FACULTAD DE INGENIERIA DE PROCESOS

ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERIA

QUIMICA
ANALISIS INSTRUMENTAL 2

TEMA:“ESPECTROSCOPIA DE ABSORCION
MOLECULAR Y ATOMICA”
DOCENTE:
ING. ARMANDO SALINAS SANCHEZ

INTEGRANTES:
CHAMBI AGUILAR FLOR EDITH
CRUCES LLERENA KATHERINE FIORELLA
LUQUE FLORES ROSEMARY DEL PILAR
TITO HUAHUACHAMPI CARLOS PAUL

GRUPO:
B

AREQUIPA-PERU
2019
INDICE
 INTRODUCCION
La espectrometría de absorción atómica (AAS), es un método ampliamente utilizado
durante casi medio siglo para la determinación de elementos en muestras analíticas.
Mientras que la mayoría de las técnicas espectroscópicas se utilizan para el estudio y
caracterización de moléculas o iones en su entorno cristalino, la espectroscopia de
emisión puede utilizarse para la identificación y para la determinación cuantitativa de
todos los elementos de la tabla periódica.
La medida de la emisión (dar) y la absorción (tomar) de la luz por parte de las
sustancias se denomina espectrofotometría. El termino luz se refiere a la luz visible
para nuestros ojos; sin embargo la luz visible es únicamente una pequeña parte del
espectro electromagnético, que incluye las radiaciones de radio, microondas,
infrarrojo, visible, ultravioleta, rayos x y rayos gamma. Los instrumentos específicos
utilizados para la espectrometría se denomina espectrofotómetros,
espectroradiometros o espectrómetros, dependiendo de su construcción.
 CAPITULO I
ESPECTROSCOPIA ATOMICA
1.1 DEFINICION
La espectroscopia de absorción atómica (EAA), tiene como fundamento la
absorción de radiación de una longitud de onda determinada. Esta radiación es
absorbida selectivamente por átomos que tengan niveles energéticos cuya
diferencia en energía corresponda en valor a la energía de los fotones incidentes.
La cantidad de fotones absorbidos, está determinada por la Ley de Beer, que
relaciona esta pérdida de poder radiante, con la concentración de la especie
absorbente y con el espesor de la celda o recipiente que contiene los átomos
absorbedores.

En el caso de átomos libres,

medimos la absorción o emisión
de luz (zona UV-VIS) por parte de
los átomos o iones elementales
gaseosos. Estas transiciones
espectroscópicas ocurren en
posiciones predecibles, con
anchuras de línea relativamente
estrechas. Cuando los átomos del
analito permanecen asociados con
una molécula o una matriz, para
obtener un espectro atómico
independiente de la matriz se
requiere una excitación previa con
Figura 1: Espectroscopia de absorbancia atómica
partículas de alta energía o con
radiación de energía superior a la radiación UV. Pueden medirse tanto la radiación
emitida como la energía cinética; estos análisis pueden dividirse en métodos
sensibles al contenido de analito en la totalidad de la muestra y métodos que solo
son sensibles al analito en una superficie concreta de la muestra.

Es un método instrumental que está basado en la atomización del analito en matriz

líquida y que utiliza comúnmente un nebulizador pre-quemador (o cámara de
nebulización) para crear una niebla de la muestra y un quemador con forma de
ranura que da una llama con una longitud de trayecto más larga, en caso de que la
transmisión de energía inicial al analito sea por el método "de llama". La niebla
atómica es desolvatada y expuesta a una energía a una determinada longitud de
onda emitida ya sea por la dicha llama, o una Lámpara de Cátodo hueco construida
con el mismo analito a determinar o una Lámpara de Descarga de Electrones (EDL).
 La temperatura de la llama es lo bastante baja para que la llama de por sí no excite
los átomos de la muestra de su estado fundamental. El nebulizador y la llama se
usan para desolvatar y atomizar la muestra, pero la excitación de los átomos del
analito se hace por el uso de lámparas que brillan a través de la llama a diversas
longitudes de onda para cada tipo de analito.

En AA la cantidad de luz absorbida después de pasar a través de la llama determina

la cantidad de analito existente en la muestra. Hoy día se utiliza frecuentemente
horno de grafito para calentar la muestra a fin de desolvatarla y atomizarla,
aumentando la sensibilidad.

El método del horno de grafito puede también analizar algunas muestras sólidas o
semisólidas. Debido a su buena sensibilidad y selectividad, sigue siendo un método
de análisis comúnmente usado para ciertos elementos traza en muestras acuosas.

Figura 2: Absorción y emisión

1.2 NOMENCLATURA DE ESPECTROMETRIA ATOMICA

Para todos los métodos de espectrometría óptica, el límite de detección se define

como la cantidad o la concentración de analito necesaria para producir una señal
que sea tres veces ese nivel. Actualmente se acepta como límite de cuantificación
la cantidad que emite una señal que sea diez veces la desviación estándar del
blanco. Las longitudes de onda se darán en nm en algunos textos será en angstrom
1nm= 10A°.

