CRITERIOS DE MALIGNIDAD

inflamación, metaplasia y regeneración,

pero en estos estados las células no

Aumento de la
relación nuclear-
citoplasmátlca
La Elación entre el volumen
nuclear y el citoplasmático se
mantiene dentro dé límites
constantes en las células
normales. El aumento del
componente nuclear de esta
es uno de los rasgos más
distintivos de malignidad. La malignas exhiben un aumento de tamaño
relación nuclear-citoplasmática (relación general y conservan la relación N/C dentro
N/C) no sólo es valiosa para distinguir de límites benignos, de modo que se las
malignidad, sino que da la pauta del grado puede diferenciar de las células malignas sin
de diferenciación de la célula cancerosa; mayores dificultades.
cuanto menos diferenciadas son las
cancerosas, mayor es la Elación N/C. Hipercromía del núcleo
Koss define el término "hipercromatismo" como una
Puede ocurrir agrandamiento nuclear en Fig. 29. Partículas de heterocromatina aumentadas en una célula cancerosa.
Partículas de heterocromatina densamente distribuidas en una célula cancerosa no
células no malignas por irradiación, degenerada. De un carcinoma ira situ del cuello uterino, Observación con luz
polarizada sobre fondo OScuro.
administración de agentes alquilantes,

Fig. 30. Reacción de Feulgen en células Cancerosas (a) yen células mesoteliales en actividad (b). Nótese la intensa reacción de los núcleos de las células cancerosas que
varían de tamaño. No aparece reacción en las áreas nucleolares, La mayor cantidad y dispersión del contenido de DNA, medido con microespectrofotometria, se deben a
la poliploidia y aneuploidia.
 CRITERIOS DE MALIGNIDAD

Fig. 31. Célula hiperploidecon 157 cromosomasen un caso de ascitis. Esto pertenecea la muestra delá figura 30a. Callamativa poliploidia que apareceen derrames Como
éste no se suele reconocer en el tumor primario. Es probable que esto se deba a endomitosis o endorreduplicación en el líquido.

33
DEL

tinción perceptiblemente más Aglomeración

oscura de los núcleos a la
microscopia óptica, de modo que granúlar gruesa de
esto significa mayor cromatina
concentración de DNA y mayor
tingibilidad de sustancias Además del hipercromatismo, la cromatina
basófilas (heterocromatina) en exhibe una
los núcleos en lugar de un simple
aumento del DNA. Los núcleOs
hipercrómicos grandes suelen ser
poliploides y hacen el
diagnóstico de malignidad. De
acuerdo con estudios
espectrofotométricos, las células
malignas en división activa no
sólo contienen más DNA, sino
que éste se halla ampliamente
Las mayores Fig. 32. Prominencia de los nucléolos en células
adenocarcinomatosas. Los nucléolos se tiñen de púrpura rojizo
cantidades de DNA son las con la coloración de azul de metileno y eosina. Aunque la
cantidad de nucléolos varía por fusión en interfase, la
multiplicidad es proporcional a la poliploidia y se la considera
causantes de la hipercromía para uno de los criterios de malignidad,
Nótense los nucléolos redondos
los colorantes básicos como enormes, de contornos nítidos, y los
hatos perinucleolares. Esta figura es muy común en el
verde de meti1035S •356 azul de adenocarcinoma.

metileno, y de la fluorescencia
acentuada con los fluorocromos
de diaminoacridina. La
existencia de células cancerosas
normocrómicas 202 es atribuible a
diversos factores que se
interpretan como estado de la
eucromatina, degeneración del
DNA e hipodiploidia de las
líneas clonales.
Fig. 33. Prominencia de nucléolos en células cancerosas.
Aumento y variación de la cantidad de nucléolos y partículas
en banda N. De una línea celular de. un adenocarcinoma mal
diferenciado de pulmón. Las partículas de banda N
 CRITERIOS DE MALIGNIDAD

