Guias de Laboratorio

UNIVERSIDAD COLEGIO MAYOR DE CUNDINAMARCA
67 Años
PRIMER PERIODO ACADÉMICO DE 2015
BIOLOGÍA COMPARADA GUÍAS DE LABORATORIO
PROFESORA : MARTHA BERMÚDEZ

CORREO ELECTRÓNICO: martha_c_bermudez @yahoo.com
RECOMENDACIONES PARA EL TRABAJO EN EL LABORATORIO
 Antes de cada práctica los y las estudiantes deben estudiar la guía e investigar la razón
del uso como también los cuidados que se deben tener al manipular cada uno de los reactivos
que se usarán en la práctica. Cada estudiante debe llevar su guía para los laboratorios y talleres.
 Cada estudiante debe llevar su carpeta de apuntes.
 Para todas las prácticas se debe traer grupos, de uno de los libros recomendados en las
referencias bibliográficas.
NORMAS DE BIOSEGURIDAD
1. Es necesario llevar la bata blanca y el uniforme completo y guantes desechables para cada
práctica.
2. Nunca se debe pipetear con la boca ninguna sustancia.
3. No esta permitido comer, beber o fumar durante los laboratorios
4. Los reactivos químicos NUNCA deben olerse o probarse.
5. En el caso de que ocurra algún accidente, este debe ser notificado inmediatamente a la
profesora.
PRÁCTICA Nº1
MICROSCOPIO
1. MARCO TEÓRICO
Para el estudio del material biológico se usa el microscopio óptico. La utilidad de un microscopio depende
de su capacidad de resolver detalles.
FUNDAMENTO
Con el microscopio óptico los objetos se ven por diferencia de contraste entre ellos y el medio que los
rodea. Esta proviene que las células absorben o dispersan la luz en variable grado. Básicamente, este
microscopio actúa como mecanismo de ampliación en dos etapas:
La lente del objetivo proporciona el aumento inicial, y la lente del ocular se coloca de tal manera que
amplifica la imagen primaria por segunda vez. De está manera, el aumento total se obtiene multiplicando
el poder de ampliación del objetivo con el del ocular.
COMPONENTES :
SISTEMA DE SOPORTE :
 Pie
 El bastidor
 Portaobjetito revólver (Cambiador de objetivos)
 La platina
SISTEMA DE AUMENTO
A. El objetivo
Se halla en el extremo inferior del tubo. Costa de varios lentes desmontables colocados en un disco
giratorio.Cada objetivo tiene un poder de aumento diferente , el cual se indica por un número grabado en
la manga del lente.x10 aumenta 10 veces, el x40 lo hace 40 veces, el de x 25 , lo hace 25 veces y el
x100 lo hace 100 veces. Apertura numérica (AN) es la capacidad de reunión de la luz del objetivo. Esta
grabada en la manga del lente.
Poder de resolución. Se refiere a la capacidad de hacer perceptible detalles adyacentes cercanos,
separándolos y aclarándolos.
B. El ocular.
Se encuentra en el extremo superior, por donde mira el microscopista y consta de las siguientes
características. Los oculares están formados generalmente por un sistema de dos lentes plano convexas
simples o compuestas, separadas por un diafragma interno.
 Poder de aumento. El x4 aumenta 4 veces la imagen, el de x6 aumenta 6 veces. De esta
manera, si el objetivo se hace aumentar 40 veces y 6 veces mediante el ocular, el aumento total
será 6x40=240. En los laboratorios médicos, el poder de aumento de los microscopios oscila
entre 50 y 1000.
SISTEMA DE ILUMINACIÓN
 La fuente luminosa.
 El espejo
 El condensador (Sistema de lentes que concentra la luz en la preparación. Posee un tornillo de
control que permite mover este dispositivo).
 El diafragma. Se localiza en el condensador y permite regular la cantidad de luz que sale de
este.
 El filtro.
2. OBJETIVO: Familiarizar a los y las estudiantes con el manejo del microscopio y todas sus partes.
3. MATERIALES
Microscopio óptico
4. PROCEDIMIENTO
Dibuje el sistema de soporte de un microscopio óptico.
Dibuje el sistema de aumento de un microscopio óptico.
Dibuje el condensador de un microscopio óptico.
Dibuje el diafragma de un microscopio óptico.
Dibuje el sistema de ajuste de un microscopio óptico.