Los átomos de donde surgen los espectros atómicos pueden provenir de varios
estados de oxidación. Por ejemplo, el cobre poder ser atómico o iónico:
+2

Cu 0 ,Cu +¿ ,Cu ¿: la nomenclatura espectral utiliza números romanos, una unidad

 mayor que el estado de oxidación; por consiguiente el átomo neutro es “I” es
estado de oxidación de +1 es “II”; el de +2 es “III”

Figura 3: Nomenclatura de espectrometría de absorbancia atómica

1.3 COMPONENTES DE UN ESPECTROFOTOMETRO DE ABSORCION ATOMICA (EAA)

Los componentes instrumentales de un equipo de espectrofotometría de absorción

atómica son los similares a los de un fotómetro o espectrofotómetro de flama,
excepto que en EAA se requiere de una fuente de radiación necesaria para excitar
los átomos del analito.

1.3.1 Fuente de radiación: Emite una línea específica correspondiente a la necesaria

para efectuar una transición en los átomos del elemento analizado.
1.3.2 Nebulizador: en el cual por efecto de la temperatura alcanzada en la
combustión y por la reacción de combustión misma, se favorezca la formación
de átomos a partir de los componentes en solución.
1.3.3 Sistema óptico: separa la radiación de longitud de onda de interés, de todas las
demás radiaciones que entran a dicho sistema.
1.3.4 Amplificador o Sistema electrónico: amplifica la señal eléctrica producida, para
que en el siguiente paso pueda ser procesada con circuitos y sistemas
electrónicos comunes.
1.3.5 Sistema de lectura: En el cual la señal de intensidad de corriente, sea
convertida a una señal que el operario pueda interpretar (ejemplo:
transmitancia o absorbancia). Este sistema de lectura puede ser una escala de
aguja, una escala de dígitos, un graficador, una serie de datos que pueden ser
procesados a su vez por una computadora, etc.
 Figura 4: Componentes de un EAA

a. La lámpara de cátodo hueco: las lámparas de cátodo hueco son un tipo de

lámparas de descarga. Toman su nombre de la forma de copa del cátodo,
hecho del elemento de interés. La descarga eléctrica ioniza los átomos
gaseosos, que son acelerados al cátodo y desprenden átomos del metal a la
fase gaseosa. Estos colisionan con átomos de gas o electrones, se excitan a
niveles electrónicos superiores y emiten luz al regresar a sus niveles inferiores.

Figura 5: Lámpara
b. La llama: La llama provee una fuente de alta temperatura para la desolvatacion
y vaporización de la muestra para obtener átomos libre para el análisis
espectroscópico. En la espectroscopia de absorción atómica es deseable que
los átomos estén en su estado base. En la espectroscopia de emisión la llama
debe excitar también a los átomos a niveles energéticos superiores. En la tabla
se muestran las temperaturas que se alcanzan con determinadas llamas.

En la figura se muestra un quemador para

espectroscopia de emisión. Todo el proceso de
desolvatacion, atomización y excitación en la llama.

Figura 6: Quemador

Para la espectroscopia de absorción

atómica se inserta previamente un
nebulizador y un quemador que
proporcione una mayor longitud de paso
de la luz por la llama.

Figura 7: Nebulizador y quemador

c. El monocromador: Es el encargado de
lograr un haz de luz que incida en el detector con la monocromaticidad
necesaria. En EAA no se necesitan monocromadores de muy alta resolución. Un
parámetro de importancia es la salida de luz que dé, para obtener buenas
señales.
 Los anchos de slit más utilizados en EAA son de 0.2, 0.5 y 1.0 nm. Las menores
aberturas de slit se utilizan cuando se necesita resolver líneas cercanas.

d. El fotomultiplicador: Es un tipo de detector óptico de vacío que aprovecha el

efecto de emisión secundaria de electrones para responder a niveles muy bajos
de iluminación, manteniendo un nivel de ruido aceptable. Está compuesto de
un fotocátodo que emite electrones cuando sobre el inciden fotones de energía
adecuada. Un campo eléctrico acelera estos electrones y los dirige hacia un
ánodo, que en estos tubos recibe el nombre de dinodo. La energía de los
electrones incidentes provoca la emisión un número mayor de electrones
secundarios que son dirigidos hacia un segundo dinodo. El número de dinodos
y su disposición varía con el modelo de fotomultiplicador.

Figura 8: Fotomultiplicador

1.4 INTERFERENCIAS ESPECTRALES

Las interferencias espectrales son originadas, por señales alteradas de la longitud

de onda de radiación electromagnética seleccionada. Esta alteración tiene
diferentes orígenes y son los siguientes:

1.4.1 Traslapamiento de líneas atómica: En EAA se hace incidir radiación de longitud

de onda que corresponde exactamente a la longitud de onda requerida para
efectuar una transición específica en los átomos de la especie absorbente. En
teoría existe la posibilidad de que otra especie atómica que no es la que se está
analizando absorba la radiación incidente, esta posibilidad es sumamente difícil
de que se llegue a presentar debido a que las líneas de absorción de los átomos
son sumamente agudas, además la información de las líneas espectrales de los
diferentes elementos están documentadas.

