PRÁCTICA NO.

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CAMBIOS EN LA CONCENTRACIÓN DE GLUCÓGENO EN DISTINTOS ÓRGANOS
Gabriela Morataya1 (200722745), Jossy Aguirre1 (200922871), Yeriel Estrada1 (201315422), María Alejandra
Leiva1 (201322124)
Departamento de Bioquímica, Facultad de Ciencias Químicas y Farmacia, Universidad de San Carlos de
Guatemala, Carrera de Química Farmacéutica

INTRODUCCIÓN

El glucógeno es un polisacárido de reserva energética formado por cadenas ramificadas de glucosa.

Este se puede obtener en ciertos alimentos de origen animal, sin embargo, no constituye una reserva
dentro del cuerpo debido a que a través de enzimas digestivas es degradado a glucosa. El glucógeno
de reserva en el cuerpo es el que se sintetiza mayormente en el hígado o músculo esquelético (Burke,
2009). La síntesis y degradación del glucógeno son reguladas por variaciones hormonales. Cuando la
concentración de glucosa sanguínea se incrementa, la liberación de la hormona insulina también
aumenta, provocando la activación de la glucógeno sintasa (síntesis de glucógeno). En cambio, cuando
las concentraciones de glucosa sanguínea son bajas, se promueve el aumento de la enzima glucagón
en el hígado y la activación de la glucógeno fosforilasa (degradación de glucógeno), además de
estimular la gluconeogénesis; sin embargo, en el músculo quien estimula la degradación de glucógeno
es la adrenalina (Nelson & Cox, 2009). En la presente práctica se tuvo por objetivo evaluar los niveles
de glucógeno en distintos órganos de rata con la finalidad de compararlos. Adicionalmente, se
analizaron casos clínicos en los que la concentración de glucosa plasmática y glucógeno en hígado y
músculo se vio afectada bajo distintas condiciones como la dieta y el ayuno. Asimismo, la importancia
de la práctica fue comprender como la función de los órganos está ligada al consumo y producción de
glucógeno.

METODOLOGÍA por lo que la concentración de glucosa se

cuantificó por espectrofotometría a 630 nm y
Para aislar el glucógeno de distintos órganos se
mediante una curva de calibración de glucosa,
realizó una centrifugación de una solución con
que a la vez permitió determinar la cantidad de
el órgano en KOH para digerir, debido a que es
glucógeno por estequiometría (Vejar, 2005).
una sustancia corrosiva que destruye el tejido.
Con el tejido disuelto, se hizo precipitar el
glucógeno con Na2SO4 y etanol al 95%, debido
a la poca solubilidad con estas sustancias
(Dapaena et al, s.f.). A este se le agregó H2SO4
con el fin de hidrolizar los enlaces glucosídicos
y obtener glucosa libre para determinar su
concentración mediante la detección de sitios
reductores con el método de Somogyi-Nelson,
el cual consiste en la reducción del ion cúprico
a cuproso en medio alcalino que reacciona con
arsenomolibdato, formando un complejo azul;
RESULTADOS Tabla 2. Sitios reductores detectados y
porcentaje de glucógeno en formación
Tabla 1. Curva de calibración de concentración
obtenida de tejidos analizados en laboratorio
de glucosa y sus absorbancias

Concentración Sitios
glucógeno en % de
Absorbancia reductores
Tubo de glucosa Absorbancia tejido (mg de glucógeno / g
a 630 nm Tejido detectados
(mg/mL) a 630 nm glucógeno / de órgano
([glucosa])
Blanco g)
mg/mL
0 0.000
0.0211 %
Hígado 0.026 0.0117 0.211
1 0.075 0.153 7x 10^-3 %
Riñón 0.014 3.9x10^-3 0.070

