Modulación de las funciones de las células presentadoras de antígeno durante la infección

crónica por VPH

Resumen
Los virus del papiloma humano de alto riesgo (HR-HPV) infectan los queratinocitos basales , donde en algunos
individuos evaden las respuestas inmunes del huésped y persisten. La infección persistente por HR-HPV del
cuello uterino causa una neoplasia precancerosa que puede producir cáncer de cuello uterino. Las células
dendríticas (DC) son eficientes en el cebado / cebado cruzado de células T específicas de antígeno y en la
generación de células T CD8 + citotóxicas antivirales y antitumorales. Sin embargo, HR-HPV ha adoptado varias
estrategias inmunosupresoras , con una modulación de la función DC crucial para escapar de la respuesta
inmune adaptativa del huésped.. Las oncoproteínas E6 y E7 del VPH alteran el reclutamiento y la localización
de DC epidérmicas, mientras que los factores reguladores solubles derivados del epitelio hiperplásico inducido
por HPV cambian el desarrollo de DC e influyen en el inicio de respuestas inmunes celulares específicas . Esta
revisión se centra en la evidencia actual para la manipulación de la presentación del antígeno en el VPH-HR en
las células dendríticas y el escape de la inmunidad del huésped.
1 . Introducción
Los VPH son virus de ADN de doble cadena epiteliotrópicos que infectan los queratinocitos basales (KC) en los
epitelios superficiales de la piel y las membranas mucosas . Los cánceres cervicales y otros cánceres
anogenitales representan aproximadamente el 5% de la carga mundial de cáncer [1] , [2] y están asociados
con la infección por VPH de "alto riesgo"; principalmente HPV16 y HPV18 . Juntos, HPV16 y 18 son
responsables de ~ 70% de todos los casos de cáncer de cuello uterino en todo el mundo, y aproximadamente ~
60% de los cánceres de orofaringe están asociados con HPV16 [2] , [3] , [4] , [5] , [6] , [7]. Se han identificado
más de 200 genotipos de VPH . Los VPH de la mucosa se clasifican según su oncogenicidad en tipos de alto
riesgo (HR) y de bajo riesgo (LR) [8] , [9] . La persistencia de la infección por HR-HPV es el paso clave en la
transformación del epitelio normal en lesiones precancerosas y cancerosas [10] , [11]. Las lesiones
precancerosas anogenitales, también conocidas como neoplasia intraepitelial, por ejemplo, neoplasia
intraepitelial cervical (CIN), se pueden subcategorizar en lesiones de bajo grado (CIN1) y de alto grado (CIN2 /
3). El desarrollo de lesiones precancerosas relacionadas con el VPH y el cáncer depende de la expresión de las
oncoproteínas HR-HPV E6 y E7; Las oncoproteínas E6 y E7 interrumpen la función de las proteínas reguladoras
del ciclo celular del huésped en los KC infectados y desencadenan la transformación celular . Estas dos
oncoproteínas promulgan la desregulación del ciclo celular a través de mecanismos separados. E6 se une a la
proteína asociada a la ubiquitina ligasa E6 del huésped (E6AP / UBE3A) y promueve la degradación del
producto del gen supresor de tumores p53 , un factor de transcripción que promueve la reparación del ADN
,detención del ciclo celular y apoptosis . Por el contrario, el VPH E7 se une al retinoblastoma (pRb) y desplaza
el factor de control de la transcripción E2F, lo que conduce a la expresión constitutiva de los genes que
responden a E2F, promoviendo la activación del ciclo celular.
El sistema inmune juega un papel clave durante la carcinogénesis asociada al VPH. Alrededor del 90% de las
personas inmunocompetentes infectadas por el VPH resuelven una infección cervical espontáneamente
dentro de los tres años y menos del 1% desarrollan cáncer cervical invasivo [15] . La inmunidad mediada por
células se considera crucial para la eliminación de las infecciones por VPH y la neoplasia maligna relacionada
con el VPH es más frecuente en individuos inmunocomprometidos [16] , [17] . La presencia de un infiltrado
citotóxico de células T CD8 + en tumores relacionados con el VPH se corresponde con una mejor supervivencia
del paciente [5] , [18].. Toda la infección por el VPH y el ciclo de vida del virus se encuentra exclusivamente
dentro de los KC epidérmicos. Los KC mismos se consideran como un componente del sistema inmune innato
con funciones centinelas inmunes [19] , [20] . Expresan varios receptores tipo toll (TLR) que reconocen los
patrones moleculares asociados a patógenos (PAMP) en los patógenos, lo que desencadena la producción de
interferón tipo I (IFN), defensinas y citocinas proinflamatorias como la interleucina 1 β (IL1-β) y la necrosis
tumoral factor α (TNF-α) [21] , [22] .
2 . Impacto de la infección por VPH en la susceptibilidad de KC a las respuestas inmunes
La transfección in vitro de KC primario con HPV episomal, o vectores de expresión génica de HPV , ha
demostrado que los productos del gen HR-HPV pueden prevenir las respuestas inmunitarias innatas de KC
proinflamatorias y la susceptibilidad de KC a la eliminación mediada por el sistema inmune. La expresión de los
genes E6 y E7 de HR-HPV regula a la baja la transcripción y la función del sensor de ADN viral, TLR9 [23] , [24] .