1.4.2 Interferencia por dispersión por partículas: Cuando la solución aspirada hacia
el quemador tiene un gran número de solidos disueltos, es probable que se
tenga interferencia por dispersión por partículas.
 Este tipo de interferencia se debe a que si el número de partículas sólidas que
llegan al quemador son grandes y es posible que no ocurra en forma completa
todos los pasos que producen la descomposición de las partículas que se
encuentran en solución.
1.4.3 Interferencia por traslapamiento de bandas moleculares: Por matriz de la
muestra se entiende todo lo que acompaña al analito; el entorno en que se
encuentra este. Por ejemplo: en una muestra de agua, la matriz es el agua y
todos los demás solidos disueltos y en suspensión que se encuentran en la
misma. El analito es el elemento que se va a cuantificar.
Se dice que la matriz es muy compleja ya que tiene gran cantidad de componentes
químicos y de solidos disueltos y/o en suspensión. La interferencia por bandas
moleculares ocurre cuando la matriz tiene en cantidades grandes, compuestos
moleculares sumamente complejos; por ejemplo: una muestra de orina o de sangre. Al
quemarse la muestra en la flama, los componentes orgánicos que se encuentran en la
matriz de la muestra producen compuestos y radicales que son potenciales
absorbedores de radiación electromagnética. Si las bandas de absorción de estos
compuestos caen dentro del rango de la línea de absorción del elemento a determinar,
se tendrá una interferencia de tipo espectral, ya que se registrara una falsa
absorbancia.

1.4.4 Interferencias espectrales en fase gaseosa: Se deben a los siguientes

fenomenos en fase gaseosa que ocurren tanto en emision como en absorcion:

1.4.4.1 Por la dispersion de la radiacion por la presencia de particulas y de gotas:

Las particulas se originan en una atomizacion incompleta, mientras que las
gotas se forman por una nebulizacion deficiente. La dispersion dela luz
normalmente reduce la cantidad de luz que alcanza al transductor. Sin
embargo, en emision, la luz reflejada puede provocar un aumento en la señal.
Seria muy raro encontrarse con tales particulas en plasmas ICP.

Figura 9: Dispersión de la radiación por partículas y de gotas

1.4.4.2 Debido a la absorcion y emision molecular: Las moleculas producen
significativamente mas lineas espectrales que los atomos. El efecto de la
radiacion molecular o fondo que puede observarse a la derecha de la figura,
donde la señal varia rapidamente con la longitud de onda, se denomina fondo
estructurado y se debe a la estructura vibracional y rotacional de las
moleculas. En los analisis por emision atomica encontrar longitudes de onda en
los que se presenta el fondo estructural suele resultar dificil. Una forma de
resolver estas dificultades es utilizar una linea atomica de este mismo
elemento, pero en una region de longitud de onda diferente una donde no este
presente un fondo estructurado. Para la absorcion atomica, las tecnicas de
correccion de fondo funcionan bien incluso en presencia de fondos
estructurados.

Figura 10: Interferencia debido a la absorción y emisión molecular

1.4.4.3 Por emision de un espectro continuo procedente de la matriz: Se produce un

espectro continuo cuando la separacion entre niveles de energia se hace mas
pequeña que la anchura de la linea espectral; las lineas espectrales van juntas y
 sin resolucion. En la region continua. Este efecto se dice que esta sin
estructurar y normalmente se puede compensar con facilidad y efectividad.

Figura 11: Interferencia por emisión de un espectro continuo

1.4.4.4 La luz emitida por todos los objetos calentados: Va desde el calor rojo al calor
blanco y se la denomina radiacion de un cuerpo negro. Como podemos ver por
la fogura, la intensidad de la radiacion de un cuerpo negro varia
atenuadamente con la longitud de onda. La radiacion del cuerpo negro
trambien esta sin estructurar y puede compensarse con efectividad. En
espectrometria atomica la llama o el plasma pueden comportarse como un
cuerpo negro, asi como cualquier sustancia que atraviese el camino optico,
como pueden ser particulas no atomizadas.

Figura 12: Interferencia luz emitida por todos los objetos calentados
1.4.4.5 Por autoinversion de lineas espectrales: Debidas a la absorcion de la radiacion
emitida por partes menos calientes de la fuente. La autoinveriosn siempre
reduce la cantidad de luz que llega al transductor. Podemos compensar los
efectos de la autoinversion, pero las condiciones de llama/plasma tienen que
permanecer altamente estables para realizarlo con una buena precision.
No solamente influye sobre el fondo la muestra, sino que tambien afecta a la
atomizacion. Esto significa que el fondo difiere según que la muestra se atomice por
medio de una llama o el plasma o calentandola en un horno; las especies quimicas
presentes en la fase gaseosa dependen no solo de los componentes de la muestra o de
los reactivos del pretratamiento, sino tambien del sistema de atomizacion. Estos
detalles incluyen las temperaturas de las diversas zonas del atomizador (llama, plasma
u horno) asi como el tiempo de permanencia del compuesto a cada temperatura.
1.4.5 Interferencia quimica:

1.4.5.1 De la matriz : Afectan el numero de atomos libres que llegan al camino optico.
Precipitacion de la muestra antes del nebulizador, efectos de la viscosidad, la
tension superficial. pH. Presion de vapor del solvente, etc, dado que afectan la
nebulizacion. Por eso los patrones y las muestras deben ser lo mas parecidos
posibles en estas propiedades (mejor que un 10 %).

