INSTITUTO POLITECNICO NACIONAL

Unidad Profesional Interdisciplinaria de Biotecnología

Producción de un aminoácido (lisina)

2LM2

Integrantes
 Casanova Priego Sandra
 Castañeda Olvera Mahonri
 Cruz Reyes Michael Misael
 Martínez Escalante Adán Sebastián
 Zarate Zúñiga Carla Gabriela

Fecha de entrega: 4 de junio de 2018

Profesora: Guadalupe Verenice López

1
 Índice

Introducción 3
Características de la L-lisina 6
Reacción de la formación de la L- lisina 6
Importancia de la producción de aminoácidos en américa latina 6
Metodología 8
Glosario 6

3
6

3
6

3
6

2
Objetivo general
- Reconocer la importancia de los metabolitos en la industria alimentaria.
- Realizar un proceso para la producción de un aminoácido.
Objetivo especifico
- Evaluar la producción de L-lisina mediante procesos químicos a partir de
ciertos microorganismos
Introducción
Se llevará a cabo la producción de un aminoácido, en este caso de la L- lisina, los
aminoácidos son compuestos orgánicos que presentan un grupo carboxílico y un
grupo amino unidos a un mismo átomo se carbono, este carbono se encuentra
unido a una cadena lateral que los diferencia entre sí, que se combinan para
formar proteínas. Entre sus funciones, los aminoácidos ayudan a descomponer los
alimentos, al crecimiento, reparar tejidos corporales y pueden ser una fuente de
energía.
Las cadenas laterales, o grupos R de los aminoácidos difieren en su estructura,
tamaño y carga eléctrica, y determinan sus propiedades fisicoquímicas, como su
solubilidad y su comportamiento en la cadena peptídica 1.
Numerosas proteínas contienen derivados aminoácidos, que se forman a su vez
sintetizada la cadena polipeptídica como modificaciones postraduccionales y no se
encuentran codificados en el código genético.
De los cerca de 250 aminoácidos que existen, hay 20 aminoácidos denominados
protinogenicos2, que se consideran importantes y esenciales para el correcto
funcionamiento del organismo, entre estos se encentran:
- Esenciales: no los produce el cuerpo y por lo tanto se adquieren de
alimentos
o Histidina o Fenilalanina
o Isoleucina o Treonina
o Lisina o Triptófano
o Metionina o Valina

- No esenciales: los produce el cuerpo

o Alanina o Acido aspártico
o Asparagina o Ácidoglutámico

- Condicionales: son necesarios para disminuir enfermedades o el estrés.

o Arginina o Tirosina
o Glutamina o Glicina

3
 o Ornitina o Serina
o Prolina

La lisina es un aminoácido esencial, el cuerpo no puede sintetizar lisina por sí

mismo y por lo tanto tiene que depender de fuentes extremas para conseguirlo.
El valor biológico o nutritivo de una proteína está determinado por el contenido y la
proporción que presente de aminoácidos esenciales. La L-lisina es uno de los
aminoácidos esenciales más importantes que existen para la nutrición humana y
animal.
La L-lisina pertenece al grupo de los ácidos alifáticos diaminomonocarboxílicos, es
de color blanco o amarillento, según el grado de pureza obtenido durante el
proceso de recobrado. Presenta un olor característico, es insoluble en alcohol y
éter, y soluble en agua. 

La L-lisina es uno de los 9 aminoácidos esenciales, el cuerpo humano no puede

producirlo por sí mismo y este debe ser obtenido en la ingesta de alimentos. EL
cuerpo necesita de este aminoácido para el crecimiento adecuado y reparación de
tejidos, los niños debido a que se encuentra en etapa de crecimiento necesitan
consumir 3 o 4 veces más que los adultos.

La lisina es un componente de las proteínas y es importante en la producción de

algunas enzimas, hormonas, anticuerpos y colágeno. Participa en la absorción de
calcio, haciéndola importante para la salud de huesos y dientes. La lisina junto con
la metionina, produce la materia para la síntesis de la carnitina, que esta a su vez
promueve la síntesis de ácidos grasos a nivel celular. La vitamina C, se necesita
para la conversión de la lisina a hidroxilisina, que se convierte en colágeno.

