Materia: Analiza y fracciona sangre con fines

transfusionales Semestre: 5° LCAM

Profesor: Daniel Morales

Reporte / Trabajo de investigación No. 2

Título: Prueba de Coombs

Tema: Prueba de Coombs indirecta Fecha: 17/11/2015

EVALUACIÓN

CRITERIO VALOR OBSERVACIONES

Organización,
gramática
y
Ortografía.
Aportación al tema en
cuestión.

Calidad y uso de
inteligencias múltiples.

Fuentes bibliográficas.

Trabajo en equipo,
cumplimiento de
instrucciones y
seguridad en el
trabajo.

Calificación final:

Nombre de los alumnos:

Arroyo Saavedra Christian Paola

Moreno Arriaga José de Jesús
Rodríguez Ramírez Dulce Daniela
Vázquez Almanza Daniela Alejandra
 PRACTICA No.2
Prueba de Coombs (Indirecta)

Objetivo:
Demostrar el revestimiento a los eritrocitos por los anticuerpos
incompletos “in vitro” de una muestra de sangre dada.

Introducción:
La prueba de Coombs tiene como objetivo determinar la
sensibilización in vitro de los eritrocitos con moléculas de
anticuerpos no aglutinantes (IgG) y/o fracciones del complemento
(C3d).
Los glóbulos rojos y el suero que contienen los anticuerpos y el
complemento son incubados bajo la acción de un potenciador que en
este caso es albúmina.
Los glóbulos rojos son lavados con la finalidad de eliminar las
inmunoglobulinas y/o complemento no unidos.
Y seguidamente se hacen reaccionar los hematíes con el suero
antiglobulina.
Si los hematíes son aglutinados por el suero antiglobulina humano o
suero de Coombs, podemos decir que han sido sensibilizados in
vitro por anticuerpos IgG y/o por complemento (C3d) como ya
habíamos mencionado.
Esta prueba tiene importancia clínica en el estudio del suero de
mujeres con isoinmunización materno-fetal, es decir, cuando la
mamá es Rh negativa y su feto es Rh positivo y esto ocasiona que
esta madre genere Anticuerpos contra el antígeno D (el positivo).
También es empleada en otro tipo de pruebas como:

 Identificación de auto anticuerpos.

 Pruebas de compatibilidad sanguínea.
 Búsqueda de anticuerpos no aglutinantes contra
microorganismos.
Material Reactivos Equipo
Tubos de ensaye Solución salina Centrifuga
Gradilla Sangre venosa Baño María
Suero problema
Albumina
Suero de Coombs

Procedimiento:

1. Enumeramos los tubos del 1-5.

2. En todos los tubos se coloca 0.1 ml de solución salina.

3. En los tubos 1 y 2 se colocan 0.1 ml del suero problema.
4. Del tubo 2 se toma 0.1 ml y se pasa al tubo 3, se mezcla y se
pasa o.1 ml al 4 y así sucesivamente.
5. Agregamos a cada uno de los tubos 0.1 ml de la suspensión
al 5% de glóbulos rojos (O Rh+)

.
6. Incubar a 37º durante 15 minutos tubo 1 y 5.
7. Centrifugar por 30 segundos a 3000rpm.
8. Observar aglutinación macroscópica, removiendo los G.R
sedimentados.
En caso de no existir aglutinación, se procede:

9. Centrifugar por 3 minutos a 3000rpm, decantar y quitar

sobrenadante.
10.Agregar 1 gota de albumina.
11. Incubar 15 minutos.
12.Centrifugar por 30 segundos a 3000rpm.

13.Observar aglutinación.
14.Lavar 3 veces.
15.Agregar 1 gota de suero de Coombs.
16.Incubar 30 minutos.
17.Centrifugar 30 segundos a 3000rpm.
18.Observar
NOTA:
La sangre y el suero
problema lo
obtuvimos del
equipo anterior por
falta de tiempo.
 VALORES NORMALES:
Resultado: NEGATIVO
Negativo.

Paciente: Isauro Alejandro Ríos Velázquez Edad: 17 años

Observaciones:

No se observó aglutinación en ninguno de los tubos.

Causas de reacciones falsas-negativas:

 Tiempo de incubación insuficiente.

 Suspensión de G.R. demasiado débil o fuerte.
 Neutralización del suero de Coombs por globulinas séricas
contaminantes.
 Enfermedad hemolítica del recién nacido.
 Sueros o glóbulos no reciente.
 Perdida de potencia del suero de Coombs.

Mejoras a la técnica para disminuir el valor de los errores:

 Tiempo exacto en baño maría.

 Realizar casa paso con la mayor calidad posible.
 Agregar la cantidad exacta de cada uno de los reactivos.
 Más tiempo para realizar la práctica.
Cuestionario:

¿Qué función tiene la albumina?

La albúmina se usa desde el año de 1945, la función de la albumina es

aumentar la aglutinación directa de los hematíes con Ac’s de tipo IgG,
en particular de los Ac’s Rh. Aún no se conoce de manera exacta el
mecanismo por el cual potencia la unión del Ac, pero se tiene la teoría
que la albúmina solo interviene en la primera fase de la aglutinación, y
esto solamente hace posible la unión de los Ac’s a los hematíes, sin
demostrar la aglutinación completa.

Conclusión/Discusión:

Realizamos la prueba de Coombs indirecta, trabajamos en equipo

realizando está practica con calidad, sin embargo, creemos que si
nosotros hubiéramos llevado a cabo la extracción de sangre, aumentaría
nuestra calidad.

Nuestro objetivo fue buscar anticuerpos circulantes que fueran contra

los glóbulos rojos, esta prueba nosotros creemos que tiene una alta
importancia clínica ya que es muy útil para ver si existe una reacción
antes de hacer una transfusión o en embarazos para detectar la
enfermedad hemolítica del recién nacido.
Referencias bibliografía:
 Víctor Hugo Dueñas “Banco de Sangre“. Editorial Universidad del
Valle, 2da edición; 122.
 Jaime J.C., Gómez D. “Hematología: La sangre y sus
enfermedades”. Mc Graw Hill, 3ra edición; 209.
 Garibay Escobar, Adriana “Manual de prácticas de inmunología”.
Editorial UniSon, 2006; 48.