ANÁLISIS DE LIGAMIENTO EN GENES DUMPY, BLACK Y WHITE
EN LA MOSCA DE LA FRUTA DROSOPHILA MELANOGASTER
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Genética. Laboratorio de Genética Humana. Departamento de Ciencias Biológicas, Universidad de Los Andes, Bogotá D.C., Colombia.
Forero, L. M., Neira, L., Pedraza, J. J., Suárez, S.
Departamento de Ciencias Biológicas, Universidad de Los Andes, Bogotá D.C., Colombia.
Resumen – Drosophila melanogaster, conocida
como la mosca de la fruta, ha sido ampliamente
utilizada en estudios genéticos ya que posee
distintas características que la hacen un modelo de
estudio óptimo, especialmente en estudios de
patrones de herencia, como por ejemplo su
reducido número de cromosomas, reproducción
temprana así como también su corto tiempo de
vida. En este experimento se realizó un cruce de
cinco hembras virgenes de fenotipo silvestre (wt)
de Drosophila melanogaster con cinco machos de
fenotipo W D B de la misma
Posteriormente, se llevo a cabo un conteo y
caracterización de la progenie y se establecieron, a
través de la prueba estadística de chi-cuadrado, los
patrones de herencia de la genes de estudio Dumpy
(Dp), Black (B) y White (W). Los resultados fueron
congruentes con lo esperado, en donde se
corroboraron proporciones de aparición del gen
White de acuerdo a su ligamiento al X así como
también se corroboró un ligamiento de los genes
Dumpy y Black situados ambos en el cromosoma
II del modelo de estudio.
Palabras clave – Drosophila melanogaster,
herencia mendeliana, ligamiento, chi-cuadrado.
1. INTRODUCCIÓN
Drosophila melanogaster resulta ser un excelente
organismo modelo para el estudio de la evolución
cromosómica y las interacciones génicas. Después
de casi un siglo desde que Thomas Morgan (1866-
1945) descubre lo él denominó “herencia limitada
ligada al sexo” y la mutagénesis causada por
radiación ionizante (Morgan, 1910) en D.
melanogaster, este organismo sigue siendo
ampliamente utilizado por la capacidad de realizar
múltiples cruces, con progenie numerosa, rápido
crecimiento y con poco espacio requerido.
especie. La obtención del primer mutante reportado de D.
melanogaster fue realizado por Morgan, mutante
que de diferencia de los individuos silvestres, tenía
ojos blancos. El conocimiento por parte de Morgan
del trabajo previo de Mendel lo impulsó a realizar
cruces para comprobar la base genética de esta
mutación. Aunque Morgan encontró progenies y
proporciones similares a las esperadas bajo la
genética mendeliana un resultado no era predicho
por la teoría de Mendel: todas las moscas de ojos
blancos eran machos (Raven et al., 2002), a lo cual
Morgan se refirió como un carácter “limitado al
sexo”.
En este informe se reportan los resultados de un
experimento para analizar la aplicabilidad de la
teoría genética mendeliana sobre la herencia de
caracteres mutantes en D. melanogaster.
Adicionalmente, al trabajar con la mutación White,
ligada al sexo según la literatura, se pretende
estudiar los patrones correspondientes a dicho tipo
de herencia en el marco de las teorías propuestas
por Thomas Morgan.
Drosophila melanogaster tiene un genoma
compuesto por cuatro pares de cromosomas (tres
pares autosómicos y un par sexual), en los cuales
el material genético es altamente conservado entre
las especies del género (Müller, 1940). Esto da
lugar la posibilidad de identificar interacciones
génicas a nivel alélico y de alelos de diferente loci,
más aún cuando se posee una característica
genética clara que de un cambio fenotípico claro,
como es el caso de las mutaciones, que son muy
dicientes cuando se estudian patrones hereditarios.
Para el desarrollo experimental del presente
proyecto se seleccionaron moscas triple-mutantes
macho y moscas silvestres hembra para la
realización de los cruces, las tres mutaciones de
