La replicación comienza en una secuencia de nucleótidos en el ADN
llamada origen de la replicación, oriC o punto de iniciación, que actúa como señal de iniciación. Esta secuencia es distinta según la especie, pero tiene abundante timina (T) yadenina (A). La T y A están unidas por dos puentes de Hidrógeno, en lugar de tres, como la C y la G, por lo que estos enlaces serán más débiles y fáciles de romper.
En la iniciación de la replicación intervienen las siguientes proteínas:
Helicasas. Son enzimas que reconocen la secuencia de nucleótidos
origen de la replicación y rompen los puentes de hidrógeno entre las bases nitrogenadascomplementarias. Se encargan de abrir la doble hélice para que las cadenas puedan servir de molde para las nuevas cadenas. Topoisomerasas. El desenrollamiento de la doble hélice da lugar a tensiones entre las dos cadenas, y las topoisomerasas se encargan de hacer cortes en las cadenas para liberar las tensiones de superenrollamientos. Cortan una (lastopoisomerasas I) o las dos cadenas (las topoisomerasas II o girasa) de ADN, y cuando ya no existen esas tensiones, se empalman nuevamente. Proteínas SSB (del inglés, Single Strand Binding-DNA). Son las proteínas estabilizadoras que se unen a cada cadena de ADN separada por la helicasapara que no vuelvan a unirse.
Una helicasa actúa en cada sentido, por lo que este proceso
es bidireccional. Lasdos horquillas de replicación que se han creado forman las burbujas u ojos de replicación.
Como la ADN-polimerasa necesita tener un cebador al que poder añadir
los nucleótidos, tienen que intervenir primero una ARN-polimerasa que sintetice un pequeño fragmento de unos diez nucleótidos de ARN que sirva como cebador. A esta ARN-polimerasa se le llama primasa, y al fragmento de ARN que sirve como cebador, prímer. Fuente 2
Mediante consumo de ATP en dirección a la horquilla de replicación, es
decir, en dirección 3' → 5' en la hebra rezagada y 5' → 3' en la hebra adelantada, la helicasa actúa rompiendo los puentes de hidrógeno que mantienen unida la doble hélice.3 El siguiente conjunto de proteínas reclutadas son las denominadas proteínas SSBnota 1 encargadas de la estabilización del ADN monocatenario generado por la acción de las helicasas, impidiendo así que el ADN se renaturalice o forme de nuevo la doble hélice, de manera que pueda servir de molde. Estas proteínas se unen de forma cooperativa, por lo que su unión al ADN conforme avanza la helicasa es rápida. Por otro lado, conforme las helicasas van avanzando se van generando superenrollamientos en la doble cadena de ADN por delante de la horquilla y si éstos no fueran eliminados, llegado a un punto el replisoma ya no podría seguir avanzando. Las topoisomerasas son las enzimas encargadas de eliminar los superenrollamientos cortando una o las dos cadenas de ADN y pasándolas a través de la rotura realizada.2
Eucariotas: En organismos eucarióticos, la replicación del ADN se inicia en
múltiples orígenes a la vez (hay uno cada 20 kb aproximadamente), es decir, hay varios replicones.2