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Objetivos particulares:
Al término del tema, el participante:
Si las aguas residuales son biodegradables, es decir, que pueden ser degradadas por
medios biológicos, es de gran importancia que se comprendan a cabalidad los fenómenos
biológicos que suceden, los diferentes tipos de microorganismos que lo realizan, los
diferentes patrones metabólicos que los microorganismos siguen para la degradación de
las aguas residuales, que factores afectan el crecimiento biológico y la cinética de
tratamiento que siguen para la degradación de los desechos
El principal objetivo del tratamiento del agua residual es producir un efluente que pueda
ser descargado sin causar daños al medio ambiente. Los contaminantes del agua residual
pueden ser eliminados por unidades
• Físicos
• Químicos
• Biológicos
148
En muchos casos, se combinan varios procesos dependiendo de la calidad del agua
residual que se va a tratar y de las características que deba tener el agua tratada al final del
tren de tratamiento.
Con base en los contaminantes a ser eliminados, el número de procesos unitarios que
pueden combinarse es ilimitado. El término tren de tratamiento se usa para describir una
combinación particular de procesos o sistemas empleados para alcanzar un objetivo
específico de tratamiento.
149
En la literatura, los esquemas de tratamiento se conocen como:
• Primarios
• Secundarios
• Terciarios (avanzados)
DBO5 mg/L 30 45
150
La figura 5.1 presenta un ejemplo de un tren de tratamiento para alcanzar una
determinada calidad de agua para reúso.
SEDIMENTADOR PRIMARIO
AGUA
CRUDA
S ED IM E N TA D O R
L S E C U N D A R IO
REJILLAS DESARENADOR
O BIODISCOS
D recirculació
L
O O
Excedente de
l d S D CLORACIÓN
O
FILTRO PRENSA S
AGUA
TRATAD
COMPOSTEO
DIGESTIÓN
ESPESAM IEN TO ANAEROBIA
LECHOS DE SECADO
ACARREO Y
DIGESTIÓN DISPOSICIÓN EN TIERRA
AEROBIA
151
La eliminación de la DBO carbonosa, la coagulación de los sólidos coloidales no
sedimentables, y la estabilización de materia orgánica se consiguen, biológicamente,
gracias a la acción de una variedad de microorganismos, principalmente bacterias. Los
microorganismos se utilizan para convertir la materia orgánica carbonosa coloidal y
disuelta en diferentes gases y material celular (biomasa). Dado que esta biomasa tiene un
peso específico ligeramente superior a el del agua, se puede eliminar por sedimentación.
Es importante señalar que, salvo que la biomasa que se produce a partir de la materia
orgánica se separe del agua, no se alcanzará un tratamiento completo. Debido a que la
biomasa que es de naturaleza orgánica, aparecerá como parte de la medida de la DBO del
efluente. Si no se separan las células, el único tratamiento que se habrá llevado a cabo es el
asociado con la conversión bacteriana de una fracción de la materia orgánica presente
originalmente en diversos productos gaseosos finales.
Los microorganismos importantes en el tratamiento biológico del agua residual son: los
microorganismos procariotes (eubacterias y arqueobacterias) que suelen denominarse
simplemente bacterias, y son primordiales en el tratamiento biológico. El grupo de los
microorganismos eucariotes incluye a las plantas, animales y las protistas. Los organismos
eucariotes importantes en el tratamiento biológico de las aguas residuales incluyen:
• Hongos
• Protozoos y rotíferos
• Algas
152
Figura 5.2 Clasificación de los seres vivos según Whittaker
Las condiciones medio ambientales se pueden controlar mediante la regulación del pH, de
la temperatura, la adición de nutrientes o elementos traza, la adición o exclusión de
oxígeno o también, mediante una mezcla adecuada del medio. El control de las
condiciones ambientales asegurará que los microorganismos dispongan del medio
adecuado para su desarrollo.
153
5.4.2 Tipos y clasificación de los sistemas biológicos
Los objetivos del tratamiento biológico del agua residual son la coagulación y eliminación
de los sólidos coloidales no sedimentables y la estabilización de la materia orgánica. En el
caso del agua residual doméstica, el principal objetivo es la reducción de la materia
orgánica presente y, en muchos casos, la eliminación de nutrientes (como el nitrógeno y el
fósforo). A menudo, la eliminación de compuestos a nivel traza que puedan resultar
tóxicos, también constituyen un objetivo de importancia en el tratamiento. En el caso de
aguas residuales industriales, el principal objetivo es la reducción de la concentración de
compuestos tanto orgánicos como inorgánicos. A menudo, puede ser necesario llevar a
cabo un pretratamiento previo, debido a la potencial toxicidad de estos compuestos para
los microorganismos. Para el caso de las aguas de retorno de usos agrícolas, el principal
objetivo es la eliminación de los nutrientes que puedan favorecer el crecimiento de plantas
acuáticas.