Hoy en día la podemos encontrar comúnmente e alimentos comoel yogur,

pescado, queso, levadura de cerveza, germen de trigo, carne de cerdo y otras
carnes.

El efecto más notable de L-lisina es su efecto contra las infecciones virales,

especialmente infecciones por herpes, por ejemplo, el herpes labial o herpes
zoster, y este presenta menos eficiencia en el herpes genital. Tras el
descubrimiento inicial de que la arginina tenía un estimulador del crecimiento y la
lisina inhibidor sobre el crecimiento de cultivos de herpes de fluidos, se realizó un
estudio clínico el cual revelo que cuando el equilibrio de lisina y arginina se
mantiene en niveles adecuados, se da una replicación de células del virus. Si un
virus absorbe la lisina, que en su estructura química es similar a la arginina, estas
compiten una con otra, y cuando hay exceso de lisina, la cual es inhibidor del
crecimiento poblacional de un virus, y este hecho hará que se reduzca la
absorción de la arginina.

Se debe evitar el consumo en exceso de arginina, no debe tomarse como

suplemento, a causa de que tiene efecto directo sobre la hormona del crecimiento,

4
y así provoca daños directos sobre el páncreas, también se necesita la L-lisina
para la formación de anticuerpos.

Los vegetarianos a menudo tienen una deficiencia de lisina, debido a que este
aminoácido esta en bajas concentraciones en ciertas proteínas a base de granos.
Los síntomas de una deficiencia de lisina son, fatiga, reducción de capacidad de
concentración, fatiga crónica, inhibición del crecimiento y reducción de la
inmunidad.

La L-lisina es el primer aminoácido que se obtiene industrialmente. El proceso de

producción se realizaba mediante la hidrólisis de la caseína. Posteriormente surge
otro proceso de producción industrial, donde este aminoácido se extraía del gluten
de trigo y soja desgrasado, para ser purificado luego utilizando resinas de
intercambio iónico, sin embargo, el proceso presentaba bajos rendimientos y el
costo del producto final era muy elevado. También se obtiene L-lisina mediante
síntesis química, aunque este proceso tiene como limitación la formación de
mezclas racémicas3.

Análisis hechos en laboratorio, resultaron quela especie Micrococcus glutamicus

con una deficiencia de biotina en sus células, estimula la síntesis del glutamato y
la producción de aminoácidos entre ellos la lisina.

Actualmente existen dos rutas fundamentales mediante las cuales se obtiene L-

lisina a escala industrial por vía fermentativa:

- Proceso del ácido diaminopimélico: Es un proceso ya obsoleto que ocurre

en dos etapas. Generalmente se obtienen menores rendimientos en
comparación con el segundo proceso.

- Proceso de Kinoshita: Mediante este método se obtiene la L-lisina de forma

directa, es decir, utilizando un solo paso de fermentación. En este proceso
se emplean microorganismos auxótrofos4 tales como Micrococcus
glutamicus, Brevibacterium flavum o Corynebacterium glutamicus,
modificados genéticamente.

Este último proceso es más utilizado hoy en día, y para obtener altos rendimientos
del aminoácido el medio de fermentación deberá tener cantidades importantes de
biotina y tiamina. Es por ello que una de las materias primas más utilizadas en
este proceso es la miel final de caña, aunque también se deberá agregar harina de
soya o extracto de licor de maíz.

En la producción de L-lisina por vía fermentativa existen dos formas

fundamentales de presentación del producto de acuerdo con el grado de pureza
final que se necesite. El denominado bioconcentrado, con una pureza del 15 – 25
%, y la L-lisina hidroclórica cristalina (L-lisina HCl), con una pureza del 98%.

5
Entre los usos que presenta este producto se pueden mencionar el
enriquecimiento de cereales para la nutrición humana, como materia prima para la
industria farmacéutica y en la formulación de piensos para el ganado no rumiante.

