UNIVERSIDAD DE SAN CARLOS DE GUATEMALA

FACULTAD DE AGRONOMÍA
ÁREA DE CIENCIAS
SUBÁREA DE CIENCIAS BIOLÓGICAS
LABORATORIO DE GENÉTICA GENERAL
AUX. STEPHANIE DE PAZ
JUEVES / VESPERTINA

LUIS ALFREDO ROS DOMINGO 201603622

SELVIN FROILAN SABÁN SEQUÉN 201516795
GUATEMALA, 20 DE FEBRERO DE 2,020.

REPORTE PRÁCTICA No. 2

CRUZAS EXPERIMENTALES CON (Drosophila melanogaster)
INTRODUCCIÓN
Uno de los organismos más estudiados en el campo de la genética para el tema de las
mutaciones es la mosca de la fruta (Drosophila melanogaster). En el estado silvestre es una
pequeña mosca diploide cuyo tamaño es aproximadamente la tercera parte de una mosca
doméstica. El ciclo de vida del díptero Drosophila melanogaster incluye las etapas de
huevo, larva pupa y adulto, a partir del huevo, los primeros hechos embrionarios producen
en estado larvario conocido como I instar, con un crecimiento rápido; la larva muda 2 veces
/II III instar, y entonces se forma el estado de pupa, en el cual la cutícula de la larva es
remplazada por las estructuras adultas y un imago. Un adulto emerge de la cáscara de la
pupa listo para aparearse, en el caso del macho. (Strickberger, 1978).
El presente documento alberga información sobre los procesos o pasos y características
de cruzas con Drosophila melanogaster; así como también información acerca de la cepa
mutante “w” White, que hace referencia a las moscas con ojos blancos. Debido a que son
organismos pequeños, pueden llegar a ser criados en frascos pequeños dentro de un
laboratorio por lo que no se requiere tanto especio y al mismo tiempo son lo suficientemente
grandes para observar la distribución de sexos entre ellas entre algunas otras
características. Otra de las grandes ventajas de Drosophila se basa en la facilidad para
introducir y combinar mutaciones en su genoma. De esta forma, el fenotipo mutante nos
permite inferir la posible función del gen durante el desarrollo, por lo que se ha de realizar
la cruza entre machos silvestres (++) y hembras vírgenes (w), para darle seguimiento y
determinar las características de la descendencia de estos dos individuos en un tiempo
determinado.
 OBJETIVOS
General:
 Estudiar las cruzas experimentales con base a los patrones de herencia que posee
cada cepa a utilizar, y así conocer los modos de herencia de los caracteres de cada
una.

Específicos:
 Realizar cruces entre individuos de distintas cepas con el fin de estudiar el modo de
herencia de un carácter particular.
 La determinación del fenotipo de los parentales, identificar como se heredan estos
caracteres y a que cromosoma está ligada esta mutación.

REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA
Müller estudio el proceso y frecuencia de las mutaciones, lo que le permitió desarrollar un
esquema del armado y combinaciones de los genes. Estos hallazgos le permitieron detectar
la inducción de mutaciones genéticas por los rayos X. El demostró que las mutaciones son
consecuencia de roturas de cadenas y alteraciones en los genes. Fue un activo promotor
en las campañas sobre el peligro de las radiaciones en las futuras generaciones. También
realizó sugerencias controvertidas respecto a la donación de esperma humano que podría
congelarse para programas eugénicos. (Premio Nobel, 2008).
El estudio realizado por Müller el cual consistió en inducir a mutación con rayos X a
Drosophila melanogaster, dio como resultado a ojos de color naranja claro con manchas de
color naranja intenso que se hace rojo encendido con la edad. Los tubos de malpighi son
normales. Es letal en condiciones homocigóticas, además mencionas que los heterocigotos
son totalmente viables y fértiles (Lacadena, 1988).
Morgan estudio a la Drosophila melanogaster para encontrar más mutantes de genes no
solamente ligados al cromosoma X, también genes que estaban presentes en otros
cromosomas, lo que le ayudo a establecer una correcta metodología experimental en las
cruzas en las moscas de la fruta, así como formular la revolucionaria teoría de la herencia
cromosómica y la correcta segregación de los cromosomas, en total Morgan y su equipo
encontraron cerca de 61 mutaciones en Drosophila melanogaster, con estos estudios
Morgan obtuvo el premio Nobel en 1933 (Stock Center, 2008).
El cruce monohíbrido es la combinación entre organismos que difieren en una
característica, la realización de este cruce revelará la primera ley de Mendel, la cual enuncia
que los alelos de un gen se segregan independientemente en los gametos. De tal manera,
al cruzar líneas puras se obtiene una F1 con heterocigotos donde se expresa el carácter
dominante y en la F2 (auto cruce F1xF1) se obtiene tres partes de dominantes y una parte
de recesivos (proporción 3:1) (Garner et al., 2003).
En este caso se trabajarán con moscas silvestres (++) y moscas mutantes de la cepa (w)
White, de las cuales se describen sus características a continuación:
CEPA SILVESTRE (++): existen diversas cepas de la mosca Drosophila melanogaster,
muchas de ellas han sido estudiadas por sus mutaciones, sin embargo, existen cepas
naturales o silvestres que son usadas como base para los experimentos genéticos que se
realizan con esta especie.
Las moscas wild type al no poseer ninguna mutación genéticas presentan ojos de color rojo
bien formados, así mismo presentan el color de cuerpo característico de la especie sin
ninguna alteración. Las alas se desarrollan correctamente. En la página de (Exploratorium,
2008), se menciona que una mosca puede ser de fenotipo salvaje, pero su genotipo queda
en incógnita, ya que no se sabe si es portadora de un alelo de alguna mutación recesiva.
Las moscas silvestres o wild type son usadas para realizar comparaciones contra
mutaciones que se deseen estudiar, tal es el caso de los experimentos que se reportan en
la investigación realizada por (Molina, 2001). Las moscas silvestres poseen un mapa
cromosómico conformado por cuatro cromosomas, de los cuales tres son autosómicos y
uno sexual. Cada par de cromosomas está compuesto por dos brazos que en el caso de
las moscas se diferencian por los términos “L” y “R” como se hace referencia en el
documento publicado por (Giraldez, 2016), en algunos de los cosos existen mutaciones en
las cuales las mutaciones alteran la composición cromosómica, como las mutaciones en
los genes específicos responsables de alguna característica o función del organismo de las
mochas de la fruta.
Cromosomas de la mosca silvestre

CEPA MUTANTE WHITE (W): Las mutaciones son capaces de afectar diversas partes o
características de los individuos que las poseen. Uno de estos caracteres es la coloración,
normal o blanca, de los ojos de la mosca. El gen White es un locus situado en la posición
1,5 del cromosoma X, en el segmento diferencial. se encuentra involucrado en la
producción y distribución de los pigmentos onocromo y pteridina, marrón y rojo
respectivamente, que se encuentran en el ojo de las moscas adultas.
Los alelos extremos de White asi como las deficiencias remueven tanto los pigmentos
marrones como los rojos, los mutantes White poseen ojos blancos y son positivamente
fototacticos. (Gibaja, 2001). El gen white forma parte de una extensa lista de genes cuyas
desregulacion se vincula a los procesos neurodegenerativos.
En un estudio realizado por Marchesano, se menciona que las hembras white viven menos
que las wild type, al igual que la mayoria de los machos white tienen locomocion deficiente
con respecto a los de tipo wild type de acuerdo con (Marchesano, 2013). La ausencia de
efecto de la falta de funcion del gen white afecta a los individuos podria ser explicada en
parte por la localizacion del gen en el cromosoma sexual X.
En enero de 1910, Thomas hunt Morgan descubrio el primer mutante de Drosophila
melanogaster, un macho de ojos blancos. Esta mutacion fue nombrada como White y pronto
demostro que reseidia en el cromosomo sexual X. Desde su descubrimiento el gen white
ha estado asociado a la determinacion de varios principios geneticos fundamentales,
ademas de ser utilizado masivamente ocmo marcador para todo tipo de experimentos.
CSIC. (2015), según (Marchesano, 2013) el gen white está involucrado en la produccion y
distribucion d elos pigmentos omocromo y pteridina que se encuentra en el ojo de las
moscas adultas, así como en la vaina de los testiculos en los adultos y en los tubos de
malpighi en la larva. En el ojo, white se acopla a Brwn o Scarlet para transportar moleculas
de pigmento derivadas de guanina o trptofano respectivamente a los granulos, donde su
color rojo caracteristico en las moscas normales (Boryxz et al, 2008) Los mutantes white
son positivamente fototácticos, sin embargo, carecen de respuesta de optomotora y
presentan un electroretinograma anormal. (Claray, S. 2012).
En el caso particular de white, existe evidencia experimental de que la mutacion afecta
procesos biologicos extra oculares en el tejido nervioso como el trasnprote de cGMP.
(Kiyoung, K. (2013). Se ha demostrado en el estudio de marchesano, que en relacion a las
moscas normales los mutantes white poseen menores niveles de aminas biogenas,
muestran decaimento de la actividad locomotora inicial sobre open- Field.