Además, los KC primarios transfectados con episomas HPV16 y HPV18 muestran una expresión alterada de los
genes inflamatorios de citocinas y quimiocinas [21]. Las oncoproteínas HR-HPV E6 / E7 inhiben la activación de
NFκB y la secreción de citocinas y quimiocinas proinflamatorias mediadas por TLR , para proteínas como IFN-β,
IL1-β, IL-8, CCL2 , CCL5 y MIP3α, lo que limita el tráfico de células inmunes innatas y activación de células
efectoras específicas de antígeno (Ag) . Las oncoproteínas HR-HPV inhiben la señalización de NFκB al bloquear
la translocación de NFκB al núcleo [25] , [26] y suprimir las actividades de transcripción nuclear de NFκB a
través de la mejora de la expresión del regulador del desarrollo 1 relacionado con interferón (IFDR1) [27] , y
promueven la dependencia de E6 destrucción proteolítica de IL-1β [28]. Como resultado, los KC infectados por
VPH no producen IFN tipo I y las citocinas proinflamatorias, TNF-α , IL-6 , IL-8 y MIP3a [25] , [26] . La infección
por HR-HPV de KC humanos primarios también previene la detención del ciclo celular mediada por IFN-γ y
bloquea la inducción de necroptosis mediada por TNFα regulando negativamente la proteína transmembrana
inducida por interferón 1 (IFITM1) y la proteína quinasa 3 que interactúa con el receptor (RIPK3),
respectivamente [29] . Se ha demostrado que el producto genético temprano HPV16 E5, usando KC
inmortalizados infectados con HPV, regula negativamente la expresión de moléculas del complejo de
histocompatibilidad principal (MHC-I) clase I [30] , [31], reduciendo la susceptibilidad de KC a la muerte
mediada por células T CD8 . La expresión de la proteína HPV16 E7 en KC también afecta la mejora mediada por
IFN-γ del procesamiento del antígeno (Ag), la presentación y la lisis mediada por linfocitos T citotóxicos (CTL) al
deteriorar la fosforilación de STAT-1, lo que resulta en la supresión de la regulación positiva mediada por IRF-1
de TAP-1[32],[33],[34].
3 . Impacto de la infección por VPH en la presentación del antígeno al sistema inmunitario adaptativo
Para inducir una respuesta de células T citotóxicas contra KC infectados, las células presentadoras de antígeno
(APC) residentes en la piel deben iniciar y coordinar respuestas inmunes innatas y adaptativas . APCs
residentes en la piel macrófagos y células dendríticas (DC) residentes en tejidos. Las DC son las únicas APC
profesionales que cruzan eficientemente Ags asociados a células y transportan Ag procesado a los ganglios
linfáticos de drenaje (LN) para activar la proliferación decélulas T vírgenes [35],[36]. Los macrófagos residentes
en los tejidos son los principalesAPCcaptadoresresponsables de la fagocitosis de las células apoptóticas y el
mantenimiento de la homeostasis local.. Sin embargo, no migran específicamente a los LN drenantes y son
menos eficientes en la presentación de Ag a las células T [36]. Las DC son un grupo altamente heterogéneo de
APC con subconjuntos funcionalmente distintos. Las DC de la piel humana comprenden células
deLangerhansepidérmicas(LC), DC convencionales dérmicas (CD) y DC derivadas de monocitos, sin embargo, la
inflamación local está asociada con un infiltrado en la piel de DC plasmacitoides, la principal fuente de IFN tipo
I durante la infección viral[37],[38]. MurinoLos modelos han sido útiles para comprender las funciones
biológicas y las disfunciones de las células presentadoras de antígeno en la piel en estado estacionario y
enfermedad. Es importante tener en cuenta que existen diferencias fundamentales en la maquinaria celular
entre el ratón y la piel humana. La mayoría de los estudios en modelos de ratones utilizaron piel de pelo
donde hay folículos capilares densamente empaquetados en relación con la piel humana, o en el cuello
uterino, están ausentes. Las capas epidérmicas del ratón y la piel humana también tienen un grosor diferente
[39] . Sin embargo, la piel del ratón y la piel humana contienen tipos de células inmunes similares : células de
Langerhans y células T CD8 + con memoria residente en los tejidos en la epidermis y DC dérmicas, macrófagos,
neutrófilos, Células T CD4 + e ILC en el compartimento dérmico [38] . La piel del ratón también contiene tipos
de células adicionales, como las células T epidérmicas dendríticas y las células T gamma-delta [40] . En la piel
sana, las LC son las únicas DC residentes en la epidermis y representan del 3 al 5% de las células nucleadas
epidérmicas [41] , [42] . Se originan a partir de precursores embrionarios antes del nacimiento y, en contraste
con otros subconjuntos de DC, son resistentes a la radio. Repoblan continuamente localmente en la
membrana basal debajo de la capa epidérmica sin la necesidad de una entrada continua de precursores de
médula ósea. Tanto las LC humanas como las murinas pueden identificarse mediante la expresión de CD11b,
molécula de adhesión celular epitelial(EpCAM) y langerina (CD207) [43] , [44] . Los cDC dérmicos surgen de
precursores hematopoyéticos y comprenden principalmente CD murinos CD11c + CD11b + y CD103 + y sus CD
CD1c + y CD141 + humanos funcionalmente equivalentes, respectivamente. Las CD de piel de ratón y humana,
tanto en estado estacionario como inflamatorio, capturan y transportan Ag cutáneo a LN drenantes de la zona
de células T e inician respuestas de células T específicas de Ag [45] , [46] , [47] . El resto del resto de esta
revisión se centra en la influencia de la infección por VPH en la presentación de Ag por APC profesional en la
piel.