1.4.5.2 Formacion de compuestos estables (por ejemplo de los alcalino-terreos con

fosfatos, silicatos) los metales refractarios forman oxidos estables.Se resuelve
con la adicion de agentes liberadores (lantano-forma compuestos mas
estables), y el uso de la llama nitroso acetileno.
1.4.6 Interferencia de ionizacion: Si ocurre mucha ionizacion del analito, no lo tengo
en su estado base para excitarlo. La solucion es añadir una especie facilmente ionizable
(Na, K, Mg), en concetraciones de 1000 a 4000 ppm, para que se ionicen, den
bastantes electrones en la llama y se inhiba la ionizacion de los analitos de interes.
1.5 INTERFERENCIAS NO ESPECTRALES

1.6 INSTRUMENTACION EN EAA

CAPITULO II

ESPECTROSCOPIA MOLECULAR

2.1 DEFINICION

2.2 MEDIDA DE LA TRANSMITANCIA Y DE LA ABSORVANCIA

2.3 LEY DE BEER

Los métodos espectroscópicos de análisis están basados en la medida de la radiación
electromagnética que es absorbida o emitida por una sustancia. En función de ello se
clasifican fundamentalmente en: Métodos de absorción: Se basan en la disminución de
la potencia de un haz de radiación electromagnética al interaccionar con una
sustancia. Métodos de emisión: Se basan en la radiación que emite una sustancia
cuando es excitada previamente por medio de otro tipo de energía (térmica,
eléctrica…). Métodos de fluorescencia: Se basan en la radiación que emite la sustancia
cuando es excitada previamente por un haz de radiación electromagnética. Otras
clasificaciones de los métodos espectroscópicos se establecen en función de la región
del espectro electromagnético que interviene en la técnica. Así, pueden utilizarse
regiones como rayos X, ultravioleta, visible, infrarrojo, microondas, etc. En la Figura 1
pueden verse las regiones del espectro electromagnético, en función de los valores de
la longitud de onda (λ) de cada radiación:

En esta figura puede también observarse como la luz visible para el ojo humano
constituye únicamente una pequeña parte del espectro electromagnético. Dado que
los primeros métodos espectroscópicos desarrollados corresponden a la región del
visible recibieron la denominación de métodos ópticos, la cual se utiliza todavía con
frecuencia. A continuación, se ofrece una breve información sobre la ley de Lambert-
Beer y la espectrofotometría de absorción en la región visible del espectro. Si se
considera que se dispone de una fuente de radiación que hace llegar a la muestra un
haz de radiación, de longitud de onda previamente seleccionada, cuya potencia es P0,
la muestra de espesor b absorbe una parte de esa radiación incidente, de forma que la
potencia del haz disminuye después de atravesar la muestra siendo su nueva potencia
P. El cociente entre la potencia de la radiación que sale de la muestra y la de la que
incidió sobre ella, se define como transmitancia: T=P/P0. La transmitancia también
puede expresarse en tanto por ciento, multiplicando el cociente anterior por 100. Es
más frecuente utilizar el concepto de absorbancia, o densidad óptica, que se define
como el logaritmo de la transmitancia cambiado de signo: A = log (P0/P) = - log T De
acuerdo con estas expresiones, si la muestra no absorbe radiación, P y P0 coinciden,
por lo tanto A=0, y se transmite toda la radiación T=1 (100% de transmitancia). Si, en
otro caso, se transmite solo un 1% de radiación (T=0.01), P=P0/100, la absorción de
radiación que ha tenido lugar corresponde a A=2. Al incidir radiación electromagnética
visible sobre la materia puede ser totalmente absorbida o totalmente reflejada. En el
primer caso el objeto aparecerá de color negro y en el segundo de color blanco. Puesto
que nosotros percibimos los objetos por medio de la luz reflejada, si hacemos incidir
un haz de luz blanca (que contiene todas las longitudes de onda) sobre un objeto, éste
absorberá ciertas longitudes de onda y reflejará otras, siendo éstas últimas las
responsables del color. Se dice que este color (observado) es complementario del que
se percibiría si la luz absorbida se pudiera detectar. Dado que en la parte experimental
de esta práctica las medidas van a realizarse con espectrofotometría visible, es
conveniente conocer para qué longitud de onda tiene cada color su máxima absorción,
lo que se muestra en la tabla siguiente:

Para medir los valores de absorbancia y transmitancia de una disolución se utilizan

espectrofotómetros UV-Vis, que, como puede verse en la Figura 2, se componen de
cinco
elementos principales:
● Una fuente de radiación que suele ser una lámpara de filamento de wolframio
● Un monocromador que permite seleccionar una longitud de onda determinada
originando un haz monocromático.
● Un recipiente para contener la muestra denominado cubeta fabricado con un
material
que permite el paso de la radiación en la región del espectro de interés. Suelen ser de
vidrio, plástico o cuarzo. El espesor de la cubeta más habitual es 1 cm.
● Un detector que convierte la energía radiante en una señal eléctrica.
● Una pantalla de visualización

La absorbancia está relacionada con la concentración de la sustancia, c, por la ley de

