%

1.0748 33.62
 % 3. Benzocaína

3.1972 100%

1.925 60.21
 %

Problema 30. En un laboratorio de control de calidad se quiere poner a punto un

método de análisis por HPLC en una fase inversa de una mezcla de dos
compuestos A y B. se sabe que, en columna de octadecil sílice de 25 cm de
longitud y utilizando una fase móvil de metanol-agua, los tiempos de retención son
6.25 y 7.10 min respectivamente, el tiempo muerto es 1.4 min y la resolución es
1.05.

a) ¿Cuál debe ser la longitud de la columna para conseguir una resolución

de 1.5
b) Calcular los factores de retención de A y B. serán diferentes en la nueva
columna.
Muestra A mg/L B mg/L P.I. mg/L Área A Área B Área pi
1 2.0 2.0 1.0 25542 36216 13320

tr−tm 6.25−1.4 min

B¿K= K= =3.464
tm 1.4 min

7.10−1.4 min
K= =4.071
1.4 min

K promedio = 3.76785
 t´ R2 7.1−1.4
α=
t´ R1 = 6.25−1.4 = 1.1753

R= √
N α −1 Ka
4 ( )( 1+ Kprome
α )
√ N 1.1753−1 4.071
1.05= 4 ( 1.1753 )( 1+3.76785 )=N=1087.4
L 25
=N = 0.023 cm/ plato REAL
H 1087.4

√ N 1.1753−1 4.071
1.5= 4 ( 1.1753 )( 1+3.76785 )=N=2219.1863=N platos TEORICO

L=H* N = 2219.1863 (0.023 cm/ plato) = 51.04 cm

a) 51.04 cm

Problema 31. Para conocer el contenido de hesperidina en aguacate de la

variedad Hass se realizó un análisis por HPLC. Para ello, se pesaron 15 mg pulpa
seca de aguacate de la variedad Hass y se adicionaron 100 microlitros de una
solución de 250 microgramos/mL de catequina como sustancia de referencia; se
completó el volumen a 2 mL; de esta solución, se tomaron 200 microlitros, y se
ajustó el volumen a 500 microlitros, para después inyectar al HPLC,
produciéndose áreas de 513 y 1985 para catequina y hesperidina,
respectivamente; aparte, se preparó un estándar pesando 7 mg de catequina y 5
mg de hesperidina, se aforó a 100 mL con metanol:acetonitrilo, y ésta solución se
diluyó 20 veces. Después de inyectar al HPLC, se reportaron áreas de 1351 y
1002 para catequina y hesperidina, respectivamente ¿Cuántos miligramos de
hesperidina están presentes en un kilogramo de pulpa seca en esa variedad de
aguacate?
Método estándar interno
STD= Catequina
Analito de interés= Hesperidina

Conc. STD Catequina y Hesperidina

7 mgCatequina 1 V 3.5 x 10−3 mgCatequina
100 mL ( )
20 V
=
mL

5 mg Hesperidina 1 V 2.5 x 10−3 mg Hesperidina

100 mL ( )
20 V
=
mL

2.5 X 10−3 mg hesperidina /mL

1002
FRR= =0.9630
3.5 X 10−3 mgcatequina /mL
1351

CONCprob= (0.9630)(1985)(0.25 mg/513)=0.9316 mg hesperidina/mL

1 x 106 mg 310,533.33 mghesperidina

=
1 kg pulpa kg pulpa
0.9316 mghesperidina 0.5 mL 2 mL
( )( )¿
mL 0.2 mL 15 mg pulpa

Problema 32.
La determinación de herbicidas e insecticidas clorados en alimentos, agua potable,
suelo, etc. pueden ser determinados empleando cromatografía de gases con un
detector de captura de electrones. El 4,4-DDT fue determinado en una muestra de
5.0 gr del suelo de una granja donde se empleó el insecticida, la muestra se
coloca dentro de un extractor y se reflujarón 50 ml de hexano para extraer el
plaguicida durante 1 hr. A 1.0 mL del extracto se le añade 1.0 ml de una solución
de Adrin (0.001microgramos/ml), de esta solución se inyecta 1.0 [L en el
cromatógrafo y las áreas resultantes para cada insecticida fueron de: 4, 4'-DDT=
13454 y Adrin= 2335682. Una mezcla estándar comercial que contiene 100 pg/ml
de Adrin y 400 pg/ml de4,4'-DDT fue inyectada en el mismo cromatógrafo
empleando las mismas condiciones que para la extracción, para esta solución se
reporta una área de 1273 para el Aldrin y 23455 para el 4,4'-DDT. Calcule la
concentración del DDT en la muestra de suelo (en pg/gr de suelo).
Método estándar interno
STD= ADRIN
Analito de interés= 4,4-DDT

400 pg DDT
23,455 UA
FRR= =0.2170
100 pg ADRIN
1273 UA

CONCprob= (0.2170)(13,474 UA)(0.001 microgramos ADRIN/mL/2,335,689 UA)=

1.25X10-3 microgramos DDT/mL

1.25 x 10−3 microgramos DDT 1000 pg

mL (
1 microgramo )( 550g suelo
mL
)= 12.5g suelo
pg DDT

Problema 33. Al analizar un licor por cromatografía de gases se obtuvieron los

siguientes datos:

No. STD 1 2 3 4 Muestra

Conc. De 0.01 0.05 0.08 0.10 ¿?
Metanol(%vol)
Área de 235 1173 1884 2360 824
unidades
arbitrarias

Las condiciones de medición se conservaron constantes (Temperaturas,

sensibilidad del detector, flujo del gas acarreador, etc.) Es importante considerar
que el volumen de los estándares fue constante y bien medido, pero en la muestra
fue inyectado el doble del volumen usual. ¿Cuál es la concentración de metanol en
el licor problema en % vol?

Regresion Lineal
R=0.9999942 segura
824ẋ=0.035 % vol Metanol

Problema 34. Para calcular el factor de respuesta en un análisis cromatográfico,

se realizaron tres determinaciones con cantidades diferentes de un analito A y de
un estándar interno EI, obteniéndose los siguientes resultados.

Muestra A, mg/l Área A u.a. Ei, mg/l Área Ei u.a.

 1 0.200 25532 0.100 13320
2 0.100 11830 0.100 12320
3 0.200 24110 0.200 25150

Una vez establecido dicho factor de respuesta, se analizó por triplicado una
muestra que contiene el analito A y se añadieron 0.1000 mg/l del estándar interno
a cada una de las alícuotas, obteniéndose los siguientes datos:

Muestra Área de A u.a. Área de EI, u.a.

4 21010 11201
5 21315 11500
6 21240 11425

Calcular la concentración de A en mg/l

EI:

CT 0.100 mg/l mg/l 0.100 mg/l

FRA1 = AT = 13320 = 7.50 x 10-6 ua FRA2 = 12320

mg/l
= 8.11 x 10-6 ua

0.200 mg/l mg/l

FRA3 = 25150 = 7.45 x 10-6 ua

STD:

0.200 mg/l mg/l 0.100 mg/l

FRA1 = 25532 = 7.8 x 10-6 ua FRA2 = 11830 = 8.45 x

mg/l
-6
10 ua

0.200 mg/l mg/l

FRA3 = 24110 = 8.29 x 10-6 ua

7.8 x 10−6 mg/l

FRR1 = 7.50 x 10−6 = 1.044 ua

8.45 x 10−6 mg/l

FRR2 = 8.11 x 10−6 = 1.041 ua

8.29 x 10−6 mg/l

FRR3 = 7.45 x 10−6 = 1.042 ua
 Muestra

0.1mg/l
¿
C4 = (1.044) (21010ua) ( 11201 = 0.1958 mg/l

0.1mg/l
¿
C5 = (1.041) (21315ua) ( 11500 = 0.1929 mg/l

0.1mg/l
¿
C6 = (1.042) (21240ua) ( 11425 = 0.1937 mg/l

55 ppm
FRA= =1.69E-3 ppm Conc . prob.=( 1.69E-3 ppm ) ( 8626 )=14.58 ppm
32525

( 14.58 mg 10 ml
)( )( 50 ml
1000 ml 5 ml 0.8265 g )=
1.76 mg de cafeína
1 g de cafe
∑=3066
100
( 654 ) ( 3066 )=21.33 Ác . Láctico
100
( 533 ) ( 3066 )=17.38 Ác . Acético
100
( 205 ) ( 3066 )=6.68 Ác .Cí t r ico
100
( 268 ) ( 3066 )=8.74 Ác . Fumári co
100
( 918 ) ( 3066 )=29.94 Ác . Succínic o
100
( 488 ) ( 3066 )=15.91 Ác . Fórmico
Piridoxina= ( 10.5 mg 98.7 mg 0.1036 mg
100 ml )( 100 mg )
=
ml

Tiamin a=( 21.8 mg 9 1 .6 mg 0.1996 mg

100 ml )( 100 mg )
=
ml
 mg
0.1036
ml mg
FRA P .= =1.08E-5
9524.5 ml

mg
0.1996
ml mg
FRA T .= =4.37 E−5
4563.8 ml

mg
(
Conc . prob . P .= 1.08E-5
ml )
( 3954.1 )=0.973 m g/ml

mg
(
Conc . prob .T .= 4.37E-5
ml )
( 4736.9 )=0.2071 mg/ml

Piridoxina= ( 0.973
1ml
mg 100 ml 10 ml
)( )(
10 ml 4 ml ) (2 ml)=
48.65 m g
2 ml

Tiamina= ( 0.2071 mg 100 ml 10 ml

1ml )( 10 ml )( 4 ml )
(2 ml)=
103.9mg
2 ml

ng
200
ml mg
FRA= =0.0386
5180 ml
 mg
(
Conc . prob .= 0.0386
ml )
( 7444 )=287.33 n g /ml

( 287.33
1 ml
ng
)( 1ug
1000 ng )( 0.25 ml 0.071 u g
1ml )
=
1 ml
de plasma