Características de la L-lisina
La L-lisina es un aminoácido para uso exclusivo de la alimentación animal. La
lisina es un aminoácido esencial y por lo tanto debe ser suplementado por la dieta,
es un elemento estructural de proteínas, interviene en la formación de los tejidos
cartilaginosos, estimula la división celular y esta implicado en procesos
metabólicos fundamentales en nutrición y salud.
El producto final L-lisina HCl presenta las siguientes características.

Reacción de formación de la L-lisina

Esta reacción ocurre durante la etapa de fermentación industrial y se lleva acabo
de acuerdo a la ecuación estequiometrica
C 6 H 12 O6 +1.88 O2 +0.89 N H 3 → 0.35C 6 H 14 O2 N 2+ 0.39C 4 H 6.5 O2 N 0.5 +3.6 H 2 O+ 2.34 C O2

Esta reacción presenta un rendimiento del orden de 85 – 90 % con respecto a la

glucosa suministrada.

Importancia de la producción de aminoácidos en América Latina.

La lisina junto con la treonina, aminoácidos limitantes para el crecimiento aves y

cerdos, son estrictamente esenciales porque los animales, a diferencia de los
vegetales no poseen las vías metabólicas para sintetizarlos. Al no haber síntesis
endógena de estos aminoácidos, los mismos deben ser suministrados
obligatoriamente a través del alimento balanceado, ya sea por la lisina y la

6
treonina presentes en los ingredientes proteicos o energéticos habituales, ya sea
por la lisina y la treonina industriales. Históricamente, los alimentos balanceados
fueron formulados para suministrar lisina y treonina a partir de la proteína intacta
del alimento. La formulación de alimentos balanceados para aves y cerdos tenía
como base un mínimo de proteína cruda, resultando frecuentemente en alimentos
balanceados con un contenido de aminoácidos que excedía las exigencias de los
animales.

A partir de la producción local de la lisina en 1997 y de la treonina en 2006, que

permitieron el suministro seguro y a precios más accesibles de estos dos
aminoácidos en toda América Latina, los nutricionistas pudieron formular alimentos
balanceados adecuados, ya que pasaron a tener con prontitud disponibilidad de
ambas materias primas. Siguiendo la misma

La utilización de aminoácidos industriales también permite alimentar

adecuadamente a los animales incluso en períodos críticos, como durante la
nutrición de pollitos y lechones o en situaciones de elevadas temperaturas
ambientales, cuando el consumo de alimento balanceado está normalmente
reducido, no siendo posible ingerir cantidades adecuadas de aminoácidos a partir
de la proteína intacta del alimento. En el período de calor, por ejemplo, la
reducción del consumo de alimento balanceado ocurre para minimizar el
incremento calórico generado por la digestión, principalmente a partir de la
proteína intacta del alimento, lo que aumenta el calor corporal. La utilización de
aminoácidos industriales, que son aminoácidos libres, prontamente absorbibles,
permite reducir los niveles de proteína cruda del alimento balanceado y adecuar el
consumo de aminoácidos esenciales, mejorando el rendimiento animal.

7
Metodología
Materia Prima Principal
 Como materia prima principal se utiliza la miel final de caña, ya que contiene de
forma natural la vitamina biotina y otros compuestos nutritivos necesarios para que
se sintetice la L-lisina.

Proceso
1. Propagación

A escala del laboratorio, el cultivo celular contenido en los frascos de

propagación es traspasado al Cultivador, en el cual los microorganismos
son cultivados bajo condiciones aerobias y de agitación. Esta etapa tarda
entre 18 a 26 horas.

El contenido del cultivador es inoculado en el pre-fermentador, en el cual

existe un medio líquido apropiado con los nutrientes necesarios para que
ocurra la multiplicación de las células también bajo condiciones aerobias y
con agitación. Dura alrededor de 20 horas.