INSTRUCCIONES BÁSICAS:
Antes de observar cualquier preparación debe tener presente que el microscopio es un instrumento
delicado. Debido a esto debe utilizarse tomando en cuenta algunas instrucciones básicas:
a. Coloque el microscopio en una posición cómoda sobre una superficie plana. Tómelo siempre del
brazo o columna. Si desea cambiar la posición del instrumento levántelo y no lo arrastre por el
mesón.
b. Es conveniente chequear la limpieza de los diferentes lentes antes de comenzar la observación.
c. Encienda la lámpara, baje el condensador y abra el diafragma completamente.
Realización de la observación
a. Aleje el objetivo de la platina y coloque la lente de aumento menor.
b. Seleccione la preparación que desea observar, revísala para asegurarse que esta se encuentra
limpia.
c. Abra la pinza del carro, coloque la preparación con el cubreobjeto hacia arriba y cierre el carro.
d. Ajuste la posición del carro de modo que la región a observar quede justo en el orificio de la
platina.
e. Usando el micrométrico acerque la lente a la preparación. Cuando logre un foco aproximado
utilica el micrométrico (gírelo lentamente) para el ajuste de precisión.
f. Si desea cambiar el aumente, gire el revolver y seleccione el nuevo objetivo a utilizar. Debiera
bastar un pequeño ajuste del micrométrico para llegar a foco, si fuera necesario reajuste la
iluminación usando el condensador. Si quiere usar el lente de inmersión NUNCA lo use como
objetivo seco, puede rayarlo.
Uso del objetivo de inmersión
a. La preparación debe estar enfocada a 40X ( objetivo a seco),gire el revolver de modo que el
objetivo de inmersión quede en una posición intermedia (40X y 100X).
b. Coloque una gota de aceite de inmersión sobre el cubre objeto
c. Lleve el objetivo de inmersión al eje óptico

d. Utilizando el tornillo micrometrico lleve el objeto a foco, si lo requiere modifique la cantidad de luz
del condensador.
e. Cuando finalice la observación baje la platina, retire la preparación. Limpie tanto el objetivo como
la preparación con un paño humedecido con Xilol.
Finalizar las observaciones el microscopio y las preparaciones debe quedar limpio. Gire el revolver y deje
la lupa como lente de observación. Apague la lámpara y enrolle el cordón en el pie del microscopio.
Asegurase de colocar el microscopio en una superficie plana (no al borde de la mesa) cubierto por su
funda.
INVESTIGACIÓN:
1. El fundamento del microscopio de campo oscuro consiste en;
2. El fundamento del microscopio de fluorescencia consiste en;
3. El fundamento del microscopio electrónico consiste en;
4. Consulte la siguiente pagina :http://www.angelfire.com/bc2/biologia/microscopia.htm.
AVISO IMPORTANTE
1. Traer leído el tema de clase. Durante TODO EL SEMESTRE
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS.
Karp, Gerald. Biología celular y molecular conceptos y experimentos. 2011. McGraw-Hill

Interamericana Editores S.A de C. V. (México D.F.). Sexta edición.
Campbell, Mary. Bioquimica. 2010. Cengage Learning Editores, S.A. (México, D.F.). Sexta
edición.
Cooper, Geoffrey M. La célula 2010.5 edic. Marban Madrid.
Curtis, Helena. Biología. 2008. 7 Ed. Editorial Panamericana. Colombia.
Starr Cecil Ralph T . 2008. Biología. La unidad y diversidad de la vida. Decima

edición. Editorial Thomson..
Purves,W. Sadava D,Orians G, Heller C. Vida. La ciencia de la biología. 2004. Sexta Edición .
Editorial Panamericana. Colombia.
Audesirk,T,. La vida en la tierra : 2003 .6 Edición .Editorial Pearson Educación

PRÁCTICA Nº2
MICROSCOPIO CÉLULAS PROCARIOTAS
1. MARCO TEÓRICO
LAS células procariotas carecen de membranas internas por esta

razón no tienen organelos definidos. Dentro de las células
procariotas se encuentran las bacterias, estas tienen diferentes
formas y diferentes hábitat, algunas son benéficas para el
hombre y otras producen enfermedades. El material genético
está típicamente organizado en un solo cromosoma circular
situado en el citoplasma dentro de un cuerpo de forma irregular denominado
nucleoide. Las bacterias pueden también presentar plásmido, pequeñas
moléculas extra-cromosómicas de ADN que pueden contener genes
responsables de la resistencia a los antibióticos o factores de virulencia .
2. OBJETIVO: Familiarizar a los y las estudiantes con el manejo del microscopio e identificación de
células procariotas y reconocer los diferentes tipos de bacterias según su forma.
3. MATERIALES
Microscopio óptico y láminas.
5. PROCEDIMIENTO.
6. Siguiendo las instrucciones básicas descritas * observe las láminas que le son suministradas.
*INSTRUCCIONES BÁSICAS:
d. Coloque el microscopio en una posición cómoda sobre una superficie plana. Tómelo siempre del
mesón.
e. Es conveniente chequear la limpieza de los diferentes lentes antes de comenzar la observación.
f. Encienda la lámpara, baje el condensador y abra el diafragma completamente.
g. Aleje el objetivo de la platina y coloque la lente de aumento menor.
h. Seleccione la preparación que desea observar, revísala para asegurarse que esta se encuentra
limpia.
i. Abra la pinza del carro, coloque la preparación con el cubreobjeto hacia arriba y cierre el carro.
j. Ajuste la posición del carro de modo que la región a observar quede justo en el orificio de la
platina.
k. Usando el micrométrico acerque la lente a la preparación. Cuando logre un foco aproximado
l. Si desea cambiar el aumente, gire el revolver y seleccione el nuevo objetivo a utilizar. Debiera
f. La preparación debe estar enfocada a 40X ( objetivo a seco),gire el revolver de modo que el
g. Coloque una gota de aceite de inmersión sobre el cubre objeto
h. Lleve el objetivo de inmersión al eje óptico
i. Utilizando el tornillo macrométrico lleve el objeto a foco, si lo requiere modifique la cantidad de
luz del condensador.
j. Cuando finalice la observación baje la platina, retire la preparación. Limpie tanto el objetivo como
funda.
INVESTIGACIÓN:
1. Qué es taxonomia? Quien fue el padre de la taxonomia?