La principal división entre los procesos biológicos para el tratamiento de las aguas
residuales, se hace con base en la forma en que los microorganismos utilizan el oxígeno.
Así se tienen los procesos aerobios (requieren oxígeno) y los anaerobios (requieren
ausencia total de oxígeno). Esto se traduce en sistemas muy diferentes entre sí, tanto en su
microbiología, como en sus aplicaciones, su ingeniería y su control.
Dado que los microorganismos son los responsables de llevar a cabo el proceso biológico,
sus características metabólicas determinarán el tipo de aplicación, así como sus ventajas y
desventajas. Las principales características de los procesos aerobios y anaerobios desde el
punto de vista energético se esquematizan en la figura 5.3. En ésta se observa que la
energía contenida en la materia orgánica contaminante, utilizada por los microorganismos
como demanda química de oxígeno (DQO) o como demanda bioquímica de oxígeno
(DBO), es transformada en diversos productos dependiendo del metabolismo aerobio o
anaerobio de la célula. En general, las bacterias anaerobias utilizarán el 10% de la energía
contenida en su alimento o sustrato para funciones de reproducción, lo que da origen a
nuevas células y el 90% restante lo dirigirá a la producción de metano y bióxido de
carbono. Por su parte, las bacterias aerobias emplearán en presencia del oxígeno, de un 60
a 65% de la energía del sustrato en la síntesis de nuevas células, mientras que la fracción
restante es disipada en forma de calor.
154
5.4.2.1 Metabolismo aerobio
La tecnología del tratamiento de aguas residuales por vía aerobia está bien desarrollada y
es sin duda la más comúnmente aplicada. La experiencia acumulada y las altas eficiencias
en la remoción de materia orgánica son algunas de las razones de su aceptación.
155
Tratamiento aerobio
Carbono en
CO2 (49%)
Carbono Carbono en
orgánico en el lodos (49%)
influente
(100%)
Carbono en el
efluente
tratado (2%)
Biogás (49%)
Carbono en el biogás,
(92%) CO2 +CH4
Carbono en el
efluente
tratado (4%)
Anaerobiosis
(CHON)n + O2 R CH3COOH
Materia orgánica CO2 + CH4 + C5H7O2N Biomasa (4%)
Ácidos orgánicos
Biogás
156
Figura 5.4 Las tres fases del metabolismo aerobio
157
5.4.2.2 Metabolismo anaerobio
La figura 5.5 presenta la cadena de transporte electrónico para la respiración anaerobia con
los diferentes aceptores de electrones y productos finales formados y la figura 5.6 el
esquema de la digestión anaerobia de aguas y lodos residuales.
DH2 CADENA DE
CO2 SO=4 NO-3
D
ADP+PI CH4 H2S N2NH3N2O
TRANSPORTE
ELECTRÓNICO
Figura 5.5 Cadena de transporte electrónico para la respiración anaerobia
Para llevar a cabo la digestión anaerobia se han propuesto varios procesos con
configuraciones diferentes que buscan optimizar el sistema. Estas configuraciones pueden
agruparse por la forma en que se encuentra la biomasa en su interior, lo que origina dos
grandes bloques:
158
Figura 5.6 Digestión anaerobia de aguas y lodos residuales
159
5.5 Crecimiento bacteriano
Las bacterias son los microorganismos que en mayor proporción constituyen la biomasa
de los lodos activados (95%). Estos organismos unicelulares crecen en el agua residual
consumiendo la materia orgánica biodegradable tales como las proteínas, carbohidratos,
lípidos y otros compuestos. La manera más común para la reproducción de las bacterias es
por fisión binaria, donde la célula original se convierte en dos organismos nuevos. El
tiempo requerido para cada división, conocido como tiempo de generación o de
duplicación, puede variar desde menos de 20 minutos hasta varios días. Existen
limitaciones ambientales que frenan la duplicación como disponibilidad del sustrato,
concentración de nutrientes, o incluso, el tamaño del sistema. Existen dos maneras de
expresar el crecimiento de los microorganismos, uno, en términos de números y el otro en
términos de masa bacteriana en un cultivo puro, al igual que el crecimiento en cultivos
mixtos.