3.1 . Los efectos del VPH en la frecuencia y distribución de las células dendríticas
La regulación de la diferenciación y la función de DC es un mecanismo esencial para el escape del tumor de la
vigilancia inmune [48] . Varios estudios han demostrado que la progresión de la carcinogénesis inducida por el
VPH está asociada con la alteración de la frecuencia y la distribución de las CL, las CD epidérmicas que
normalmente residen donde se produce la infección por VPH [49] . Las células cancerosas HR-HPV positivas y
las células que expresan E6 y E7 pueden inhibir la diferenciación de monocitos en LC in vitro [50] . En las
lesiones precancerosas cervicales y los cánceres invasivos, la infección activa por VPH-AR y / o la expresión de
oncoproteínas E6 / E7 se correlacionaron con el agotamiento de las LC intraepiteliales [51] , [52].. De manera
similar, la expresión de la proteína HPV16 E7 sola en la epidermis murina se ha asociado con un número
significativamente reducido de LC epidérmicas [53] . Además de las lesiones relacionadas con el VPH-HR, en
los estudios inmunohistoquímicos de las biopsias de piel del paciente, la densidad de las LC se redujo en las
lesiones cutáneas de pacientes con Epidermodisplasia Verruciforme positiva al VPH8 [54] y en las verrugas
cutáneas asociadas al VPH crónico, las APC desaparecieron gradualmente de la epidermis con sus retención
debajo de la membrana basal de la capa epidérmica [55] . Significativamente, la acumulación de CL en las
biopsias cervicales se asocia con la eliminación de la infección cervical por VPH [56]. Además, aunque el
número de LC intratumorales en pacientes con cáncer de células escamosas de cabeza y cuello (HNSCC) fue
mayor en relación con las lesiones precancerosas, los pacientes con HNSCC positivo para HPV contenían un
número menor de LC intratumorales en comparación con pacientes con HNSCC negativo para HPV y un
aumento en La frecuencia de LC se ha correlacionado con la supervivencia libre de recurrencia [57] . En
conjunto, estos datos sugieren que las LC residentes en la epidermis podrían ser importantes para el control
de las lesiones inducidas por el VPH y la inhibición de la infiltración de LC en la epidermis infectada por el VPH
podría ser un mecanismo de escape inmune del virus.
Un mecanismo que podría producir el número alterado y la distribución de las LC puede ser la disminución de
la regulación observada en las KC infectadas con HR-HPV de la expresión de las quimiocinas CCL20 / MIP3α y
E-cadherina [58] , [59] junto con la inhibición de KC respuesta a citocinas proinflamatorias y quimiotácticas
[25] , [26] . Los KC juegan un papel importante en el desarrollo y mantenimiento de las LC epidérmicas. Las KC
expresan CCL20 que da como resultado la migración de LC inmaduras a la epidermis, mientras que la E-
cadherina expresada por KC media la adhesión de las LC a KC [60] , [61] , [62]. En condiciones homeostáticas,
la IL-34 derivada de KC regula la reposición local de LC [63] , mientras que KC ayuda a mantener las LC en la
epidermis mediante la activación mediada por integrina del factor de crecimiento transformante β (TGF-β).
TGF-β , un factor de transcripción LC autocrino requerido para su localización epidérmica, es activado por la
integrina α v β 6 y α v β 8 derivada de KC [64] . Además, los experimentos in vitro revelaron que la interacción
KC-LC mediada por E-cadherina es necesaria para la diferenciación de LC [65]. En el epitelio cervical infectado
por HPV16, la expresión de E6 y E7 y la gravedad de la enfermedad se correlacionaron con la regulación
negativa de la expresión de CCL20 [52] y el silenciamiento de HPV16 E6 y E7 in vitro promueve la secreción de
CCL20 y la migración de LC al epitelio infectado por HPV [66] . Además, en pacientes con HNSCC positivo para
HPV, el perfil inmunohistoquímico mostró que la expresión reducida de CCL20 se correlaciona con una
disminución significativa en la infiltración de LC en tumores [57] . Lo que es más importante, los estudios de
transfección génica in vitro en KC primarios humanos han demostrado que la expresión de CCL20 es inhibida
por las proteínas virales del VPH a través de la regulación negativa de la señalización de NF-κB [58]e inhibición
de la unión del factor de transcripción celular CCAAT / proteína de unión potenciadora (C / EBP) a un promotor
CCL20 [67] . En este estudio, C / EBP de KC normales se colocalizó y mejoró la expresión de CCL20. Sin
embargo, los KC humanos transfectados con la proteína HPV8 E7 exhibieron una disminución de la expresión
de CCL20 al evitar la unión de C / EBP al promotor CCL20 [67] , lo que sugiere un posible mecanismo para la
interferencia de la oncoproteína del VPH con CCL20 derivado de KC, que atrae a las LC. Del mismo modo, una
menor expresión de E-cadherina en KC infectadas con VPH se correlaciona con la gravedad de la lesión cervical
[59] , [68] , [69] y un número reducido de LC en la epidermis infectada con VPH [60] ,[70] . In vitro , la
inhibición de las oncoproteínas HPV16 E6 y E7 restableció la expresión de E-cadherina y la adhesión de LC a KC
[69] , [70] . Juntos, estos datos implican que el reclutamiento y la localización de DC a epitelios infectados con
HPV pueden dificultar la accesibilidad de las proteínas de HPV a APC y esto puede contribuir en parte al
fracaso para generar respuestas efectivas de CTL anti-HPV.
