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FACULTAD DE MEDICINA
AUTORES:
MARIN, FRANCISCO
SCIARONI, OSCAR
TRABAJO PRÁCTICO 1
CONTENIDOS: EL LABORATORIO EN MICROBIOLOGIA –
BIOSEGURIDAD – EL MÉTODO EXPERIMENTAL – LAVADO DE
MANOS – TOMA DE MUESTRA AMBIENTAL -
RIESGO BIOLÓGICO
CONDUCTAS A SEGUIR ANTE CASOS DE INCENDIO
1. El primer día de concurrencia al laboratorio del piso 14, identifique las 2 salidas de
emergencia (que están indicadas por letreros verdes) y la forma de operar las puertas de
salida. Al abrirlas sonará una alarma. NO LAS USE INNECESARIAMENTE. Hay una
salida hacia las escaleras del lado de Junín y otra hacia las del lado de Uriburu.
2. Identifique la ubicación de los matafuegos y la manera de operarlos.
3. Si hay un foco de incendio chico, el Instructor intentará apagarlo con los
matafuegos. Si no se controla inmediatamente, EVACÚE EL LUGAR.
4. Identifique el foco de incendio, CIERRE TODAS LAS PUERTAS DE LOS
LABORATORIOS para evitar la circulación de aire y abandone INMEDIATAMENTE EL
PISO por la salida de emergencia contraria al incendio.
5. Si hubiera mucho humo, respire a través de un pañuelo y desplácese agachado
hacia la salida de emergencia.
6. No entre en pánico ni corra. Camine rápido y en forma contínua. Antes de descender POR
LAS ESCALERAS (NUNCA POR EL ASCENSOR) mire hacia abajo para ver si hay humo
denso en los pisos inferiores. En ese caso NO descienda. Comunique la situación a los
números indicados en el punto 7 y su ubicación en la Facultad.
7. Cuando esté a salvo llame al 911 indicando el lugar del incendio y a la Oficina de
Seguridad de la Facultad: 5950-9500 Int 2024. O, DIRECTAMENTE “2024” SI LLAMA
DESDE UN TELÉFONO INTERNO.
El método científico (del griego: -µετά = hacia, a lo largo- -οδός = camino-; y del latín
scientia = conocimiento; camino hacia el conocimiento) es un procedimiento de investigación
usado para producir los conocimientos que forman una ciencia. Es un proceso sistemático,
que permite obtener el conocimiento basándose en la observación y la experimentación
(“donde no hay método científico no hay ciencia”; Bunge, M. l981). Para que haya ciencia
debe haber dos componentes, “un conjunto de conocimientos” y “un método apropiado para
su estudio: la observación”, y la observación ha de ser sistemática y controlada.
El método científico es tan general que lo pueden utilizar investigadores de todas las
disciplinas. Dadas sus características, el método científico es también un proceso que se
produce en el tiempo y que comprende varias fases, cada una de las cuales comprenden y
necesitan la anterior.
1. Observación:
2. Planteamiento del problema
3. FORMULACIÓN DE LA HIPÓTESIS
4. Comprobación de la hipótesis=> EXPERIMENTACION
5. Análisis y conclusión => Construcción de leyes, teorías y modelos.
1. Observación: de la curiosidad por tratar de explicar los fenómenos que ocurren, el ser
humano plantea una pregunta a resolver.
2. Planteamiento del problema: No todo problema tiene resolución científica; los
problemas científicos son exclusivamente aquellos que se plantean sobre un trasfondo
racional y sistemático y se estudian por la aplicación del método científico, con el
objetivo primario de incrementar nuestro conocimiento. Los problemas por resolver
implican la necesidad de hallar la respuesta a una cuestión indagada. Entonces debe
tener ciertas consideraciones:
a. Debe existir un “cuerpo de conocimientos” en que se pueda insertar el
problema, de tal modo que sea posible tratarlo.
b. Se tiene que expresar en forma clara, con términos lógicos y precisos.
c. Se deben incluír las variables involucradas en el estudio.
d. Debe estar bien delimitado para evitar confusiones.
3. Hipótesis: La hipótesis es aquella explicación anticipada que le permite al científico
asomarse a la realidad (López, 1990). Una hipótesis es una suposición, que da
respuesta tentativa al problema de investigación; que permite establecer relaciones
entre hechos.