correspondientes a los organizadores nucleolares están

dispersas en los nucléolos en interfase. Preparado secado al protrusiones nucleares anormales;
aire tras fijación con líquido de Carnoy ytratamiento con
CIK 0,75 M durante 15 minutos, antes de la fijación. esta figura anormal se debe a un
distribución granular gruesa o en cromosoma marcador.29
riendas gruesas e irregulares. Las
aglomeraciones granulares de Aumento del tamaño y
cromatina, que se definen como
cromocentros, predominan más en número de nucléolos
las células malignas que en las Todo agrandamiento del nucléolo
benignas. El espacio comprendido en más de 5 de diámetro es muy
entre los grumos gruesos parece sugestivo de malignidad. La
libre de partículas de cromatina. relación nucleolarnuclear está
Las cromatinas asociadas con el aumentada; el agrandamiento
nucléolo también aparecen en nucleolar se asocia con la síntesis
mayor cantidad y son más grandes, de RNA y proteína. En la neoplasia
paralelamente al agrandamiento y maligna este aumento de tamaño
multiplicación de los nucléolos. también se debe a un bloqueo del
trasporte de los productos
nucleolares al citoplasma. Desde el
Anormalidades de la punto de vista funcional del ciclo
cromatina sexual celular, los nucléolos observados
En los cánceres de las mujeres con el microscopio óptico en la
pueden aparecer células cancerosas fase intermitótica pueden ser
con cromatinas X anormalmente menos numerosos y destacarse más
grandes o múltiples, mientras que por fusión, en comparación con los
la pérdida de la cromatina X es que se ven justo después de la
bastante más frecuente que la telofase, cuando los nucléolos
anormalidad de tamaño y/o reaparecen. La cantidad de
cantidad (fig. 194). Las células nucléolos está dada por la cantidad
cancerosas de los varones también de organizadores nucleolares que
se acompañan de anormalidades de hay en los cromosomas. ll' Los
las cromatinas Y. La pérdi da o el nucléolos múltiples son atribuibles
aumento numérico sospechosos de a la poliploidia; en teoría, la
malignidad. presencia de más nucléolos que los
cinco juegos normales de
Irregularidad y engrosamiento organizadores nucleolares,
significaría malignidad.
del borde nuclear
El borde del núcleo, que se solía
llamar membrana nuclear, se
Multlnucleaclón y
engruesa y adquiere un contorno multilobulación
irregular. Con el microscopio La multiplicación y pronunciada
electrónico se observan indentación o plegamiento de los
invaginaciones irregulares o núcleos se deben a mitosis
indentaciones del borde nuclear anormales: un buen ejemplo es la
(figs. 39 y 40). Recuérdese que la formación de células gigantes por
membrana nuclear se engruesa por endorreduplicación, pero
condensación de cromatina en el recuérdese que también ocurre
borde del núcleo como signo multinucleación en células
incipiente de degeneración celular. benignas como las transicionales
De vez en cuando, en algunas del tracto urinario, las mesoteliales
células malignas se disciernen en los derrames pleurales o
 CRITERIOS DE MALIGNIDAD

peritoneales, las columnares de los histiocitos. La diferenciación entre

bronquios o endocérvix, y los multinucleación maligna y .benigna debe

Fig. 34. Prominencia de nucléolos en células malignas. a, Vista muy ampliada de nucléolos múltiples en células iinfomatosas histiocitarias. Además de Id multiplicidad,
en el reticulosarcoma son comunes las variaciones de tamaño y forma. b, Vista poco ampliada de enormes nucléolos en un grumo de células adenocarcinomatosas, En el
adenocarcinoma diferenciado, el nucléolo redondo único se Sitúa en el Centro, (Azul de metileno y eosina.)

Multinucleación

Engrosamiento
del borde
nuclear

Mitosis anormal
Grumos celulares
con
anisocariosis

Nucléolos prominentes

Hipercromatismo con distribución gruesa

Hipercromatismo con distribución gruesa

Alta relación NIC

Fig. 35. Rasgos distintivos de malignidad.

basarse en la alta relación
 CRITERIOS DE MALIGNIDAD

nuclearcitoplasmática, en la Variaciones de tamaño y

mayor cantidad de material
cromatínico y en la forma del núcleo y
irregularidad de su distribución, citoplasma
todo lo cual es característico de
malignidad. En la Estos son criterios muy notorios de
multinucleación benigna malignidad. Hasta las células atípicas
benignas pueden acompañarse de
los núcleos son de tamaño y forma agranda-
uniformes y de igual contenido de
cromatina.