2. Como se clasifican taxonomicamente las diferentes especies sobre la tierra.
3. Describa las caracteristicas del reino monera.
4. Cómo se clasifica el reino monera’
5. Dibuje la célula procariota
6. Describa las diferentes formas que presentan las bacterias.
7. Por qué es necesario observar las bacterias utilizando métodos de coloración y el lente
de inmersión en microscopía óptica?
8. Anexe el dibujo del campo observado por usted al observar la lámina. ¿De qué color
aparecen teñidas las bacterias?
9. Describa la tinción de Gram.

10. Por qué hay bacterias Gram positiva y Gram negativas?
11. Identifique el tipo de bacteria observado en el cultivo (según su reacción a la tinción de
Gram) y explique por qué se observa de ese color
12. Consulte la siguiente pagina :http://www.angelfire.com/bc2/biologia/microscopia.htm
AVISO IMPORTANTE
1. Traer leído el tema de clase. Durante TODO EL SEMESTRE

edición.


PRÁCTICA Nº3
MICROSCOPIO CÉLULAS EUCARIOTAS
1. MARCO TEÓRICO
Las células eucariotas son aquellas que poseen membranas internas que
permiten la compartamentalización es decir la presencia de organelos con
morfología y funciones definidas.
2. OBJETIVO: Familiarizar a los y las estudiantes con el manejo del microscopio e identificación de
células eucariotas y reconocer los diferentes orgánulos.
3. MATERIALES
Microscopio óptico y láminas
7. PROCEDIMIENTO.
8. Siguiendo las instrucciones básicas descritas * observe las láminas que le son suministradas.
9. Represente lo observado en las láminas.
*INSTRUCCIONES BÁSICAS:
g. Coloque el microscopio en una posición cómoda sobre una superficie plana. Tómelo siempre del
mesón.
h. Es conveniente chequear la limpieza de los diferentes lentes antes de comenzar la observación.
i. Encienda la lámpara, baje el condensador y abra el diafragma completamente.
m. Aleje el objetivo de la platina y coloque la lente de aumento menor.

n. Seleccione la preparación que desea observar, revísala para asegurarse que esta se encuentra
limpia.
o. Abra la pinza del carro, coloque la preparación con el cubreobjeto hacia arriba y cierre el carro.
p. Ajuste la posición del carro de modo que la región a observar quede justo en el orificio de la
platina.
q. Usando el macrométrico acerque la lente a la preparación. Cuando logre un foco aproximado
r. Si desea cambiar el aumente, gire el revolver y seleccione el nuevo objetivo a utilizar. Debiera
k. La preparación debe estar enfocada a 40X ( objetivo a seco),gire el revolver de modo que el
l. Coloque una gota de aceite de inmersión sobre el cubre objeto
m. Lleve el objetivo de inmersión al eje óptico
n. Utilizando el tornillo micrometrico lleve el objeto a foco, si lo requiere modifique la cantidad de luz
del condensador.
o. Cuando finalice la observación baje la platina, retire la preparación. Limpie tanto el objetivo como
funda.
INVESTIGACIÓN:
13. Qué es “dominio” desde el punto de vista de la taxonomia?
14. Cuales dominios se encuentran desde el punto de vista de la taxonomia?

15. Describa la clasificación de las diferentes especies desde el punto de vista de la taxonomia?
16. Represente una célula eucariota animal.
AVISO IMPORTANTE
1. Traer leído el tema de clase. Durante TODO EL SEMESTRE.

edición.


PRÁCTICA Nº4
CROMATOGRAFÍA EN CAPA FINA PARA SEPARAR AMINOÁCIDOS
1. MARCO TEÓRICO
El término cromatografía se refiere de forma general a procedimientos de separación de componentes de

una muestra por distribución entre dos fases, una estacionaria y otra móvil. La técnica cromatográfica se
basa en colocar una pequeña cantidad de la muestra en una cromatoplaca que se sitúa en una cubeta
con un disolvente adecuado que asciende por acción capilar. Los componentes de la muestra se separan
al desplazarse por la placa a distinta velocidad, en función de su solubilidad en el disolvente y del grado
de retención de los adsorbentes de la placa.
FUNDAMENTO
La separación de aminoácidos por cromatografía capa fina, es un método cromatogràfico unidimensional

que permiten el fraccionamiento de dichos compuestos en grupos o individualmente. En la técnica
cualitativa, los aminoácidos son separados de acuerdo a su peso molecular, polaridad y son coloreados
con ninhidrina, los cuales son comparados con los controles y las soluciones patrón.
MUESTRA
Se requiere orina fresca u orina congelada. También se necesita sangre tomada del paciente en ayunas
en tubo tapa lila o tapa roja (suero o plasma).
2. OBJETIVO: Que el estudiante pueda diferenciar los aminoácidos por cromatografía en capa fina, según
su peso y polaridad.
3. MATERIALES
a. CROMATOPLACAS DE CELULOSA DE 10 x 10 ó de 20 x 10 cm: (Merck 1.05552).

b. SOLVENTE PARA AMINOÁCIDOS
4. PROCEDIMIENTO
1. Cortar las placas de acuerdo al número de muestras a analizar.

