UNIVERSIDAD DEL VALLE DE MÉXICO-CAMPUS LOMAS VERDES

Determinación de Glucosa
Delgadillo Pérez Ivan, Irvin Leonel Arce Barajas, Beatriz Parada Guerra, Jocelyn
Saavedra Nuñes
Asignatura: Bioquímica Clínica
Licenciatura QFBT
Periodo 2020-1

RESUMEN

La glucosa es la principal fuente de energía para el metabolismo celular. Se obtiene

fundamentalmente a través de la alimentación, y se almacena principalmente en el hígado,
el cual tiene un papel primordial en el mantenimiento de los niveles de glucosa en sangre
(glucemia). El análisis de glucosa es utilizado para indicar el contenido de azúcar presente
en la sangre. Este tipo de determinaciones permite detectar afecciones en el hígado o
presencia de enfermedades como la diabetes mellitus, por lo cual se vuelve necesario
determinar la cantidad de glucosa en pacientes en ayuno y en pacientes con alimentos
recién ingeridos. Tomando en consideración las varianzas de la cantidad de glucosa en el
organismo en cada caso, por género, edad, embarazo, etc., por ello se considera importante
conocer la correcta metodología para la aplicación de esta técnica en clínica e
investigaciones, así como el comprender al análisis de los distintos valores y resultados
observados en pacientes. Donde el paciente 1 tuvo valores fuera del rango normal de
glucemia

Palabras clave: glucosa, sangre, espectrofotómetro, absorbancia, patrón, muestra

sanguínea, hemolisis.