Fase
Logaritmo del numero viable de microorganismos
Crecimiento
Latencia exponencial Estacionaria Muerte
Tiempo
Figura 5.7. Curva característica de crecimiento bacteriano en términos
del registro del numero viable de organismos
160
• Fase de latencia. Se inicia al agregar un inóculo a un medio de cultivo, y representa
el tiempo que requieren los organismos para aclimatarse a su nuevo ambiente y
empezar a dividirse.
• Fase exponencial. Durante este periodo las células se dividen a cierta tasa
determinada en función de su tiempo de generación y su habilidad para procesar el
alimento.
161
5.5.3.- Crecimiento en cultivos mixtos
Fase
Logaritmo del numero viable de microorganismos
Crecimiento Declinación
Latencia exponencial
Endógena
Del crecimiento
Tiempo
Figura 5.8. Curva característica de crecimiento bacteriano en términos
del registro de la masa de los organismos
162
Figura 5.9 Crecimiento relativo de microorganismos durante la estabilización
de desechos orgánicos en un ambiente líquido
El proceso de crecimiento en suspensión con lodos activados es uno de los sistemas más
comúnmente usado para el tratamiento biológico aerobio de las aguas residuales.
163
completa. En el proceso de los lodos activados, las aguas residuales previamente cribadas
y sedimentadas se mezclan con cantidades variables (20 a 100%) de la purga del
clarificador secundario. La mezcla entra en el tanque de aireación, donde se mezclan los
organismos y las aguas residuales con gran cantidad de aire. Bajo estas condiciones, los
organismos oxidan una parte del desecho con producción de células microbianas nuevas
utilizando la energía obtenida de la oxidación.
• Criterios para carga del proceso. Los criterios para la carga del proceso que se utilizan
comúnmente para los procesos de lodos activados incluyen la relación alimento-
microorganismos (F/M), el tiempo de retención celular (TMRC) y la tasa volumétrica
de carga.
• Configuración y tamaño del reactor. La configuración del reactor depende del tipo de
proceso de lodos activados que se escoja. Los reactores de flujo de pistón y de mezcla
completa son los dos más comunes. A medida que se diseñan más plantas de lodos
activados que lleven a cabo la remoción biológica de nutrientes, se prefiere la
configuración de reactor con flujo de pistón.
164
Volumen basado en la relación F/M
Q( So)
V= (1)
X (F / M )
5.7.1.1. Bacterias
Son los constituyentes más abundantes del flóculo, existen más de 300 especies reportadas
que han sido aisladas del licor mezclado. Las bacterias son las responsables de la
oxidación de la materia orgánica y de la transformación de los nutrientes, producen
polisacáridos y materiales poliméricos que ayudan en la floculación de la biomasa
microbiana.
• Zooglea
• Pseudomonas
• Flavobacterium
• Alcaligenes
• Bacillus
• Achromobacter
• Corynebacterium
• Comomonas
• Brevibacterium
• Acineto bacter
• Organismos Filamentosos (Sphaerotilus, Beggiatoa)
• Bacterias autotróficas nitrificantes (Nitrosomonas y Nitrobacter)
• Bacterias sulfurosas fototróficas (Rhodospirillaceae)
165
Las cuentas totales en placa realizadas al licor mezclado están en el orden de 108 UFC/mg
de lodo.
5.7.1.2. Hongos
• Geotrichium
• Penicillium
• Cephalosporium
• Cladosporium
• Alternaria
5.7.1.3. Protozoarios
Los protozoarios son organismos pertenecientes al reino Protista y que son predadores de
bacterias. Los principales grupos son los siguientes:
a) Ciliados
Su medio de locomoción son los cilios y por el movimiento de éstos se hacen llegar el
alimento. Se clasifican en libres, trepadores y anclados. Los principales géneros son:
166
b) Flagelados
c) Rhizopoda o Amiboidea
5.7.1.4.- Rotíferos
Los rotíferos son organismos multicelulares. Su tamaño fluctúa entre las 100 y 500 micras.