los genes asociadas a los individuos macho se
encuentran en los genes White (XWY), ubicado en
el cromosoma sexual (X), la cual otorga al
individuo el fenotipo de ojos y ocelos blancos, esta
mutación se encuentra ligada al cromosoma sexual
X, es de origen tanto mutagénico como espontáneo
y presenta dominancia incompleta. Los
heterocigotos (w/w+) tendrán menor cantidad de
pteridinas de pigmento rojo, mientras que en los
individuos homocigotos (w+/w+) no presentan
pigmentos a causa de un bloqueo en al ruta
metabólica de las pteridinas y omocromos
(Thiemann, 2001).
Los individuos, a su vez, eran portadores de una
mutación en el gen Dumpy, el cual se encuentra en
la región 13 del cromosoma 2 implicado en la
codificación de proteínas encargadas de mantener
la tensiones en las uniones epidermis-cutícula, de
esta manera mutaciones en este gen ocasiona un
fenotipo recesivo caracterizado por poseer alas
truncadas y reducidas a ⅔ de su longitud normal.
La tercera mutación presente en las moscas macho
se encuentra en el gen Black y ocasiona cuerpo de
coloración negra. El primer mutante del gen Black
fue reportado por Thomas Morgan quien lo
describió como una mutación autosómica recesiva.
Este estudio es particularmente importante por la
utilización de una cepa triple-mutante, tratando así
de comprender mejor los fenómenos de interacción
génica que pueden ocurrir en genes del mismo o
diferente locus y cromosoma. Además, este
estudio posee implicaciones en el entendimiento
de procesos evolutivos, métodos de mejora
genética y herencia de enfermedades.
2. METODOLOGÍA
Para observar la segregación genética de los
fenotipos de las mutaciones asociadas a los genes
White, Dumpy y Black se realizó un cruce entre
hembra de cepa pura silvestre y macho triple
mutante White, Dumpy y Black. Inicialmente, se
seleccionaron 5 machos con las tres mutaciones
mencionadas, además 5 hembras silvestres
vírgenes y se introdujeron en un recipiente con el
medio de cultivo apropiado compuesto por banano
y fécula de maíz.
Se realizaron adicionalmente 3 réplicas para
obtener una mayor progenie, evitar interferencias y
tener resultados estadísticamente significativos.
Los tres recipientes con las moscas se incubaron a
una temperatura de 25ºC durante 15 días para
optimizar su ciclo de vida, obteniendo la primera
filial (F1) dos semanas después. Posteriormente, se
realizó el conteo de la progenie y se prosiguió a
realizar el cruce de la F1 tomando 5 machos que
presentaron las tres mutaciones y 5 hembras
vírgenes por recipiente. Se tomaron, además, 3
réplicas y se incubaron a 25ºC durante dos
semanas.
Finalmente, se llevo a cabo el conteo de la segunda
filial (F2) para comprobar la existencia de un
patrón de herencia mendeliano de las tres
mutaciones consideradas y en caso de no
cumplirse las leyes mendelianas se verificó bajo
qué mecanismo genético se segregaron los alelos
que causan las mutaciones.
3. ANÁLISIS DE RESULTADOS Y Tabla 2. Resultados prueba Chi cuadrado (X2) para
DISCUSIÓN patrón mendeliano. Se muestran los individuos
observados (O) de cada fenotipo, las proporciones
esperadas (P) y el número de individuos esperados (E),
Conteo de fenotipos obtenido de la F2
así como el valor de chi cuadrado y el P-value obtenido
Los datos obtenidos del conteo de progenie de la
de la prueba.
F2 entre (i) machos wild type (wt) y hembras triple
mutantes (W, D y B), así como (ii) hembras wt y
machos triple mutantes se resumen en la Tabla 1,
donde se obtuvieron 1012 y 1440 individuos para
cada cruce respectivamente. Los genes mutantes se
encuentran agrupados según la característica
fenotípica del grupo de individuos. D, B y W
hacen referencia a la presencia de un único alelo
sin mutación, por lo cual al ser dominante, este no
expresa el fenotipo del alelo mutado.

