SEGUNDA PRÁCTICA

ESPECÍMENES, VARIACIONES, SOLUCIONES, SI

OBJETIVOS

Al término de la práctica el estudiante estará en la capacidad de:

1. Manejar adecuadamente los conceptos sobre soluciones y unidades de

medida.
2. Obtener una muestra de sangre venosa mediante la punción con
jeringuilla hipodérmica.
3. Manipular adecuadamente una muestra sanguínea, para su análisis y
conservación.

SOLUCIONES

Dado que en bioquímica es corriente el empleo de soluciones, es dable revisar

las principales de ellas. Consideramos que una solución es aquella que en un
volumen variable o constante presenta cantidades variables de soluto.

Se denomina SOLUTO a la sustancia que se disgrega o dispersa y

DISOLVENTE a la sustancia que constituye el medio de dispersión.

1. SOLUCIONES PORCENTUALES: Expresan el porcentaje de soluto en 100

ml de solución final y pueden ser:

a) De volumen en volumen: % (v/v) expresa el número de militros de soluto

en 100 ml de disolvente (ml/ 100ml) Se usa para disoluciones de líquidos. Por
ejemplo soluciones alcohólicas.

b) De peso en peso: % (p/p) expresan el número de gramos de soluto que

existen en 100g de disolución final ejemplo ácido clorhídrico al 36%, significa
36 g del ácido clorhídrico y el resto es agua.

c) Peso en volumen: % (p/v), expresan el número de gramos de soluto

disueltos en 100ml de solución final (g/100ml) independientemente de cual sea
el solvente. Muy utilizada en soluciones de sólidos en líquidos.

2. SOLUCIONES MOLARES: Expresa el número de moles de soluto que

existen en un litro de disolución.

MOL: es el peso molecular de una sustancia expresado en gramos. En el

caso del Acido sulfúrico será:

SO4H2 (32+64+2) = 98

Un mol de ácido sulfúrico es igual entonces a 98 gramos.

MILIMOL, es el peso molecular expresado en miligramos.
Un milimol de ácido sulfúrico es igual a 0.098 gramos o 98 mg.
MICROMOL, es el peso molecular expresado en microgramos.
Un micromol de ácido sulfúrico es igual a 0.000098 g o 98 microgramos.

Por consiguiente una solución molar será aquella que se prepara añadiendo
al mol de soluto suficiente cantidad de agua hasta alcanzar un litro de solución
final.
Para poder preparar las soluciones molares es necesario conocer el peso
molecular del soluto. El peso molecular del soluto se obtiene sumando los
pesos atómicos de cada elemento químico que interviene en la molécula.
SO4H2 (32+64+2) = 98
S = 32
O = 16 x 4 = 64
H=1x2 = 2

Para preparar cualquier cantidad de una solución molar se utiliza la siguiente

fórmula:
gr de sustancia= VxPMxM
1000

V= volumen del problema; PM= peso molecular; M= molaridad de la solución

3. SOLUCIONES MOLALES: Expresa el número de moles de soluto disueltos

en 1 kg de disolvente.

4. SOLUCIONES NORMALES: Son las que contienen el equivalente químico

de una sustancia en un litro de solución final.

Equivalente o peso equivalente, es el peso de una molécula o de un átomo o

de un radical (grupo de átomos que reaccionan químicamente como unidad)
dividido por su valencia.
Cuando la valencia es 1, el equivalente es igual que el peso de la molécula, del
átomo o del radical del que se trate. Así:
HCO3 (12+48+1) = 61 g (peso molecular) = 61 g (equivalente) puesto que la
valencia del ión bicarbonato es 1 .
Cuando la valencia es 2, 3, etc., el equivalente es la mitad, el tercio, etc., del
peso de la molécula, del átomo o del radical del que se trate Así:
SO4 (32 + 64) = 96 g (peso molecular) = 48 g (equivalente). La valencia del ión
sulfato es 2.

Miliequivalente, es la milésima parte del equivalente o dicho de otra manera

es el peso equivalente expresado en miligramos. Se utiliza para expresar
valores de electrolitos. Por ejemplo: 40 mEq de Na / litro de plasma.

Para transformar mg/100 ml en mEq/l, se aplica la siguiente fórmula:

mEq/1 = mg/100 ml x 10
peso equivalente

Para preparar cualquier cantidad de una solución de molaridad determinada

aplíquese la fórmula siguiente:

Gramos de la sustancia = V x PM x M
1000

V es el volumen del problema, PM el peso molecular y M la molaridad de la

solución.

5.- SOLUCIONES OSMOLARES: Son aquellas que contienen un osmol de

sustancia en gramos. OSMOL es la actividad osmótica de una molécula, un ión
o un radical. La osmolaridad de una solución se calcula multiplicando su
concentración molar por el número de iones que forman cada mol. En
condiciones normales la osmolaridad de los líquidos orgánicos se mantiene
constante entre 275 y 295 mOsm/l.

EL SISTEMA INTERNACIONAL DE UNIDADES

Diseñado en 1960 por el Comité Internacional de pesos y medidas comprende

unidades básicas y derivadas.

