1.

PRACTICA NÚMERO 1 EN EL LABORATORIO ENZIMAS

2. INTRODUCCIÓN: una enzima es una proteína que cataliza las reacciones
bioquímicas del metabolismo. las enzimas actúan sobre las moléculas conocidas
como sustratos y permiten el desarrollo de los diversos procesos celulares, las
enzimas pueden ser como catalizadores complejos de origen biológico que tiene
un alto grado de eficiencia para poder demostrar la actividad enzimática se debe
tener presente fundamentalmente que la acción catalítica de las enzimas es de
carácter específico, es decir cada reacción química debe ser catalizada por una
determinada enzima y contribuyen al desdoblamiento de las moléculas de los
principios nutritivos (proteínas, grasas y carbohidratos) En el desarrollo de la
practica nos centramos en una de ella que es la alfa -amilasa salival
3. OBJETIVO
OBJETIVO GENERAL

Se utiliza principalmente una enzima llamada amilasa salival y un sustrato de almidón y

demostraremos las actividades enzimáticas(catalítica). determinando la presencia del
almidón no transformado y la presencia de carbohidratos reductores.

OBJETIVOS ESPECIFICOS

Reconocer NaCL como cofactor de la amilasa salival.

Demostrar la presencia de azucares reductores a través de la utilización de reactivo

Benedict

Reconocer el sustrato residual utilizando solución yodada

MARCO TEORICO

Una enzima es una proteína que cataliza las reacciones bioquímicas del metabolismo. Las
enzimas actúan sobre las moléculas conocidas como sustratos y permiten el desarrollo de
los diversos procesos celulares, las enzimas pueden ser como catalizadores complejos de
origen biológico que tiene un alto grado de eficiencia.

Para poder demostrar la actividad enzimática se debe tener presente fundamentalmente

que la acción catalítica de las enzimas es de carácter específico, es decir cada reacción
química debe ser catalizada por una determinada enzima y contribuyen al desdoblamiento
de las moléculas de los principios nutritivos (proteínas, grasas y carbohidratos)
en el desarrollo de la practica nos centramos en una de ella que es la alfa -amilasa salival

4 MATERIALES UTILIZADOS

Gradilla

6 tubos de ensayo

Pipetas

Incubadora para (Baño María a 37

Cocina eléctrica

REACTIVOS A UTILIZAR

Solución de almidón pH 6.6 al 1%

Cloruro de sodio solución 0.1M

Enzima al 1%

Acido clorhídrico 0.05N

Solución yodada

5.DIBUJAR

6 PROCEDIMIENTOS

ETAPA A

Primeramente, tenemos 6 tubos de ensayo

Al tubo uno y dos se le agrega 5ml solución de almidón, PH 6,6 y luego se le agrega
cloruro de sodio 0,1m y nuevamente se le agrega agua destilada al tubo uno y dos se
coloca a Baño María a 37grados por 5minutos, agregar 1ml de amilasa salival al tubo
dos sin retirar del baño maría y dejarlo por 30minutos al tubo dos
ETAPA B

De los tubos 1 y 2 de la etapa a se trasmite 1ml al tubo 1 y 2 luego se agrega acido

clorhídrico 1ml a cada tubo y luego solución yodada 0,5ml a cada tubo

Etapa c

De los tubos 1 y2 de la etapa A se le agrega benedict 1ml a cada tubo y poner a hervir por
10 minutos y luego observar de los resultados

9 OBSERVACIONES

El tubo 1 del grupo A sale morado azulado y el otro sale de color amarrillo maíz

10CONCLUSIONES

Se libera la amilasa salival y se destruyen los carbohidratos

11 CUESTIONARIO

1¿Cómo demuestra usted la presencia del sustrato en los tubos de ensayo?

2¿Cómo demuestra usted si se a producido o no reacción enzimática en el

experimento realizado?

3¿Cómo demuestra usted los productos de la reacción enzimática en el experimento

rializado?

4¿Qué diferencia y semejanza encontró entre los experimento 4 y 5 para determinar

actividad enzimática?