Los rotíferos presentes en lodos activados pertenecen a dos órdenes principales:
El papel de los rotíferos en los lodos activados es: remover las bacterias suspendidas no
floculadas y contribuir con sus desechos a la formación del flóculo,
En donde se presenta abultamiento, una parte de los sólidos suspendidos del aereador se
descargan en el efluente. El abultamiento puede ser causado por:
167
espuma con el proceso de lodos activados, la cual es causada, en su mayoría, por el
crecimiento excesivo de organismos Nocardia.
Foto 5.2 Formación de espuma debido al crecimiento de Nocardia sobre la superficie del
tanque de aireación
168
5.10. Control de organismos filamentosos
La Nocardia, una bacteria hidrofóbica que crece en forma de filamento, puede conducir a
la formación de una espuma hidrofóbica en la superficie de las unidades de tratamiento
biológico (el tanque de aireación y el tanque de sedimentación secundaria). Cuando los
organismos crecen en numero suficiente, tiende a atrapar burbujas de aire en cantidad
suficiente para que floten en la superficie y se acumulen como espuma. El problema es
continuo cuando se recircula internamente la espuma de Nocardia. Dentro de las medidas
que pueden tomarse para controlar la Nocardia están:
• Evitar el contacto de la espuma y la nata que va hacia las etapas iniciales del
proceso a otros puntos intermedios
169
Autoevaluación
Instrucciones: Lea cuidadosamente cada una de las preguntas y responda en forma breve y
precisa.
2.- Mencione los cuatro factores que son importantes en el diseño adecuado de un proceso
biológico para el tratamiento de las aguas residuales?
170
5.11 .PRACTICA DE LABORATORIO: MICROBIOLOGÍA DE LODOS
ACTIVADOS
Dra. Gabriela Moeller
MC. Ana Cecilia Tomasini Ortíz
Objetivo particular:
Introducción
El proceso de lodos activados es quizá el proceso biológico de más amplio uso para el
tratamiento de aguas residuales, orgánicas e industriales. El objetivo del proceso de
tratamiento por lodos activados es el de reducir la demanda de oxígeno bioquímico (DBO)
y los sólidos suspendidos (SS) de las aguas residuales. Las bacterias de los lodos
convierten la materia orgánica en materia más estable y en productos inorgánicos (CO2,
H2O) y protoplasma celular en la presencia de oxígeno. Otras conversiones biológicas que
se dan lugar en el tanque de aeración son la remoción de nitrógeno y fósforo.
El proceso básico consiste en que las aguas residuales se pongan en contacto con una
población microbiana mixta, en forma de suspensión floculenta en un sistema airado y
agitado. La materia en suspensión y la coloidal, se eliminan rápidamente de las aguas
residuales por adsorción y aglomeración en los flóculos microbianos. Esta materia y los
nutrientes disueltos se descomponen lentamente por metabolismo microbiano, proceso
conocido como estabilización. En ésta parte el material nutriente se oxida a sustancias
simples como el anhídrido carbónico (mineralización), y parte se convierte en materia
celular microbiana o biomasa (proceso metabólico de asimilación). Parte de la masa
microbiana se descompone a su vez mediante un proceso llamado respiración endógena.
171
sólidos. La mayor parte del lodo asentado en la etapa de separación se regresa a la etapa
de aeración para mantener la concentración de los microorganismos en el tanque de
aeración al nivel necesario para un tratamiento efectivo y para que actúe como un inóculo
microbiano.
5.11.1 Microbiología
5.11.1.1 Metabolismo.
Los organismos autótrofos son capaces de sintetizar sus requerimientos orgánicos a partir
de la materia inorgánica y pueden crecer independientemente de las substancias orgánicas
externas. Emplean dos métodos para alcanzar este fin:
Por su parte, los organismos heterótrofos requieren una fuente externa de materia
orgánica; los tres tipos principales son:
172
de carbono hasta varios compuestos complejos de carbono y nitrógeno, junto con
factores adicionales de crecimiento.
Tabla 5.1. Clasificación general de los microorganismos con base en sus fuentes de
carbono y energía.
5.11.1.2 Microorganismos.
Por definición, los microorganismos son aquellos organismos muy pequeños que no se
pueden ver a simple vista, se requiere de diferentes aumentos proporcionados por el
microscopio, ya sea de disección, óptico y/o electrónico, quedando comprendidos en esta
categoría un gran número de organismos.