2. Preparar las placas de Acetato de celulosa, con la distribución de las muestras a analizar.
3. Incluir en la placa mínimo 2 controles de suero y orina normales, el patrón total de aminoácidos y un
control positivo.
4. Adicionar con puntas de pipeta las muestras a una distancia de 1.5 cm del borde inferior de la placa,
en un espacio de 0.5 cm. Se debe dejar entre muestra y muestra un espacio de 0.5 cm.
5. Activar la placa por 5 minutos a 45 °C.

6. Colocar en cámara 10 ml de solvente más 1ml de la solución reveladora (Ninhidrina) a la cámara
cromatográfica
7. Depositar la placa en la cámara y permitir que el cromatograma se desarrolle aproximadamente hasta
1.5 cm del borde superior.
8. Sacar la placa y dejar secar a una temperatura de 50°C
10 cm
0.5cm
1.5 cm
20 cm
5. ANÁLISIS DE RESULTADOS
Lectura e interpretación por comparación entre la distancia de migración de cada de los aminoácidos de
la muestra con los controles positivos y negativos.
INVESTIGACIÓN:
1. En qué enfermedad se aumenta del aminoácido fenilalanina?
2. Por qué decimos que la fenilalanina es un aminoácido apolar?
3. Consulte la página siguiente:
http://www.javeriana.edu.co/Genetica/Doc/Trastornos_Bioquimicos_de_Origen_Genetico.doc
PRÁCTICA Nº5
MICROSCOPIA: CÉLULA ANIMAL
1. MARCO TEÓRICO
Los seres vivos están compuestos por células, en algunos casos una sola célula conforma un organismo
completo es decir son unicelulares, en otros varias células constituyen un organismo pluricelular. Existen
diferentes formas y tamaños celulares, como también diferentes niveles de organización. Los procariotes
son simples no tienen membranas internas, coexiste compartimentos, el material genético ADN o RNA se
encuentran dispersos en el citoplasma. Los eucariotes presentan sistema interno de membranas que
forman los organelos. El núcleo es el organelo que contiene el material genético. El microscopio es el
elemento que ha permitido conocer la morfología celular. Las células en la mayoría de los casos no son
diminutas sino transparentes. Debido a esto los principales descubrimientos sobre la estructura interna de
la célula dependieron del hallazgo, a fines del siglo XIX, de diversas técnicas de preparación de los
materiales mediante fijación, corte y tinción que proporcionó él suficiente contraste para hacerlas visibles.
Además el perfeccionamiento del microscopio llegó a un alto grado y se pudieron obtener aumentos hasta
de 1500 veces.
FUNDAMENTO: Utilizar sustancias cargadas positiva o negativamente (Colorante de Wrigth) que se una
a moléculas cargadas que se encuentra en las células, suministrando un medio para estudiarlas; en este
caso, las células sanguíneas y determinar las variaciones y anormalidades de estructura forma y tamaño.
MUESTRA
Sangre capilar.
2. OBJETIVO: Que el estudiante pueda establecer comparaciones entre la morfología de diferentes