Lambert-Beer, que se resume con la ecuación: A = ε b c , donde c se expresa en mol/L,
b es la longitud del camino óptico (anchura de la célula que contiene la disolución de la
sustancia) y se expresa en cm, y ε es la absortividad molar, propiedad característica de
cada sustancia correspondiente a la cantidad de radiación que absorbe a una longitud
de onda determinada por unidad de concentración, siendo sus unidades L mol-1 cm-1
(téngase en cuenta que la absorbancia no tiene unidades). Para poder aplicar la ley de
Lambert-Beer es necesario seleccionar previamente una longitud de onda puesto que
tanto A como ε varían con ella. Para ello se obtiene previamente el espectro de
absorción de la sustancia, que consiste en una representación de los valores de
absorbancia frente a la longitud de onda expresada en nanometros (nm). Del espectro
de absorción puede seleccionarse el valor de longitud de onda para el cual la
absorbancia
es máxima.
La Figura 3
muestra dos
ejemplos de
espectro de
absorción.
Si bien la ley de Lambert-Beer indica que a una representación gráfica de la
absorbancia frente a la concentración le correspondería una línea recta, esto sólo tiene
lugar para disoluciones diluidas, por ello, no es conveniente utilizar la expresión
matemática directamente, sino construir en cada caso la recta de calibrado que
confirme que la ecuación de Lambert-Beer se cumple en el intervalo de
concentraciones en el que se trabaja. Esta recta se construye midiendo la absorbancia
de una serie de disoluciones de concentración perfectamente conocida.

2.4 EFECTO DEL RUIDO EXPERIMENTAL EN LOS ANALISIS ESPECTROFOTOMETRICOS

En la actualidad, la técnica de absorción se ha vuelto de uso habitual en química, sobre

todo por su aplicación en áreas provenientes de la biología y de la química analítica.
Esto hace que los fundamentos de esta técnica se enseñen en los primeros años de las
carreras universitarias relacionadas con química. Con la utilización de los nuevos
espectrofotómetros, en su mayoría con un alto grado de automatización, es una gran
tentación convertirse en meros usuarios de estos equipos, descuidando aspectos
básicos relacionados con la calidad y confiabilidad de los datos obtenidos.

Conceptos básicos
Cada vez que se realiza una medición, la señal resultante está compuesta de:
• la señal analítica propiamente dicha (S), correspondiente a la cantidad que
deseamos medir y que está relacionada con alguna característica del analito
que nos interesa y,
• cualquier señal no deseada a la cual la calificaremos como ruido (N).
En la Figura 1 se muestra una señal típica proveniente de un detector de radiación
(tubo
fotomultiplicador). La resolución del sistema de detección es suficiente como para ver
las
fluctuaciones de la señal. A estas fluctuaciones las denominaremos ruido. Para una
serie de n
mediciones independientes (Ei) el valor de la señal estará representada por su media
aritmética:

Sin bien el ruido es la parte no deseada de la señal, es importante su estudio, ya que

esto
podría permitirnos diseñar estrategias para minimizarlo.
En una forma cuantitativa, la magnitud del ruido se puede expresar como:
• la desviación estándar de la señal (σE) obtenida a partir de un número n de
mediciones:

 su valor pico a pico (p-p), el cual está dado por la diferencia entre el valor
máximo y el valor mínimo de la señal para una serie de mediciones.
Ambas expresiones son usadas para cuantificar el ruido de la señal y su valor no es más
que la incerteza con que podemos determinar la señal analítica. A partir de estas
expresiones podemos calcular el error relativo de la señal (σE /E).
Para muchas mediciones el nivel de ruido es constante e independiente del nivel de la
señal analítica. Por lo tanto, a medida que la intensidad de la señal analítica decrece, la
degradación de la señal por el efecto del ruido es cada vez más evidente. La relación
S/N es un valor utilizado para determinar la calidad de una medición y está dada por

Es interesante notar que la

relación S/N no es más que
la recíproca del error
relativo de
la señal.
Tipos de ruidos
El ruido está presente en
cualquier sistema de
medición y, de acuerdo a su
naturaleza,
puede ser clasificado en dos
categorías: fundamental y
no-fundamental. Los ruidos
fundamentales provienen de
las propiedades intrínsecas
de la materia y por lo tanto
no
pueden ser completamente
eliminados. Los ruidos no-
fundamentales son causados
por
fluctuaciones que pueden
ser corregidas y mejoradas
con un adecuado diseño
experimental.
El ruido presente en una
señal puede ser:
Es interesante notar que la relación S/N no es más que la recíproca del error relativo
de
la señal.