INTRODUCCIÓN contrario y mantiene los niveles de

La glucosa es un azúcar que es utilizado
por los tejidos como forma de energía al
combinarlo con el oxígeno de la
respiración. Cuando se consume, la
glucosa en sangre se eleva, lo que se
consume desaparece de la misma, para
ello hay una hormona reguladora que es
la insulina producida por el páncreas. Esta
hormona hace que la glucosa de la sangre
entre en los tejidos y sea utilizada en
forma de glucógeno, aminoácidos, y
ácidos grasos. Cuando la glucosa en
sangre está muy baja, en condiciones
normales por el ayuno, se secreta otra
hormona llamada glucagón que hace lo
glucosa en sangre.
Cuando la insulina es insuficiente, la
glucosa se acumula en sangre, y si esta
situación se mantiene, da lugar a una
serie de complicaciones en distintos
órganos. Esta es la razón principal por la
que se produce aumento de glucosa en
sangre, pero hay otras enfermedades y
alteraciones que también la provocan.
El tejido más sensible a los cambios de la
glucemia es el cerebro, en
concentraciones muy bajas o muy altas
aparecen síntomas de confusión mental e
inconsciencia.
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El mantenimiento de la glucemia, o
concentración plasmática de glucosa, en
los organismos superiores es
fundamental para el funcionamiento de
todos los órganos, al ser la glucosa un
metabolito energético principal. La
coordinación de los procesos metabólicos
implicados en este cometido se lleva a
cabo por la relación insulina/glucagón. La
ingestión de glucosa o sustancias que la
produzcan (almidón, fructosa, galactosa,
proteínas, pero no grasas) va seguida, en
las personas sanas, por un aumento de la
glucosa en sangre. Este aumento origina
la puesta en marcha del mecanismo
regulador: aumento de la utilización de
glucosa (por glucólisis, entre otras),
aceleración de la gluconeogénesis y
disminución de la glucogenólisis; todo el
lo ocurre principalmente mediante la
secreción de insulina, una hormona
pancreática de tipo polipeptídico. En el
caso de que la producción de insulina esté
disminuida, la glucosa no puede ser
utilizada por las células, lo cual ocasiona
niveles elevados de glucosa en sangre
(hiperglucemia); así ocurre en las
personas que sufren diabetes del tipo
denominado "dependiente de insulina" o
"tipo 1".El diagnóstico de la diabetes
dependiente de insulina es sencillo y se
basa en antecedentes, síntomas clínico
sy comprobación de una hiperglucemia
significativa. Las determinaciones de
glucemia basal permiten el diagnóstico de
la diabetes, pero constituyen valores
puntuales y aislados en el tiempo que no
reflejan los niveles medios de glucemia ni
la duración de esta. Por lo tanto, es
necesario disponer de pruebas que
indiquen el grado del control metabólico
de la enfermedad a corto y medio plazo.
Estas pruebas están basadas en el
fenómeno de unión de la glucosa a
diversas proteínas. Esta glucosilación
tiene lugar por una reacción no enzimática
y afecta tanto a proteínas de vida media
corta (albúmina, hemoglobina, etc.) como
debida media larga (colágeno, mielina,
etc.). La intensidad de la glucosilación
depende de varios factores, siendo los
más importantes los niveles medios de
glucemia, la duración de la hiperglucemia,
la vida media de las proteínas y la
concentración de éstas. Como
consecuencia, la medida de la
glucosilación proteica constituye un buen
marcador bioquímico del grado de
compensación del enfermo diabético.
Análisis de glucosa en sangre
El análisis de la glucosa mide la
concentración de glucosa presente en la
sangre y sobre todo se realiza para
estudiar la posible presencia de una
diabetes mellitus o sacarina. Como es una
enfermedad muy compleja y con grandes
repercusiones de salud es un análisis
muy discriminativo y útil que se realiza
de forma bastante rutinaria. Como se ha
indicado, la diabetes dependiente de
insulina cursa con un aumento de la
concentración de glucosa en sangre
(glucemia), que se produce de manera
repentina y la hiperglucemia es severa.
Una hiperglucemia superior a 140 mg/dL
detectada en más de una ocasión en
ayunas es un índice de posible diabetes,
diagnóstico que debe confirmarse con
otras pruebas. La determinación de
glucosa sanguínea es una prueba muy
frecuente en bioquímica y se puede llevar
a cabo tanto por métodos químicos como
enzimáticos, siendo estos últimos los más
específicos.
Principio del Método de Determinación
cuantitativa de glucosa IVD (Spinreact)
La glucosa oxidasa (GOD) cataliza la
oxidación de glucosa a acido glucónico. El
peróxido de hidrogeno producido se
detecta mediante un
aceptor cromogénico de oxígeno, fenol-
ampirona en presencia de peroxidasa
(POD):
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Figura 1. Reacción general en la determinación de
glucosa IVD.
En el método GOD-POD, en un primer
paso la glucosa oxidasa cataliza la
oxidación de la D-glucosa a ácido D-
glucónico conformación de peróxido de
hidrógeno. Éste es utilizado
por la peroxidasa para oxidar a la 4-
aminofenazona y al fenol, dando lugar a
una quinonaimina coloreada. La
intensidad de color será proporcional a la
concentración de glucosa presente
inicialmente. En ocasiones se utilizan
otros sustratos en lugar de 4-