173
Los procariotes son estructuras celulares simples y pequeñas (0 – 5 µm) con núcleo
primitivo de un solo cromosoma circular, sin membrana nuclear. Su reproducción
normalmente es por fisión binaria. Se incluyen en este grupo las bacterias, los
actinomicetos y las cianobacterias (antes algas verde-azules).
Los eucariotes son células más grandes (0 – 20 µm) con una estructura más compleja y un
núcleo verdadero que contiene varios cromosomas con membrana nuclear. Su
reproducción puede ser asexual o sexual y tienen ciclos de vida muy complejos. En esta
clase de microorganismos de incluyen los hongos, la mayoría de las algas y los
protozoarios.
Hay grupos adicionales de microorganismos: los virus, que no pueden ser clasificados en
ninguna de las dos clases anteriores y, por lo tanto, se consideran por separado.
Bacterias. Las bacterias son organismos protistas unicelulares que pueden vivir
como autótrofos o como heterótrofos y aprovechar el alimento soluble. Su
reproducción es por fisión binaria y el tiempo de generación en algunas especies
puede tomar sólo 20 minutos en condiciones favorables.
Algunas bacterias forman esporas resistentes que pueden permanecer latentes por
periodos prolongados en condiciones ambientales adversas pero que pueden
reactivarse al retornar las condiciones favorables. La mayoría de las bacterias se
desarrollan en condiciones de pH neutro, aunque algunas especies pueden existir
en ambientes altamente ácidos. Las bacterias desempeñan una función vital en los
procesos naturales de estabilización y se utilizan ampliamente en el tratamiento de
aguas residuales orgánicas. Se conocen alrededor de 1,500 especies que se clasifican
en relación con criterios tales como: tamaño, forma y agrupamiento de células;
características de las colonias, reacción a la tinción; requerimientos de crecimiento,
movilidad y reacciones químicas específicas. Se encuentran formas aerobias,
anaerobias y facultativas.
Los actinomicetes son un grupo grande de bacterias que crecen como células
elongadas o filamentosas y muestran algún grado de ramificación durante su
crecimiento. Ellos crecen más lentamente que otros géneros de bacterias
encontradas.
174
Los hongos tienen gran importancia en la descomposición de la materia orgánica.
Existen mas de 100,000 especies de hongos y su estructura es muy compleja. Tiene
cuatro o cinco fases de vida distintas con reproducción por esporas asexuales o
semillas. Los hongos existen en las plantas de tratamiento biológico cuando hay
altas relaciones de C:N.
Virus. Los virus son la forma más simple de organismo. No son células y son
parásitos obligados ya que no tienen la habilidad para sintetizar nuevos
compuestos. Su tamaño varía entre 0.01 a 0.3 micras y consisten de material
genético -ácido desoxirribonucleico (ADN) o ribonucleico (ARN)- dentro de una
cubierta proteica.
175
Por su incapacidad para crecer fuera de un huésped adecuado, los virus se
encuentran en la frontera entre la materia viviente y las substancias inanimadas.
La muestra para la observación de los microorganismos se puede tomar del licor mezclado
(líquido en el tanque de aireación del sistema de lodos activado) o del efluente del tanque
de aeración o del canal del licor mezclado entre el tanque de aeración y el tanque
clarificador. Las muestras del licor mezclado pueden ser tomadas debajo de la superficie,
excluyendo espuma u otro material flotante. Si el lodo activado está espumoso, tomar
parte de la espuma de la superficie del efluente del tanque de aeración, de la superficie del
canal del licor mezclado, o de la superficie del tanque clarificador. También se puede
tomar una muestra de lodos activados del retorno de lodos.
La frecuencia de muestreo y examen puede ser dictada por las circunstancias de la planta
y por la localización de las muestras examinadas. En períodos críticos el examen diario
puede ser justificado. El examen rutinario puede ser de una a dos veces por semana.
5.11.2.2 Microscopio.
5.11.2.3 Tinciones.
176
5.11.2.4 Preparaciones.
El recipiente que contiene la muestra tomada se agita levemente y con una pipeta Pasteur
tomar un poco de ella, colocar en un cubreobjeto (23 x 77 mm) una o dos gotas de la
muestra y cubrir con cuidado, evitando hacer burbujas, el cubre objeto (22x22mm, No 1).
Si se encuentra muy densa la muestra, se puede colocar una gota de muestra y una de
agua destilada para facilitar la observación. Esto se hace en caso de examinar una muestra
fresca, si se requiere o si se elige la tinción, seguir las instrucciones de tinción. Al tener lista
la preparación o placa, colocarla en la platina del microscopio.