Las unidades básicas son siete: longitud, masa, tiempo, intensidad de corriente
eléctrica, temperatura termodinámica, intensidad luminosa, cantidad de
sustancia.
•Las unidades derivadas derivan de las magnitudes básicas. Se dividen en
coherentes si no tienen factores de reducción y coherentes si lo tienen, por
ejemplo la densidad es una unidad no coherente (g/ml), pero su unidad
coherente sería kg/m3.

NOMBRE SIMBOLO UNIDAD BASICA

Longitud m Metro
Masa Kg Kilogramo
Corriente Eléctrica A Amperio
Tiempo S Segundo
Temperatura K Kelvin
Intensidad cd Candela
Luminosa
Cantidad de M Mol
Sustancia
Cantidad Catalítica Kat Katal

MÚLTIPLOS Y SUBMÚLTIPLOS EN EL SI
Algunas unidades básicas del SI pueden tener distintos múltiplos y
submúltiplos, cada uno de ellos con un nombre característico que se forma
mediante la unión de un prefijo al nombre básico de la unidad.
Los prefijos más utilizados se describen a continuación:
 Prefijo Símbolo Relación con la Unidad
tera- T 1O12 unidades
giga- G 109 unidades
Mega- M 106 unidades
kilo- k 103 unidades
Hecto- h 102 unidades
deca- da 101 unidades
deci- d 10-1 unidades
centi- c 10-2 unidades
mili- m 10-3 unidades
micro- µ 10-6 unidades
nano- n 10-9 unidades
pico- p 10~12 unidades
femto- f 10-15 unidades
atto- a 10-18 unidades

Por ejemplo:
 kilogramo = 103 gramos = 1000 gramos
 miligramo = 10-3 gramos = 1/1000 gramos = 0.001 gramos
 decímetro = 10-1 metros = 1/10 metros = 0.1 metros

MARCHA EXPERIMENTAL

A) EXTRACCION DE SANGRE CON TUBO AL VACIO

El tubo al vacío, comúnmente conocido como vacutainer, está reemplazando a

la jeringuilla hipodérmica para la obtención de muestras de sangre, tanto en los
laboratorios clínicos como cuando se trata de recolección de muestras a grupos
de población que son sujetos de investigación (i.e. escuelas, cuarteles,
comunidades rurales, etc.), puesto que el tubo permite trasladar fácilmente la
muestra recolectada desde el sitio de obtención de la misma hacia el
laboratorio.
El vacutainer se encuentra formado por:
• Aguja con dos puntas: la una para la punción en la vena y la otra para
insertarla en el tubo al vacío.
• Adaptador de plástico para sujetar la aguja de doble punta y el tubo al
vacío; y
• Tubo al vacío
A continuación un esquema con el procedimiento para extraer sangre con
vacutainer.
 B. SEPARACION DE SUERO Y PLASMA POR
CENTRIFUGACION

Suero: Una vez obtenida la muestra de sangre, ésta se debe trasvasar a un

tubo de centrífuga seco y limpio, se lo deja coagular a temperatura ambiente o
a 37 grados centígrados en incubadora. Una vez formado el coágulo se
despegan los bordes con un estilete y se lo somete a centrifugación por 10
minutos y a 3000 rpm (revoluciones por minuto) el líquido sobrenadante se
retira cuidadosamente por medio de una pipeta manual o semi-automática para
no contaminar la muestra. El líquido obtenido se denomina suero y éste,
carece de fibrinógeno Es un líquido transparente ligeramente opalescente y
de tonalidad amarilla; de obtenerse un líquido quiloso (lechoso por
alimentación reciente, en especial grasas), rojizo (hemólisis, por destrucción
de glóbulos) debe repetirse la toma de la muestra.

Plasma: La sangre obtenida se recibe en un tubo de centrífuga que contenga

un anticoagulante. Se mezcla uniformemente por medio de inversión del tubo
en forma lenta, nunca agitando el tubo con la muestra, se lo deja en reposo por
pocos minutos y se lleva a centrifugación por un lapso de 5 minutos a 3000
rpm.
El líquido sobrenadante se retira con pipeta con mayor precaución que el
suero; tiene las mismas características que el plasma, pero se diferencia de
éste porque el plasma posee fibrinógeno.

C. TECNICA PARA LA OBTENCION DE SANGRE CAPILAR

a) Elija el sitio de punción en el dedo medio o anular, o en el borde libre del

lóbulo de la oreja y para los niños en el talón.
b) Desinfecte la zona de punción con torunda de algodón - alcohol yodado y
espere evaporación espontánea.
c) El sitio que Ud. ha elegido sujételo entre los dedos pulgar e índice.
d) Introduzca la lanceta de una sola vez y en la profundidad deseada. Deseche
las dos primeras gotas, que corresponden a líquido tisular.
e) Deje que fluya la sangre libremente, y si no lo hace realice una ligera
presión, a distancia del sitio de punción.
f) Una vez realizadas las determinaciones, realice hemostasia con una
torunda de algodón - alcohol.

Preguntas

1. Diferencias entre sangre venosa, arterial y capilar.

2. Semejanzas y diferencias entre suero y plasma.

3. Que es centrifugación y el mecanismo de la centrifuga clínica.