Posición Cromosómica Del Gen Mutante White (W)

 MATERIALES QUE SE UTILIZARÁN PARA LAS CRUZAS
 Cepas de Drosophila melanogaster. (machos silvestres y cepa mutante white)
 Medio de cultivo
 Caja Petri
 Pinzas
 Vidrios de reloj
 Estereoscopios y microscopios
 Cámara para anestesiar

METODOLOGÍA
Diagrama Del Experimento A Realizar

Semana 1: Cada grupo recibirá una cepa de Drosophila con tres mutaciones y moscas tipo
silvestre. El cruce inicial consiste en hembras vírgenes de la misma cepa mutante con
machos silvestres, colocar 8-10 moscas de cada sexo en uno o más medios de cultivo. Los
frascos deben estar de lado para que las moscas dormidas no se peguen a la comida,
después de que las moscas despierten estos deben colocarse de pie (dejar los frascos de
lado durante mucho tiempo - más de una noche - puede causar que la comida cambie de
posición).
Semana 2: Remover los progenitores del frasco que contiene su cruce. Transferir estos
progenitores a un nuevo medio de cultivo. Este será un cultivo de reserva en caso de que
algo ocurra al cruce original.
Semana 3: En esta semana deberá: (1) Determinar el fenotipo de lo moscas progenie F1
(los resultados indicaran si las mutaciones son dominantes o recesivas y si son autosómicas
o ligadas al sexo). (2) Aislar hembras vírgenes y retro cruzarlas con machos de la cepa
mutante. Para obtener hembras vírgenes transferir todas las moscas F1 adultas a un nuevo
medio de cultivo sin anestesiarlas (guardarlas porque se necesitarán para obtener datos
sobre el fenotipo), menos de 8 horas después transferir a los adultos que hayan emergido
a un frasco limpio para anestesiarlas, colocar las hembras vírgenes en uno o más medios
de cultivo (desechar los machos).
Semana 4: Remover los progenitores utilizados para iniciar el retrocruce durante la semana
tres.
Semanas 5 y 6: Determinación de los fenotipos de la progenie de la retrocruza. Con los
datos fenotípicos determinar si las mutaciones están ligadas y de ser así la distancia de
mapa y la interferencia.
CONCLUSIONES
- Se podrán identificar y estudiar las cruzas de distintas cepas de Drosophila
melanogaster, y con ello se logrará reconocer y analizar el tipo de herencia que
existe entre cepas.
- Se realizará la cruza entre individuos de distintas cepas (machos silvestres y
hembras vírgenes mutantes white), con el fin de estudiar el modo de herencia de un
carácter particular, que proveerán los descendientes de estos.
- Se podrá determinar el fenotipo de los parentales y de la progenie de la F1, y con
ellos se trabajarán estadísticamente para comprobar las razones de proporciones
que se den.

BIBLIOGRAFÍA
1. Strickberger, M. (1978). Genética Edit. Omega, Barcelona, España.
2. (s.n) Premio Nóbel Medicina y Filosofía. Consultado el 16 de febrero de 2020.
Disponible en línea: http://antioxidantes.com.ar/Art072.htm
3. Lacadena, J.R: 1988. Genética. Cuarta edición. 1550p.
4. (s.n) Stock Center: Drosophila melanogaster en la investigación científica.
Consultado el 16 de febrero de 2020.
Disponible en línea: http://www.Drosophila Stock Center México.html
5. Garner, E. J., Simmons, M. J., &Snustad, D. P. 2003. Principios degenética. Mexico:
Limusa Wiley.
6. Exploratorium. (2008). wild type and mutants.
7. Molina, E. H. (2001). analisis de la herencia de las mutaciones ebony and dumpy en
Drosphila melanogaster.
8. Giraldez, R. (2016). Obtenido de:
https://www.unioviedo.es/esr/pp/tch2.pdf.
9. Gibaja, M. A. (2001). estudio de mutantes del cromosoma III de Drosophila
melanogaster. Barcelona.
10. Marchesano, M. (2013). posibles efectos neurodegenerativos por la falta de funcion
del gen White.
11. CSIC. (2015). Blog Proyectos genoma. Obtenido de:
http://www.seresmodelicos.csic.es/mosca.html
12. Claray, S. (2012). Evolutionibus. Obtenido de:
http://evolutionibus.eresmas.net/drosophila.html
13. Kiyoung, K. (2013). Biosynthesis of drosopterins, the red eye pigments of Drosophila
melanogaster