Mltosls anormales
Aunque a veces se ven figuras
mitóticas en los histiocitos y

35
DEL

Fig. 36. Células malignas descamadas en un grumo suelto de un carcinoma gigantocelular de pulmón. Nótense los siguientes criterios completos de malignidad: 1)
considerable agrandamiento nuclear: 2) gran aumento de la relación N/C; 3) pronunciado hipercromatismo con cromatinasgruesas; 4) prominencia de los nucléolos, y

5) variación del tamañoy forma de los núcleos.

células mesoteliales, las mitosis anormales y

frecuentes Significan malignidad. Las
mitosis anómalas que caracterizan a las
neoplasias malignas son placa en metafase
hueca, cromosomas atrasados en anafase,
división multipolar, división asimétrica y
cromosomas polares. Los cromosomas
multipolares y polares son los más útiles
para diagnosticar malignidad (figs. 20-23).
 CRITERIOS DE MALIGNIDAD

Fig. 37. Inclusión celular en células cancerosas cultivadas de un

carcinoma pulmonar poco diferenciado. Esto no se debe a
fagocitosis, sino que representa una íntima interrelación mutua. Dlstrlbuclón Irregular de las
miento nuclear, prominencia del
células
nucléolo e hipercromatismo de
Las células aglomeradas suelen
los núcleos, que son muy
hallarse apiladas en forma
frecuentes en las neoplasias
irregular o distribuidas en
malignas, pero comparando las
desorden. Esto se conoce como
células malignas entre ellas se
pérdida de la polaridad
reconocen grandes variaciones
histológica del epitelio.
de tamaño y forma en los
núcleos y en el citoplasma. Fig. 38. Diátesis tumoral en el
esputo de un paciente con
Pérdida de especialización o carcinoma espinocelular de
especialización anómala pulmón. Las células picnóticas
En la carcinogénesis se pierde la dispersas que tienen núcleos en
especialización de las células; gotitas de tinta china dentro de los
restos necróticos sugieren
por ejemplo, la presencia de
neoplasia maligna.
cilias en las células del epitelio
bronquial significa benignidad,
mientras que en las neoplasias Presencia de células de inclusión y de
malignas es frecuente encontrar células apareadas
especialización anormal o La inclusión de células o canibalismo
desdiferenciación. En ocasiones representa el estado en que una célula maligna se
se observa en el halla incluida en el citoplasma de otra célula
cistadenocarcinoma la ciliación maligna. A este fenómeno se lo explicó como
de células cancerosas originadas "fagocitosis" de una célula maligna por otra. El
en el ovario. También son contacto anormal de células cancerosas qué han
buenos ejemplos la perdido la inhibición de contacto, puede originar
invaginación citoplasmática, como si una célula
queratinización anormal en el
esférica fuese ingerida por la externa, que emite
carcinoma espinocelular y la
una prolongación alada de su citoplasma; esta
enorme producción de moco con evidencia se puede interpretar por el hecho de
células en anillo de sello en el que las membranas celulares entre las dos células
adenocarcinoma. persisten y están desarrollados los desmosomas
(fig. 37). Para el canibalismo verdadero hay otra
2. Rasgos malignos en aglomeraciones de células explicación que atribuye la inclusión celular a
una mitosis anormal con separación incompleta
Aglomeración celular de las células. Las células apareadas son dos
células distintas unidas entre sí en una porción de
con pleomorflsmo y la membrana celular. También se considera que
anlsocarlosls se originan en la separación incompleta de las
células durante la mitosis.
Las células cancerosas de origen
epitelial tienden a exfoliarse 3. Crlterlos Indirectos de malignidad
formando grumos de células,
Presencia de gran cantidad de eritrocitos
aunque es frecuente encontrar y de hlstlocitos cargados de
como células individuales más o hemosiderina
menos degeneradas las del
carcinoma espinocelular. Uno La presencia de numerosos glóbulos rojos
puede sugerir hemorragia y su importancia
de los rasgos más característicos
depende del examen para sangre oculta. En
de malignidad en estas
consecuencia, carece de significado en los
aglomeraciones celulares son las extendidos directos de raspajes como curetajes
pronunciadas variaciones de cervicales, cepillados bronquiales y esofágicos y
tamaño y forma de los núcleos.
 CRITERIOS DE MALIGNIDAD

muestreos con globo gástrico, pero sí es

importante en muestras como esputo, orina,
líquido cefalorraquídeo y derrames corporales.