3.2 . Los efectos del VPH en la activación de las células dendríticas
La maduración funcional de DC es instrumental en la generación de respuestas inmunes específicas de Ag. Las
DC muestrean continuamente los tejidos periféricos y reconocen los agentes patógenos o las señales de
peligro de las células moribundas o infectadas y se someten a una maduración inmunogénica, caracterizada
por el transporte del MHC-II endosómico a la membrana celular, la regulación positiva de CD80 (B7-1) y CD86
(B7 -2) moléculas coestimuladoras y secreción de citocinas proinflamatorias instructivas, incluidas IL-1α / β, IL-
6 , IL-12 y TNF-α , y quimiocinas, incluidas CCL2 , CCL3 y CCR4 [71] , [72]. Las DC maduras presentan Ags
procesados en asociación con moléculas de MHC para células T vírgenes, e instruyen a la proliferación de
células T al proporcionar señales coestimuladoras y citocinas que ayudan a la diferenciación de las células T
[73] , [74] . Sin embargo, varios estudios han demostrado que la infección por HR-HPV conduce a una
maduración de CC deteriorada, lo que limita su capacidad para estimular una respuesta CTL y esto promueve
la progresión de la lesión [51] , [75] . Las células T que encuentran su péptido afín en DC inmaduras que
carecen de marcadores de superficie coestimuladores y / o citocinas proinflamatorias son tolerizadas, un
mecanismo crítico que el tumor utiliza para escapar de los ataques inmunes del huésped [76] .
En el contexto de la infección crónica por VPH, además de la baja densidad de LC, la expresión de MHC-ΙΙ y
langerina en LC en lesiones cervicales positivas de bajo grado de CIN1 HR-HPV se redujo significativamente en
comparación con el epitelio cervical normal [51] . Además, en pacientes con CIN mediada por HR-HPV, la
regulación negativa de MHC y moléculas coestimuladoras en CD11c + DC intraepitelial cervical se correlacionó
significativamente con la gravedad de la lesión [75] . Se diseñó un modelo in vitro que utilizaba partículas
virales (VLP) de HPV autoensambladas para estudiar las respuestas inmunitarias anti-HPV mediadas por APC
residentes en la piel. Exposición in vitro de LC inmaduras aisladas de pacientes con CIN2 / 3 [77] o voluntarios
sanos [78]a HPV16 L1L2 Las VLP no lograron regular el MHC y las moléculas coestimuladoras y no promovieron
la secreción de citocinas y quimiocinas proinflamatorias [77] , [78] . El efecto supresor in vitro de las VLP no se
limita al HPV16, pero la exposición a muchas VLP de HR-HPV y LR-HPV también inhibe la activación de las LC
[79] . En ausencia de un estímulo inflamatorio, las células T CD8 + cocultivadas con CL expuestas a HPL VLP no
proliferaron ni secretaron la citocina efectora IFN-γ [77] , [78] . Por otro lado, mientras que la exposición a la
cápside principal HPV16 L1La VLP sola desencadena la activación de las LC derivadas de monocitos humanos,
las VLP de HPV16 que contienen la proteína de la cápside menor L2, individualmente o con L1, no pudieron
inducir la activación de la LC [80] . Sin embargo, las DC derivadas de monocitos humanos se incubaron con las
moléculas de activación reguladas por HPV16 L1 o L1L2 VLP y pudieron estimular la proliferación de células T
[80] , [81] . La interacción mediada por la proteína de la cápside L2 mediada por HPV16 con el
heterotetramero de anexina A2 (A2t) en LC se sugiere como un posible mecanismo para la interferencia
inducida por HPV con la maduración de LC [82] , lo que lleva a un fallo en la generación de respuestas
inmunitarias celulares específicasdurante la infección temprana por VPH. Esta inhibición específica de LC por
HPV L2 VLP puede indicar un mecanismo de escape inmune de HPV. Sin embargo, la maduración completa y la
capacidad de estimulación de células T CD8 específicas de Ag podrían lograrse cuando la LC expuesta a VLP de
HPV también fue estimulada con agonistas de TLR [77],[79]o biológicos basados en citocinas derivadas de
células (IRX-2) que consisten en IL -1β, IL-2, IL-6, IL-8, TNF-α, GM-CSF e IFN-γ[83], lo que sugiere que la
administración de estímulos inflamatorios locales restaura la activación de LC tolerizada de la proteína de la
cápside del VPH. Juntos, la disfunción de APC durante la infección por HR-HPV parece estar asociada con la
acumulación de APC "inmaduras", o el agotamiento de DC maduras, en el entorno local, lo que en
consecuencia puede impactar negativamente en el cebado de células T en el drenaje de LN y el montaje de un
LN apropiado respuesta inmune contra células infectadas.