A continuación, se procedió a comprobar la

existencia de un patrón de herencia mendeliano
para las mutaciones estudiadas. Para lo anterior, se
realizó una prueba Chi-cuadrado (X2) utilizando
Análisis de Ligamiento Cromosómico
como resultado esperado las proporciones de
herencia mendeliana, lo cual incluye la suposición
En consideración de la significancia estándar
de que los genes mutantes se encontraban en
utilizada de 0,05 y el valor de P de
cromosomas autosómicos diferentes (Tabla 2),
aproximadamente 0.00 se puede concluir que la
obteniendo un valor crítico de X2 de 24,99 y
herencia de los cruces realizados no siguen un
correspondiente a un P-value menor a 0,001
patrón mendeliano.
(α=0,05) para ambos cruces realizados. De esta
manera, se encontró que los valores obtenidos de
Por otro lado, se procedió a considerar la
los conteos fenotípicos no presentan proporciones
disposición de genes en el genoma de Drosophila
propias de un patrón de herencia mendeliano.
melanogaster (Ilustración 1). Se sabe que los tres
Tabla 1. Conteo de progenie discriminado por sexo. D,
genes: Dumpy (dp), Black(b) y White(w) son
B y W hacen referencia a la presencia de un único alelo recesivos para cada fenotipo. Conociendo que los
sin mutación, de esta manera no se expresa la alelos mutantes Dumpy (dp) y Black (b) se
mutación. encuentran en el mismo cromosoma (Ilustración
1), es decir, están ligados a nivel cromosómico,
permitiendo que por recombinación se presenten
individuos genotípicamente, y por lo tanto también
fenotípicamente distintos a los parentales.

Por consiguiente, estos genes no se comportan de

forma mendeliana en tanto la distancia entre genes
que están en un mismo cromosoma aumenta las
probabilidades de obtener genotipos
recombinantes debido a la generación de diferentes
gametos.
Adicionalmente, el alelo mutante White (w) está
ubicado en el cromosoma X, es decir, está ligado
al sexo. Por lo que el fenotipo expresado por el
gen white se observa principalmente en machos
debido a que el cromosoma Y no contiene la
mayoría de genes contenidos en el cromosoma X y
un solo gen recesivo expresaría ojos blancos en un
macho XY.
Ilustración 1. Disposición de loci y genes en el genoma
de Drosophila melanogaster. Nótese que el gen black
body (b) y el gen dumpy (dp) se encuentran ambos en el
cromosoma II. Imagen tomada de:
http://flybase.org/maps/chromosomes/maps.html.
Se puede observar de la Ilustración 1 que el gen
Dumpy se encuentra en la posición 13.0 y el gen
Black en la posición 48.5, es decir, existe una
distancia de 35.5cM entre los genes Dumpy y
Black, lo cual también indica un 35% de
probabilidad de recombinación durante la meiosis.
Bajo la anterior premisa se puede conocer que la
probabilidad de que suceda alguno de los alelos
recombinados es de ½ r y la probabilidad de que
sucedan los alelos sin recombinar corresponde a ½
(1-r), donde r es la fracción o probabilidad de
recombinación. De esta manera, se obtuvieron las
probabilidades de ocurrencia de los combinaciones
alélicas para la F2 (Tabla 3).
Tabla 3. Probabilidad de aparición de gametos. El
símbolo “o” en los alelos hace referencia al alelo
silvestre para Dumpy o para Black por cuestiones de
facilidad visual, mientras que D o B indican la
presencia del alelo mutado. X1 hace referencia a la
presencia de la mutación White ligada al cromosoma X.
Con dichas probabilidades se desarrolló el cuadro
de Punnett para el cruce trihíbrido y se calcularon
las probabilidades fenotípicas tanto para machos
como para hembras.
Tabla 4. Cruce trihíbrido. En negrita se denota la
proporción de machos correspondientes a cada
cruce. La Tabla 5 contiene el código de colores de
cada fenotipo con sus respectivas probabilidades.
Conociendo las probabilidades de obtener los Tabla 6.Resultados prueba Chi cuadrado (X2)
diferentes gametos, mostradas en la Tabla 3, se para patrón no mendeliano. Se muestran los
realiza un cruce trihíbrido que es mostrado en la individuos observados (O) de cada fenotipo, las
Tabla 4. proporciones esperadas (P) y el número de
Las probabilidades de tener machos o hembras con individuos esperados (E), así como el valor de chi
los cuatro diferentes fenotipos se obtienen cuadrado y el P-value obtenido de la prueba.
sumando las probabilidades de los genotipos que
dan origen al fenotipo específico. Por ejemplo, en
la Tabla 4 se muestra en amarillo las
probabilidades de tener un individuo con fenotipo
salvaje, posteriormente se suman dichas
probabilidades, discriminando si es hembra o
macho, y de ese modo se obtiene una probabilidad
igual a 0.151 para un macho con fenotipo salvaje y
otra de 0.302 también para una hembra con
fenotipo salvaje. Las sumas de las probabilidades
de acuerdo a los fenotipo se muestran en la Tabla
5.