Tipos de ruidos
El ruido está presente en cualquier sistema de medición y, de acuerdo a su naturaleza,
puede ser clasificado en dos categorías: fundamental y no-fundamental. Los ruidos
fundamentales provienen de las propiedades intrínsecas de la materia y por lo tanto
no
pueden ser completamente eliminados. Los ruidos no-fundamentales son causados
por
fluctuaciones que pueden ser corregidas y mejoradas con un adecuado diseño
experimental.
El ruido presente en una señal puede ser:
Ruido cuántico o de disparo (“shot”) (σs): Es un ruido fundamental que se
origina
de la estadística del proceso de conteo de partículas discretas, como ser: un flujo de
fotones o
electrones. Siempre que haya un proceso de conteo de partículas discretas, se
encuentra que
el número promedio de partículas por unidad de tiempo que pasa por un punto está
dado por
que la estadística de Poisson y por lo tanto el ruido estará dado por:
Σs= √ N
Ec. 3
donde N es la cantidad de partículas que han sido contadas. De este modo, cuando
prevalece ruido “shot” la relación S/N es directamente proporcional a la raíz cuadrada
de la intensidad de luz. En este caso un gráfico del logaritmo de la S/N versus el
logaritmo de S resulta en una pendiente de 0.5. Este tipo de ruido se espera que sea
dominante a bajos niveles de luz.
Ruido flicker (σf). Es un ruido no fundamental. Su principal característica es que
su valor es directamente proporcional con la intensidad de la señal, es decir:
σf = Eξsσ

donde
ξ
es el factor del ruido flicker y ES es la señal. En las mediciones de absorción este tipo
de ruido proviene principalmente de la variación de la intensidad de la lámpara o de la
incerteza en la posición de la celda.
Ruido oscuro (σd): se denomina así al ruido que aparece en condiciones de
ausencia de luz en el detector. Puede tener origen en pequeñas corrientes en el
detector, en fluctuaciones en la amplificación y eventualmente en la conversión
analógica-digital. En el caso de mediciones de absorbancia este ruido es el que se
observa a 0 % de transmitancia o cuando la cantidad de luz incidente es baja. Este tipo
de ruido no es función del nivel de la señal:

d Ec. 5
σd = k

Así, la relación S/N es directamente proporcional a la señal, por lo que una gráfica
log(S/N)
vs log(S) conduce a una recta cuya pendiente vale 1 cuando este es el ruido
dominante.

2.5 INSTRUMENTACION

ESPECTROSCOPÍA DE ABSORCIÓN ATÓMICA CON LLAMA Y ELECTROTÉRMICA

Instrumentos para la espectroscopia de absorción atómica

En esencia el equipo de absorción atómica consta de tres partes como muestra la

figura 7.2: una fuente de radiación, un medio para la obtención de átomos libres y un
sistema para medir el grado de absorción de la radiación.

Figura 2 Esquema de equipo de AAS

Fuentes de radiación
La fuente de radiación característica debe poseer tres propiedades fundamentales: •
Monocromaticidad: la línea de resonancia se debe poder seleccionar con toda
precisión exactamente a la longitud de onda del elemento a determinar. • Intensidad:
deber ser lo suficientemente intensa a la longitud de onda de interés. • Estabilidad:
suficiente como para poder realizar las medidas sin fluctuaciones considerables. •
Actualmente hay varias fuentes de radiación utilizables: las de emisión continua, que
abarcan el espectro desde el ultravioleta lejano hasta el visible y las fuentes de emisión
discontinua, que emiten únicamente a longitudes de onda muy concretas. En la figura
7.3 se muestra una tipo de fuente de radiación discontinua es decir, una lámpara de
descarga sin electrodos o EDL.
Las fuentes de emisión continua son muy buenas, pero necesitan un monocromador
de un elevado poder de resolución cuyo precio es muy alto. Por esta razón son más
utilizadas las fuentes de emisión discontinua, entre las que se pueden distinguir las
lámparas de cátodo hueco y las lámparas de descarga sin electrodos. Tanto unas como
otras requieren un período de calentamiento antes de comenzar las mediciones. Sin
embargo, se debe destacar que las lámparas de descarga sin electrodos tienen un
elevado precio y requieren un elevado tiempo de calentamiento, pero presentan la
ventaja de alta intensidad de emisión frente a las lámparas de cátodo hueco.

. Atomizadores con llama

Su función es convertir los átomos combinados de la muestra en átomos en estado

fundamental, para ello es necesario suministrar a las muestras una cantidad de energía
suficiente para disociar las moléculas, romper sus enlaces y llevar los átomos al estado
fundamental. En la figura 7.4 se representan las etapas por las que pasa la muestra
hasta obtener átomos en estado fundamental
Los componentes necesarios para obtener los átomos en estado fundamental son:
• Nebulizador: cuya misión en convertir la muestra aspirada en una nube de tamaño
de gota muy pequeño.
• Cámara de premezcla: donde penetra la muestra una vez se ha nebulizado. En ella se
separan las pequeñas gotitas que forman la niebla mezclándose la muestra nebulizada
con el oxidante y el combustible íntimamente.
• Mechero. Se sitúa sobre la cámara de premezcla, y por él sale la llama con
temperatura suficiente para poder comunicar a la muestra la energía suficiente para
llevar los átomos a su estado fundamental.
• La llama es el medio de aporte de energía a la muestra. Entre las llamas se diferencia
entre la de aire-acetileno y la de óxido nitroso-acetileno. Como puede observarse en la
figura 7.5, en la llama se pueden distinguir tres zonas:
- La zona interna: es la más próxima al mechero, de color azul y con temperatura
relativamente baja.
- La zona de reacción: donde se produce la atomización.
- La zona externa: Es la parte más fría de la llama.
Monocromadores Tienen como función seleccionar la línea de absorción,
separándola de las otras líneas de emisión emitidas por el cátodo hueco. Los
aparatos comerciales suelen venir equipados con monocromadores del tipo de
prima o red de difracción.