Diátesis tumoral*
Los tumores malignos suelen ser degenerados
y necróticos. La presencia de detritos celulares
necróticos y las llamadas células fantasmas se
denomina "diátesis tumoral" , que significa
cáncer avanzado (fig. 38). El material lipoide
forma parte de los tejidos necróticos y es
fagocitado por los histiocitos. Por lo tanto, en
ocasiones los histiocitos sudanófilos significan
necrosis hística.
Addendum: Contenido de DNA y su
significación citodiagnóstica. En un gran número
de publicaciones se describieron cantidades
aumentadas de DNA en los núcleos de las células
porque el aumento de DNA en los núcleos en
interfase en muestreos aleatorios de células, se
considera proporcional a la ploidia cromosómica;
este cuadro indica el modo de las líneas clonales
del tumor. Debemos señalar que las células
benignas que sintetizan activamente o que han
sintetizado DNA y están en el período
intermitótico (fase S o G2) pueden presentar
mayor cantidad de DNA: en el estado de
proliferación celular el histograma del contenido
de DNA revela el segundo pico en la región
tetraploide y algunos valores dispersos en la
gama hipotetraploide. El histograma obtenido de
tumores malignos de una sola clona revela el
pico máximo en su propio modo y un valor doble
de DNA como segundo modo.61 El análisis
cuantitativo de DNA demuestra que el carcinoma
poco diferenciado despliega una pronunciada
heteroploidia con líneas clonales aneuploideas.
En cambio, en algunos carcinomas bien
diferenciados se ve un valor modal de DNA en la
gama diploidia, como sucede en los de próstata732
y mama.6i En consecuencia, se requieren otros
marcadores morfológicos o bioquímicos
adicionales para distinguir entre un carcinoma
próximo a la diploidia y neoplasias benignas e
hiperplasia. Muchas veces surgen dificultades
para reconocer una diferencia neta en el
histograma de DNA entre displasia severa,
carcinoma in situ y carcinoma invasor incipiente
del cuello uterino.

* Nota: En la diátesis tumoral los

extendidos presentan: I ) restos de tejido
necrosado, 2) precipitados proteináceos y 3)
signos de hemorragia venosa, representada
por depósitos de hemosiderina.
 CITOLOGÍA DEL CÁNCER

Fig. 39. Estructura fina del carcinoma epidermoide de pulmón. Nótese la variación del contenido de cromatina de una célula a otra, Los núcleos predominan en
comparación con el citoplasma (relación N/C aumentada) yexhiben contornos irregulares, con invaginaciones ocasionales (In". Las tonofibrillas características de la
diferenciación epidermoide se reconocen en forma focal ( ro), NIr nucléolo. ('x 4650.)

l\lm

Fig. 40. Rasgos microscópicos electrónicos de malignidad. Hay cantidad de grumos de cromatina) condensados a lo la envoltura nuclear. Estoes la causa del
engrosamiento del borde nuclear a la microscopia óptica. La membrana nuclear, con sus poros ocasionales, es tan irregular que forma invaginaciones. La menor cantidad de
mitocondrias y el subdesarrollo del retículo endoplasmático representan desdiferenciacióh de células. Ch, cromatina; AC", cromatina asociada con

Diferenciación y desdiferenciación
1. Definición de diferenciación las malignas indiferenciadas exhiben
Las células embrionarias que se desarrollan a nucléolos más prominentes y núcleos más
partir del óvulo fecundado se organizan en hiperplásicos que las células normales
tejidos y órganos. El proceso de la maduras y que las células malignas
diferenciación o maduración celular es la diferenciadas. El núcleo, que ejerce el control
etapa de especialización, y por lo general genético de la diferenciación celular, ocupa
llega a un punto final de estructura y función una posición central en las células
estables. Las células normales muy jóvenes y embrionarias y después adopta una situación