➢ Características de las hipótesis:
o Tienen que ser claras
o Deben tener referentes empíricos; ninguna hipótesis utilizable debe
llevar a juicios morales
o Deben ser susceptibles de verificación
o Deben permitir la conexión entre el marco teórico y el campo
específico de estudio.
o Tienen que apoyarse en conocimientos previos comprobados.
o Deben tener el mismo alcance que el problema propuesto.
o Deben conducir a la predicción de fenómenos reales.
➢ Tipos de hipótesis:
o De una sola variable: se las denomina hipótesis descriptivas ya que
plantean sólo la descripción del objeto de estudio
o De dos variables (relación causa-efecto): se las llama hipótesis
explicativas porque proponen estudiar las causas y los efectos de los
fenómenos.
o De dos o más variables con una relación asociativa: se denominan
hipótesis asociativas. La modificación de una variable, también
modifica la otra (sin una relación causa-efecto)
¿QUÉ ES UN EXPERIMENTO?
Cabe recordar que existen aquellas condiciones que el experimentador puede controlar o
modificar (VARIABLE INDEPENDIENTE) y aquellos que no dependen del mismo, y
pueden ser el producto del experimento o lo que se quiera observar (VARIABLE
DEPENDIENTE); así como aquellas que se mantienen constantes (VARIABLES
CONTROLADAS).
CONTROL POSITIVO
CONTROL NEGATIVO
CONTROL INTERNO
El control del investigador se ejerce tanto en los estímulos que debe provocar al proceso
como en el resultado mismo. Las fases principales del método experimental son la
observación cuidadosa, la reflexión acerca de las hipótesis, la predicción de sus
consecuencias, la planeación del experimento para someter la hipótesis a prueba, el diseño
del experimento, la ejecución del experimento planeado, la obtención de resultados y la
confrontación entre los resultados experimentales y las predicciones teóricas para la
interpretación de las conclusiones
EN RESUMEN:
En el método científico EXPERIMENTAL (ya que hay otros que no lo son, como por
ejemplo en la matemática o la lógica) esquemáticamente se cumplen los siguientes pasos:
CONOCIMIENTO PREVIO: Es lo que se acepta como cierto de un hecho determinado
hasta antes de comenzar el trabajo de investigación. Por ejemplo, es lo que se aprende en la
Universidad como verdadero.
OBSERVACIÓN: Casual o provocada.
CONTRADICCIÓN: La observación no concuerda con lo que se acepta como “cierto” en
ese momento.
HIPÓTESIS: Es una explicación teórica que el investigador elabora como para poder
explicar el nuevo fenómeno.
EXPERIMENTACIÓN: Es la puesta a prueba de la hipótesis a través de experimentos
controlados, usando técnicas precisas, repitiendo el experimento 3 veces y empleando los
controles positivos, negativos e internos deseados.
RESULTADOS: Es lo que dio. El investigador sólo lo describe. No los interpreta. De tal
forma que cualquier otro investigador pueda repetir el experimento y reproducir los
resultados en forma independiente, aunque luego arribe a otras conclusiones. A esto se le
denomina REPRODUCIBILIDAD.
CONCLUSIONES: Es la interpretación de los resultados por parte del investigador. Los
mismos resultados deberían llevar a investigadores independientes a las mismas
conclusiones, pero a menudo esto no es así. Es lo que en la redacción de los trabajos de
investigación se desarrolla en el tópico de DISCUSIÓN, donde el investigador afirma algo y
después dice el por qué de esa afirmación y también presenta alternativas lógicas para
explicar el hecho.
Si los resultados concuerdan con la hipótesis se considerará que es válida y que –por
consiguiente- la explicación que plantea es verdadera. Si ocurriera lo contrario la
hipótesis será falsa y habrá que elaborar otra.
4. En otra placa de Petri apoye nuevamente las yemas de los dedos e identifíquela
con el número 2. Cierre la Placa y coloque las 2 placas en la estufa de 37°C.
1. Tome las placas de Petri de la estufa (las del experimento de las manos y las del repique),
obsérvelas y responda:
A ¿Hay colonias bacterianas en la placa de “control interno”?
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B. ¿Hay colonias bacterianas en la placa de “control negativo”?
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C. ¿Hay colonias bacterianas en la placa de ¿control positivo?
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D. ¿Qué conclusiones saca de esto?
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E. ¿Hay colonias bacterianas en la placa donde colocó sus dedos sin lavar?
