Pipetas Desplazamiento - PLT Unit

Juliana Navarro
Bacterióloga Microbiologia Médica

BRAND GMBH + CO KG
Gerente Regional de Ventas VECO + PE
Your Partner in the Lab. Worldwide

1
© BRAND GMBH + CO KG
Volumetría con pipetas
- Tipos de pipetas - Puntas: Compatibilidad

- Principio de funcionamiento - Manejo
- Cojín de aire - Pipeteado
- Desplazamiento directo - Pipeteado inverso
- Aplicaciones - Mantenimiento y limpieza
- Pipetas
- Pipetas de despla- - Control y Monitoreo
zamiento directo - Calibración
- Dosificadores manuales - Técnica Easy Calibration
- Certificados
- Exactitud - PLT Unit
- Condiciones - Resumen
- Temperatura
- Experiencia - Informaciones
- Angulo de pipeteo
- Pre-enjuague - Tests con la PLT Unit
- Presión atmosférica
2
Pipetas
Transferpettor® HandyStep® HandyStep® S

Transferpette® S Transferpette®
electronic
electronic
Pipeta monocanal Pipeta electrónica Pipetas de despla- Dispensador manual y

y multicanal monocanal y multicanal zamiento positivo electrónico
Cojín de aire Desplazamiento directo

3
Principio de Funcionamiento
1. Cojín de aire
No hay contacto directo del émbolo con el

líquido (cojín de aire)
2. Desplazamiento directo
El émbolo tiene contacto directo con el

líquido
1. 2.
4
Principio de Funcionamiento
Principio Pros Contras

Cojín de aire Pipeteado más rápido, Pipeteado con aplicación
especialmente en largas limitada para líquidos de alta
series presión de vapor y alta
viscosidad
Rápido cambio de las El cojín de aire se ve afectado
puntas por varios factores
Recomendado donde no se
permite ningún arrastre
Desplazamiento Adecuado para pipetear Quitar o sustituir la punta

directo medios de alta presión de requiere de más tiempo
vapor, alta viscosidad y que
tienden a producir espuma
5
Aplicaciones
Pipetas con cojín de aire
- Soluciones acuosas, ácidas, alcalinas y

solventes compatibles con: PP, TPX, PVDF,
FKM* e PTFE* (*= multicanales)
- Ampliamente utilizadas en las áreas: química,

bioquímica, inmunología, salud, ambiental,
alimentos, etc.
6
Aplicaciones
Pipetas de desplazamiento directo
- Ideales para medios críticos y suspensiones

- Soluciones de alta viscosidad
- Alta presión de vapor
- Que producen espuma
* La punta no necesita ser descartada dado

el bajo volumen residual.
7
Aplicaciones
Dosificadores manuales (desplazamiento

directo)
- Ideales para la dosificación en alícuotas y en

largas series de pipeteado
- Es posible dosificar líquidos de alta viscosidad o
de alta presión de vapor
- Los medios deben ser compatibles con
PE y PP (punta-PD)
• Las puntas no se pueden esterilizar en

autoclave (puntas estériles disponibles)
8
Exactitud
1.000µl Pipeta vol. “A” Pipeta grad. Transferpette S Transferpette Transferpettor HandyStep electronic PD-
(1ml) 1ml “A” 1ml 100-1000µl electronic 200-1000µl tip :
100-1000µl 1ml 50ml
E≤±% 0,6 0,7 0,6 0,6 0,5 0,6 1,5
E ≤ ± µl 6 7 6 6 5 6 15
10.000µl Pipeta vol. “A” Pipeta grad. Transferpette S Transferpette Transferpettor HandyStep electronic PD-
(10ml) 10ml “A” 10ml 1.000-10.000µl electronic 2.000-10.000µl tip :
10ml 50ml
E≤±% 0,3 0,2 0,6 - 0,5 0,5 1,5
E ≤ ± µl 30 20 60 - 50 50 15
9
Exactitud
Según la DIN EN ISO 8655-6:

Vol. 1 2 5 10 20 50 100 200 500 1000 2000 5000 10000
µl
E≤ 5,0 4,0 2,5 1,2 1,0 1,0 0,8 0,8 0,8 0,8 0,8 0,8 0,6
±%
Según BRAND (Transferpette® S):

Vol. 1 2,5 10 20 50 100 200 1000 2000 5000 10000
µl
E≤ 2,0 1,4 1,0 0,8 0,8 0,6 0,6 0,6 0,6 0,6 0,6
±%
* Los límites de error se aplican a instrumentos nuevos bajo condiciones ideales de

ensayo (procedimiento correcto, técnico capacitado y ambiente controlado. Típicamente
los valores se reducen a la mitad de la norma.
10
Exactitud
Pero…
Los límites de error que figuran en la norma y en las especificaciones del

fabricante se refieren al valor nominal.
Ejemplos:
Transferpette® S 100µl Transferpette® S 10.000µl
Vol. µl E≤±% E≤± Vol. µl E≤±% E≤±

µl µl
100 0,6 0,6 10.000 0,6 60
50 0,8 0,4 5.000 0,8 40
10 3 0,3 1.000 3 30
11
Condiciones
Condiciones ideales:
- Temperatura (ambiente y líquido) en equilibrio

- Pipeta y accesorios por lo menos 2 horas en la sala de control
- Humedad relativa entre 40% y 60%
- Ausencia de corrientes de aire o variaciones de temperatura
- Acondicionar la punta aspirando y expulsando el líquido 5 veces
- Sumergir la punta en la profundidad apropiada
- Accionamiento del mando de pipeteado de manera lenta y uniforme
- Dejar la punta de la pipeta aprox. 1 seg (3 seg. para 5ml y 10ml) en el
líquido de control
- Escurrir la punta de la pipeta por la pared del recipiente a lo largo de aprox.
10mm
12
Condiciones
Factores que influyen la calidad del pipeteado:
- Temperatura: Pipeta, punta y líquido en equilibrio

- Humedad: Ambiente seco favorece la evaporación
- Presión del aire: Importante para la calibración o grandes altitudes
- Personalidad y experiencia del usuario
- Ergonomía: LER (Lesión por Esfuerzo Repetitivo)
- Calidad de la pipeta y características específicas (ej.: aislamiento
térmico)
- Compatibilidad de la punta
- Condiciones de limpieza y mantenimiento
- Monitoreo
13
Temperatura
Volumen (µl)
1030
1015
1000 Pipeta a 10°C

Pipeta a 20°C
985
970
10 15 20 25
Temp. ambiente °C
*** Ejemplo ilustrativo para

pipetas de diversas marcas
14
Experiencia
Pipeta manual Pipeta electrónica

Imprecisión % Imprecisión %
3 3
2.3 2.25
1.5 1.5
0.8 0.75
0 0
1000 500 200 100 10 1000 500 200 100 10
Volumen (µl) Volumen (µl)
Usuarios principiantes
Experiencia moderada
Usuarios experimentados *** Ejemplo ilustrativo para
15
Angulo de pipeteo
Volumen (µl)
1004
1002
1000 Pipeteo a 45°

Pipeteo vertical
998
996
1 2 3 4
Pruebas

16
Pre-enjuague
Volumen (µl)
100.2
99.96
99.72
99.48
99.24
99
0 3 5 8 10
Nr. pre-enjuagues
- Una diferencia de 5% de humedad implica un error de 0,35µl (pipeta 1000µl)

- Trabajar bajo condiciones de humedad 40 - 60%
17
Presión atmosférica
Overview pressure dependence of accuracy air interface pipette
Location Altitude Air pressure 10 ml 1000µl 100µl 20µl yellow 20µl crystal
[m] [hPa] Tolerance [%] nominal volume
0.6 0.6 0.6 0.8 0.8

