UNIVERSIDAD NACIONAL DE LOJA

FACULTAD AGROPECUARIA Y DE RECURSOS

NATURALES RENOVABLES.

CARRERA DE INGENIERÍA AGRONÓMICA

GRUIPO N° 1
TEMA: ESTABLECIMIENTO DE CULTIVOS IN VITRO
INTEGRANTES:
Fredy Alexander Alvarado Romero
María Elizabeth Armijos Pineda
Byron Luis Becerra Montalván
Kevin Samuel Buele Valarezo
Bernardo Gonzalo Castillo Pérez
Paul Andrés Campoverde

ASIGNATURA:
CULTIVO IN-VITRO
FECHA DE ASIGNACIÓN:
FECHA DE PRESENTACIÓN:
DOCENTE: Ing. For.Victor Hugo Eras Guamán.
Mg.Sc
CURSO: VIII Ciclo “A”

LOJA – ECUADOR
2019
INTRODUCCION
Las plantas son organismos fotoautótrofos, son multicelulares. Cada célula tiene la
misma información genética, al observar a diferentes niveles de organización existe
diversidad de formas celulares que se estructuran en tejidos y órganos para
desarrollar funciones específicas, como las células radicales se especializan en la
absorción y transporte de nutrientes, las células de las hojas transforman la energía
luminosa en energía química.
Para cultivar material vegetal es necesario adicionar un medio sintético cuyos
componentes serán absorbidos a través de raíces o de los órganos
fotosintetizadores de la planta.
Para cultivar células, tejidos u órganos in vitro, es necesario primero separar y
seleccionar el material a cultivar, luego eliminar microorganismos que contaminen
el material y por último proporcionar un ambiente adecuado a través un medio
sintético y condiciones de incubación adecuadas.
Los cultivos in vitro se pueden iniciar con cualquier parte de la planta, la fuente inicial
determina el éxito de su establecimiento. Comúnmente se seleccionan partes
activas en división activa, como los meristemas de las raíces o de las yemas y del
cambium en el tallo.
La facilidad del cultivo disminuye con la edad de la planta, el tipo de planta también
es determinante para su éxito como también el tamaño del explante.
Los medios de cultivo pueden ser semisólidos o líquidos dependiendo al propósito
particular, estos contienen elementos inorgánicos esenciales, vitaminas,
reguladoras de crecimiento y fuentes de carbono, no existe un medio de cultivo
satisfactorio de uso general. Cuando se desea establecer un cultivo por primera vez
se usa medio previamente definidos, el cual va siendo modificado y adaptado al
nuevo sistema vegetal, alternadamente puede utilizarse medios de composición
relativamente simple, adicionando componentes nutritivos complejos, en casos
extremos puede contener suplementos orgánicos como extracto de malta, de
levadura, hidrolizado de caseína o una mezcla de aminoácidos.
Los componentes mas influyentes son los reguladores de crecimiento. Otros
factores de cierta influencia es el pH, luz y la temperatura. De acuerdo al tipo de
material vegetal se puede clasificar en:
Cultivo de órganos, es el más antiguo y usado para la propagación y mejoramiento
genético de las plantas. Cuando un órgano es inoculado y cultivado en medio
sintético el patrón de desarrollo puede cambiar o mantenerse. Un embrión puede
desarrollarse normalmente hasta formar una planta, pero depende de los
reguladores de crecimiento que podrían favorecer el desarrollo de primordios
foliares o radícula del embrión obteniendo un crecimiento desproporcionado en una
de las dos partes. Inclusive estos reguladores pueden provocar un crecimiento
irregular y desordenado sin organización y especificación definida llamada callo.
En los cultivos de tejidos, se utiliza pequeños segmentos o explante de órganos
reproductivos o no reproductivos. Se utilizan medios semisólidos o medios líquidos
estacionarios. A partir estos se puede inducir con facilidad la formación de callos.
Manipulado los componentes del medio sintético puede formar órganos nuevos.
En los cultivos en suspensión, los callos se inoculan en medio líquidos con
agitación continua, las células se separan, se suspensión de células individuales o
pequeños agregados celulares.
Este establecimiento depende del grado de disgregabilidad del callo. Esta aumenta
con altas concentraciones de auxinas en el medio de cultivo. En ocasiones la adición
de hidrolizado de caseína o extracto de levadura promueve la dispersión y
crecimiento celular. Las suspensiones se mantienen en subcultivos sucesivos.
Después de 2 ó 3 subcultivos esta se estabiliza.
Las células en suspensión presentan mayor tamaño y mayor absorción al estar
bañados sobre él. Este sistema facilita la adición o remoción de compuestos del
medio de cultivo para el mejor control de las condiciones ambientales, permite el
aislamiento de células mutantes si posee un factor de selección. En medios
semisólidos puede formar callosidades que permiten regenerar tejidos, órganos o
plantas completas en presencia de combinaciones y concentraciones apropiadas
de reguladores de crecimiento.
En los cultivos de protoplastos. Se realiza la remoción de la pared celular, las cual
libera el protoplasto, para evitar la ruptura de la membrana celular se debe controlar
la presión osmótica con manitol o sorbitol, esta ruptura también depende del
material de las enzimas hidrolíticas y de las condiciones de incubación durante la
hidrolisis. El protoplasma se lava con medios de cultivo para eliminar enzimas y
restos celulares no degradados. A 1 ó 3 días se regenera la pared celular y se inicia
la división.
La ausencia de pared celular hace posible la fusión inducida de protoplastos de
diferentes fuentes vegetales para obtener células hibridas y regeneración genética
de ambas fuentes. Los proplastos facilitan la introducción de información genética
exógena al incorporar organelos o genes específicos.