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F ¿Y en la placa en la que colocó sus dedos lavados?
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G ¿Y en la que colocó sus dedos luego de haberlos sumergido en antiséptico? Eventualmente,
¿cuántas hay en cada una? ¿Puede hacer una relación matemática entre ellas?
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H. ¿QUÉ CONCLUSIONES FINALES SACA DE ESTE EXPERIMENTO?
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Materiales:
OBJETIVOS ESPECÍFICOS:
➢ Desarrollar los conceptos de medios simples, enriquecidos, selectivos y diferenciales.
➢ Caracterización de una bacteria a partir de un caldo de cultivo.
Materiales:
Materiales:
➢ Portaobjetos y cubreobjetos
➢ Gancho y aguja
➢ Mechero de Bunsen
Procedimiento:
El ayudante mostrará en primer lugar todos los pasos de la coloración para que luego cada
alumno realice la misma secuencia.
➢ Queme la aguja y el gancho (o dos ansas) hasta que estén al rojo y déjelos enfriar
al aire. (EL ANSA Y EL GANCHO SE ESTERILIZAN CON LA LLAMA DEL
BUNSEN - NO USAR LA LLAMA AMARILLA)
➢ Abra el cultivo cerca del mechero y tome una muestra SIN ROMPER EL AGAR.
EJERCITACIÓN:
1. Esquematice los tubos que recibió y descríbalos brevemente (morfología, color,
aspecto). NO SE OLVIDE DE COLOCAR EL NOMBRE DEL HONGO
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2. Esquematice lo que visualiza al microscopio y trate de describir qué es lo que
observa: Micelio hialino o pigmentado, tabicado o no, ¿presenta ramificaciones? ¿Y
elementos de fructificación?
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TRABAJO PRÁCTICO 2
OBJETIVO GENERAL: Conocer y desarrollar habilidades útiles en la práctica clínica.
OBJETIVOS ESPECÍFICOS:
✓ Observar y explicar los fundamentos de las pruebas intradérmicas.
✓ Recordar las partes de la jeringa y los fundamentos de la técnica de
intradermorreacción.
✓ Desarrollar los conceptos de antígenos y respuesta inmune.
✓ Explicar los fundamentos del aspirado nasofaríngeo y su utilidad frente al diagnóstico
de infecciones virales.
✓ Poder clasificar e identificar parásitos a partir de la observación.
CONSIDERACIONES GENERALES:
Los alumnos al final del TP deberán adquirir el conocimiento de cómo se realiza una
intradermorreacción, qué es lo que se observa (respuesta inmune celular) y cuál es la utilidad
en la práctica clínica hoy en día: diagnóstico/pronóstico de TBC, HISTOPLASMOSIS, etc.
➢ Practicar la intradermorreacción
○ Explicarle al paciente lo que se le va a hacer
○ luego desinfectar la piel de la cara anterior del antebrazo donde no se vean
venas superficiales con una solución iodada después de haberle preguntado al
paciente si es alérgico al iodo.
○ Tomar la ampolla de solución fisiológica y desinfectarle el cuello con un
algodón con alcohol iodado.
○ Con el cuello rodeado por el algodón partir la ampolla.
○ Sacar la jeringa con la aguja del estuche. Con la uña del pulgar de la mano
hábil sujetar el cono y con la otra mano traccionar con firmeza pero con
cuidado el capuchón.
○ Cargar la jeringa con 0,1 cc de Sn fisiológica (cargar de más ponerla vertical,
sacar el aire golpeando en la camisa y ajustar el volumen con el émbolo que
previamente debió ser deslizado para arriba y para abajo).
○ Poner el bisel de la aguja mirando hacia el operador y paralelo a las dos
“orejitas” que tiene la camisa. (Se sugiere tomar la aguja cargada con el pulgar
ya tocando el émbolo, listo para inyectar)
○ Lo que sigue es esencial: con la otra mano rodear por detrás el antebrazo
del paciente y traccionar con fuerza estirando la piel.
○ En ese momento apoyar la aguja en 15% y presionar hasta que el orificio de la
misma haya entrado por debajo de la epidermis.
○ Inyectar.
○ La aguja se retira y se coloca el algodón con alcohol sobre la punción. Puede
haber un puntito de sangre.
SE HACE CON GUANTES. CADA AYUDANTE DEBERÁ USAR UN PAR.