8
 CRITERIOS DE MALIGNIDAD

excéntrica durante la diferenciación celular a reconocen en las células pavimentosas de la

medida que se elaboran sustancias
funcionales. 142 Los carcinomas anaplásicos y
los tumores germinales presentan una
posición nuclear central dentro de un
citoplasma basófilo pálido y escaso.
La maduración celular se caracteriza por la
diferenciación de la matriz citoplasmática y
del plasmalema; el citoplasma de las células
muy jóvenes es escaso, pálido, basófilo y de
bordes borrosos. El citoplasma contiene
gránulos ribosómicos libres que son los
responsables de la basofilia. A medida que
progresa la diferenciación (especialización en
citomorfosis), el citoplasma aumenta de
tamaño y aparecen organoides bien
desarrollados como mitocondrias, aparato de
Golgi, lisosomas y retículo endoplasmático,
asociados con ribosomas.
epidermis, son los elementos fundamentales
que mantienen los citoesqueletos; miden 30 a
60 Á de espesor y se aglomeran en haces que
muchas veces terminan en dirección de los
desmosomas. Los miofilamentos son
característicos de las células musculares y
están a cargo de la contractilidad. Los
neurofilamentos son estructuras tubulares de
100 Á de espesor que se forman en las
neuronas y corren paralelamente al
cilindroeje.
Especialización del plasmalema
La diferenciación del plasmalema se
manifiesta morfológicamente por el
establecimiento de un contacto comunicativo
entre las células y por la especialización de
las membranas citoplasmáticas libres. Las
uniones intercelulares, que están
estructuradas para permitir el pasaje de
moléculas, se pierden en las células
trasformadas; en la microscopia electrónica
las células cancerosas presentan contactos
más simples que sus equivalentes normales.
La especialización de las membranas
citoplasmáticas está representada por un
borde estriado , ribe-

Fig. 41. Epitelio intestinal de rata, con su ribete en cepillo a la

microscopia electrónica de exploración.

2. Especialización
Especialización de la matriz citoplasmática

Este fenómeno está representado por el

desarrollo de tonofibrillas, miofilamentos y
neurofilamentos, etc. Las tonofibrillas, que se

9
 CRITERIOS DE MALIGNIDAD

Fig. 42. Superficie del epitelio intestinal de rata vista con mayor
aumento.

10
 DIFERENCIACIÓN Y DESDIFERENCIACIÓN

Fig. 43. Especialización de la superficie libre de la célula.

Micrografía electrónica de los ribetes en cepilló del túbulo i?
contorneado proximal. Nótense los elementos vellosos
densamente aglomerados.

Fig. 44. en cepillo vistos con mayor aumento,

te en cepillo, cilias, etc. 0,5 a I g de longitud y de
Los bordes estriados se unos 80 nm de diámetro.
desarrollan de manera Los ribetes en cepillo se
característica en los ven en los túbulos
márgenes epiteliales del contorneados proximales
intestino (figs. 41 y 42). del riñón y son similares a
Éstas son unas los bordes estriados (figs.
prolongaciones cilíndricas 41 y 42), pero se
delgadas e individuales de diferencian en que los

11
elementos vellosos cancerosas también
aglomerados o fusionados experimentan el proceso
forman unas de diferenciación, aunque
invaginaciones tubulares ésta puede ser incompleta
funcionalmente o desordenada. El grado
compatibles con de diferenciación está
pinocitosis. dado por la similitud entre
las células tumorales y los
La célula ciliada normal
respectivos tejidos
de los vertebrados posee
originales. El hepatoma
centenares de cilias de
con desviación mínima
unos 5 a IO g de longitud
podría pertenecer a la
por 0,2 de espesor,
CITOLOGÍA DEL CÁNCER

forma. más
constituidas por dos
filamentos centrales y pf
nueve periféricos (figs.
45-47). En la
carcinogénesis
experimental se pueden
inducir anormalidades en
la estructura de las cilias;
en pacientes con
carcinoma pulmonar y en
animales que han inhalado
cancerígenos, se observan
cilias compuestas, con
múltiples filamentos
axiales distorsionados y
una localización no apical
atípica. 2S7 En la
diferenciación celular
Fig. 46. Micrografía electrónica de un corte
normal, el epitelio longitudinal de las cilias nasales. Nótense un
filamento central electrondenso (ch y los filamentos
pavimentoso estratificado periféricos (pm La raicilla posee estriaciones (flecha).

se diferencia desde las

células basales hacia las
células superficiales
cornificadas. En
consecuencia, puede
decirse que las células
cornificadas son más
diferenciadas que las
basales. Las células
extrema. El cancroide con
formación de perlas y el
carcinoma mucosecretante,
son formas bastante
diferenciadas de carcinoma
espinocelular y
adenocarcinoma,
respectivamente. Debemos