células.
3. MATERIALES
Microscopio.
Porta y cubreobjetos.
Alcohol metilico
Soporte tinciones
Cubeta de lavado
Colorante de Wright
Lanceta estéril.
4. PROCEDIMIENTO.
 A partir de una gota de sangre fresca, recién extraída de la punción en el pulpejo del dedo, se
realiza el extendido de sangre colocando una gota de sangre a un lado, en el centro del
portaobjetos.
 Colocar la lamina extensora sobre el portaobjetos de manera que la gota de sangre impregne
todo su borde y realizar un pequeño movimiento hacia atrás, realizar el extendido deslizando la
lamina extensora sobre el portaobjetos, con un movimiento fino y preciso.
 El extendido debe ser uniforme y tener tres zonas.
COLORACIÓN DE WRIGHT:
♣ Se deja secar el extendido de sangre completamente al aire, de manera horizontal.
♣ Se aplica el colorante de Wright de manera que cubra toda la lámina y se deja por 4
minutos.
♣ Luego se agrega el buffer de Giordano (agua destilada) y se sopla suavemente con una
pipeta hasta la aparición de un brillo metálico el cual se deja por otros 4 minutos.
♣ Luego lavamos la lámina con agua de la llave y colocamos a secar la lamina de manera
vertical para luego realizar la observación microscópica.
El colorante Wrigth está compuesto por eosina y azul de metileno. La eosina es un colorante con carga
negativa y se une a moléculas cargadas positivamente, este colorante se une a los grupos amino de las
proteínas y distingue detalles del citoplasma. El azul de metileno es un colorante básico, tiene carga
positiva y se une a moléculas cargadas negativamente como los ácidos nucleicos. Las células tienen
agua, proteínas, carbohidratos, lípidos, ácidos nucleicos. La observación al microscopio, se empezara con
el objetivo de menor aumento para localizar la mejor zona de la extensión por estar debidamente teñida,
ausente de precipitados y los glóbulos sin deformación.
Los glóbulos rojos (eritrocitos), son las células dominantes, teñidas de rojo por la eosina. No tienen núcleo
y son más delgadas por el centro que por los bordes. Los leucocitos son de mayor tamaño, tienen el
núcleo teñido por el azul de metileno. Su número es mucho menor y suele oscilar entre dos o tres por
campo del microscopio.
Hay varias clases de glóbulos blancos: Linfocitos, de tamaño parecido al de los glóbulos rojos y con un
solo núcleo. Monocitos, de mayor tamaño, poco frecuentes, con núcleo grande y redondo. Los
polimorfonucleares, llamados también granulocitos, por la estructura granular de su citoplasma, tienen los
núcleos de formas muy variadas.
Las plaquetas se observan como fragmentos de citoplasma de color violeta.
ACTIVIDADES:
♣ Realizar la observación microscópica de los extendidos de sangre.
♣ Reconocer las diferentes células presentes en el extendido de sangre.
♣ Establecer las diferencias morfológicas entre cada una de las células observadas
5. ANÁLISIS DE RESULTADOS.
Dibuje lo observado distinguiendo eritrocitos, monocitos, granulocitos, linfocitos y polimorfonucleares ( Ver
imágenes de la clase teórica.
Evaluación Cualitativa Para la evaluación formativa (2%) se tendrá en cuenta los siguientes
indicadores:
Participación, organización, esfuerzo, rendimiento en la realización de los trabajos asignados.
Evaluación Cuantitativa. La materia biología tiene una parte práctica y una teórica. Durante el
semestre se hará entrega de dos evaluaciones y una final .Cada evaluación tendrá un valor de
30% y la final 40%.Cada evaluación tiene una parte practica (50%) y una teórica (50%)
La nota de biología teórica se dará de la siguiente manera: Para la primera entrega de notas
Examen parcial 25%
Trabajo de investigación =23%
Evaluación formativa: (2 %)
Para la segunda entrega de notas
Exámen parcial 25 %
Trabajo de investigación =23%
Evaluación formativa: (2 %)
Evaluación final equivalente al 40%
.
AVISO IMPORTANTE

edición.


http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=genomeprj
Artículos de Publicación Científica. Revistas: Journals, Science, nature, PNAS, Cell,
Investigación y Ciencia.
PRÁCTICA Nº6
MICROSCOPIA: CÉLULA VEGETAL
1. MARCO TEÓRICO
Los seres vivos están compuestos por células, en algunos casos una sola célula conforma un organismo
completo es decir son unicelulares, en otros varias células constituyen un organismo pluricelular. Existen
diferentes formas y tamaños celulares, como también diferentes niveles de organización. Los eucariotes
presentan sistema interno de membranas que forman los organelos. El núcleo es el organelo que
contiene el material genético. El microscopio es el elemento que ha permitido conocer la morfología
celular. Las células vegetales son células eucariotas con membrana citplasma en donde se encuentran
diferentes plastidios, mitocondrias y vacuolas. Las células vegetales tienen diferentes formas y tamaños..
La pared puede ser primaria o primaria y secundaria. La pared primaria se compone de celulosa,
hemicelulosa y sustancias pécticas.
2. OBJETIVO: Identificar estructuras y funciones de diferentes partes de la célula vegetal.
3. MATERIALES
Microscopio.
Cebolla Allium cepa.
Azul de metileno
Lugol
Violeta de cristal o safranina
4. PROCEDIMIENTO.
a) Realizar cortes longitudinalmente en una cebolla Allium cepa. En uno

de éstos, separe una de las hojas de la parte interna.
b) Desprender la tenue capa delgada y transparente adherida a la cara
interna (cóncava) de la hoja.
c) Depositar un pequeño fragmento de epidermis en un porta-objeto,
extiéndalo evitando que se formen arrugas, adiciónele una gota de
agua, ubique el cubre - objetos y observe con menor y mayor aumento.
Esquematice sus observaciones.
d) Tome otro fragmento de epidermis de cebolla, sitúelo en el porta
objeto, agréguele dos gotas de colorante (azul, metileno o lugol) y
póngale el cubre-objeto. Observe con mayor o menor aumento y
dibuje. Identifique las estructuras observadas.
AVISO IMPORTANTE


edición.


http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=genomeprj
Artículos de Publicación Científica. Revistas: Journals, Science, nature, PNAS, Cell,
Investigación y Ciencia.
PRACTICA Nº 8
Microscopia HONGOS
1. MARCO TEÓRICO
Los hongos son un reino de seres vivos unicelulares o pluricelulares que no

forman tejidos y cuyas células se agrupan formando un cuerpo filamentoso muy
ramificado.
El conjunto de filamentos de un hongo se llama micelio, y cada filamento se
denomina hifa. A veces las células que forman el micelio pueden parecer falsos
tejidos. Las células de los hongos tienen una pared celular de quitina, sustancia
propia de los animales artrópodos. Raramente acumulan también celulosa.
Los hongos tienen alimentación heterótrofa, puesto que no pueden realizar la
fotosíntesis porque no tienen clorofila. Tienen digestión externa, pues vierten al
exterior enzimas digestivas, sustancias proteicas que actúan sobre los alimentos
dividiéndolos en moléculas sencillas, que atacan a los alimentos. Los hongos
absorben los alimentos después de digerirlos.
Los hongos viven en lugares húmedos, con abundante materia orgánica en
descomposición y ocultos a la luz del sol. También pueden habitar medios
acuáticos o vivir en el interior de ciertos seres vivos parasitándolos.
La reproducción de los hongos puede ser asexual, por esporas, y sexual.
2. OBJETIVOS
 Identificar las diferentes estructuras morfológicas de los hongos con ayuda del
microscopio y su afinidad por el colorante utilizado.
 Realizar preparaciones en fresco y en cinta adhesiva de distintas especies de
mohos.
3. MATERIALES
 Laminas portaobjetos y laminillas cubreobjetos

