PRÁCTICA N° 16

BACTERIAS DEGRADADORAS DE HIDROCARBUROS DE

PETRÓLEO DIESEL

NOMBRE: CHERO NUNURA ANDY. NÚMERO: #12

I. INTRODUCCIÓN

El manejo inadecuado de los materiales y residuos peligrosos ha generado a escala

mundial, un problema de contaminación de suelos, aire y agua. Entre las más severas
contaminaciones se destacan las que se produjeron y todavía se producen a causa de
la extracción y el manejo del petróleo en todos los países productores de
hidrocarburos.
En el suelo los hidrocarburos impiden el intercambio gaseoso con la atmósfera,
iniciando una serie de procesos fisicoquímicos simultáneos como evaporación y
penetración, que, dependiendo del tipo de hidrocarburo, temperatura, humedad,
textura del suelo y cantidad vertida puede ser más o menos lenta, ocasionando una
mayor toxicidad, además de tener una moderada, alta o extrema salinidad,
dificultando su tratamiento.
Altos gradientes de salinidad pueden destruir la estructura terciaria de las proteínas,
desnaturalizar enzimas y deshidratar células, lo cual es letal para muchos
microorganismos usados para el tratamiento de aguas y suelos contaminados.
En la presente revisión se analiza la biorremediación como una alternativa saludable
frente al deterioro progresivo de la calidad del medio ambiente por el derramamiento
de crudos, ya que la esta problemática genera una amenaza real a la salud pública, así
como la extinción de gran cantidad de especies vegetales y animales.

II. OBJETIVOS

 Aislar bacterias heterótrofas en una muestra de suelo contaminado con

hidrocarburos de petróleo.
 Seleccionar las bacterias degradadoras de hidrocarburos de petróleo o
hidrocarbonoclásticas.
 Determinar la eficiencia de la biorremediación de suelo contaminado con
hidrocarburos de petróleo.
III. METODOLOGÍA

PRIMER OBJETIVO

MUESTRA

 Recolectar 100 g de suelo contaminado con petróleo (suelo de Talara).

AISLAMIENTO DE BACTERIAS
HETERÓTROFAS

 Pesar 10 g de la muestra para favorecer el aislamiento de bacterias

heterótrofas.
 Enriquecer los 10 g de la muestra con 90 ml de caldo Bushnell Haas el cual
contiene como indicador púrpura de bromocresol (acidez: amarillo –
alcalinidad: morado) y agregar 1% de petróleo. Acondicionar y dejar la
muestra 96 horas a 30 oC.

 Tomar una alícuota de la solución con ayuda de un asa de siembra.

 Sembrar la alícuota en una placa de Petri con agar Bushnell Haas y 0.1% de
petróleo mediante la técnica de agotamiento y estría.
 Acondicionar e incubar por 24 horas a 30 oC.

 Seleccionar con un asa de siembra una colonia formada en la placa de Petri

para realizar el cultivo puro de bacterias.

 Sembrar en un vial con agar Bushnell Haas y Tripticasa Soya para obtener un
cultivo puro de bacterias heterótrofas.
 SEGUNDO OBJETIVO

TIEMPO REQUERIDO PARA LA UTILIZACIÓN DEL

PETRÓLEO COMO FUENTE DE CARBONO Y ENERGÍA

 Del cultivo puro de bacterias tomamos una alícuota con la ayuda de un asa de
siembra y la colocamos en 10 ml de caldo Bushnell Haas con 0.1 % de
petróleo.

 Cultivamos hasta por 10 días a 30°C con agitación manual.

  Diariamente se investiga el viraje del indicador de lila a amarillo. La turbidez
indicará crecimiento microbiano y la coloración amarilla indicará acidez, esto
se interpreta como positivo para la utilización del petróleo como fuente de
carbono y energía (bacteria hidrocarbonoclásticas).

TERCER OBJETIVO

DETERMINACIÓN DE LA EFICIENCIA EN LA
BIORREMEDIACION DE SUELO CONTAMINADO

 Para determinar la eficiencia de un suelo biorremediado se tendrá en cuenta

que el límite de HTP (hidrocarburos totales de petróleo) el cual es 50 000 mg/
Kg de HTP.
 Se inocula de 5- 10 % de bacterias en el suelo a analizar.

 Se hacen evaluaciones cada 30 días hasta llegar al día 120 esto es para
controlar los HTP, además de contar el número más probable de bacterias
heterótrofas e hidrocarbonoclásticas.

 La prueba de toxicidad se realizará sembrando 100 semillas de lechuga o

rábano a las cuales se tendrán que regar periódicamente.
IV. CONCLUSIONES:

 Los hidrocarburos impiden el intercambio gaseoso con la atmósfera, iniciando una

serie de procesos fisicoquímicos simultáneos, como evaporación y penetración, que,
dependiendo del tipo de hidrocarburo, temperatura, humedad, textura del suelo y
cantidad vertida pueden ser procesos más o menos lentos lo que ocasiona una mayor
toxicidad.
 Las prácticas de biorremediación consisten en el uso de microorganismos como
bacterias naturales para neutralizar sustancias toxicas, transformándolas en sustancias
menos tóxicas o convirtiéndolas en inocuas para el ambiente y la salud humana.
 Los dispersantes químicos utilizados para favorecer la remediación de los ambientes
contaminados pueden causar un mayor impacto ecológico que el mismo derrame, por
su toxicidad a la biodegradación. Por tanto, una mejor alternativa de solución es el
proceso de biorremediación.

V. BIBLIOGRAFÍA:
Narváez, S. (2012). Bacterias Degradadoras de Hidrocarburos: Aislamiento y Selección a
Partir de Sedimentos del Caribe Colombiano. Cartagena, Colombia. Editorial
Académica Española.
Llanos, C. (2012). Eficiencia de la biorremediación de suelos contaminados con petróleo
por bacterias nativas en el distrito de Pimentel, departamento de Lambayeque, 2011.
(Tesis de pregrado). Universidad Nacional Pedro Ruiz Gallo, Lambayeque, Perú.