12
 Fig. 47. Micrografía electrónica de un corte trasversal
señalar, empero, que la de una Cilia. Cada cilia está constituida por dos
filamentos centrales y nueve periféricos.
diferenciación celular en los
aspectos morfológico y
funcional no es paralela tasis. En cambio, el
siempre a la malignidad carcinoma (epitelioma)
biológica. El basocelular de la piel, que
melanocarcinoma y el tiene un aspecto más
carcinoma mucosecretante, inmaduro que el
por ejemplo, son bastante carcinoma queratinizante,
diferenciados desde el punto
DIFERENCIACIÓN Y DESDIFERENCIACIÓN

Diferenciación normal

Secretoria

Cornificada

Célula
adenocarcino-
matosa

de
Fig.48. Diferenciacióny desdiferenciación de células. carcinomaepidermoide

de vista funcional, pero
muchas veces se comportan
como tumores malignos que
dan metás-
Fig. 45. Cilias de la
trompa de Falopio
humana vistas con
microscopia
electrónica de
exploración.
Célula
es un tumor benigno
desde el punto de vista
biológico.
3. Desdlferenclación
La diferenciación retrógrada
o desdiferenciación tiene
lugar cuando una célula
toma el camino contrario de
la maduración citológica
normal y retorna a su forma
embrionaria, tal como se
demuestra in vitro en la
trasformación blastoide con
PHA de los linfocitos T

13
pequeños; desde el punto de
vista morfológico esto se
caracteriza por pérdida de la
especializa ción y mal
desarrollo de los
organoides. 79 Hablando en
términos generales, las
células tumorales
anaplásicas son ricas en
ribosomas libres, poseen
escasas mitocondrias y poco
retículo endoplasmático
áspero, y carecen de
especialización. Mientras
tanto, en ocasiones la célula
adquiere el carácter y la
energía de un crecimiento
autónomo (anaplasia según
Hansemann, 1920). No es
probable que ocurra
maligniza ción en células
normales y maduras por
completo que se han de
descamar. Las células
sometidas a diversos
mutágenos serían las que
están en vías de crecimiento
y diferenciación (fig. 48).
En citología exfoliativa
muchas veces se habla de '
'atiPia" o de "atípico" para
denotar diferenciación
retrógrada. Los
anatomopatólogos muchas
veces utilizan estos
términos entendiendo un
desarrollo anómalo o
desviado sugestivo de
carcinoma; pero los
citólogos suelen
emplearlos en un senti-
do relativo, tal como se lo
representa en la
clasificación de
Papanicolaou o en la
descripción de St011. 62S
4. Características bioquímicas en
la desdlferenciaclón
Desde que se publicó el
concepto de Greenstein
sobre la simplificación
bioquímica en la
carcinogénesis, se ha
estudiado la diferenciación
retrógrada bioquímica
hacia células fetales
(desdiferenciación) o la
diferenciación desviada
respecto de las células
normales de las cuales
deriva el tumor
(disdiferenciación). En los
últimos años han aparecido
tres direcciones principales
en estos estudios;
alteraciones de isoenzimas
que intervienen en el
fetalismo, producción de
hormonas ectópicas y
aparición de antígenos
específicos para el
embrión. Aunque los
tumores indiferenciados
originados en una variedad
de tejidos se parecen entre
ellos, la producción de una
sustancia dada es
específica de un órgano y
se relaciona con la
diferenciación de las
células tumorales. La
alfafetoproteína es un
ejemplo de una sustancia
14
 que se produce
específicamente en el
carcinoma hepatocelular
primario. Esta proteína no
se produce en la misma
medida en todos los casos
de hepatoma y la
elaboración es más
pronunciada en el tumor de
diferenciación intermedia.
La produc ción de
isoenzimas de tipo fetal
como aldolasa A, 572
piruvato cinasa K , 166
subunidades H de LDH y
transaminasa III de
aminoácidos de cadenas
ramificadas298 es un
importante criterio de
malignidad y se dice que
es más acentuada en los
tumores de crecimiento
rápido que en los de
crecimiento lento. 166 En el
capítulo sobre ' 'Isoenzimas
vinculadas con
malignidad" se describe un
enfoque citoquímico con
técnicas tintoriales para
isoenzimas relacionadas
con neoplasias malignas.
5. Diferenclaclón experimental
inducida en células tumorales y
características bioquímicas
respectivas
La diferenciación
experimental inducida se
ha aplicado a líneas
celulares cultivadas in
vitro y hace poco se
empezaron a investigar sus
manifestaciones en las
características
morfológicas y
bioquímicas. La
diferenciación inducida
con rayos X con dibutiril
adenosina 3':5'-
monofosfato (dbc y
con prostaglandina El en
presencia de inhi-
bidor de fosfodiesterasa,S12
exhibe una diferenciación
citoplasmática con
aumento de tamaño de las
células. Se sabe que él
aumento del dbc-AMP
intracelular inducido por
activación de la adenil
ciclasa de la membrana, es
responsable de la
acentuación de las
funciones de proteína
cinasa que intervienen en
la síntesis de RNA, en la
síntesis en la
actividad enzimática"
'203537 y en la
morfogénesis, como
organización de
microtúbulos,
microfilamentos, etc. (fig.
49).
La prostaglandina El es un
estimulante de la adenilato
ciclasa (Prasad y col.). 513
La papaverina (25 gg/ml) y
la teofilina (l mM) son
conocidos inhibidores de la
nucleótido cíclico
fosfodiesterasa y ambas
elevan el dbc-AMP
intracelular. Haciendo el
tratamiento in vitro con
dbc-AMP en dosis óptima
15
(0,5 a 1 mM) se registra un diferenciación celular
aumento de la cantidad de (Prasad y Vernadakis) SlS
células diferenciadas a las (fig. 50).
24 horas, pero la
En estos experimentos sobre
proliferación celular
diferenciación celular se
empieza a inhibirse más
solieron emplear líneas
tarde, a los tres días de la
celulares cultivadas del
administración, como
sistema nervio-
consecuencia de la
CITOLOGÍA DEL CÁNCER

