Reacciones con múltiples sustratos

Gran parte de las reacciones enzimáticas presentan 2 o más sustratos. En buena

parte de ellas el 2º sustrato es el agua (hidrólisis), cuya concentración es más de 1000
veces superior a la del otro sustrato, pudiendo considerarse constante, de forma que
se cae en un tratamiento semejante al de Michaelis-Menten. En el caso de existir
efectivamente 2 sustratos, un posible tratamiento matemático es el siguiente:

E + S1 ES 1
k1
E + S2 ES 2
k2

ES1 + S 2 ES 1 S 2
k12

ES 2 + S 1 ES1 S 2
k 21

ES 1 S 2 P+E
k

V = K [ES1S2]

Llamando:

[E] = e [ES1] = es1 [ES1S2] = es1s2

[S1] = s1 [ES2] = es2 [Eo] = eo
[S2] = s2
Tenemos:
eo = e + es1 + es2 + es1s2
Entonces se debe hallar el valor de es1s2 para tener la ecuación de V.

K1. es1 = (eo - es1 - es2 - es1s2 ) s1

K2. es2 = (eo - es1 - es2 - es1s2 ) s2

K12. es1s2 = es1. s2 → es1 = K12 . es1s2 / s2

K21. es1s2 = es2. s1 → es2 = K21 . es1s2 / s1

K 12 es1 s 2
K1 = (eo − es1 − es 2 − es1 s 2 ) s1
s2
K1 K12 = K 2 K 21
K es s
K 2 2 1 1 2 = (eo − es1 − es 2 − es1 s 2 ) s 2
s1

K 12 es1 s 2 K es s K es s
K1 = (eo − 12 1 2 − 2 1 1 2 − es1 s 2 ) s1
s2 s2 s1
eos1 eo
es1 s 2 = =
K 1 K 12 K 12 s1 K 1 K 12 K 21 K 12
+ K 21 + + s1 + + +1
s2 s2 s1 s 2 s1 s2

Por tanto:

K [ Eo ]
v= (*)
K 1 K 12 K K
+ 21 + 12 + 1
s1 s 2 s1 s2

S1 KEoS 2 K12 K1 + K 21S 2

o v = v max * , donde: v max * = Km* =
K m * + S1 S 2 + K 12 S 2 + K12

La determinación de las constantes de esta ecuación es un proceso bastante

trabajoso, descrito con detalles por Dixon y Webb, basándose en el mantenimiento de
un sustrato constante y variando el otro y viceversa.
Por otro lado, si los sitios activos de la enzima son diferentes para cada sustrato, no
ocurrirá interferencia en las respectivas afinidades, o sea, K1 = K21 y K2 = K21, de
forma que la ecuación se reducirá a:

S1S 2
K [ Eo ]
K1K 2
v=
S1 S2
(1 + )(1 + )
K1 K2

REACCIONES CON INHIBICIÓN