5.11.2.5 Microorganismos.
a) Bacterias bioindicadoras
b) Protozoarios
∗ Amoeba
∗ Suctoria
∗ Ciliados libres
∗ Ciliados fijos
∗ Ciliados reptantes
∗ Rotíferos
c) Microalgas
∗ Cianofíceas/Cyanophyta
∗ Cloroficeas/Chlorophyta
∗ Criptoficeas/Cryptophyta
∗ Crisoficeas/Cryptphyta
∗ Diatomeas/Diatoms
∗ Dinoficeas/Dinophyta
∗ Euglenoficeas/Euglenophyta
∗ Xantoficeas/Xantophyta
177
a) Bacterias bioindicadoras.
178
Beggiatoa sp. Bacteria filamentosa constituida por
filamentos rectos, activamente móviles por deslizamiento y
a partir de pequeñas sacudidas. Habitualmente presenta
acumulaciones de azufre, en forma de gránulos esféricos.
No disponen de vaina, ni crecimiento epífito asociado. Esta
bacteria es Gram y Neisser negativo.
179
Streptococcus sp. Bacteria filamentosa corta, compuesta por
una cadena de células redondeadas. Se suele encontrar libre
en la solución del aglomerado, alrededor de los flóculos.
180
Tipo 0092. Presenta tricomas cortos, insertos en los flóculos,
que normalmente no se observan en vivo. Desarrollan
tinción de Neisser con coloración característica.
181
b) Protozoarios.
Amoeba
182
Suctoria
Ciliados libres
183
Coleps hirtus. Protozoo ciliado de forma característica,
posee placas de carbonato de calcio co estructura típica de la
especie. Habitan medios con sustancias en descomposición.
184
Prorodon teres. Protozoo ciliado del grupo Gymnostómido
que se alimenta de bacterias y pequeñas algas. Esta especie
tolera altos rangos de salinidad.
185
Ciliados fijos.
186
Vorticella alpestris, Célula solitaria, pequeña, con diámetro
del labio peristomal similar a la máxima anchura del
cuerpo. Macronúcleo en forma de J y vacuola contráctil
encima del centro de la célula.
187
Vorticella muralls. Con estructura y dimensiones celulares
características de la especie. Se alimenta de las bacterias
presentes en el medio.
Ciliados reptantes.
188
Euplotes aediculatus. Especie de Euplotes con estructura
ciliar característica. Habita en agua dulce.
189
Rotíferos.
190
Lecane sp. Microorganismo que presenta caparazón con dos
placas, pié corto y ancho, con un solo elemento libre, que
surge del lado ventral del caparazón. Presenta uno o dos
dedos. Con frecuencia se fija con los dedos y nada alrededor
del punto de fijación.
191
Trichotria pocillum. Especie con cabeza, tronco y pié
cubierto con caparazón grueso de bordes agudos. La cabeza
es retráctil y está protegida por placas. El pié tiene dos
largos dedos.
c) Microalgas.
Cianofíceas/Cyanophyta
192
Oscillatoria rubescens. Microalga filamentosa que presenta
un tono ligeramente rosado. Las células terminales
desarrollan extremos gradualmente apuntados, presentando
una especie de caperuza.
Cloroficeas/Chlorophyta
193
Chlamydomonas ehrenbergi. Células don forma de
irregular a ovadas. Membrana delicada, que puede estar
algo separadas del borde del citoplasma. Los flagelos
parten de una pequeña protuberancia cutánea. Mancha
ocular en el centro de la célula.
194
Dictyosphaerium ehrenbergianum. Colonias insertas en una
masa gelatinosa claramente delimitada. Las células son
ovaladas en disposición periférica y están unidad entre si
mediante cordones gelatinosos.
195
Pediastrum simples. Los individuos de esta especie
presentan células marginales alargadas, con forma
triangulas y las células centrales se encuentran unidas de
forma completa.
196
Volvox aureus. Colonia esférica, gelatinosa, con las células
situadas en la periferia. Vistas por encima, las células son
circulares y se comunican entre si mediante filamentos
plasmáticos muy finos.
Criptoficeas/Cryptophyta
Crisoficeas/Cryptophyta
197
Diatomeas/Diatoms
198
Melosira varians. Diatomea colonial que forma cadenas
largas de células en forma de tambor. Presentan cloroplastos
en forma de plaquitas de color pardo amarillento.