aminofenazona+fenol, tales como o-
dianisidina, guayacol y ABTS.
Figura 2. Mecanismo de reacción en
determinación de glucosa IVD.
PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA
El análisis de glucosa es utilizado para
indicar el contenido de azúcar presente en
la sangre, la cual se vuelve necesaria para
la obtención de energía, utilizada en gran
parte en el metabolismo celular. Este tipo
de determinaciones permite detectar
afecciones en el hígado o presencia de
enfermedades como la diabetes mellitus,
por lo cual se determinará de manera
cuantitativa la cantidad de glucosa en
pacientes en ayuno y en pacientes con
alimentos recién ingeridos, obteniendo los
valores de glucosa utilizando la
absorbancia del patrón y de las muestras.
JUSTIFICACIÓN
La determinación de glucosa dentro de un
estudio clínico permite conocer acerca de
la existencia de cierto daño en hígado o
tejido y la presencia de cierto tipo de
enfermedades como puede ser la
diabetes mellitus, con el fin de prevenirla,
diagnosticarla y si es el caso tratarla en
tiempo. Tomando en consideración las
varianzas de la cantidad de glucosa en el
organismo en cada caso, por género,
edad, embarazo, etc., por ello se
considera importante conocer la correcta
metodología para la aplicación de esta
técnica en clínica e investigaciones, así
como el comprender al análisis de los
distintos valores y resultados observados
en pacientes.
HIPÓTESIS
A medida que aumente la absorbancia de
las pruebas con la sangre, se considerara
que la concentración de glucosa en
sangre es mucho mayor.
En aquellos pacientes con menor tiempo
de ayuno se esperan obtener
absorbancias mucho más altas y por tanto
la
concentraciones de glucosa en sangre
mucho mayores.
OBJETIVOS
General
● Conocer y comprender el método
clínico para determinar de manera
cuantitativa la cantidad de glucosa
en pacientes, así como sus
aplicaciones.
Específicos
● Comprender las posibles
alteraciones del organismo al
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presentar varianza en una
determinación de glucosa.
● Aplicar el conocimiento ya
mencionados a un estudio de
muestras biológicas (sangre) de
pacientes.
● Conocer las diferentes
aplicaciones clínicas de la
determinación de la glucosa, así
como los datos en varianza de la
misma y la relación que tiene la
misma con enfermedades.
● Reforzar la capacidad de análisis
y síntesis.
MÉTODO
En 2 Celdas Colocar 1ml
De Solucion De Trabajo
•10 Ul De Muestra Problema
•10il De Calibrador
Mezclar E Incubar 30
Min A Temperatura
Ambiente
Medir A 505 Nm
RESULTADOS
Figura 3 . coloración de las muestras de glucosa
despues de la incubación
Tabla 1. Resultados obtenidos de glucosa
Sujeto Valores Horas de Valores de
de ayuno referencia
glucosa
en sangre
(mg/dL)
Paciente 1 159 desconocido 60-110
mg/dL
ANÁLISIS DE RESULTADOS
Para realizar un análisis de glucosa se
debe de tener un ayuno mínimo necesario
de 8 a 12 horas. Debido a que si no se
respetan estas horas los valores
obtenidos no son confiables.
Las características de las sustancias que
se van a medir y especialmente para
algunas pruebas en particular como
lípidos o de glucosa, se necesita que la
sangre no tenga los niveles de glucosa o
grasa que se tienen tras la última ingesta
de alimentos (Fernández Campuzano
Eduardo, 2016).
La glucosa es la principal fuente de
energía para el metabolismo celular. Se
obtiene fundamentalmente a través de la
alimentación, y se almacena
principalmente en el hígado, el cual tiene
un papel primordial en el mantenimiento
de los niveles de glucosa en sangre
(glucemia). Para que esos niveles se
mantengan y el almacenamiento en el
hígado sea adecuado, se precisa la ayuda
de la insulina, sustancia producida por el
páncreas. Cuando la insulina es
insuficiente, la glucosa se acumula en
sangre, y si esta situación se mantiene, da
lugar a una serie de complicaciones en
distintos órganos. Esta es la razón
principal por la que se produce aumento
de glucosa en sangre, pero hay otras
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enfermedades y alteraciones que también
la provocan (Espinoza Claudia, 2008).
En esta práctica se determinó en un solo
individuo la concentración de glucosa en
suero, para esto se utilizó un kit, se
llevaron a cabo las respectivas reacciones
y posteriormente se leyó la absorbancia
en un espectrofotómetro a 505 nm.
En la tabla 1 se puede observar que el
paciente obtuvo una glucosa de 159
mg/dL la cual se encuentra fuera del
rango de valores de referencia y esto se
debe al tiempo de ayuno que tuvo el
paciente debido a que se desconoce
cuándo ingirió su ultimo alimento antes de
realizarse el estudio.
. CONCLUSIONES
Se conoció y comprendió el método
clínico para determinar de manera
cuantitativa la glucosa en sangre de
distintos pacientes, así como las
aplicaciones clínicas y la relación de la
misma con posibles alteraciones del
organismo, aplicando el conocimiento a
estudio de muestras biológicas de sangre,
donde el paciente se encontró fuera de
los valores normales de glucosa en
sangre
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Recuperado de:
https://www.diabetesjuntosxti.mx/
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tus-examenes-medicos/2016/05/
Revisado el: 24/09/18