UNIVERSIDAD DE CÓRDOBA

FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD

PROGRAMA DE BACTERIOLOGÍA

Código: 504130
Horas semanales: 3
Componente: Practico
Ubicación: III semestre
Número de créditos: 4
Requisitos: R504112 – R504114
Docentes: Cindy Rodiño y María Fernanda Yasnot .

PRACTICA N° 4

AGLUTINACIÓN: ANTIGENOS FEBRILES

1. FUNDAMENTO TEORICO

Para establecer el agente causal de una enfermedad infecciosa, el mejor método es el

aislamiento, cultivo e identificación del microorganismo a partir de diferentes muestras. Existen dos
métodos diagnósticos: directo e indirecto.

El método directo puede presentar dificultad cuando el número de microorganismos es pequeño o

cuando no se cumplen los requisitos mínimos para la realización del cultivo, también se hace difícil
en pacientes que acuden al médico con la infección en curso o bajo antibiotícoterapia, la cual
suprime parcialmente el agente invasor. El diagnóstico indirecto se hace determinando el titulo de
anticuerpos en el suero del paciente fundamentándose en la respuesta inmunitaria, ya que todo
agenta nocivo que penetra el organismo, estimula la acción del sistema inmune desarrollando una
considerable cantidad de anticuerpos alrededor de 7-15 días los cuales pueden ser titulados in vitro
sí se colocan frente a su antígeno especifico.

Para un diagnóstico seguro es indispensable realizar dos determinaciones, para conocer las
variaciones en el titulo de anticuerpos y establecer si se trata de una infección en fase aguda, en
etapa de recuperación o de una infección del pasado. Por tanto es necesario conocer la estructura
antigénica del microorganismo y el valor de referencia normal.

Estas reacciones se basan en el hecho de que cuando el organismo humano es invadido por
agentes infecciosos, responde produciendo anticuerpos aglutinantes contra ellos los cuales se
ponen de manifiesto al entrar en contacto el anticuerpo con el anticuerpo específico. El título del
anticuerpo depende del tipo y curso de la enfermedad. Para que los resultados tengan un valor
diagnóstico el título de ellos debe aumentar.

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2. NECESIDAD

 Reconocer las reacciones de aglutinación como una herramienta para visualizar una reacción
antígeno – anticuerpo, utilizando como modelo los antígenos febriles.
 Manejar el procedimiento para realizar una prueba de aglutinación y su visualización.

3. OBJETO DE ESTUDIO

Aglutinación: Antígenos febriles

4. OBJETIVO DE LA PRÁCTICA

4.1 Identificar cada uno de los antígenos utilizados en la prueba de antígenos febriles y los
respectivos anticuerpos.
4.2 Realizar correctamente la determinación de antígenos febriles.
4.3 Interpretar los resultados obtenidos en dicha práctica.
4.4 Aplicar las normas generales de bioseguridad y el manejo adecuado de los materiales
utilizados en ésta práctica.
4.5 Demostrar disponibilidad de trabajo e interés por el tema a desarrollar en la práctica de
laboratorio.

5. COMPETENCIAS

5.1 Aplica las normas de bioseguridad dentro del laboratorio.

5.2 Conoce el fundamento de las pruebas de aglutinación

5.3 Realiza de forma adecuada el manejo de material, equipos, y procesamiento de muestra para
la realización de la prueba de hemoaglutinación..

5.4 Interpreta de forma correcta la presencia o ausencia de aglutinación.

6. PRELABORATORIO

6.1 ¿Qué y cuáles son los antígenos febriles?

6.2 ¿Qué otro nombre recibe la prueba para determinación de antígenos febriles?
6.3 ¿Qué entiende usted por titulo de anticuerpos?
6.4 ¿Qué títulos de Ac tienen importancia clínica en cada uno de los casos de Ag febriles?

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7. MATERIALES Y REACTIVOS

Muestra: suero fresco libre de hemolisis, turbidez, lipemia y contaminación bacteriana.