12 BIBLIOGRAFIA

http://es.scribd.com/doc/17469299/Informe-N9-laboratorio-de-BioquimicaI

http://jose-canel.blogspot.com/p/presencia-y-desnaturalizacion-de-la.html

5.DIBUJAR
INFORME DE PEROXIDASAS PEROXIDASAS
OBJETIVOS
OBJETIVO GENERAL
Diferencial un catalizador de un biocatalizador por desprendimiento de oxigeno
molecular
2.2 OBJETIVOS ESPECIFICOS
Demostrar la presencia de peroxidasas en los diferentes tipos de células
Demostrar el efecto oxidante del O2 sobre el alcohol etílico mediante el reactivo schiff
Demostrar cómo se evalúa la actividad catalítica de las de las peroxidasas
3 MARCO TEORICO
Las peroxidasas son enzimas que degradan ácidos grasos y aminoácidos, también
contienen grandes cantidades de enzima catalasa la cual degrada al peróxido de
hidrogeno
Es una enzima que catalasa la oxidación de un amplio número de sustratos orgánicos e
inorgánicos, utilizando el poder oxidante del peróxido de hidrogeno
4 MATERIALES UTILIZADOS
Agua oxigenada de 10vol
Gradillas
Tubos de ensayo Buffer fosfato 7,2
Reactivos schiff
Rabanito
Carne o hígado
Levadura de hierro
hierro
Alcohol etílico
5 DIBUJAR
6 PROCEDIMIENTOS
Armamos una serie de ochos tubos de ensayo a cada tubo se le agrega 2ml de buffer
fosfato pH 7,2 y luego se agrega al tubo 1, 4ml de agua destilada y al tubo dos 1ml de
agua destilada al tubo dos y luego al tubo 3 se le agrega 0,5gramos de hierro y al tubo 4
le agregamos 0,5gramos de rabanito, y luego al tubo 5 le agrega 0,5gramos de
zanahoria y luego al tubo 6 le agrega 0,5gramos de hígado de pollo, y al tu tubo 7 le
pusimos levadura de pan y después al tubo 2le agregamos 3ml de agua oxigenada de
tres volúmenes y también al tubo 3,4,5,6,7 y lo observamos ´por 15minutos y luego
Alos tubos 1,2,3,4,5,6,7 le agregamos 2ml de alcohol etílico y también le agregamos a
todos los tubos del 1 al 7 1ml de reactivo de schiff y hubo una reacción en el tubo 3
hubo desprendimiento de oxigeno del 20%, el tubo 4 hubo un desprendimiento del
40%y el tubo 5 hubo un desprendimiento del 60% y el tubo 6 el 70% y al tubo 7 hubo
un desprendimiento del 90% por la misma levadura y se izó parecido a un volcán con la
misma levadura y por el oxígeno, después de 15minutos se le agrega el reactivo de
schiff y tuvimos un resultado del tuvo 1 un fucsia clarito y abajo trasparente y él tuvo 2
salió fucsia bajito y se dividió en dos partes y el tubo 3 nos salió un fucsia oscuro la
mitad y debajo de limadura de hierro y el tubo 4 salió fucsia clarito y se evapora el
rabanito y abajo trasparente, y el tubo 5 fucsia bajito y el contorno la zanahoria y al tubo
6 salió fucsia clarito la mitad y abajo trasparente y en la parte superior hígado y el tubo
7 y esta con mayor desprendimiento como un volcán
7 CONCLUSIONES
En esta práctica liberamos oxígeno a través del agua oxigena
8 CUESTIONARIO
1 ¿Mencione usted en que organelo se encuentran las peroxidasas?
2 ¿Cuál es la función de las peroxidasas en las células?
3 ¿Qué diferencias hay entre peroxidasa y catalasas?
4 ¿Explique usted como en la célula se forma los peróxidos y que acción tiene?
¿Cómo interviene la catalasa en la oxidación del alcohol etílico?
9 BIBLIOGRAFIA
https://es.wikipedia.org/wiki/Peroxidasa
INFORMES DE IHIBIDORES
Introducción
Los inhibidores enzimáticos se clasifican en dos grandes grupos: reversibles e
irreversibles, que se pueden distinguir en base de un criterio experimental. Si después de
hacer actuar el inhibidor sobre la enzima eliminamos por algún método como podría ser
la diálisis, el exceso de inhibidor, la enzima recupera la actividad original, se dice que el
inhibidor es reversible. A la inversa si la enzima continúa inhibida después de la
reacción del exceso de inhibidor, se dice que el inhibidor es irreversible.
Objetivos
Objetivo general
Caracterizar a los inhibidores enzimáticos. También son usados como herbicidas y
pesticidas.
objetivos específicos
demostrar el efecto reversible del cloruro de mercurio, por adición de mayor
concentración de sustrato y valoración final del vinage del color del indicador 2,6-
diclorofenolindofenol.
Marco teórico
Reactivos utilizados:
Buffer fosfato 0,1MpH 7.2
Succinato de sodio 0.1M
Succinato de sodio 0.5M
2.6-diclorofenolindofenol
Malo nato de sodio 0.1M
Homogenizado hepático 10%
Metodología
Lugar de ejecución
Procedimiento
Armamos una serie de cinco tubos de ensayo al primer tuvo se le agrega 2,0ml de buffer
fosfato 0,1M pH 7,2, al segundo tuvo se le agrega 1,0ml de 0ml de buffer fosfato 0,1M
pH 7,2, al tercer tuvo se le agrega 1,3ml de buffer fosfato 0,1M pH 7,2, al tercero se le
agrega igual y finalmente al cuarto tuvo 1,0ml.Al tuvo 2 ,3,4 se le agrega 0,2ml de
succinato de sodio 0.1M.al quinto tuvo se le agrega 0,5ml de succinato de sodio
0.5M.AL TERCERO y cuarto tuvo se le agrega 0.5ml de malo nato de sodio de 0,1m.
después se le agrega 1.oml de 2,6-diclorofenolindofenol a todos los cinco tubos de
ensayo. Finalmente, se le agrega 1,0ml de homogenizado hepático de 10% a todos los
cinco tubos de ensayo.
Después se deja en reposo por 30 minutos a la temperatura del ambiente.
En el primer tubo observamos un color verde bajito en la parte superior y en la parte
superior un color ladrillo, en el segundo observamos un color ladrillo, en el tercero
observamos mitad verde y mitad color ladrillo, en el cuarto tubo observamos un color
celeste en la parte inferior y azul oscuro en la parte superior, finalmente en el tubo seis
observamos un color verde en la parte superior, y en la parte central se ve un color
amarillo, y e n la parte inferior se observa un color anaranjado claro.
conclusión