 Lancetas o agujas delgadas
 Cinta tranparente
 Azul de lacto fenol (azul de algodón)
 Muestra para analizar
o Esta muestra puede ser fruta (banano, naranja, manzana) o pan q se
hayan dejado 15 días antes de la prueba; en maduración.
4. PROCEDIMIENTO
PREPARACIÓN EN FRESCO
1. Colocar sobre un portaobjetos una gota de solución de lacto fenol no demasiado

grande.
2. Con la lanceta o con la aguja coger un poco de la muestra a observar en una
mínima cantidad procurando arrancarlo desde la base y disponerlo con cuidado
sobre la gota de lacto fenol, con la aguja o lanceta se distribuye el material en la
gota de manera que no quede amontonado.
3. Colocar el portaobjetos poco a poco y empezando por un lado para evitar que se
formen burbujas entre los dos vidrios.
PREPARACIÓN EN CINTA ADHESIVA
1. Colocar sobre un portaobjetos una gota de solución de lacto fenol no demasiado

grande.
2. Cortar un trozo de cinta adhesiva transparente de aproximadamente 2cm.
3. Tocar con el lado adhesivo de la cinta la superficie de la fruta o el pan con
presencia de hongos.
4. Pegar la cinta adhesiva sobre la gota del portaobjetos.
5. Eliminar el colorante sobrante con un papel de filtro.
LACTO FENOL AL AZUL ALGODÓN
Para preparaciones en fresco y tinciones de mohos.
Solución de azul algodón

Sol. saturada de azul algodón (azul anilina soluble).......10 ml
Glicerol..............10ml
Agua...................80 ml
Mezclar esta solución con lacto fenol a partes iguales
el azul de lacto fenol tiene tres funciones importantes a la hora de observar hongos del
tipo mohos obtenidos por aislamiento o de medios inoculados, el fenol destruye la
flora acompañante, el acido láctico conserva las estructuras fúngicas al provocar un
cambio de gradiente osmótico con relación al interior del fúngico generando una
película por así llamarlo protectora, pero el que realmente permite apreciar la
estructura fúngica es el azul de algodón el cual posee la capacidad de adherirse a la
quitina presente en las hifas y conidios de los hongos microscópicos y también los
macro pero es fundamentalmente utilizado en microscópicos u hongos imperfectos
como aspergillus o penicillium.
Investigación
Colocar en la imagen las siguientes partes:
- Micelio
- Hifas
- Septum
- esporas
PRACTICA N° 9
REINO DE LOS PROTISTAS
1. MARCO TEÓRICO
El Reino Protista está conformado por un grupo de organismos que presentan un conjunto
variado de características que impiden colocarlos en los reinos ya existentes de una manera
plenamente definida. Esto se debe a que algunos protistas pueden parecerse y actuar como
individuos del reino plantas, otros protistas pueden parecerse y actuar como organismos del reino
animal, pero los organismos del reino protista no son ni animales ni plantas.
Los individuos del reino de los protistas son los que presentan las estructuras biológicas más
sencillas entre los eucariotas (ya que su ADN está incluido en el núcleo de la célula), y pueden
presentar una estructura unicelular (siendo esta la más común), multicelular o colonial (pero sin
llegar a formar tejidos). Los protistas son autótrofos (en su mayoría) y producen un alto porcentaje
del oxígeno de la tierra.
Las características más comunes:
1. Son Eucariotas
2. No forman tejidos
3. Son autótrofos (por fotosíntesis), heterótrofos (por absorción) o una combinación de ambos.
4. Generalmente son aerobios pero existen algunas excepciones.
5. Se reproducen sexual (meiosis) o asexualmente (mitosis).
6. Son acuáticos o se desarrollan en ambientes terrestres húmedos
La Ameba es un protozoario heterótrofo que se caracteriza por su particular forma de

desplazarse; emitiendo pseudópodos (falsos pies) y asi se arrastra. El mismo patrón de
movimiento es utilizado por algunas células humanas como los macrófagos que se
encargan de atrapar bacterias y otros patógenos invasores a nuestro organismo.
Investigación :
Complete el siguiente cuadro, investigue y redacte con sus propias palabras.
SUB REINO PHYLU CARACTERISTICAS EJEMPLOS

M
PROTOFITA EUGLEN EJEMPLO:

S OZOA EUGLENA
(EUGLE
NIDOS)
Ilustración
1http://www.fcps.edu/islandcreekes/ecology/e
uglena.htm
PROTOFITA EJEMPLO:
S HETERO DIATOMEA
KONTOP
HYTA
(ALGAS
PARDAS
)
Ilustración
2http://www.ison21.es/2007/10/15/diatomeas
-para-la-industria/
PROTOFITA PYRROP EJEMPLO:

S HYTA GONIAULAX
(DINOFL
AGELAD
OS)
Ilustración
3http://recursostic.educacion.es/ciencias/biosf
era/web/alumno/2bachillerato/micro/contenid
os7.htm
PROTOZOOS SARCOD EJEMPLO:

YNA AMEBA
(SARCO
DINOS)
Ilustración
4http://jcoll.org/genoma/vida_microsubmarin
a/protozoos/amoeba.html
PROTOZOOS CILIOPH EJEMPLO:

ORA PARAMECIUM
(CILIAD
OS)
Ilustración
5http://jcoll.org/genoma/vida_microsubmarin
a/protozoos/paramecium.html
PROTOZOOS MASTIG EJEMPLO:

OPHORA TRYPANOSOMA
(FLAGE
LADOS)
Ilustración
6http://tolweb.org/Trypanosoma/98034
PROTOZOOS SPOROZ EJEMPLO:

OA PLASMODIUM
(ESPOR
OZOOS)
Ilustración
7http://es.wikipedia.org/wiki/Plasmodium_falc
iparum
GIMNOMIC MYXOMI EJEMPLO:

OTA CETES PHYSARUM
(HONGO
S
MUCILA
GINOSO
S)
Ilustración
8http://www.connecticutvalleybiological.com/
physarum-polycephalum-plate-p-11225.html
GIMNOMIC RHODO EJEMPLO:

OTA PHYTA CHONDRUS
(ALGAS
ROJAS)
Ilustración
9http://hydrodictyon.eeb.uconn.edu/courses/a
gae/
PRÁCTICA Nº10
CICLO CELULAR. CROMOSOMAS EN LA MITOSIS
1. MARCO TEÓRICO
La división celular es el proceso por el cual el material celular se divide en dos nuevas células
hijas. El ciclo celular es el proceso a través del cual se regula el crecimiento y división celular.
El ciclo celular está formado por cinco fases G1 S, G2 mitosis y citocinesis.
El proceso de reproducción celular conocido con el nombre de mitosis, puede ser estudiado
eligiendo un material constituido por células que se hallen en continua división. Esta condición
la reúnen los meristemos terminales o primarios, tales como los que se encuentran en el ápice
de las raíces.
Un bulbo de cebolla cuya base se mantenga en contacto con el agua durante 4 ó 5 días, nos
proporciona abundante cantidad de raicillas jóvenes, muy apropiadas para la obtención de
muestras destinadas a observar figuras de mitosis.
2. OBJETIVO: Reconocer las distintas etapas de la mitosis.
3. MATERIALES
Microscopio.
Cebollitas con raíces
Cubeta de lavado
Pipeta cuenta gotas
Colorantes Orceína A y B
Pinzas tijeras.
Agua destilada.
Lanceta estéril
Vasos de precipitado
Vidrio de reloj.
4. PROCEDIMIENTO
Etapas de la mitosis
 Traer fotocopias de las etapas de la mitosis, ordénelas secuencialmente y señale los
eventos más importantes de cada etapa.
Estudio de la mitosis en la células de la raíz de cebolla.
 Llenar un vaso de precipitado con agua y colocar un bulbo de cebolla (Allium cepa) sujeto
con dos o tres palillos de manera que la parte inferior quede inmersa en el agua. Al cabo de
3 a 4 dias aparecerán numerosas raicillas en crecimiento de unos 3 o 4 cm de longitud.
 Cortar con las tijeras unos 2-3 mm del extremo de las raicillas y depositarlo en un vidrio de
reloj en el que se han vertido 2-3 ml de orceina A.
 Calentar suavemente el vidrio de reloj a la llama del mechero durante uno 8 minutos,
evitando la ebullición, hasta la emisión de vapores tenues.
 Con las pinzas tomar uno de los apices o extremos de las raicillas y colocarla sobre un
portaobjetos, añadir una gota de orceina B y dejar actuar durante 1 minuto.
 Colocar el cubreobjetos con mucho cuidado sobre la raíz. Con el mango de una aguja
enmangada dar unos golpecitos sobre el cubre sin romperlo de modo que la raíz quede
extendida.
 Sobre la preparación colocar unas tiras de papel de filtro, 5 o 6. Poner el dedo pulgar sobre
el papel de filtro en la zona de cubreobjetos y hacer una suave presión, evitando que el
cubre resbale. Si la preparación esta bien asentada no hay peligro de rotura por mucha
presión que se realice.
Observar al microscopio.
 La orceina A reblandece las membranas celulares y la B completa el proceso de tinción.
Con la presión sobre el porta de la preparación se logra una extensión y difusión de las
células del meristemo de la cebolla. La preparación presenta el aspecto de una dispersión
de células por todo el campo que abarca el microscopio. Se observan células en diversas
fases o estados de división célular. Se ven los cromo somas teñidos de morado por la
orceina. El aspecto reticulado, así como el mayor tamaño de algunos núcleos, corresponde
a las células que se encontraban en los procesos iniciales de la división mitotica.
5.POSLABORATORIO
Describe las fases de la mitosis que has observado y su significado.