Fig. 49. Actividad funcional del 3',5'dbc-AMP en el metabolismo celular.

16
Fig. 50. Medición simultánea del contenido de DNA y proteína mediante microscopia fluorométrica (BH2-QRFL
Olympus con combinaciones de filtro de excitación-espeio dicrótico-barrera filtrante) tras la estabilización de la
fluorescencia con una técnica posirradiación.73B Doble tinción con pararrosanilina-Schiff y ninhidrina-acriflavina.
a, Línea celular PC 1 establecida a partir de un carcinoma espinocelular poco diferenciado de pulmón. Control: 72
horas después del pasaje sin dbc-AMP. b, Líneacelular PC 1 a las 72 horas del pasaje con administración de dbc-
AMP 1 mM. Se ha suprimido la proliferación Celular y existe considerable síntesis de proteína (diferenciación
celular)' inducida por el dbc-AMP.

Cuadro 24. Alteraciones citoisoenzimáticas inducidas con

dbc-AMP
Cá. espinoc.elular poco diferenciado (CP l) Adenoca, poco diferenciado (CP 7)

Control dbc-AMP mM dbc-AMP I Control dbc-AMP mM dbc-AMP lmM

Termoestabilidad de la KAU 16,9 KAU 31,6 KAU 1,4

KAU 70,2 KAU 67,9 KAU fosfatasa alcalina*
100 % 91,1 % 12,3 11,1
% 7,3 %
Sensibilidad de fosfata-KAU
7.6 KAU 14,3 KAU sa
ácida al tartra- 15,4
40,4

17
LDH total 1619 U. 2557 U. 2789 U. 3187 U.
6362 U. 5780 U.
Zimograma I o
2 12,0 % 12,8 % 26,9 13,7 % 16,1 % 25,3
3 51,7 % 47,5 % 40,3 % 34,9 % 29,0 % 29,3 %
4 36.3 % 39,7 % 32,8 % 38,3 % 43 % 36,0 %

50 9,3 % 6,5 %
Nota: Las actividades enzimáticas por 106
célulasseÃT1idieron a las 72 horas de la administración
de dbc-AMP. La estabilidad citoquímica se examinó
calentando 30 minutos a 560C. No se hallaron isoeozimas
placentarias.
La

sensibilidad
citoquímica
se examinó
tratando
con L-
tartrato. +
Pronunciad
as
alteraciones
de los
valores.

18