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MICROORGANISMOS INDUSTRIALES
Dr. Pedro F. Mateos
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secados y esterilizados por Las distintas temperaturas que se
calentamiento con aire caliente (no utilizan para la conservación de los
utilizar autoclave y sí calor seco). microorganismos por congelación son:
Sobre estos soportes se añade la
suspensión de los microorganismos y -30˚C: congelador de frigorífico. No se
se deja secar a temperatura ambiente. recomienda debido a la formación de
También se pueden utilizar como eutécticos (suspensión con distintos
soportes discos o tiras de papel, agar , puntos de congelación debido a los
discos de gelatina donde se añade la solutos que pueden dañar a las células).
suspensión de microorganismos y
posteriormente se seca al vacío -70˚C: nieve carbónica (CO2 sólido) o
evitando la congelación, lo que se ultracongeladores. Es el método más
denomina L-secado (L-drying). utilizado en los laboratorios de
microbiología.
Estos métodos de secado son
particularmente útiles para conservar -196˚C: nitrógeno líquido. Se utiliza
microorganismos productores de para la conservación de bacterias, virus
esporas, p.j. actinomicetos. y líneas celulares. Existen varios
problemas prácticos: el nitrógeno se
3.- Congelación evapora continuamente por lo que se
debe rellenar regularmente; se deben
Al bajar la temperatura hasta el punto utilizar recipientes que resistan bien
de congelación o por debajo de éste se estas temperaturas y que estén bien
reduce el metabolismo drásticamente cerrados para evitar la entrada de
hasta el caso de prácticamente anularlo nitrógeno líquido.
con nitrógeno líquido (-196˚C).
4.- Liofilización
Sin embargo, existen una serie de
problemas que debemos tener en Es el método más utilizado por las
cuenta. La formación de cristales de colecciones internacionales de cultivos
hielo pueden romper las células, tipo para la conservación de los
además al eliminar el agua líquida por microorganismos. Básicamente
convertirse en hielo existe una consiste en congelar rápidamente una
concentración de sales que puede ser suspensión de microorganismos y
perjudicial. Para evitar estos problemas eliminar el agua como vapor de agua
se deben utilizar suspensiones que directamente del hielo sin pasar por el
contengan el mínimo de sales posibles estado intermedio líquido. Por lo tanto,
así como utilizar agentes protectores combina las dos técnicas anteriormente
como el glicerol (25%) o citadas ya que es una desecación por
dimetilsulfóxido (DMSO c.a. 10%) sublimación. El sistema requiere tres
que neutralizan el efecto de las sales. componentes: mecanismo de
El realizar el proceso de congelación congelación, bomba de vacío y una
de una forma rápida o gradualmente no trampa de agua.
está claro. Algunos recomiendan una
bajada gradual (1˚C/min) hasta -20˚C Los liófilos se conservan entre 0 y 5˚C
para posteriormente enfriar durante muchos años. Para su
rápidamente. Sin embargo, la recuperación se resuspende el liófilo en
descongelación debe ser rápida. el medio de cultivo adecuado y se
incuban a la temperatura adecuada. No
obstante, hay que estudiar, como en los
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casos anteriores (desecación y conservación durante largos períodos
congelación), las condiciones óptimas de tiempo el nitrógeno líquido.
de supervivencia de nuestro
microorganismo. 4.- Hongos
2.- Bacterias
3.- Virus
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