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MATERIAL BM Nº 13
EXPRESIÓN GÉNICA.
1. LOS EXPERIMENTOS QUE DEMOSTRARON QUE EL DNA ES EL MATERIAL GENÉTICO
A comienzos del siglo XX se había demostrado que los genes se localizaban en los
cromosomas. Dada la composición nucleoproteína de estas estructuras, los ácidos nucleicos y
las proteínas eran las sustancias candidatas a constituir los genes. Las proteínas son
moléculas complejas y su actividad biológica ya estaba probada por aquellos años, los ácidos
nucleicos por el contrario, se consideraban moléculas simples y no se concebía que pudieran
almacenar tal cantidad de información.
El concepto de gen fue introducido en 1860 por Mendel (factor mendeliano) y recién alrededor
de 1920 se realizaron los primeros experimentos que revelaron al DNA como material genético.
Pese a que esta prueba demostraba que el DNA era el principio transformante (genes),
la comunidad científica se resistió a aceptar la importancia genética del DNA.
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El DNA es la macromolécula portadora de los genes: el DNA es el asiento molecular de la
información genética.
• El fenotipo de un organismo depende del fenotipo de sus partes, que a su vez está
determinado por el fenotipo de sus células componentes.
• El fenotipo de una célula está determinado por su química interna, que es controlada por las
enzimas que catalizan sus reacciones metabólicas.
• La función de una enzima depende de su estructura tridimensional específica, además
depende de su secuencia lineal específica de aminoácidos.
• Las enzimas y las proteínas estructurales, presentes en una célula, están determinadas por
el genotipo de la célula.
• Los genes especifican la secuencia lineal de aminoácidos en las proteínas y por lo tanto los
genes determinan el fenotipo.
• El fenotipo está determinado por el genotipo más la acción ambiental.
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4. FLUJO DE LA INFORMACIÓN GENÉTICA
F. Crick enunció lo que él llamó “el dogma central”, según el cual la información fluye del
DNA a las proteínas en una única dirección.
transcripción traducción
DNA ⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯ → RNA ⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯→ Proteínas
Así, el genotipo determina el fenotipo, dictando la composición de las proteínas. F. Crick fue
criticado por utilizar el término “dogma” ya que un dogma es algo que no se pone en duda. El
científico reconoció más tarde que debió llamarlo hipótesis central.
Una gran diversidad de experimentos han demostrado que el dogma se cumple, salvo en unas
pocas excepciones. La principal excepción corresponde a la trascripción inversa, en la cual la
información codificada por ciertos virus que contienen RNA se transcribe al DNA por la acción
de la enzima transcriptasa inversa. Por ello el dogma o hipótesis central hoy se presenta así.
transcripción traducción
⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯
DNA ←⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯ → RNA ⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯
⎯ → Proteínas
(transcriptasa
inversa)
La transcripción consiste en la síntesis de una molécula de RNA a partir de una de las cadenas
del DNA; esta cadena se denomina complementaria, molde o templado; la otra hebra del
DNA se denomina no complementaria. (Figura 4).
5’
5’
3’
3’ 3’
3’
5’
Figura 4. Representación del proceso de transcripción. Observe que la dirección de la trascripción siempre es de
5´ a 3´, es decir, la elongación o crecimiento de la molécula de RNA es siempre por el extremo 3´.
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Es importante destacar que los RNA que se sintetizan a partir de un fragmento de hebra
molde o templada de DNA puede terminar como: RNA mensajero, RNA de transferencia y/o
RNA ribosomal; estos dos últimos no llevan información genética para la síntesis de una
proteína, pero son imprescindibles en el proceso.
Todos los RNAs se sintetizan por medio de reacciones catalizadas por RNA polimerasas,
gracias a la información contenida en el DNA que sirve de patrón o molde. La dirección
de la transcripción siempre va en el sentido 5’ a 3’.
A) Iniciación
La RNA polimerasa se une fuertemente cuando entra en contacto con una secuencia
específica de DNA, llamada promotor. En el promotor se encuentran dos cortas
secuencias situadas entre -35 y -10 nucleótidos del inicio (0) de la transcripción. La
misión de las secuencias promotoras es indicar dónde se inicia la transcripción, en cuál
de las dos hebras del DNA y en qué lugar (Figura 5).
DNA
-35 -10 0
TTGACA TATATT
Inicio de la transcripción
Figura 5. Centros promotores y sitio de inicio de la transcripción en la hebra molde o templado de DNA.
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B) Elongación.