. Detectores Miden la intensidad de la radiación antes y después de la

absorción por la muestra. A partir de los valores obtenidos se podrá calcular la
radiación absorbida. En los aparatos comerciales se emplean tubos
fotomultiplicadores.

Modulación La llama emite energía continuamente a longitudes de onda no

deseadas, produciendo interferencia y una gran inestabilidad en las lecturas.
Los detectores que se utilizan son sensibles a determinadas frecuencias,
ignorando las señales continúas ocasionadas por la llama. Por ello, se modula el
sistema de alimentación de las lámparas a la misma frecuencia que el tubo
fotomultiplicador.

Sistema óptico Su función es conducir las radiaciones emitidas por la lámpara a

través del sistema de obtención de átomos en estado fundamental y el
monocromador hasta llegar al detector. El sistema óptico está formado por:

- Espejos y lentes, que focalizan sobre la llama la mayor cantidad de energía

emitida por la lámpara y la sitúan a la entrada del monocromador.
- Láminas planoparalelas, que se utilizan para aislar los demás elementos del
exterior.
- Rendijas que, como se ve en la figura 7.6, se sitúan una a la entrada para
obtener un haz paralelo y estrecho procedente de la lámpara y otra a la salida
para seleccionar la longitud de onda adecuada eliminando el resto de las
emisiones.
De acuerdo con el sistema óptico, los aparatos de absorción atómica pueden
ser de doble haz y de haz simple. En los aparatos de doble haz parte de la
radiación pasa a través de la muestra y otra parte va directamente al detector.
Estos equipos presentan la ventaja de que las variaciones de la intensidad de la
fuente de radiación son compensadas automáticamente. Sin embargo, estos
aparatos son más caros que los de haz simple.

ESPECTROSCOPÍA DE EMISIÓN ATÓMICA DE LLAMA

Instrumentación

Los instrumentos para trabajar con emisión de llama son similares a los
instrumentos de absorbancia de llama, excepto por el hecho de que en los
primeros la llama actúa como fuente de radiación.

En la espectrofotometría de emisión de llama, la muestra en solución es

nebulizada e introducida dentro de la llama, en donde es desolvatada,
vaporizada y atomizada, todo esto en rápida sucesión. Subsecuentemente, los
átomos y las moléculas se elevan a estados excitados por colisiones térmicas
con los constituyentes de los componentes de la llama parcialmente
quemados.

Durante su regreso a un estado electrónico basal o más bajo, los átomos y

moléculas emiten la radicación característica de los componentes de esa
muestra. La luz emitida pasa por un monocromador que aisla la longitud de
onda específica para el análisis deseado. Un fotodetector mide la potencia
radiante de la radiación seleccionada, que entonces es amplificada y enviada a
un dispositivo de lectura: medidor, registrador o sistema con
microcomputadora.

Un instrumento de FES típico se muestra en la figura 7.10:

Comparación entre los métodos de absorción y emisión.

Principales ventajas e inconvenientes de los dos métodos más utilizados de

espectroscopia de llama:
o Instrumentos. La principal ventaja de los procedimientos de emisión
consiste en que la llama actúa como fuente. Por el contrario, los
métodos de absorción necesitan de una lámpara diferente para cada
elemento. La calidad del monocromador de un instrumento de
absorción no tiene que ser tan alta para alcanzar el mismo grado de
selectividad. - Habilidad del operador. Los métodos de emisión
requieren un mayor grado de habilidad por parte del operador.
o Corrección del fondo. Las correcciones de los espectros de banda se
realizan con mayor facilidad y por lo general con más exactitud en los
métodos de emisión.
o Precisión y exactitud. En manos de un operador experto, la
incertidumbre es la misma para ambos procedimientos (±0,5 a 1%
relativo). Con personal menos entrenado, los métodos de absorción
atómica presentan menos problemas.
o Interferencias. Ambos métodos sufren interferencias químicas
semejantes.
o Límites de detección. Ambos procedimientos presentan unos límites de
detección complementarios.
ESPECTROSCOÍA DE EMISIÓN ATÓMICA BASADA EN LA ATOMIZACIÓN CON
PLASMA (ICP)

El plasma Un plasma es una mezcla gaseosa conductora de la electricidad que

contiene una concentración significativa de cationes y electrones. En el plasma
de argón que se utiliza en los análisis de emisión, los iones de argón y los
electrones son las principales especies conductoras, aunque los cationes de la
muestra también están. Espectroscopia de emisión y absorción atómica
presentes en menor cantidad. Los iones argón, una vez que se han formado en
un plasma, son capaces de absorber suficiente potencia de una fuente externa,
como para mantener un nivel de temperatura en el que la ionización adicional
sustenta el plasma indefinidamente.

La antorcha

La fuente de alimentación empleada para mantener un nivel de temperatura

de 10000K es la de plasma acoplado inductivamente (ICP) denominada
antorcha, figura 7.11.

