SOLUCION TALLER CRECIMIENTO MICROBIANO Y CUANTIFICACION

CAMILO ANDRES PADILLA RANGEL COD 6171121

FUNDACION UNIVERSIDAD DE AMERICA
MICROBIOLOGIA INDUSTRIAL

1.. ¿Cuál fue el objetivo de la investigación?

El objetivo de la investigación fue estudiar cepas recombinantes de
Saccharomyces cerevisiae a condiciones y medios de cultivo diferentes, donde
el principal fue la melaza de caña de azúcar. Todo esto se hizo para obtener
las gráficas de su cinética y con esas graficas observar el crecimiento y la
producción de etanol.
Con la información obtenida y el análisis de las gráficas, en el campo de los
ingenieros las gráficas sirven para tomar una decisión respecto al
microorganismo y el sustrato que se debe utilizar en el experimento a escala
industrial, también nos da un valor exacto de las horas que debemos dejar
producir al microorganismo antes de que entre a la fase de muerte, y así poder
obtener la mayor producción de etanol.
2.. ¿Qué método de cuantificación se empleó en el estudio? Describa
mediante un diagrama de flujo la metodología empleada.
Se hizo seguimiento al crecimiento celular por el método de peso seco ya que
este es el que se emplea para hongos y levaduras.
Evalúa biomasa seca
Lavado
Tiempo y temperatura
Balanza analítica
Hongos y levaduras
3.. Cuáles fueron las condiciones de operación del reactor, según lo visto
en clase (temperatura, PH, Agitación Eh, ETC).
Es un microorganismo osmofilico ya que Los organismos osmófilos son
microorganismos adaptados a ambientes con altas presiones osmóticas, tales
como altas concentraciones de azúcar, y como pudimos observar en el artículo
cuando S. cerevisiae se encuentra cultivada a altas concentraciones de azúcar
(menores a 30 – 40%) se incrementa la producción de etanol.
Eh: se da en un medio positivo ya que el microorganismo es aerobio
facultativo, el oxígeno es su donador de electrones.
pH: El pH inicial que se utilizo fue de 5 ya que a los Hongos y levaduras les
gusta los pH ácidos. En base a esto podemos clasificarlo como un acidofilo.
Temperatura: la temperatura óptima para el crecimiento de Mesofilos es de 37
a 39 grados. Las levaduras están en el rango de 25°C a 30°C perteneciendo
también a los mesofilos. En el articulo la temperatura que se utilizo fue de 30
°C siendo la temperatura más óptima para S. cerevisiae.
Aw: su Aw optimo es de 0,96 – 0,99 ya que en este rango es donde crecen las
levaduras, por debajo de 0,96 no crecerá.
Agitación: el valor de agitación que se utilizó en el artículo fue de 150 RPM

4.. ¿Cada cuanto tiempo fueron los muestreos para hacer la cinética de
crecimiento?
Los muestreos se hicieron cada 5 horas, como se puede observar en el eje x
de cada gráfica.
5.. Indique que tipo de metabolito se está produciendo según lo visto en
clase y por qué.
Se está produciendo un metabolito tipo 1 ya que el consumo de sustrato, el
crecimiento y la formación del producto ocurren simultáneamente, esto se
puede observar en las gráficas del artículo. Además, que el producto deriva
directamente del catabolismo.
6.. Tome una de las gráficas de cinética y explique que se concluye de la
imagen, ojo conclusión personal no la del artículo.

En la gráfica podemos observar la producción de etanol a determinados

tiempos. Sabemos que tenemos un metabolito primario (asociado al
crecimiento), entonces sabiendo esto, el máximo crecimiento de el
microorganismo fue a las 30 h, por lo tanto, ese también es el tiempo de
fermentación, y sería el momento en el que se debe apagar el reactor antes de
que el microorganismo entre en fase de muerte, porque si esto pasa no
sabremos cuantos microorganismos hay vivos y hay muertos gracias a que el
método de cuantificación que se usó no grafica fase de muerte.
Basándonos en esta gráfica y en que es un metabolito asociado al crecimiento,
su fase exponencial va desde aproximadamente las 7 horas a las 18 horas.
7.. ¿Según el artículo cuales fueron los macronutrientes adicionados al
medio de cultivo para el crecimiento de la bacteria? Indique cada uno de
los macronutrientes empleados.
YPD (yeast extract-peptone-dextrose) extracto de levadura-peptona-dextrosa.
La peptona actúa como fuente de carbono, nitrógeno, vitaminas y minerales ya
que es una proteína hidrolizada.
La dextrosa es una fuente de carbohidratos, y los carbohidratos son
biomoléculas compuestas principalmente de carbono, hidrógeno y oxígeno,
aunque algunos de ellos también contienen otros bioelementos tales como
nitrógeno, azufre y fósforo.
Melaza de caña de azúcar: Es una fuente de hidratos de carbono entones
obtenemos macronutrientes esenciales como carbono, hidrógeno, oxígeno
nitrógeno, azufre y fósforo, también es una fuente de minerales, pero los más
importantes en este caso es el magnesio, calcio, potasio.
8.. Indique si usaron micronutrientes y cuales fueron.

La melaza de azúcar es una fuente de cobre, zinc y cobalto los cuales son
micronutrientes.
En el YPD los micronutrientes están implicados implícitamente ya que el
extracto de levadura proporciona vitaminas del complejo B, que estimulan el
crecimiento bacteriano, en donde están elementos como el cobalto, molibdeno
entre otros.
9.. ¿Cuál fue el resultado más importante de la investigación?

El resultado más importante de la investigación fue que se pudo analizar la

reacción de la cepa en dos medios diferentes de cultivo y a diferentes
concentraciones. Para determinar el sustrato y las condiciones más eficientes
para una producción a mayor escala, además de saber los tiempos exactos de
crecimiento y de máxima producción del microorganismo gracias a las gráficas
que se obtuvieron. En el caso del artículo se observa que el mayor
rendimiento se obtuvo con la cepa recombinante 9.1 cultivada en melaza,
seguida de la cepa recombinante 4.2 en medio YPS. Bajo estas condiciones,
las eficiencias alcanzadas por las cepas fueron 98.81% y 97.94%,
respectivamente.
De lo anterior podemos concluir que la melaza además de ser un sustrato
económico, tiene macronutrientes esenciales y puede utilizarse para una
producción de etanol a gran escala con una eficiencia del 98,81%