Accuracy [%] nominal volume
Chupiquinamine (Chile) 5600 498 -2.4 -1.4 -1.2 -2.3 -3.1
Wentschuan (Tibet, China), La Riconada (Peru) 5100 533 -2.1 -1.2 -1.0 -2.0 -2.7
Lhasa, La Paz 3700 641 -1.3 -0.8 -0.6 -1.3 -1.7
Jungfraujoch (CH) 3500 658 -1.2 -0.7 -0.6 -1.2 -1.6
Bogotà 2600 738 -0.9 -0.5 -0.4 -0.8 -1.1
Los Alamos Nat. Lab. 2500 747 -0.8 -0.5 -0.4 -0.8 -1.1
Addis Abeba 2400 756 -0.8 -0.4 -0.4 -0.8 -1.0
Mexico City, Sanaa 2300 766 -0.7 -0.4 -0.4 -0.7 -1.0
Samedan (CH), Johannesburg 1700 825 -0.5 -0.3 -0.3 -0.5 -0.7
Teheran 1200 877 -0.4 -0.2 -0.2 -0.3 -0.5
Munich 518 953 -0.15 -0.08 -0.07 -0.14 -0.19
Hamburg 0 1013 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00

En Bokek (Israel) -390 1061 0.10 0.06 0.05 0.10 0.13
18
Puntas
Compatibilidad de las puntas:
La compatibilidad depende de la calidad del material, dimensiones

y proceso de fabricación.
• Las puntas disponibles en el mercado no son 100%

compatibles con todas las pipetas.
• Puntas incompatibles resultan en errores de volumen.
• Puntas incompatibles dañan los conos de acoplamiento.
19
Manejo
1) Acoplar la punta:
Utilizar la punta apropiada, de acuerdo con el rango de
volumen y el código de color. Verificar que el asiento de la
punta sea hermético y esté bien firme.
2) Ajuste de volumen:
Desplazar hacia arriba el protector contra cambio de volumen
(UNLOCK).
Para fijar el volumen requerido, girar el selector de volumen.
Haga el giro de forma uniforme y evite movimientos bruscos.
Desplazar hacia abajo el protector contra cambio de volumen
(LOCK). El selector de volumen girará con mucha dificultad,
pero no se bloqueará totalmente.
20
Manejo
3) Aspirar la muestra:
Oprimir el mando de pipeteado hasta el primer tope.
Mantenga el aparato en posición vertical y sumerja la
punta en el líquido.
Gamma Profundidad Tiempo de
de ajuste (mm) espera (seg)
Soltar lentamente el pulsador de pipeteado.

Para que el líquido alcance su posición final, dejar la
punta sumergida durante algunos segundos más.
21
Manejo
4) Expulsar la muestra:
Apoyar la punta de la pipeta en la pared del recipiente.

Sostener la pipeta contra la pared del recipiente
en un ángulo de 30-45°.
Apretar el pulsador de pipeteado hasta el primer
tope y mantenerlo así. Con sueros, líquidos de alta viscosidad o
humectantes seleccionar tiempo de espera adecuado para mejorar la
exactitud.
Apretar hasta el segundo tope para vaciar completamente la punta.
Al hacerlo, escurrir la punta de la pipeta contra la pared del recipiente.
Retirar la punta de la pipeta de la pared del recipiente y dejar retroceder
el pulsador.
Expulsar la punta
22
Manejo
Pipeteado Inverso
1) Presionar el botón de pipeteado hasta el segundo tope.

