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2011 2012 Cruces Monohibridos y Dihibrid PDF
2011 2012 Cruces Monohibridos y Dihibrid PDF
2012
INGENIERÍA EN
BIOTECNOLOGÍA
MENESES, M.,
MONTUFAR, S.,
ULLOA, J.
Cruces Monohíbridos y
Dihíbridos de Drosophila
melanogaster
Gregor Mendel reportó en 1865 los métodos básicos de la trasmisión de los caracteres
hereditarios, realizó una serie de experimentos utilizando chicharos, a partir de los
cuales se propuso las leyes fundamentales de la herencia
[Septiembre, 2011-Enero, 2012] Monohibridismo y Dihibridismo
RESUMEN:
Una hembra puede empezar a depositar los cuya función es la de hacer de flotadores
huevos desde el segundo día después de para prevenir el hundimiento del huevo en
emerger, y podrá estar poniendo huevos la superficie semilíquida en que es
durante 10 días aproximadamente, tiempo depositado (Puerta, 1999). Terminado el
tras el cual puede haber depositado desarrollo embrionario emerge del huevo
alrededor de 400- 500 huevos. El huevo una pequeña larva de gran movilidad,
depositado es de forma ovoide, cubierto por blanca, segmentada, con unas piezas negras
una fuerte membrana quitinosa, “corion”, en su región anterior, que son las
con la cara dorsal más aplastada que la mandíbulas. En las regiones anterior y
ventral, que es redondeada. La superficie posterior tiene un par de espiráculos de
del corion presenta unas marcas o relieves función traqueal (Puerta, 1999). La larva
hexagonales. El huevo tiene un tamaño sufre dos mudas hasta alcanzar el tamaño
aproximado de 0,5 mm. De su parte anterior del adulto; cada periodo entre mudas se
se proyectan dos palas, a modo de remos, denomina “estadio larvario”. El cambio se
[Septiembre, 2011-Enero, 2012] Monohibridismo y Dihibridismo
produce cuando se rasga la piel del anterior considerar también como el cuarto estadio
estadio y sale una larva un poco mayor. El larvario, que termina en una muda y
primer estadio larvario es el periodo posterior eclosión del imago. A partir de
comprendido entre la eclosión y la primera entonces comienza el periodo de “pupa” o
muda; el segundo estadio larvario “crisálida”, en el que se producen cambios
comprende el periodo entre las mudas histolíticos para dar lugar a los tejidos del
primera y segunda, y el tercer estadio adulto. Las estructuras que surgen van
larvario transcurre desde la segunda muda tomando la forma y el color del adulto
hasta la inmovilización de la larva para dar según va avanzando el estado de pupa
lugar a la pupa; en este estadio larvario la (Puerta, 1999).
larva llega a alcanzar una longitud de 4.5 Si el medio en el que se desarrolla el animal
mm o incluso mayor, dependiendo de la está a 25ºC entonces, entre el cuarto y
cantidad de alimento y la temperatura de quinto día de la vida pupal se rasga el
desarrollo larvario (Puerta, 1999). puparium y surge el individuo adulto. La
La larva en el tercer estadio cambia sus Drosophila recién emergida es de color
espiráculos por las antenas pupales, y un claro y tiene la pigmentación normal del
poco después se va inmovilizando y adulto. La longevidad del adulto puede
acortando su longitud, la cutícula se alcanzar un mes o más. Los machos suelen
oscurece y fortalece formando el vivir menos tiempo que las hembras
“puparium”. A esta prepupa se le puede (Puerta, 1999).
LEYES DE MENDEL característica a estudiar no está ligada al
sexo (Puerta, 1999).
Cuando Mendel realizó los cruces de
guisantes notó que una sola característica es La primera generación filial (F1) de plantas
regulada por dos "elementos" y que cada que presentaba semillas lisas se auto-
progenitor aporta una de ellas en la polinizó y generó una segunda generación
reproducción sexual. Si los dos elementos o filial (F2). En esta generación, se observan
genes son distintos, uno debe ser plantas que producen semillas lisas y
Dominante y el otro Recesivo (Puerta, rugosas (Puerta, 1999).