¿Por que los cromosomas se tiñen de morado? para completar el punto anterior observe al
microscopio con el objetivo de inmersión una preparación de raíz de cebolla teñida con
hematoxilina férrica. Identifique y dibuje algunas etapas de la mitosis.
¿Cual es el principal objetivo de la mitosis?
¿Cómo distinguiría en sus preparaciones una célula Interfásica?
6. ANÁLISIS DE RESULTADOS.
Compare los resultados obtenidos en la práctica con las imágenes vistas en la clase teórica, si
existen diferencias explique la razón.
AVISO IMPORTANTE

edición.


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UNIVERSIDAD COLEGIO MAYOR DE CUNDINAMARCA

PROFESORA : MARTHA BERMÚDEZ

RECOMENDACIONES PARA EL TRABAJO EN EL LABORATORIO

Dibuje el sistema de soporte de un microscopio óptico.

Dibuje el sistema de aumento de un microscopio óptico.

Dibuje el condensador de un microscopio óptico.

Dibuje el diafragma de un microscopio óptico.

Dibuje el sistema de ajuste de un microscopio óptico.

b. Es conveniente chequear la limpieza de los diferentes lentes antes de comenzar la observación.

c. Encienda la lámpara, baje el condensador y abra el diafragma completamente.

a. Aleje el objetivo de la platina y coloque la lente de aumento menor.

e. Usando el micrométrico acerque la lente a la preparación. Cuando logre un foco aproximado

utilica el micrométrico (gírelo lentamente) para el ajuste de precisión.

objetivo seco, puede rayarlo.

Uso del objetivo de inmersión

objetivo de inmersión quede en una posición intermedia (40X y 100X).

b. Coloque una gota de aceite de inmersión sobre el cubre objeto

c. Lleve el objetivo de inmersión al eje óptico

la preparación con un paño humedecido con Xilol.

1. El fundamento del microscopio de campo oscuro consiste en;

2. El fundamento del microscopio de fluorescencia consiste en;

3. El fundamento del microscopio electrónico consiste en;

4. Consulte la siguiente pagina :http://www.angelfire.com/bc2/biologia/microscopia.htm.

1. Traer leído el tema de clase. Durante TODO EL SEMESTRE

Karp, Gerald. Biología celular y molecular conceptos y experimentos. 2011. McGraw-Hill

Cooper, Geoffrey M. La célula 2010.5 edic. Marban Madrid.

Curtis, Helena. Biología. 2008. 7 Ed. Editorial Panamericana. Colombia.

Starr Cecil Ralph T . 2008. Biología. La unidad y diversidad de la vida. Decima

Audesirk,T,. La vida en la tierra : 2003 .6 Edición .Editorial Pearson Educación

MICROSCOPIO CÉLULAS PROCARIOTAS

LAS células procariotas carecen de membranas internas por esta

e. Es conveniente chequear la limpieza de los diferentes lentes antes de comenzar la observación.

f. Encienda la lámpara, baje el condensador y abra el diafragma completamente.

k. Usando el micrométrico acerque la lente a la preparación. Cuando logre un foco aproximado

utilica el micrométrico (gírelo lentamente) para el ajuste de precisión.

objetivo seco, puede rayarlo.

Uso del objetivo de inmersión

objetivo de inmersión quede en una posición intermedia (40X y 100X).

g. Coloque una gota de aceite de inmersión sobre el cubre objeto

h. Lleve el objetivo de inmersión al eje óptico

i. Utilizando el tornillo macrométrico lleve el objeto a foco, si lo requiere modifique la cantidad de

luz del condensador.

la preparación con un paño humedecido con Xilol.

1. Qué es taxonomia? Quien fue el padre de la taxonomia?

3. Describa las caracteristicas del reino monera.

4. Cómo se clasifica el reino monera’

5. Dibuje la célula procariota

6. Describa las diferentes formas que presentan las bacterias.

9. Describa la tinción de Gram.

12. Consulte la siguiente pagina :http://www.angelfire.com/bc2/biologia/microscopia.htm

1. Traer leído el tema de clase. Durante TODO EL SEMESTRE

Karp, Gerald. Biología celular y molecular conceptos y experimentos. 2011. McGraw-Hill

Cooper, Geoffrey M. La célula 2010.5 edic. Marban Madrid.

Curtis, Helena. Biología. 2008. 7 Ed. Editorial Panamericana. Colombia.

Starr Cecil Ralph T . 2008. Biología. La unidad y diversidad de la vida. Decima

Audesirk,T,. La vida en la tierra : 2003 .6 Edición .Editorial Pearson Educación

MICROSCOPIO CÉLULAS EUCARIOTAS

9. Represente lo observado en las láminas.

h. Es conveniente chequear la limpieza de los diferentes lentes antes de comenzar la observación.

i. Encienda la lámpara, baje el condensador y abra el diafragma completamente.

m. Aleje el objetivo de la platina y coloque la lente de aumento menor.

q. Usando el macrométrico acerque la lente a la preparación. Cuando logre un foco aproximado

utilica el micrométrico (gírelo lentamente) para el ajuste de precisión.