8
 Esquema de la obtención de la L- Lisina.

Propagación en el cultivador:

El cultivo celular contenido en los frascos de Son cultivados bajo

Entre 18 – 26 horas.
propagación es traspasado al Cultivador, demora condiciones aerobias
entre 18 – 26 horas. y agitación
Propagación en el pre-fermentador:

El contenido del cultivador es inoculado en el pre- Bajo

Dura alrededor
de 20 horas. fermentador, en el cual existe un medio líquido condiciones
apropiado desde el punto de vista nutritivo para que aerobias y con
ocurra la multiplicación de las células
Se utiliza un
Fermentación industrial: medio de
Tiene un cultivo
En esta fase ocurre la producción de la L-lisina mediante la
tiempo de compuesto
transformación enzimática intracelular de los carbohidratos
duración y nitrógeno amoniacal contenido en el medio líquido. A mayormente
cercano a las continuación, la L-lisina formada atravesará las paredes por miel final,
72 horas celulares y se acumulará en el caldo de fermentación. harina de
soya, y ciertas
sales.

Columna de El caldo es centrifugado .Este sobrenadante es acidificado

intercambio hasta alcanzar un pH cercano a 7 utilizando ácido sulfúrico Centrífugas de
iónico con concentrado (98 %). Esto favorecerá el proceso de disco continuas,
una resina separación del aminoácido (intercambio iónico). El con el fin de
catiónica sobrenadante acidificado es enviado hacia una columna separar la
fuerte donde la L-lisina es adsorbida por dicha resina sólida, biomasa del
mientras que el resto del líquido atravesará la misma. sobrenadante rico
en aminoácido.

De esta manera, el proceso de fermentación industrial puede subdividirse en

dos etapas
Fase de crecimiento: el
microorganismo productor se
multiplica y crece, obteniéndose una
cantidad de biomasa lo
suficientemente elevada que permita
asegurar una alta eficiencia en la
producción del aminoácido.  temperatura (28–30 ºC), aireación,
Fase de biosíntesis: Los carbohidratos y el
nitrógeno contenidos en la miel final son
transformados por el microorganismo para
formar la L-lisina. Esta constituye sin duda
alguna la fase más compleja de todo el
proceso de producción, ya que deberá
exigirse un estricto control de todas las
variables importantes relacionadas con la
fermentación, tales como pH (7,0),
agitación, etc., para así lograr una 9
adecuada concentración final del
aminoácido. La concentración final de L-
lisina en el caldo de fermentación oscilará
entre 75–80 g/L.
Recuperación

Evaporador de
La L-lisina adsorbida es separada de la resina empleando triple efecto de
una solución amoniacal. El eluato amoniacal que contiene película
la L-lisina se envía hacia un evaporador descendente y
calentamiento por
Acidificación/Purificación Primaria placas.

La corriente concentrada a la salida del evaporador es

acidificada nuevamente empleando ácido clorhídrico al 35%,
Agitación lenta y
con el fin de obtener la forma salina de la lisina, es decir, el
enfriamiento entre
clorhidrato de L-lisina o sal hidroclórica (lisina-HCl) la cual es
15–25 ºC, en los
fácilmente cristalizable. La Lisina-HCl obtenida es enviada
cuales se forman y
hacia unos cristalizadores verticales provistos de agitación
crecen los cristales
de Lisina-HCl. 
Concentración/Separación/Secado

Terminado el proceso de cristalización, los cristales

formados son separados del licor madre empleando Durante el
centrifugas de canasta, mediante el cual se obtienen secado se elimina
cristales húmedos que son enviados finalmente hacia la humedad
un secador de lecho fluidizado. Por su parte, el licor residual de estos
madre es recirculado como alimentado en la etapa de cristales hasta
evaporación. alcanzar un valor
mínimo de 1,5%
(98 % de pureza).
Envase

Por último, los cristales secos se envasan

en sacos de papel de cuatro capas con
una capa intermedia de polietileno.

10
Esquema representativo

11
Equipamiento empleado en el proceso de producción

12
EQUIPO FUNCIÓN
Cultivador Propagación de células
Pre-fermentador Propagación de células
Fermentador industrial Propagación de células
Tanque agitador 1 Preparación de medios de cultivo para
el pre-fermentador
Tanque agitador 2 Pre-tratamiento de la miel
Tanque agitador 3 Recepción del caldo de fermentación
Centrífuga de discos Separación de biomasa
Tanque agitador 4 Primera acidificación empleando
H2SO4
Columnas de intercambio iónico Separación de componentes de la L-
lisina
Evaporadores Concentración de la L-lisina
Tanque agitador 5 Segunda acidificación utilizando HCl
Cristalizador Formación de cristales de L-lisina HCl
Centrífuga de canasta Separación de los cristales de L-lisina
HCl
Secador de lecho fluido Secado de los cristales de L-lisina HCl
Ensacadora Envase de la L-lisina HCl
Bombas centrífugas Transporte de líquidos
Compresor centrífugo Suministro de aire comprimido para la
fermentación y la automática del
proceso
Filtros Filtración del aire de entrada y gases de
salida de los fermentadores