Sumergir la punta 2-3 mm en el líquido. Aspirar el líquido
soltando el boton. Se aspira un volumen mayor al mostrado
en el indicador de volumen
2) Presionar el botón hasta el primer tope. Queda líquido en la
punta.
Se recomienda su uso para: soluciones viscosas, soluciones con

una elevada presión de vapor o medios espumosos.
23
Manejo – pipeta electronica
Pipetear (Modo PIP) 

El programa estándar. Se aspira un volumen ajustado
previamente y se vuelve a soltar.
Mezclar muestras (Modo PIPmix) 
Programa para mezclar líquidos.
Una muestra se aspira y expulsa repetidamente y aparece en
el display el número de ciclos.
Pipeteado Inverso (Modo revPIP) 
Programa especial para pipetear líquidos de gran viscosidad, alta
presión de vapor o medios espumosos..
Pipetear en electroforesis (Modo GEL)* 
Programa para cargar geles en electroforesis**.
Un volumen de muestra se aspira a una velocidad (modificable) y se
vuelve a dosificar muy lentamente. La cantidad exacta de líquido
soltada se muestra, para su documentación, en la pantalla.
Dosificar (Modo DISP) 
Programa para dosificar líquidos. Un volumen aspirado se vuelve a
soltar parcialmente en pasos.
24
Mantenimiento y limpieza
Mantenimiento
Compruebe que el cono de acoplamiento
de puntas de pipetas no está dañado.
Compruebe también que el émbolo y la
junta estén limpios.
Compruebe la hermeticidad del aparato.
Recomendamos usar el aparato
verificador de hermeticidad de BRAND PLT unit.
Realizar limpiezas periódicas.

El desmontaje del vástago (vástago / émbolo /
sellos / cono) no descalibra la pipeta.
25
Desmontaje y limpieza
1. Desenrosque el vástago de la pipeta (S) de la empuñadura.

2. Destornille la parte superior de eyección (A) del vástago de la pipeta.
3. Extraiga el vástago (B, C y D) de la parte inferior de eyección (E).
4. Desenrosque la unidad (B) del émbolo.
Indicación: El émbolo debe permanecer dentro de la unidad (B).
5. Saque la junta (C) con el muelle (en las Transferpette® S de 1 µl, 2,5
µl y 10 µl esto no es posible).
6. Limpie las piezas ilustradas con una solución jabonosa o con
isopropanol, y a continuación, aclárelas con agua destilada.
26
7. Seque las piezas (temperatura máx. 120 °C/248 °F).

8. Engrasa ligeramente el émbolo y la junta con la grasa de silicona
suministrado.
9. Vuelva a montar las piezas enfriadas en el orden inverso al desmontaje.
Apriete la unidad de émbolo y la pieza superior de eyección (A, B)
sólo con las manos.
Autoclavado
La Transferpette® S es completamente autoclavable a 121 °C (250 °F),
2 bar y con un tiempo mínimo 15 minutos según DIN EN 285.
1. Expulsar la punta de la pipeta.

2. Sin desmontarlo adicionalmente, autoclavar la pipeta completo
3. Dejar que la Transferpette® S se enfríe y seque completamente.
27
28
Control y monitoreo
29
Técnica Easy Calibration
1. Realizar el control de volumen, determinar el valor real.

2. Quitar la ventana de escritura y la etiqueta: empujar el gancho hacia
adelante, elevarlo ligeramente y después tirar hacia atrás.
3. Quitar la lámina de protección con un clip o con una punta de pipeta no
utilizada (la lámina de protección no es más necesaria).
4. Desplazar la corredera roja de ajuste completamente hacia atrás,
levantar el anillo de ajuste (desacople) y soltar la corredera de ajuste.
5. Regular el valor de ajuste:
– Transferpette®S, tipo Variable: estando en la posición UNLOCK
(desbloquear), regule el valor real determinado con anterioridad mediante
el anillo de ajuste de volumen.
– Transferpette®S, tipo Fix: regular el volumen girando sentido +/-.
Se recomienda un control de volumen después de cada ajuste.
6. Desplazar la corredera de ajuste completamente hacia atrás, presionar
el anillo de ajuste de volumen hacia abajo y soltar la corredera.
30
Control y monitoreo
Siga las instrucciones de la SOP (POP) Instrucciones de