La fuente de plasma acoplado inductivamente consiste en tres tubos

concéntricos de cuarzo a través de los cuales fluye una corriente de argón con
un caudal total comprendido entre 11 y 17 L/min.
El diámetro del tubo más grande es aproximadamente de 2.5cm. Rodeando la
parte superior de este tubo se encuentra una bobina de inducción refrigerada
por agua, alimentada por un generador de radiofrecuencia capaz de producir
una potencia de 2kW a unos 27MHz.

La ionización del argón que fluye se inicia por medio de una chispa que
proviene de una bobina Tesla.

Espectroscopia de emision y absorción atómica

Generador de radiofrecuencia El generador de frecuencia produce un

cambio magnético oscilante con el que interaccionan los iones
resultantes y los electrones asociados a la ionización del argón.

Bobina de inducción Dentro de la bobina de inducción se produce la

interacción entre los iones y los electrones y como consecuencia, estos
iones y electrones se mueven en trayectorias anulares cerradas; el
calentamiento atómico es una consecuencia de la resistencia a este
movimiento. La temperatura del plasma así formado, es
suficientemente elevada como para hacer necesario el aislamiento
térmico del cilindro externo de cuarzo. Para lograr este aislamiento, se
hace fluir argón en forma tangencial alrededor de las paredes del tubo.
El caudal de esta corriente de argón es de unos 5 a 15ml/min. Este flujo
tangencial enfría las paredes inferiores del tubo central y centra el
plasma radialmente.

Sistemas de introducción de muestras.

-La muestra se introduce dentro del plasma caliente por el extremo superior de
los tubos mediante un flujo de argón de 0.3 a 1.5 L/min a través del tubo de
cuarzo central. La muestra puede ser un aerosol, un vapor generado
térmicamente por una chispa, o un polvo fino.

El dispositivo que más se utiliza para la inyección de las muestras, tiene una
construcción semejante a la de los nebulizadores que se emplean en los
métodos de llama.

Otro método que se puede utilizar para la introducción de muestras líquidas y

sólidas en un plasma es la vaporización electrotérmica. En este caso, la muestra
se vaporiza en un horno el cual sólo se utiliza para la introducción de la muestra
y no para la atomización de la muestra.

Tipos de instrumentos

• Instrumentos secuenciales Son menos complejos y, por lo tanto, más

baratos. Miden intensidades de línea una por una. Se programan para ir de la
línea de un elemento a la de otro, parando el tiempo suficiente para obtener
una relación señal/ruido satisfactorio.
• Instrumentos multicanal Se diseñan para medir simultáneamente las
intensidades de las líneas de emisión de un gran número de elementos. Cuando
se han de determinar varios elementos, es evidente que el tiempo de
excitación será bastante mayor con los instrumentos secuenciales; por ello,
aunque estos instrumentos son más simples, resultan caros en términos de
consumo de muestra y tiempo.

Espectroscopia de emision y absorción atómica

Ventajas y desventajas de la ICP

o Ventajas:
- Menor interferencia entre elementos consecuencia directa de sus
temperaturas más elevadas.
- Se pueden obtener buenos espectros para la mayoría de los elementos
con unas mismas condiciones de excitación, y en consecuencia, es
posible registrar simultáneamente los espectros para docenas de
elementos.
- Permiten la determinación de bajas concentraciones de elementos que
tiende a formar compuestos refractaorios, esto es, compuestos que son
muy resistentes a la descomposición térmica, tales como B, P, U, Zr Nb.
- Permiten la determinación de no metales como Cl, Br, I y S.
- Son aplicables en unos intervalos de concentración que abarcan varios
órdenes de magnitud.
- Menos tiempo de análisis.

o Desventajas:
- Equipo más caro.
- Mayor coste de operación que la espectroscopia de absorción atómica.
- Menor precisión que la espectroscopia de absorción atómica.

Aplicaciones de la ICP

Las fuentes de plasma acoplado inductivamente proporcionan datos analíticos

mucho mejores que otras fuentes de emisión. La calidad de estos resultados
radica en la gran estabilidad, bajo ruido, poca radiación de fondo y en la
ausencia de interferencias de las fuentes, cuando se opera en las condiciones
experimentales apropiadas. Esta técnica se emplea para una amplia variedad
de aplicaciones, ya que un gran número de elementos pueden ser
determinados rápidamente a niveles traza (ppm, ppb), y porque una amplia
variedad de tipos de muestras pueden ser analizados utilizando esta técnica.
 • Agricultura y alimentos: Análisis de suelos, fertilizantes, materias vegetales,
alimentos... Requiere una rigurosa preparación de la muestra.
• Biología y clínica: El mayor problema de los ensayos de esta campo, está en la
contaminación de las muestras antes del análisis. Ejemplos de
determinaciones: - Cr, Ni y Cu en orina. - Al en sangre. - Cr en heces. - Ni en
leche materna. - B, P y S en huesos.
• Geología: Las aplicaciones van desde los elementos mayoritarios, minoritarios
y los traza.
• Medio ambiente y aguas: Se requiere un tratamiento previo de la muestra
con digestiones ácidas, microondas... Incluyen análisis de suelo, sedimentos,
tejidos animales y vegetales, además de varios tipos de aguas.

Espectroscopia de emisión y absorción atómica

• Metales: Una dificultad asociada es el gran número de interferencias

espectrales de algunos metales. Aun así, se obtienen buenos resultados.