2 0.0176 %
0.15 0.209
3 0.225 0.354
4 0.3 0.475
Ecuación de la recta Y = 1.5347x +
obtenida a partir de la curva 0.008
de calibración
*mg/ml = concentración en miligramos por mililitros
* nm = nanométros
Fuente: Datos experimentales obtenidos del Laboratorio de
Bioquímica, Edificio T-12, USAC.
En la tabla anterior se muestran las
absorbancias obtenidas a partir de diferentes
concentraciones de glucosa, datos con los
cuales se obtuvo la curva de calibración de la
concentración de glucosa. La ecuación de la
recta resultante se muestra bajo la tabla
obteniéndose un coeficiente de correlación de
0.986193, siendo este valor muy poco
aceptable. La ecuación se empleó para calcular
la concentración de glucosa que se muestra en
la tabla 2.
Corazón 0.023 9.77x10^-3 0.176
8.2^-3 %
Músculo 0.015 4.56x10^-3 0.082
*mg/ml = concentración en miligramos por mililitros
* nm = nanométros
*% = porcentaje.
Fuente: Datos experimentales obtenidos del Laboratorio de
Bioquímica, Edificio T-12, USAC.
En la tabla 2 se muestra la
concentración de glucosa (o sitios reductores
detectados) y la cantidad de glucógeno que se
encontró en cada órgano, en miligramos y en
porcentaje. Obsérvese que los resultados son
muy bajos, esto debido a los bajos valores de
absorbancias obtenidas en el laboratorio.
DISCUSIÓN DE RESULTADOS
La degradación de glucógeno es un
proceso químico relativamente simple, es
llevado a cabo en casi todos los tejidos, pero
principalmente en lugares de almacenamiento
como lo son el hígado y el músculo esquelético,
regulando el nivel de glucosa en sangre
(hígado) y suministrando glucosa para la
actividad muscular vigorosa (músculo) (Devlin,
2004).
En la presente práctica se cuantificaron
y evaluaron los niveles de glucógeno en hígado,
riñón, músculo y corazón en condiciones de
ayuno, por medio de un aislamiento en medio
básico a partir de KOH, debido a que permitió
la destrucción total del tejido, seguido por una
hidrólisis acida, ya que el glucógeno posee una
estructura ramificada con cadenas lineales de
restos consecutivos de glucosa, unidos por
enlaces α (1-4), y por enlaces α (1-6) en los
puntos de ramificación. Por ende la función del
ácido sulfúrico fue romper los enlaces al azar,
de manera de formar todos los posibles
oligosacáridos hasta llegar a la conversión final
de éstos en glucosa (Martínez & Padilla, s.f.).
Según la Tabla 1, se realizó una curva
de calibración de glucosa utilizando diferentes
volúmenes de una concentración conocida de
glucosa y sus diferentes absorbancias. Para lo
cual se observa que, la concentración de
glucosa es directamente proporcional a la
absorbancia, es decir que a medida que
aumenta la absorbancia, hay un aumento en la
concentración de la glucosa.
En la tabla 2 se puede observar las
diferentes concentraciones de glucógeno que
hay en los diferentes órganos y que el órgano
que posee mayor porcentaje de glucógeno es
el hígado, ya que es el tejido con mayor
contenido específico de glucógeno, es
importante mencionar que en el hígado, el
glucógeno sirve como almacén de glucosa para
otros tejidos cuando no está disponible glucosa
en la dieta entre comidas o durante el ayuno
(Nelson y Cox, 2006). A pesar de ello se
consideró que el porcentaje obtenido de
glucógeno en hígado no es lo suficientemente
alto como era de esperarse, lo cual pudo
deberse a una pérdida de la muestra durante el
proceso.
En los demás tejidos experimentados,
se obtuvo un porcentaje de glucógeno bajo a
comparación del hígado (Tabla 2), esto debido
a que, en el músculo debía de tener un
porcentaje de glucógeno similar al de hígado ya
que es uno de los tejidos que mayor
porcentaje de glucógeno posee (por unidad de
tejido). Esencialmente a diferencia del hígado
la glucosa queda atrapada en el músculo, esto
debido a la ausencia de la enzima necesaria
para cambiar su estructura, para con ello poder
atravesar la membrana celular, regenerándose
como respuesta a períodos de consumo de
energía elevados (Nelson y Cox, 2006).
Sin embargo el otro órgano que
presentó mayor porcentaje de glucógeno por
debajo del hígado fue el corazón, del cual se
esperaba una concentración de glucógeno
mínimo al igual que el riñón, este utiliza glucosa
y se encuentra activo en Gluconeogénesis en
caso de ayunas (Williams, 2002).
El porcentaje de glucógeno en riñón
fue más bajo que en el hígado debido a que la
gluconeogénesis tiene lugar casi
exclusivamente en el hígado y solamente el
10% se efectúa en los riñones, es decir, que el
suministro de glucosa no influyó
significativamente en dicho tejido, ya que el
90% del glucógeno es utilizado para la síntesis
de glucosa en hígado (Miján, 2004).
Una de las limitantes de la práctica fue
la cuantificación indirecta del glucógeno, ya
que por el método de Nelson-Somogyi
solamente se cuantifica residuos de glucosa,
por lo que al determinar el porcentaje
aproximado de glucógeno se hace una relación
de residuos glucosa/glucógeno, sabiendo que
este puede variar desde 15 hasta 20,000
residuos de glucosa (Gonzáles y Castellanos,
2003). Así mismo solamente se cuantifica la
glucosa liberada en los tejidos en condiciones
de ayuno, sin poder comparar parámetros de la
glucosa hepática, glucosa liberada y glucógeno
almacenado.
CONCLUSIONES
La hidrólisis ácida de cada uno de los
tejidos permitió que se formaran residuos de
glucosa, así como la administración de la
misma con el fin de cuantificar los sitios
reductores y de manera indirecta conocer la mol/pdfs/23%20HIDR%C3%93LISIS%20GL
presencia de glucógeno en cada uno de ellos. UC%C3%93GENO.pdf