Calibrado en www.brand.de (downloads).
Las instrucciones de la SOP cumplen las disposiciones de
la norma DIN EN ISO 8655
Opcionalmente:
Enviar la pipeta para mantenimiento y calibración en los
servicios técnicos.
La limpieza de la pipeta no implica la necesidad de una
nueva calibración.
31
Control y monitoreo
Certificado de análisis: Criterio de aceptación
Ejemplo :
Volumen nominal 100µl
Tol. (Fabr.) ≤ ± 1,0 µl
1. La tolerancia especificada por el fabricante se refiere exclusivamente al error encontrado en la

calibración. La incertidumbre es parte del proceso de calibración, no de fabricación. Es variable
e individual de cada laboratorio.
2. No se puede tomar como referencia el error + incertidumbre para comparar con la tolerancia del
fabricante.
3. El usuario debe establecer sus propios limites de uso (fabricante / norma + margen).
32
Control y monitoreo
Pero...
Cada certificado representa el resultado de una calibración en un
momento específico.
33
Control y monitoreo
Sabía usted que…
• La mayoría de las pipetas, sin importar el fabricante, fallan con el

tiempo
• Aprox. 95% de las fallas están relacionadas con el sistema de pipeteo,
dando como resultado volumenes aspirados erroneos
• Ajustar la pipeta no resuelve el problema
• Las fallas ocurren entre calibración y calibración
34
Control y monitoreo
Fallas típicas de las pipetas de cojín de aire
35
PLT Unit BRAND
PLT - Pipette Leak Testing unit.
La causa más frecuente de imprecisiones en las

pipetas con cojín de aire son las fugas.
Éstas se producen por daños en las juntas, en los

émbolos o en los conos de acoplamiento de puntas.
Generalmente no son detectables visualmente, y

provocan importantes errores de volumen.
La PLT unit de BRAND, el aparato verificador de

estanqueidad de pipetas con cojín de aire, detecta
las fugas más pequeñas en pocos segundos.
36
PLT Unit BRAND
PLT - Pipette Leak Testing unit.
• Los valores límite para pipetas monocanal y

multicanal en el rango de volumen de 1 µl a 10
ml ya están establecidos
• Verificación con y sin punta
• Resultado de la verificación en pocos
segundos
• Patente solicitada
37
PLT Unit BRAND
¿Qué laboratorio tiene que efectuar el control de medios de análisis?

• En cada laboratorio analítico debe de ser evidente la precisión de los medios de
análisis utilizados.
• Todos los laboratorios que trabajan según BPL, están acreditados según ISO/IEC
17025 o certificados según ISO 9000.
¿ Qué tan frecuentemente verificamos los instrumentos de medición?
• Los instrumentos de medición deben ser verificados en intervalos de tiempo regulares.
• BRAND recomienda entre 3 y 12 meses para pipetas e instrumentos LH. 
La frecuencia depende según la ISO 10012 del tiempo y de la intensidad de uso.
• La periodicidad debe de adaptarse a las exigencias individuales.
• Según las BPL: La frecuencia para la calibración, revalidación y prueba, depende del
instrumento en sí, de las recomendaciones de los fabricantes , de la experiencia del
laboratorio y de la frecuencia de uso del aparato.
38
Calibrado
SOP’s calibrado
www.brand.de
(downloads / Standard Operation Procedures)
39
Resumen – Calidad en Pipeteo
y Buenas Prácticas
Utilice pipetas BRAND Realice las Verifique los Realice las Utilice puntas
calibraciones instrumentos limpiezas y BRAND
Ligeras, robustas,
mantenimientos
exactas y fiables. La inicial (antes de la De acuerdo a las Descarte después
utilización de materiales utilización) y recomendaciones del Solamente de utilizarlas.
nuevos e innovadores periódicas. fabricante y exigencias instrumentos limpios Puntas nuevas y
resultan en pipeteados Mantenga la individuales. La Unidad presentan resultados de alta calidad
precisos y cómodos por documentación PLT asegura los períodos dentro de las aseguran una
mucho más tiempo actualizada entre las calibraciones tolerancias unión perfecta y la
mediante el control diario. precisión exigida
40
Informaciones
Informaciones para los usuarios
Catálogo GK900 Folletos de los SOP – Instrucciones de Application notes

productos calibrado
www.brand.de
Información sobre la Download certificados Certificaciones BRAND
Medición del volumen
41
Thank you for your attention!
Danke fuer ihre aufmerksamkeit!
Gracias por su atención!
Obrigado pela atenção!
Juliana Navarro
BRAND GMBH + CO KG
Gerente Regional de Ventas