Después de unirse al promotor, la RNA polimerasa abre una región localizada de la doble
hélice, de forma que expone los nucleótidos de ambas cadenas de una pequeña zona del
DNA. Una de las dos cadenas expuestas del DNA actúa como patrón para el apareamiento
de las bases complementarias y se inicia la formación de una cadena de RNA. De esta
forma, la cadena de RNA va creciendo nucleótido a nucleótido en dirección 5’ a 3’. El
proceso de elongación de la cadena continúa hasta que la enzima encuentra una segunda
secuencia especial del DNA, la señal de terminación.
C) Terminación
Existen diversas señales de terminación en el DNA molde que son secuencias que
desencadenan la separación de la enzima RNA polimerasa de la cadena molde y del RNA
transcrito.
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D) Maduración
Intrón
Transcrito
Intrones
Empalme
m RNA
Exón Exón Exón AAAAAA(A)n
5`
El número de intrones varía para cada gen, sin embargo, su número aumenta a medida
que el organismo es más complejo y de reciente evolución. Se ha propuesto que los
intrones promueven la recombinación genética (vía crossing-over), y por lo tanto
aumentan la velocidad de evolución (de cambio).
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5. CÓDIGO GENÉTICO
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6. TRADUCCIÓN O SÍNTESIS DE LAS CADENAS POLIPEPTÍDICAS
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6.3. tRNA, el vehículo de los aminoácidos.
Los tRNA son las moléculas adaptadoras que permiten traducir el código de nucleótidos a
aminoácidos para la síntesis de proteínas. Reconocen tripletes de nucleótidos (codones) por
un extremo de su molécula (anticodón) y en el otro extremo (3’) llevan un determinado
aminoácido, que la maquinaria traduccional (el ribosoma) se encarga de unir covalentemente
con otros aminoácidos, siguiendo en este caso el molde de tripletes que trae el mRNA.
Aminoácido leucina
Antico dón
Codón
↑
Aminoacil + tRNA sintetasa
Algunos investigadores se refieren a esta reacción como la carga del tRNA. La energía
usada en la carga del aminoácido a su correspondiente tRNA, queda depositada en la unión
química entre el aminoácido y el tRNA. Esta energía será utilizada posteriormente por la
actividad de la peptidil transferasa presente en la subunidad mayor del ribosoma para la
formación del enlace peptídico.
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6.5. Etapas de la síntesis de cadenas polipeptídicas.
A) Iniciación.
Es la unión de la subunidad menor a la región del mRNA que contiene el codón de inicio
AUG. Posteriormente se une el tRNA iniciador cargado con el residuo N-formilmetionina. Por
este motivo, el primer aminoácido incorporado durante la síntesis de muchas proteínas
bacterianas es una metionina modificada, la N-formilmetionina(Figura 11).
El inicio es algo diferente en los eucariontes, donde el mRNA es reconocido por la subunidad
menor sólo cuando ésta ha unido previamente la molécula de tRNA iniciador cargado con el
residuo aminoacídico metionil, y algunos factores de iniciación eucarióticos.
B) Elongación.
2) Formación del primer enlace peptídico cuando la N-formilmetionina del tRNA iniciador
se une al residuo aminoacídico unido al segundo tRNA ubicado en el sitio A. El ribosoma se
desplaza tres nucleótidos en dirección del extremo 3´ del mRNA, quedando libre un nuevo
sitio A.
3) Los procesos citados se repiten de forma sucesiva codón tras codón. Se calcula que se
agregan a la cadena, en promedio, cinco aminoácidos por segundo, deteniéndose la
incorporación cuando al sitio A llega a alguno de los codones de término.
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Figura 12. Elongación de la cadena polipeptídica.
C) Terminación.
En esta etapa, el sitio A del ribosoma es abordado por alguno de los codones de término y
ocupado por un factor de terminación, RF en las bacterias y eRF (eucaryotic releasing factor)
en eucariontes. La cadena polipeptídica terminada se libera del último tRNA. Se disocian las
sub-unidades ribosomales y el mRNA, quedando disponibles la subunidades ribosomales
para ser utilizados en una nueva síntesis (Figura 13).
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7. MUTACIONES GÉNICAS O PUNTUALES
Sustituciones: se cambia una base por otra, según sea el problema causado, se
clasifican como: neutras, con sentido erróneo y sin sentido
Tipo de Sustituciones
Mensaje original
Sustitución neutra
Sin sentido
ADN 3’ TAC TCA ATC ACG ATA
ARN 5’ AUG AGU UAG UGC UAU
Proteína met ser Stop
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Deleción y Adición de bases: En estos tipos de mutaciones puntuales se corre el
marco de lectura de los tripletes del ARNm, y aparecen proteínas muy distintas .En la
deleción se pierde un par de bases del DNA indicándose en el esquema con una flecha la
perdida correspondiente a la base de la hebra molde y en la adición se incorpora un par
de bases en el ADN, también indicándose en el esquema con una flecha la base que se
adicionó en la hebra molde.