El efecto de la neoplasia maligna inducida por el VPH se ha modelado en un modelo de injerto de piel murino
en el que los ratones están diseñados para expresar un transgén E7 del VPH16 dentro de KC basales bajo el
control del promotor transcripcional de queratina 14 (K14) (K14E7). La piel K14E7 muestra hiperplasia epitelial
que imita la NIC humana relacionada con el VPH [84] , [85] , [86] . Al igual que las LC aisladas del epitelio
cervical humano, las LC epidérmicas de ratones transgénicos K14E7 exhiben una baja expresión de MHC-ΙΙ y
langerina / CD207, pero los niveles de las moléculas de superficie CD40, CD80 y CD86 estaban regulados por
aumento en comparación con la piel de ratón no transgénica [87] , [88] . A pesar de su estado parcialmente
activado,El procesamiento in vivo de Ag y la capacidad de cebado de células T de DC de piel K14E7 se vio
afectada [88] . Además, las LC en la epidermis K14E7 mostraron un fenotipo regulador caracterizado por la
expresión de indoleamina 2, 3-dioxigenasa 1 (IDO-1) y arginasa 1 (Arg-1) [88] , [89] . Sin embargo, en la
epidermis murina transducida con HPV16 E7, el agotamiento de las LC no tuvo ningún efecto sobre la
supresión de las respuestas de CTL por HPV16 E7 [53] . En un modelo de hipersensibilidad de contacto
murino , la activación de las células T efectoras de la piel requirió la presentación del antígeno por DC
dérmicas, pero no por LC [90]. Por lo tanto, si la desregulación de las LC epidérmicas es relevante para el
fracaso para iniciar respuestas de células T CD8 + específicas de HPV requiere una investigación adicional.
4 . Infección crónica por VPH, medio de citocinas inmunorreguladoras y DC
4.1 . Factores solubles inmunorreguladores
Como se indica en la Fig. 1 y la Tabla 1 , la señalización inmunosupresora local establecida durante la neoplasia
epitelial precancerosa parece desempeñar un papel importante en la carcinogénesis relacionada con el VPH,
posiblemente mediante la modulación de la activación y función de APC. Las células transformadas por HPV
producen factores solubles inmunorreguladores y reclutan células supresoras, macrófagos asociados a
tumores, células supresoras derivadas de mieloides y células reguladoras T (T reg ), que instruyen la
diferenciación tolerogénica de DC y promueven la progresión de la lesión [91] , [92] . Las líneas y tejidos
celulares transformados por VPH estudiados en pacientes con cáncer cervical y NIC de alto grado han
demostrado que elLos mediadores , IL-10, TGF-β y prostaglandinas (PG), juegan un papel clave en el
establecimiento de un medio inmunosupresor [93],[94],[95],[96]. La PGE2 producida por el epitelio maligno
impulsado por el VPH inhibe la maduración de DC y la presentación de Ag[97]. En el epitelio neoplásico
asociado al VPH, la acumulación de TGF-β e IL-10, principal regulador del desarrollo y la función de DC, se
correlacionó con la gravedad de la enfermedad[92],[98]. La IL-10 secretada por lascélulasTregregula la
disminución de la maduración de las DC mediante la regulación positiva de la expresión E3 de ubiquitina ligasa
MARCH-I, que aumentóubiquitinación y degradación de MHC y molécula coestimuladora [99] . El posible
efecto supresor de DC de IL-10 y TGF-β en un microambiente local infectado por VPH crónico se evidencia por
una correlación entre niveles elevados decélulasT reg positivas para TGF-β e IL-10, DC reguladoras y
respuestas CTL deterioradas en el cuello uterino. epitelio canceroso en comparación con el cuello uterino
normal [95] . Esto también se observó en modelos de ratones donde los ratones experimentales con HPV Ag
experimentaron IFN-γ, favoreciendo la generación de células T IL-10 + CD4 + y respuestas CTL deterioradas
[100] . Además, el examen in vitro de líneas celulares de cáncer de cuello uterino positivas para VPHdemostró
que IL-10 y TGF-β derivados de células cancerosas suprimen la expresión de MHC-I en células tumorales [101] ,
evitando la eliminación mediada por CTL de KC transformadas por HPV. Además, la expresión de
coestimuladores y MHC-II en DC cocultivadas con líneas celulares de carcinoma de células escamosas genitales
(SCC) se redujo significativamente a través de un activador receptor del efecto mediado por la citocina del
factor nuclear ligando kappa-B (RANKL) aunque las células conservaron su capacidad de regular el receptor de
retorno linfoide CCR7 , lo que indujo el desarrollo de DC tolerogénica [102]. El receptor de quimiocinas CCR7
se expresa en DC maduras y desempeña un papel en la mediación del tráfico de DC en respuesta a las
quimiocinas CCL19 y CCL21 [103] . La expresión no regulada de CCR7 en DC dentro del epitelio escamoso
infectado por HPV y con un bajo nivel de marcadores coestimuladores puede inducir la migración de DC
inmunológicamente inactivas a LN drenantes [104] . Además, las líneas celulares de cáncer de cuello uterino
positivo para VPH-HR indujeron el reclutamiento y diferenciación de monocitos a DC inmaduras in vitro . Sin
embargo, la migración de DC maduras se vio afectada por la IL-6 derivada de células de cáncer cervical , lo que
condujo a la supresión de CCR7.