Carrera 19 nº 90-67
Bogotá- Colombia
M: +57 3203447022
T : +57 1 6222607 
juliana.navarro@brand.de
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Pipetas Desplazamiento - PLT Unit

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- Tipos de pipetas - Puntas: Compatibilidad

Transferpettor® HandyStep® HandyStep® S

Pipeta monocanal Pipeta electrónica Pipetas de despla- Dispensador manual y

Cojín de aire Desplazamiento directo

No hay contacto directo del émbolo con el

El émbolo tiene contacto directo con el

Principio Pros Contras

Desplazamiento Adecuado para pipetear Quitar o sustituir la punta

Pipetas con cojín de aire

- Soluciones acuosas, ácidas, alcalinas y

- Ampliamente utilizadas en las áreas: química,

Pipetas de desplazamiento directo

- Ideales para medios críticos y suspensiones

* La punta no necesita ser descartada dado

Dosificadores manuales (desplazamiento

- Ideales para la dosificación en alícuotas y en

• Las puntas no se pueden esterilizar en

E≤±% 0,6 0,7 0,6 0,6 0,5 0,6 1,5

E≤±% 0,3 0,2 0,6 - 0,5 0,5 1,5

Según la DIN EN ISO 8655-6:

Según BRAND (Transferpette® S):

* Los límites de error se aplican a instrumentos nuevos bajo condiciones ideales de

Los límites de error que figuran en la norma y en las especificaciones del

Transferpette® S 100µl Transferpette® S 10.000µl

Vol. µl E≤±% E≤± Vol. µl E≤±% E≤±

50 0,8 0,4 5.000 0,8 40

- Temperatura (ambiente y líquido) en equilibrio

Factores que influyen la calidad del pipeteado:

- Temperatura: Pipeta, punta y líquido en equilibrio

1000 Pipeta a 10°C

*** Ejemplo ilustrativo para

Pipeta manual Pipeta electrónica

1000 Pipeteo a 45°

*** Ejemplo ilustrativo para

- Una diferencia de 5% de humedad implica un error de 0,35µl (pipeta 1000µl)

Overview pressure dependence of accuracy air interface pipette

0.6 0.6 0.6 0.8 0.8

Chupiquinamine (Chile) 5600 498 -2.4 -1.4 -1.2 -2.3 -3.1

Hamburg 0 1013 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00

Compatibilidad de las puntas:

La compatibilidad depende de la calidad del material, dimensiones

• Las puntas disponibles en el mercado no son 100%

Soltar lentamente el pulsador de pipeteado.

Apoyar la punta de la pipeta en la pared del recipiente.

1) Presionar el botón de pipeteado hasta el segundo tope.

Se recomienda su uso para: soluciones viscosas, soluciones con

Pipetear (Modo PIP)

Realizar limpiezas periódicas.

1. Desenrosque el vástago de la pipeta (S) de la empuñadura.

7. Seque las piezas (temperatura máx. 120 °C/248 °F).

1. Expulsar la punta de la pipeta.

1. Realizar el control de volumen, determinar el valor real.

Siga las instrucciones de la SOP (POP) Instrucciones de

Certificado de análisis: Criterio de aceptación

1. La tolerancia especificada por el fabricante se refiere exclusivamente al error encontrado en la

Sabía usted que…

• La mayoría de las pipetas, sin importar el fabricante, fallan con el

Fallas típicas de las pipetas de cojín de aire

PLT - Pipette Leak Testing unit.

La causa más frecuente de imprecisiones en las

Pipetear (Modo PIP) 