1999).
Mendel encontró que 5474 semillas eran
Los estudios de Mendel se basaron en lisas y 1850 semillas eran rugosas. La
cruces entre cepas puras de arvejas que sólo proporción calculada fué 2,96 : 1 lo cual es
diferían en una característica. Tales cruces muy cercano a una proporción de 3 : 1
se conocen como cruces monohíbridos (Puerta, 1999).
(Puerta, 1999).
La primera ley expresa que mediante La Los resultados de los cruces dihíbridos si
meiosis los dos alelos que forman un gen se los consideramos teóricamente como dos
segregan y cada uno va a un gameto. Este cruces monohíbridos conducidos
principio se cumple en los cruces separadamente. Piensa que los dos
monohíbridos que equivalen al análisis de conjuntos de características están siendo
la herencia de una sola característica heredados independientemente, la
(Miller, 2006). posibilidad de cualquier planta de tener
semillas amarillas o verdes no está
Una extensión natural de los cruces influenciada por la posibilidad de que esta
monohíbridos para Mendel fue diseñar tenga semillas lisas o arrugadas. Es por eso
experimentos donde dos caracteres eran que los cruces dihibridos revelaron el
examinados simultáneamente, es decir, principio de segregación independiente
cruces donde se involucran dos pares de (Plomin, 2002).
características llamados cruces dihíbridos
(Plomin, 2002). Debido a que el amarillo es dominante
sobre el verde todas las plantas F1 en el
Si una planta de arveja posee semillas primer cruce teórico deberían poseer
amarillas y lisas y se cruza una planta que semillas amarillas. En el segundo cruce
posee semillas verdes y rugosas, la teórico todas las plantas deberían poseer
generación F1 poseerá solo semillas semillas lisas ya que el liso es dominante
amarillas y lisas. (Plomin, 2002). sobre el rugoso. Cuando Mendel examinó
las plantas F1 de los cruces dihíbridos todos
las semillas eran amarillas y lisas como lo
predicho (Plomin, 2002).
expresarse fenotípicamente tres veces más F2 se expresan los fenotipos de los gametos
que el ébano, su recesivo. Genotípicamente antes mencionados en la proporción 9:3:3:1.
de las tres partes de moscas color ocre una
SOTWARE
es homocigota dominante y dos son
heterocigoto mientras que las moscas color Existe una base bioinformática denominada
ébano son todas homocigotas recesivas. Drosophila Genetics Lab, Version 6,27
(bajado de www.newbyte.com); el cual es
El cruce dihíbrido involucra otra
un software muy versátil, que permite
característica además del color del cuerpo,
simular la cría de moscas de D.
en este caso es el tamaño de las alas, que
melanogaster y realizar diferentes cruces
dará como resultado la expresión de todas
con las distintas cepas de esta mosca.
las combinaciones posibles en diferentes
Ayuda a fomentar el desarrollo de
proporciones. Se aplica la segunda ley de
habilidades de pensamiento crítico y
Mendel ya que los alelos de diferentes
resolución de problemas, de igual forma
genes se distribuyen independientemente en
aporta con interacciones que pueden
los gametos de acuerdo a Garner, Simmons
reforzar el conocimiento sobre la genética
& Snustad (2003), es decir los alelos del
mendeliana
color del cuerpo en el cromosoma 3 pueden
combinarse independientemente con los
alelos del tamaño del ala, que se ubican en
el cromosoma 2 según Ramos et al (1993).