199
Dinoficeas/Dinophycea
Euglenoficeas/Euglenophyta
200
Phacus pyrum. Las células son abombadas, con el extremo
posterior adelgazado en una espina larga y recta. Ocho
estrías espiraladas confluyen en la desembocadura del
sáculo del flagelo.
Xantoficeas/Xantophyta
201
Autoevaluación
Instrucciones: Lea cuidadosamente cada una de las preguntas, responda en forma breve y
precisa.
2.- ¿Cuál es el objetivo del tratamiento por medio del sistema de lodos activados?
4.- ¿Qué métodos emplean los organismos autótrofos para sintetizar sus necesidades
orgánicas?
5.- De acuerdo a la fuente externa de materia orgánica ¿Mencione los tres tipos de
organismos heterótrofos?
202
Bibliografía
American Water Works Association. 1995. Problem organisms in water: Identification and
treatment. Manual of water supply practices. AEWWA. M7. Denver, Co. USA.
Environmental Protection Agency, 1987. Summary report. The causes and control of activated
sludge bulking and foaming. EPA, Cincinnati, Ohio. USA.
Gerardi, M. H., y Horsfall, F. L. 1990. Wastewater Biology: The microlife. A special publication.
Water Pollution Control Federation. Alexandria, Virginia, USA.
Metcalf & Eddy, INC. (1991). Wastewater Engineering. Treatment, Disposal and Reuse.
Mc. Graw Hill Book, Co.:.
U.S. Environmental Protection Agency.(1987). The causes and Control of Activated Sludge
Bulking and Foaming. EPA contract 68-03-3252. Cincinnati Ohio.
203
ANEXO
204
1.- Tinción de Gram, modificado del método de Hucker
Preparación:
Solución 1
A B
Solución 2
Yodo 1 g..
Yodo potasio 2 g.
Agua destilada 3000 mL.
Solución 3
Procedimiento.
- Cubrir la preparación por un minuto con la solución 2. Lavar bien con agua
destilada.
- Cubrir la preparación con la solución 3 por un minuto. Lavar bien con agua
destilada y dejar secar.
205
2 Tinción de Neisser.
Solución 1
A B
Azul de metileno 0.1 g. Cristal violeta (10% w/v en etanol 95%) 3.3 mL
Etanol 95 % 5 mL. Etanol 95 % 6.7 mL
Äcido acético glacial 5 mL. Agua destilada 100 mL.
Agua destilada 100 mL
Mezclar dos partes de volumen de la solución A con una parte por volumen de la solución
B.
Solución 2
Procedimiento.
- Teñir 30 segundos con la solución 1. Lavar por un segundo con agua destilada.
- Teñir por un minuto con la solución 2. Lavar bien con agua destilada. Y dejar secar.
- Examinar bajo aceite de inmersión a 1000x con luz directa. Coloración azul-violeta
positivo (la célula completa o gránulos intercelulares), amarillo-café negativo.
Solución.
Preparar rápidamente.
Procedimiento
- En un portaobjeto mezclar una gota de la muestra de lodo activado con una gota
de la solución de sulfato de sodio.
206
- Colocar un cubreobjetos en la preparación y presionar gentilmente para sacar el
exceso de sulfato de sodio. Quitar el exceso con un pañuelo de papel.
- Observar bajo aceite de inmersión a 1000x usando contraste de fases. Una prueba
“S” positiva se obtiene cuando se observa una alta refractancia y una coloración
amarilla de los gránulos intercelulares (gránulos sulfurosos).
Solución.
Procedimiento.
Solución.
Procedimiento.
207
- Colocar el cubreobjetos y observar al 1000x usando contraste de fases.
- En un lodo activado “normal”, la tinta de India penetra en las partículas del flóculo
completamente, en la mayoría dejando un centro claro.
Solución.
Procedimiento.
- Observar al microscopio bajo aceite de inmersión a 1000x con luz transmitida. Los
gránulos PHB podrán apreciarse como intracelulares, gránulos azul-negro, el
citoplasma podrá verse por un momento rosa o claro.
Solución.
Procedimiento.
- Mezclar una gota de cristal violeta con una gota de la muestra de lodos activados
en un portaobjeto.
- Observar al microscopio bajo aceite de inmersión a 1000x en contraste de fase. Las
células se tiñen de un violeta profundo y las vainas se pueden ver rosas o claras.
208