Placa de vidrio para reacción de aglutinación.

Gradilla.

Marcador de vidrio o lápiz de cera.

Cinta para enmascarar.

Pipetas.

Papel absorbente.

Palillos.

Bata

Guantes

Reactivos:

Solución salina al 0.85%

Antígenos estandarizados:

 Tífico O: Es una suspensión de Salmonella Typhi (inactivas o muertas), del grupo

serológico D, que contienen el antígeno somático O.
Contiene 200 U.I opalescencia por ml

Formalina al 0.5 % v/v como preservativo.

 Tífico H: Es una suspensión de Salmonella Typhi (inactivas o muertas), del grupo

serológico D, que contienen el antígeno somático H.
Contiene 200 U.I opalescencia por ml

Formalina al 0.5 % v/v como preservativo.

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 Paratífico A: Es una suspensión de Salmonella Paratífica A (muertas),del grupo A, que

contienen el antígeno flagelar.
Contiene 200 U.I de opalescencia por ml.

Formalina al 0.5% como preservativo.

 Paratífico B: Es una suspensión de Salmonella Paratífica B (muertas) del grupo B, que

contienen el antígeno flagelar H.
Contiene 200U.I de opalescencia por ml.

Formalina al 0.5% como preservativo.

 Proteus OX-19: Es una suspensión de Proteus (muertas) que contienen antígeno

somático O.
Contiene 200U.I de opalescencia por ml.

Formalina al 0.5% como preservativo.

 Brucella Abortus: Es una suspensión de Brucella Abortus (muertas) que contienen 200U.I
de opalescencia por ml.
Fenol al 0.5% como preservativo.

8. PROCEDIMIENTO

Realizar el procedimiento de acuerdo con las indicaciones del kit comercial.

9. POSTLABORATORIO

9.1 ¿Qué importancia tiene un resultado negativo en la prueba de Ag febriles?

9.2 Los resultados positivos en la prueba de Ag febriles son diagnósticos? Justifique.

9.3 ¿Por qué en zonas geográficas con elevada prevalencia de enfermedades febriles se
recomienda diluir la muestra ¼ antes de iniciar el ensayo en porta?

9.4 CASO CLINICO: Paciente, de 22 años, varón, soldado, procedente de zona rural del municipio
de Tierralta, que ingresa a la emergencia del Hospital, con una enfermedad de 10 días de
evolución, inicio brusco y curso progresivo, caracterizada por: fiebre alta (39.6°C), escalofríos,
malestar general, cefalea, diaforesis, anorexia, náuseas, vómitos y deposiciones líquidas en regular
cantidad sin moco ni sangre, con pujo y tenesmo, 3 a 4 veces por día. En los antecedentes
personales el paciente manifiesta probable paludismo en Septiembre de 2008, recibió tratamiento
por dos semanas con cloroquina y primaquina. Niega antecedente de fiebre tifoidea, alergias
medicamentosas o haber recibido transfusiones sanguíneas.

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En la orden emitida por el médico se pide realizar prueba de Antígenos febriles para los
cuales se obtuvieron los siguientes resultados:
 Tífico “O” : 1/320
 Tífico “H”: 1/40
 Paratífico “A”: Negativo
 Paratífico “B” : Negativo
 Proteus OX-19 : Negativo
 Brucella abortus: Negativo

Según los anteriores datos responda:

a) Con que enfermedades haría usted un diagnóstico diferencial, teniendo en cuenta los
signos y síntomas que presenta el paciente.
b) Con que pruebas realizaría este diagnostico diferencial.
c) Teniendo en cuenta el titulo de anticuerpos obtenidos usted pensaría que esta frente a una
infección aguda o pasada? Sustente su respuesta.

BIBLIOGRAFÍA

William Rojas M. Inmunología. Medellín, Colombia.Corporación para investigaciones Biológicas

CIB.
Goldsby Richard, Kindt Tomas, Osborne Barbara, Kubt Janis. Inmunología. Mexico. Mc Graw Hill.

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