cuestionario
bibliografía
anexos
TEMA FACTORES FÍSICOS Y QUÍMICOS
2 OBJETIVOS
2.1 OBJETIVO GENERAL
El objetivo general encontramos las reacciones enzimáticas diversas de agentes físicos y
químicos de la amilasa salival y el almidón
2.2 OBJETIVOS ESPECIFICOS
Verificar que la reacción enzimática sea lenta en un medio acido o en un medio básico
Comprobar que a una temperatura muy alta la enzima se desnaturaliza o muy baja la
enzima se inhibe.
3 MARCO TEORICO
Además del componente proteico, muchas enzimas requieren constituyentes no
proteicos para su función como catalizadores. Estas sustancias accesorias reciben
diversos nombres, grupo prostético, cofactor o enzima. El grupo prostético es cualquier
porción no aminoácido de una proteína que confiere a esta alguna propiedad especial.
Los cofactores son pequeñas moléculas esenciales para la catálisis. El termino enzima
se aplica a moléculas orgánicas, derivadas a menudo de una vitamina y que son
esenciales para una enzima algunas coenzimas se hallan estrechamente unidas a la
porción proteica de una determinada enzima; esta puede desnaturalizarse si se intenta
separar la enzima.
La teoría cinética conocida también teoría de colisiones como de la cinética química
establece que para que dos moléculas reaccionen deben; aproximarse entre si a la
distancia de formación del enlace o bien chocar y deben poseer suficiente energía
cinética.
4 MATERIALES UTILIZADOS
La solución del almidón al 1%
Fufer fosfato 0,1M pH 6,6
buffer acetato 0,1M pH3,6
buffer fosfato 0,1M PH 10, O
solución cloruro de sodio al 2%
amilasa salival dializado al 0,25%
ácido clorhídrico al 0,5N
solución yodada (yoruro de potasio)
solución cúprico alcalina
solución fosmolibdica
agua destilada
5 DIBUJAR
6 PROCEDIMIENTOS
se utiliza 8 tubos de ensayo se coloca solución de almidón al 1% de 1ml a los tubos
1,2,4,5,6,7,8 excepto al tubo 3 que se coloca 2ml de solución de almidón después de
eso se coloca buffer acetato 0.1M PH 3.6 al cuarto tubo de ensayo, buffer fosfato 0,1M
PH 6,6 se agrega 5ml a los tubos de ensayo 1,2,3,5,7,8, buffer fosfato 0,1M PH 10,0 SE
LE AGREGA 5ml al tubo 6, solución cloruro de sodio al 2% se coloca 1,4ml al
1,3,4,5,6,7,8, agua destilada al tubo 1 se le agrega 2,6ml, al tubo 2 se le agrega 3ml, al
3,4,5,6,8 se le agrega 1,6 y al 7 se le agrega 0,6m el preparado enzimático se le agrega a
los tubos 2,3,4,5,6,8 la cantidad 1ml, preparado enzimático hervido se le agrega al
tubo de ensayo 7, la cantidad 1.0
8 DISCUSIONES
9 OBSERVACIONES
10CONCLUSIONES
11 CUESTIONARIO
12 BIBLIOGRAFIA