Se determinó que el hígado fue el Miján, A. (2004). Nutrición y metabolismo en

órgano que presentó una mayor concentración trastornos de la conducta alimentaria.
de glucógeno. Barcelona: Glosa.

Nelson, D. y Cox, M. (2009). Lehninger:

Se determinó que en el riñón el Principios de Bioquímica. España:
porcentaje de glucógeno obtenido fue muy Ediciones Omega.
mínimo en comparación con el hígado, corazón
y músculo. Vejar, E. (2005). Prácticas de bioquímica
descriptiva. México: UniSon.
Para la realización de la curva de
calibración de glucosa, se demostró que las
ANEXOS
absorbancias obtenidas fueron directamente
proporcionales a las concentraciones Curva de calibración
conocidas de glucosa.
Y = 1.5347x + 0.008

REFERENCIAS Sitios reductores detectados (Concentración

de glucosa) mg/ ml
Burke, L. (2009). Nutrición en el Deporte.
España: Médica Panamericana. Y – 0.008 = x

1.5347
Dapaena, J., Padilla, C., Martínez, E., Bárcena, J.
y García, C. (s.f). Aislamiento y Y= abs abs = 0.026
cuantificación de glucógeno. Recuperado
0.026 – 0.008 = 0.0117 mg/ ml Glc
de http://www.uco .es/dptos/bioquimica-
biol-mol/pdfs/22%20 AISLAMIENTO%20G 1.5347
LUC%C3%93GENO.pdf
Miligramos de glucógeno/ g de hígado
Devlin, T. M. (2004). Bioquímica. España:
Mg Glc * 1mmol glu* 162.1mg* 20ml = Xmg
Reverté.

Gonzáles, G. y Castellanos, O. (2003). mL 180.1mgGlu 1mmol 1g órgano

Alternativas de modificación del método 0.0117 Glc * 1mmol glu * 162.1mg * 20ml
de Somogyi-Nelson para la determinación
de azúcares reductores a partir de sus mL 180.1mgGlu 1mmol 1g órgano
posibilidades químicas. Revista de
= 0.211 mg de glucógeno / g de órgano
Ingeniería Investigación, 52(1), 5-17.
Porcentaje de glucógeno por gramo de
Martínez, E. & Padilla, C. (s.f.). Hidrólisis ácida
órgano
y enzimática del glucógeno. Recuperado
de: 0.211 mg * 1g = 0.000211 * 100 = 0.0211%
http://www.uco.es/dptos/bioquimica-
biol- 1000 mg