Suposiciones

Se establece un tiempo de vida del proyecto de 20 años, con 15 meses para llevar
a cabo la construcción y puesta en marcha de la planta. Se asume una
depreciación constante del tiempo de vida del equipamiento empleado, y que la
planta  opera a un 85 % de su capacidad. Por otro lado, se asume una tasa de
interés del 15 % para determinar el Valor Actual Neto (VAN), y un 25% de
impuestos por concepto de ingresos. Por último, se establece un tiempo de 30
días al año para efectuar el mantenimiento de los equipos, accesorios y sistemas
auxiliares de la planta, por lo que la misma trabaja 7 920 horas al año como
máximo.

Glosario

13
1.- Peptídico:
El enlace peptídico es un enlace entre el grupo amino (–NH2) de un aminoácido y
el grupo carboxilo (–COOH) de otro aminoácido1. Los péptidos y
las proteínas están formados por la unión de aminoácidos mediante enlaces
peptídicos
2.-Protinogénicos:
Los aminoácidos son sustancias orgánicas caracterizadas por contener en su
molécula un grupo amino (-NH2) y un grupo carboxilo (-COOH). De todos los
aminoácidos naturales conocidos, los más comunes son aquellos que forman
parte de las proteínas y que están codificados en el material genético. Estos
aminoácidos son los que se conocen como aminoácidos proteinogénicos.

3.- Racémicas:
Es una mezcla en la cual dos compuestos químicos con actividad óptica, que
guardan entre sí la relación de imágenes especulares, son encontrados en
proporciones equivalentes. Es decir l y d estereoisómeros están presentes en un
50 %.
4.-Auxótrofo:
Se dice que un microorganismo es auxótrofo cuando solo es capaz de proliferar en
un medio de cultivo si a este se ha añadido alguna sustancia específica, que el
tipo silvestre, llamado protótrofo, no requiere, porque es capaz de sintetizarla.
5.- Propagación
Multiplicación por vía de reproducción.
6.-Enzimas intracelulares
Biocatalizadores orgánicos que se utilizan en las mismas células que las elaboran.
7.-Fermentación
Proceso catabólico de oxidación incompleta, totalmente anaeróbico, siendo el
producto final un compuesto orgánico.
8.-Biomasa
Nombre dado a cualquier materia orgánica de origen reciente que hay derivado de
animales y vegetales como resultado del proceso de conversión fotosintético. La
energía de la biomasa deriva del material de vegetal y animal.

9.-Aireación
14
Técnica que se utiliza en el tratamiento de aguas que exige una fuente de
oxígeno, conocida comúnmente como purificación biológica aeróbica del agua. El
agua es traída para ponerla en contacto con las gotitas de aire o rociando el aire
se trae en contacto con agua por medio de instalaciones de la aireación. El aire es
presionado a través de la superficie del agua, este burbujea y el agua se provee
de oxígeno.
10.-Amoniacal
Del amoniaco o relativo a este compuesto gaseoso.
11.-Hidroclórica
Que pertenece o concierne a cualquier combinación o compuesto de cloro e
hidrógeno. 
12.-Cristalizable
Que se puede cristalizar. La cristalización es un proceso por el cual a partir de un
gas, un líquido o una disolución los iones, átomos o moléculas establecen enlaces
hasta formar una red cristalina, la unidad básica de un cristal.
13.- El eluato
Cada una de las sustancias que migran a través del lecho de la fase estacionaria
(impulsadas por la fase móvil) dentro de un sistema de separación.
14.-Evaporador de triple efecto de película descendente y
calentamiento por placas
El cual opera al vacío, hasta lograr una concentración de 50–55 % a la
salida.

15