Tabla 5. Proporciones fenotípicas. Se observan

las proporciones fenotípicas totales, así como las
Considerando únicamente aquellas categorías
proporciones respectivas por sexo, y el código de
donde el valor de Chi cuadrado es diferente a 0 se
colores utilizada en la Tabla 4.
puede calcular el p-value asociado a nuestros
resultados, el cual es 0,0752. De esta manera y
considerando un valor crítico de X² de 19,68 y un
alfa de 0.05, no se rechaza la hipótesis nula bajo
los supuestos y se concluye con un 95% de
confianza que, los datos obtenidos de los conteos
de los fenotipos tienen un comportamiento tal que
los alelos mutantes de los genes Dumpy y Black se
encuentran en el mismo cromosoma, mientras que
el alelo mutante del gen White está ligado al sexo
(X).

Respecto a la tabla 2, se analizaron los altos

valores para la prueba de chi-cuadrado y un p-
value menor al valor alfa (0.05) para el rechazo de
la hipótesis nula. Además, y según los datos
obtenidos para las mutaciones White, Dumpy y
Black se rechaza una herencia mendeliana. Por
esto se procedió a incluir en el análisis las
Luego de éstos cálculos se procedió a computar el
posiciones relativas de los genes en los
valor de X² para el cruce 1.
cromosomas de D. melanogaster.

Por otro lado, en la tabla 6 se analizaron los

valores de chi-cuadrado para un patrón de herencia
no mendeliano y teniendo en cuenta las posiciones
relativas de los genes en cuestión se resaltaron tres
categorías en las que no se esperaba encontrar
individuos pero que no cumplieron con dicha
suposición. Debido a que son individuos
teóricamente imposibles bajo el tipo de herencia
conocido y apoyado científicamente, se puede
concluir a priori de la prueba de chi-cuadrado de
los datos recolectados no cumplen las predicciones
iniciales. Estos grupos que no se ajusten cuentan
con máximo dos individuos que a comparación de
un total de 1440 individuos no son significativos.
Asimismo, los resultados no esperados pueden ser
debido a una mala caracterización del sexo de los
individuos ya que al no tener individuos esperados
para las cuatro categorías estipuladas inicialmente
no se tuvieron en cuenta para el análisis chi-
cuadrado. Finalmente y respecto a el análisis de
herencia no mendeliano del valor de chi-cuadrado
no superó el valor crítico y el p-value supera el
valor alfa. Lo anteriormente mencionado permite
aceptar la hipótesis nula.
4. CONCLUSIONES
Se concluye que el tipo de herencia de las
mutaciones White, Dumpy y Black no tienen un
carácter mendeliano ya que el gen que posee el
alelo mutado para Dumpy y el gen que posee el
alelo para Black se encuentran en el cromosoma II
a una distancia de 35cM que afecta la forma en la
que se segregan dichos alelos durante la mitosis.
En síntesis, lo genes Dumpy y Black se encuentran
ligados parcialmente en tanto puede ocurrir una
recombinación dándose una segregación
diferencial o una segregación en el que ambos
genes se hereden en bloque. Con respecto a la
mutación White, este fenotipo se encuentra ligado
al sexo ya que el gen que posee este alelo se
encuentra en el cromosoma X. El ligamiento
parcial y el ligamiento al sexo de los fenotipos
cambian las proporciones mendelianas de los
fenotipos expresados. La ausencia de hembras con
fenotipo White se explican a partir del ligamiento
al sexo de este fenotipo y su carácter recesivo.
Finalmente, la filial dos (F2) se obtuvo a partir del
cruce entre una hembra portadora del fenotipo
White y un macho sin el fenotipo. En consecuencia
a lo anterior, en la progenie no se esperarían
hembras con el fenotipo White ya que todas las
hembras XX con al menos un X sin la mutación
presentarían el fenotipo salvaje de ojos rojos. Por
el contrario, los machos al ser heterogaméticos
(XY) cuando heredan un cromosoma con la
mutación obligatoriamente presentan el fenotipo
mutante de ojos blancos. En otras palabras, se
esperaría un porcentaje de 25% de machos con el
fenotipo White, con la tabla 5 se puede sumar las
probabilidades de tener un macho con fenotipo
White dando 0.249 que concuerda con lo esperado.
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http://www.mhhe.com/biosci/genbio/raven6b/grap
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