PREGUNTAS
1. ¿Cuándo se usa una intradermorreacción en Clínica Médica? ¿En Infectología? ¿En
Alergología / Inmunología clínica?
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ACTIVIDAD 2: ASPIRADO NASOFARÍNGEO (CON MUÑECOS)
➢ Usando una muñeca se medirá con la sonda k-33 la distancia que hay desde la sien
hasta la narina homolateral, formando un ángulo recto.
➢ Se marcará con la uña del dedo pulgar esa distancia y se introducirá lentamente la
sonda hasta la marca del dedo. Se colocará una jeringa estéril y se aspirará el moco.
Se retirará la sonda y se la colocará justo con la jeringa en la bolsa de la sonda.
➢ Se rotulará y se la enviará al laboratorio de Virología.
➢ El virólogo presionará el émbolo de la jeringa con la punta de la sonda introducida en
un tubo cónico, al que luego se le agregarán 2 ml de un buffer (PBS ó buffer de
fosfatos), se lo mezclará, se centrifugará a 1500 rpm 10 minutos en centrífuga de
mesa, se descartará el sobrenadante, y el sedimento –donde están las células
infectadas por el virus- se distribuirá en gotas y por duplicado sobre un portaobjetos
con múltiples “pocillos”.
➢ Se dejará secar al aire, se fijará con metanol 15 minutos y en cada par de “pocillos” se
agregará un suero primario contra los diferentes virus.
➢ Luego se realizará una inmunofluorescencia indirecta (IFI) para hacer el diagnóstico
rápido (se informa en el día). Repasar la técnica de IFI).
Anotar en el esquema del multiwell, como sería el test y cuáles serían los virus a ser
diagnosticados.
Materiales:
Trabajando de a dos alumnos, uno hará de médico y el otro de paciente. Se le deberá explicar
al paciente que se le realizará un hisopado faríngeo, para qué sirve y el hecho de que puede
sentir una molestia pero no dolor ni complicaciones.
Se hará que el paciente trague saliva, saque la lengua y diga “a”. Se iluminarán las fauces con
la luz de un celular y se introducirá el hisopo estéril que trajo el alumno en la boca del
paciente, SIN TOCAR LA LENGUA, Y TOCANDO LOS PILARES AMIGDALINOS
ROTANDO EL HISOPO Y, SI FUERA POSIBLE, LA PARED POSTERIOR DE LA
FARINGE CON LA PUNTA DEL HISOPO.
PREGUNTA: ¿Qué precaución tiene que tener el Bacteriólogo con la muestra remitida?
¿Por qué?
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Staphylococcus aureus
1 2 3 4
5 6 7 8
9 10 11 12
13 14 15 16
17 18 19 20
21 22 23 24
25 26 27 28
NOTA: Tendrá un minuto para poder visualizar y anotar la respuesta que usted crea, luego se
hará una puesta común y se analizarán los resultados.
ANEXO:
HOJA A ENTREGAR AL FINALIZAR EL DIA 1 DE TRABAJOS
PRÁCTICOS
LA ENTREGA DE ESTAS HOJAS ES EXCLUYENTE PARA OBTENER
LA REGULARIDAD DE LA MATERIA DADO QUE CERTIFICAN LA
ASISTENCIA A LOS TRABAJOS PRÁCTICOS.
Pedimos que respondan a conciencia, con el máximo de veracidad, a fin de mejorar las
actividades docentes de la Segunda Cátedra de Microbiología. Por lo tanto no hay
necesidad de escribir su nombre en esa hoja, ya que la encuesta puede ser anónima.
1 ¿En cuál de las placas del lavado de manos crecieron más colonias?
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2 ¿Cuál era el parásito en el lugar 11 del rondín?
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3 ¿Con qué sustancia se realizó la intradermorreacción? Cuál es su uso en la clínica?
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4 ¿Hasta qué edad se realiza un aspirado nasofaríngeo para diagnosticar una
bronquiolitis?
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5 ¿Que reconoció al microscopio en la tinción de Gram? ¿Qué usó para tener un mayor
aumento con el
microscopio?_______________________________________________________________
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ENCUESTA DE EVALUACIÓN DE LA CÁTEDRA PARTE 2
¿Los ayudantes lograron responder las dudas satisfactoriamente y sumar temas durante
las tutorias?
( ) SI ( ) NO
¿El primer examen parcial fue acorde a los temas vistos en la cursada?
( ) SI ( ) NO