Las células T reg con experiencia en antígenos modulan la maduración de las CD mediante la regulación por
disminución mediada por linfocitos T citotóxicos-antígeno-4 (CTLA-4) de la expresión de CD80 y CD86 . CTLA-4
se une a CD80 y CD86 con mayor afinidad que CD28 , y la interacción de las células T reg con DC a través de
CTLA-4 regula negativamente la expresión de CD80 y CD86, lo que limita la capacidad de DC para estimular las
células T CD8 + [106] . La expresión de CTLA-4, el receptor del punto de control inmunitario, en las células T
reg proporciona una estrategia importante para que diferentes células tumorales evadan la vigilancia
inmunitaria del huésped . Acumulación de CTLA-4 + T reg. células en el microambiente tumoral HNSCC positivo
para VPH [107] y en la sangre periférica de pacientes con cáncer cervical avanzado [108] , sugiere un papel
represivo para CTLA-4 durante la infección por VPH. Los beneficios clínicos del bloqueo de la vía inhibidora
inmune CTLA-4 también están bajo evaluación clínica en cáncer cervical [109] y pacientes con HNSCC [110] .
La piel premaligna de ratón que expresa HP7 E7 también ha mostrado respuestas inmunes suprimidas. A
diferencia de la piel que expresa mOVA de un neo- autoantígenos del promotor de queratina 5 (K5)
epidérmica [111] o de la hormona de crecimiento humano impulsada por K14 (K14hGH) [112] , la piel murina
que expresa E7 no se rechaza cuando se injerta en un singénico inmunocompetente , los receptores
receptores no transgénicos [86] , y una respuesta de células T CD8 + inducida por inmunización E7, no fue
suficiente para permitir el rechazo del injerto [113] . La administración de Listeria monocytogenes o
endotoxina bacteriana en el momento del injerto de piel transgénica E7 promovió el rechazo del injerto [114].
Esto sugiere que la aplicación local de estímulos proinflamatorios puede superar un entorno supresor al
mantener señales estimulantes que ayuden a rescatar la activación inmunogénica de DC [115] . Sin embargo,
aunque el agotamiento de células T CD4 + CD25 + aumentó las respuestas de células T CD8 específicas de Ag
en ratones que expresan E7 [116] , estas fueron insuficientes para inducir el rechazo del injerto [117] . Las
células T asesinas naturales (NKT) inhiben el rechazo de los injertos E7, y las CD aisladas de ratones con
deficiencia de células NKT que reciben injertos de piel E7 han demostrado una función estimuladora de células
T específica de Ag mejorada en el drenaje de LN [117]. La interacción invariable de células NKT con DC
inmaduras puede programar la maduración de DC tolerogénicas [118] que expresan moléculas
inmunorreguladoras, incluyendo IDO. También se ha observado un aumento de la infiltración de células NKT
con mayores niveles de expresión de IFN-γ en los tejidos cervicales de pacientes con lesiones de alto grado
(CIN2 / 3) [119] , aunque se desconoce la naturaleza protectora o supresora de esta respuesta. En conjunto,
los infiltrados inmunes en el microambiente tumoral pueden suprimir las respuestas anti-VPH al promover el
desarrollo regulatorio de DC, induciendo así la expansión de células T CD8 + infiltrantes tumorales ineficaces.
4.2 . Indoleamina 2, 3-dioxigenasa
La señalización local prolongada de IFN-γ contribuye a la inmunosupresión inducida por E7 en animales K14E7,
ya que los injertos de piel K14E7 deficientes en IFN-γ fueron rechazados espontáneamente por huéspedes
inmunocompetentes no transgénicos [117] . IFN-γ exhibe funciones antiinflamatorias e inmunomoduladoras y
es el principal inductor de la producción de indoleamina 2, 3-dioxigenasa (IDO) de varios tipos de células,
incluidas las APC y las células tumorales [120]. IDO es una enzima inmunorreguladora que descompone el L-
triptófano, un aminoácido importante requerido para la función efectora de las células T, al metabolito
inhibidor inmunitario llamado kynurenine. El aumento de la actividad de IDO conduce al agotamiento local de
triptófano y a un aumento de kynurenina, que posteriormente inhibe la respuesta inmune al inducir la
apoptosis de las células T efectoras, convirtiendo las células T vírgenes en células T reg o conduciendo a la
detención del ciclo celular.