Para F1 se combinan hembras ebony
vírgenes: color del cuerpo ébano y tamaño
de ala normal, con machos vestigial: cuerpo
ocre y ala reducida a vestigio; ambas líneas
homocigotas para las dos características. MATERIALES Y MÉTODOS
Los descendientes presentan un fenotipo
Se purificaron las cepas de Ebony, Oregon
ocre con alas normales pues expresan los
y Vestigial realizando autocruce de las
alelos dominantes de su genotipo
mismas, una vez que las larvas aparecieron
heterocigoto. Los gametos que producen
hembras y machos de F1 son las se procedió a retirar a los progenitores.
combinaciones de los alelos de cada A partir de las líneas puras de cada cepa se
característica: cuerpo ocre con ala normal, obtuvieron hembras y machos.
cuerpo ocre con ala vestigial, cuerpo ébano
Se colocó en dos frascos con medio de
con ala normal y cuerpo ébano con ala
cultivo 25 hembras vírgenes Ebony con 25
vestigial. Al autocruzar F1 para obtener la
machos de tipo silvestre Oregon en cada
Monohibridismo y Dihibridismo Septiembre, 2011– Enero 2012
CRUCE MONOHÍBRIDO
Con ayuda del estereomicroscopio o con una lupa se pudo observar las características
morfológicas que distinguen la cepa silvestre (oregón) de las mutante (ebony) figura 1.
Guiándonos con las características morfológicas entre machos y hembras ya mencionadas, se
obtuvieron moscas hembras vírgenes de ebony y moscas machos oregón como se indica en la
figura 2.
A B
C D
Figura 2. Diferencias morfologicas vistas desde un estereomicroscopio de las dos cepas utilizadas para
[Septiembre, 2011-Enero, 2012] Monohibridismo y Dihibridismo
el cruce monohibrido, comparadas con fotografias mas claras de moscas sacadas del programa
Drosophila Genetics Lab, Version 6,2. A y C. mosca de cuerpo de color ébano característico de la cepa
ebony, (A hembra y C macho). B y D. mosca de cuerpo de color ocre característico de la cepa silvestre
oregón (B macho y D hembra).
CÁLCULOS Y RESULTADOS
Cruza progenitores
Genotipo ee x e+ e+
Gametos e x e+
F1
Genotipo e+ e
F1: Toda la progenie expreso el fenotipo correspondiente a su genotipo: moscas cuerpo de color ocre (Oregón)
Figura 5. Cálculos y resultados teóricos con respecto al cruce monohíbrido, obteniendo una
proporción de 3:1
[Septiembre, 2011-Enero, 2012] Monohibridismo y Dihibridismo
Con ayuda del software Drosophila Genetics Lab, Version 6,2. Se logró obtener los
resultados esperados para este cruce, y con estos resultados se realizo la prueba de Chi
cuadrado
Prueba de X2
eb+eb+
77 75 0.053
eb+eb
ebeb 23 25 0.16
CRUCE DIHIBRIDO
A B
C D
Figura 3. Diferencias morfologicas vistas desde un estereomicroscopio de las dos cepas utilizadas para el cruce
dihibrido, comparadas con fotografias mas claras de moscas sacadas del programa Drosophila Genetics Lab, Version
6,2. A y C. mosca de cuerpo de color ébano y alas normales característico de la cepa ebony, (A hembra y C macho).
B y D. mosca de cuerpo de color ocre y alas atrofiadas característico de la cepa vestigial (B macho y D hembra).
Figura 4. Obtención de moscas para el Cruce Dihíbrido: a la izquierda se muestra una mosca
ebony hembra, en el medio se muestra una mosca vestigial macho, en la derecha se muestra un
medio de cultivo en donde se encuentran las dos cepas para el respectivo cruce.
CÁLCULOS Y RESULTADOS
Cruza progenitores
Gametos e v+ X e+ v
F1
Genotipo e e+ v+ v
F1: Toda la progenie expresó el fenotipo: moscas cuerpo color ocre y alas normales
(Oregón), con un genotipo heterocigoto para ambas características
Figura 6. Cálculos y Resultados teóricos con respecto al cruce dihíbrido, obteniendo una
proporción de 9:3:3:1
Con ayuda del software Drosophila Genetics Lab, Version 6,2. Se logró obtener los
resultados esperados en este cruce, y con estos resultados se realizó la prueba de Chi
cuadrado
[Septiembre, 2011-Enero, 2012] Monohibridismo y Dihibridismo
Prueba de X2
BIBLIOGRAFÍA
1. ANEXOS
Cruce monohíbrido
Cruce Dihibrido