Deleción
Mensaje original
C
ADN 3’ TAC TCA AA ↑ A CGA TA...
ARN 5’ AUG AGU UUU GCU AU
Proteína met ser phe ala
Adición
Mensaje original
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GLOSARIO
Codón (triplete): Secuencia de tres nucleótidos en el mRNA que codifica para un aminoácido.
Expresión génica: Proceso por el cual la información codificada en los genes se convierte en las
estructuras operacionales presentes en las células. Los genes expresados incluyen a aquellos que
han sido transcritos a mRNA y luego traducidos a proteínas y aquellos que han sido transcritos a
RNA pero no traducidos a proteínas (p.ej. tRNA y rRNA).
Exón: Porción de una molécula de DNA en eucariontes que codifica parte de un polipéptido.
Genes: Unidades hereditarias que conforman los cromosomas. Estos segmentos específicos de
DNA controlan las estructuras y funciones celulares; la unidad funcional de la herencia. Secuencia
de bases de DNA que usualmente codifican para una secuencia polipeptídica de aminoácidos.
Inserción: Tipo de mutación en la cual se intercalan una o más bases de DNA en una secuencia
de bases de DNA preexistente. Esto produce un corrimiento del marco de lectura en el proceso
de síntesis proteica dando, por lo general, como resultado una proteína alterada.
Intrón: La secuencia de bases de DNA en eucariontes que interrumpe la secuencia de un gen que
codifica para una proteína, esta secuencia se transcribe al mRNA pero en un proceso de "corte y
empalme" se separa del mismo antes que el mRNA sea traducido a proteína.
Mutación: El cambio de un gen de una forma alélica a otra, cambio que resulta heredable.
Modificación hereditaria del material genético espontánea o inducida.
Polimerasa (DNA o RNA): Enzimas que catalizan la síntesis de ácidos nucleicos en base a
templados preexistentes, utilizando ribonucleótidos para el RNA y desoxirribonucleótidos para el
DNA.
Promotor: Sitio del DNA donde se unirá la RNA polimerasa para iniciar la transcripción.
RNA (ácido ribonucleico): Ácido nucleico formado por una cadena polinucleotídica. Su
nucleótido, consiste en una molécula del azúcar ribosa, un grupo fosfato, y una de estas cuatro
bases nitrogenadas: adenina, uracilo, citosina y guanina.
RNA mensajero: "Molde" para la síntesis proteica que es copiado de una de las hebras de DNA y
que se traduce en los ribosomas en una secuencia proteica. Se abrevia mRNA.
RNA polimerasa: Complejo enzimático que cataliza la síntesis de RNA (transcripción) utilizando
como molde la cadena de una molécula de DNA. En eucariontes existen tres RNA polimerasas: la I
sintetiza rRNA de gran tamaño; la II es la que forma al mRNA; y la III se encarga de transcribir
rRNA pequeños y tRNA.
Secuencia de bases: el orden de las bases de los nucleótidos en una molécula de DNA.
Traducción: La síntesis de una proteína sobre un "molde" de mRNA, consiste en tres etapas:
iniciación, elongación y terminación.
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PREGUNTAS
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6. El aminoácido alanina es codificado por los siguientes codones: GCU, GCC, GCA y GCG. Esto
significa que el código genético
A) está traslapado.
B) es universal.
C) es redundante.
D) combina cuatro bases nitrogenadas.
E) codifica cada aminoácido con cuatro codones.
I) determinar el fenotipo.
II) ejecutar la información genética.
III) duplicarse a si mismas.
A) Sólo I
B) Sólo II
C) Sólo III
D) Sólo I y II
E) I, II y III
8. Para la síntesis de una proteína de 617 aminoácidos, el RNA mensajero debe contar a lo
menos (sin considerar codón de inicio y de término), con
I) 1851 nucleótidos.
II) 617 tripletes.
III) 617 bases nitrogenadas.
A) Sólo I
B) Sólo II
C) Sólo III
D) Sólo I y II
E) I, II y III
9. Las mutaciones génicas pueden causar un desplazamiento del “marco de lectura” del gen y el
producto puede ser una proteína defectuosa. Este desplazamiento es causado por una
I) sustitución.
II) delección.
III) adición.
A) Sólo I
B) Sólo I y II
C) Sólo I y III
D) Sólo II y III
E) I, II y III
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10. Las mutaciones génicas denominadas sustituciones pueden ser
I) neutras.
II) sin sentido.
III) con sentido erróneo.
A) Sólo I
B) Sólo II
C) Sólo III
D) Sólo I y II
E) I, II y III
DO-BM13
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