En un análisis de biopsia de pacientes con cáncer de cuello uterino, la expresión del gen IDO1 y la relación de
quinurenina a triptófano se elevaron significativamente en comparación con los controles sanos [122] . El
aumento de la expresión y las actividades de suero IDO [123] y la expresión de IDO de células tumorales
cervicales [124] se asociaron negativamente con la supervivencia de pacientes con cáncer de cuello uterino. Se
observó una infiltración notablemente más alta de CD de IDO + inmaduros del estroma de los tejidos
cervicales de enfermedad neoplásica cervical de alto grado y cáncer [95] . Aunque el número de células IFN-γ +
fue menor en pacientes con cáncer de cuello uterino en comparación con CIN, las células IFN-γ + fueron
significativamente mayores en CIN de alto grado en comparación con las biopsias de cuello uterino normales
[95]. De hecho, el IFN-γ promueve respuestas inmunitarias antitumorales y las células T efectoras productoras
de IFN-γ son predictores positivos importantes de una mejor supervivencia de los pacientes con cáncer
relacionados con el VPH [125] , [126] . Sin embargo, el número de poblaciones de células T dentro de las CIN
de alto grado positivas para VPH puede no ser diferente [119] . Además, a pesar de la función efectora del IFN-
γ en la respuesta inmune antitumoral, existe una creciente evidencia de que la liberación crónica de IFN-γ
podría promover la supresión inmune mediante la regulación positiva de las señales inmunomoduladoras
como PD-L1 e IDO en lesiones precancerosas positivas para VPH [127]. Además de la complejidad del papel de
IFN-γ, IFN-γ puede ser producido por una variedad de células que, en combinación con diferentes
microambientes de tejidos, pueden causar diferentes resultados en la respuesta inmune. Una fuente de IFN-γ
es el aumento del número de células NKT invariantes, como se ve en la CIN de alto grado positiva para el VPH
en comparación con las CIN de bajo grado positiva para el VPH y los tejidos cervicales negativos para el VPH
[119] . Se detectaron células NKT invariables y la expresión regulada por actividad dependiente de IFN-γ y la
actividad de IDO-1 en las DC de piel murina K14E7 y el bloqueo de las actividades de IDO-1 con 1-
metiltriptófano (1-MT) condujo al rechazo de los injertos de piel transgénicos E7 [ 88] , [89] . Además, en un
modelo murino experimental de células tumorales cervicales inoculadas por vía subcutánea, aunqueel
crecimiento de células tumorales in vitro no se vio afectado, la inhibición de la actividad IDO promueve la
acumulación intratumoral significativa de células asesinas naturales (NK) y la regresión del crecimiento
tumoral [128] . Colectivamente, estos datos sugieren fuertemente que la señalización prolongada o crónica de
IFN-γ podría ser responsable de la expresión de IDO-1 por DC de tejido infectado por HPV y la disfunción de la
respuesta de células T se puede atribuir a la diferenciación inducida por IFN-γ de DC reguladoras.
4.3 . Señalización inhibitoria programada del ligando de la muerte
Las DC expuestas al microambiente tumoral inducido por HR-HPV pueden atenuar las funciones de las células
T efectoras a través de la señalización inhibidora inmunitaria del receptor de muerte programada 1 (PD-1) /
ligando de muerte programada 1 (PD-1 / PD-L1) [75] . Normalmente, la señalización inhibitoria es importante
para terminar las respuestas inmunes mediadas por células y es responsable de prevenir las reacciones
inmunes adversas, como la destrucción mediada por el sistema inmunitario de las células normales durante
las infecciones. La interacción entre PD-1 en células T y sus ligandos PD-L1 (B7-H1) y PD-L2 (B7-DC) en APC o
células tumorales entrega una señal negativa que resulta en apoptosis y anergia o agotamiento de las células T
[ 106] . La señalización aberrante de PD-1 / PD-L1 se asocia con escape inmune en cáncer y VIHinfección [106] ,
[129] . Las DC de piel de ratón transgénica K14E7 no demuestran una expresión elevada de PD-L1 [88] . Sin
embargo, existe una correlación entre el aumento de la expresión de PD-1 / PD-L1 y la disfunción inmune de
las células T infiltrantes de tumores durante la carcinogénesis inducida por el VPH-HR tanto del cuello uterino
[75] , [93] , [130] como de la orofaringe [131] , [ 132] pacientes con cáncer han sido reportados. Del mismo
modo, existe una expresión significativamente elevada de PD-1 en las células T y PD-L1 en las DC en los tejidos
cervicales [75] , [93] y el drenaje de LN [133]de pacientes con CIN de alto grado, en comparación con
pacientes con CIN de bajo grado y CIN negativos. Además, se observa infiltración de células T PD-1 + CD8 + con
deterioro funcional en pacientes con HNSCC [132] y cáncer de cuello uterino [93] . En el tejido infectado con
VPH, las DC que expresan PD-L1 han mostrado fenotipos reguladores, caracterizados por una expresión
reducida de la molécula coestimuladora y la producción de citocinas IL-12 , pero una secreción regulada por
incremento de IL-10 [75] . La interacción entre las CD y las células T mediante la ligadura de PD-L1 / PD-1 y la
secreción de citocinas inmunorreguladoras puede permitir el escape inmunitario durante la infección crónica
por VPH-HR. Bloqueo del punto de control inmunitarioLa terapia puede promover la eliminación del tumor por
el sistema inmunitario del huésped. Los estudios in vitro que involucran líneas celulares humanas que
expresan Ags E7 de HPV16 han demostrado que el bloqueo de la señalización PD-1 / PD-L1 mejoró
significativamente las respuestas CTL [93] , [130] . Los estudios preclínicos también han demostrado que la
combinación de vacunas terapéuticas basadas en el ADN de HPV16 E7 con cobloqueo de la señalización PD-1 /
PD-L1 en ratones con TC-1 trasplantables que expresan E6 y E7 puede mejorar significativamente el tumor
específica de CTL y mejorar la regresión tumoral [134] , [135] , [136] . Actualmente, hay varios ensayos clínicos
que apuntan al bloqueo de PD-1 / PD-L1 en HNSCC yEl nivolumab (anticuerpo anti-PD1) ha sido aprobado por
la FDA para el tratamiento de pacientes recurrentes o metastásicos de HNSCC [110] , [137] . Sin embargo,
aunque los anticuerpos monoclonales anti-PD-1 pembrolizumab [138] y nivolumab [139] están bajo ensayos
de fase I / II para el tratamiento de cánceres cervicales y otros cánceres anogenitales, queda por determinar si
estas estrategias pueden ofrecer una ventaja terapéutica para aclaramiento de tumores relacionados con el
VPH en pacientes.
5 . Conclusión
El VPH utiliza múltiples estrategias para evadir las respuestas inmunes del huésped. Los KC infectados con HR-
HPV escapan del reconocimiento de CTL a través de la regulación negativa de las moléculas de MHC-I y la
maquinaria de procesamiento de Ag asociada. Subvertir la respuesta inflamatoria del KC por las oncoproteínas
no estructurales HR-HPV E6 y E7 contribuye a la ineficacia de la respuesta inmune del huésped, promoviendo
así la infección persistente por el VPH y la transformación de KC. El VPH E6 y E7 afectan el reclutamiento
epidérmico y la localización de LC a través de la interrupción de las redes de KC a LC. Los diversos tipos de
células reclutados para las lesiones infectadas por el VPH-HR parecen interactuar con las APC residentes (o
reclutadas), estableciendo un ciclo de inmunoregulación de alimentación anticipada para favorecer la
persistencia de las células infectadas. Tanto en modelos animales preclínicos como en pacientes con cáncer
cervical,Proliferación de células T . Lo más sorprendente es que, dentro de los epitelios hiperproliferativos
infectados por HR-HPV o que expresan E6 / E7, las DC exhiben fenotipos reguladores asociados con la
producción de IL-10, IDO-1 y PD-L1 . Señalización inmunosupresora persistente a través de IFN-γ crónica, IL-10
y TGF-βen la lesión hiperproliferativa infectada por el VPH-HR es presumiblemente responsable del
reclutamiento y la programación de DC tolerogénicas. Se están llevando a cabo múltiples ensayos clínicos que
abordan el bloqueo de los puntos de control inmunitario PD-1 / PD-L1 y CTLA-4 y pueden proporcionar una
ayuda crucial para disminuir la carga de las enfermedades asociadas al VPH. Sin embargo, aún no está claro si
los tumores malignos inducidos por el VPH-RH suprimen directamente la respuesta CTL o las DC condicionadas
por el entorno regulador desvían activamente las respuestas de las células T hacia la tolerancia. Por lo tanto,
una mayor investigación de la interacción entre las APC y los mediadores solubles derivados del tumor dentro
del epitelio maligno inducido por el VPH puede ayudar a dirigir las CD para la intervención terapéutica.
Fig. 1 . Ilustración esquemática de interacciones de
células T infiltrantes de tumores con células dendríticas.
La secreción crónica de IFN-γ de las células infiltrantes
de tumores y la interacción célula a célula a través de
CTLA-4 en células T reg con CD80 / CD86 en DC inducen
la expresión y actividades de IDO. El aumento de la
actividad de IDO inhibe la función efectora de las células
T a través del agotamiento del triptófano y el aumento
del catabolito de kinurenina, kynurenina. Aumentar la
producción de las moléculas inhibidoras inmunes IL-10,
TGF-β y CTLA-4 en T reg.Las células regulan
negativamente la maduración de las CD. La ligadura de
TCR con moléculas de MHC cargadas con péptidos
afines en células dendríticas que carecen de
marcadores de superficie coestimuladores y / o
interacciones PD-1-PD-L1 conducen a la detención o anergia de la proliferación de células T. APC: célula
presentadora de antígeno ; IDO-1: Indoleamina 2, 3-dioxigenasa ; IL-10: interlunkin-10; IFN-γ: interferón γ ;
IFN-γ-R: receptor de IFN-γ; CTLA-4: antígeno 4 asociado a linfocitos citotóxicos; TCR: receptor de células T ; PD-
1 / PD-L1: receptor de muerte programada 1 / ligando de muerte programada 1 ; TGF-β: factor de crecimiento
tumoral β.