Laboratorio de Conteo Eritrocitario TM 2do año. Lic.

Ronnier Meza

Conteo eritrocitario en Cámara de Neubabuer

OBJETIVO
Aprender a realizar un recuento de Eritrocitos por milímetro cúbico de sangre, interpretar el resultado,
así como adiestrarse en el manejo de la cámara de Neubauer
FUNDAMENTO
Para el conteo de eritrocitos, se usan métodos sistemáticos que son más rápidos y precisos, y los
métodos manuales.
Todo método manual de recuento celular incluye 3 fases:
 Dilución de la sangre
 Muestreo de la sangre diluida en un volumen
 Recuento de células en ese volumen

Una suspensión celular se caracteriza por presentar un número

de partículas microscópicas dispersas en un fluido.
Habitualmente será necesario determinar tanto la densidad de
las células en la suspensión como el porcentaje de éstas que
son viables.
Para determinar la densidad de las células se emplean
diferentes técnicas, desde la relativamente simple cámara de
contaje celular de la que existen numerosas variantes, entre
ellas la que utiliza la cámara de Neubauer
Para el conteo de eritrocitos, es necesario diluir la sangre con
el líquido de Hayem, en una proporción exacta. Luego se
examina en el microscopio con una cantidad pequeña colocada
en la cámara de Neubauer, contando el número de elementos que se encuentran en el retículo de la
cámara y mediante una operación se obtiene el número total.
Para la realización del conteo manual se necesita un líquido de dilución, una cámara de recuento,
una pipeta diluidora y un microscopio.

Procedimiento:

1.- Adherir el cubreobjetos sobre la cámara mediante un suave movimiento de presión y deslizamiento
sobre la zona central de la misma.

2.- Preparar una cámara húmeda.

3.- Añadir una pequeña alícuota de líquido de Hayem en el vaso de precipitados o en el tubo de
ensayo.

4.- Tomar una muestra de sangre con ayuda de la pipeta de Thoma hasta la señal de 0,5.

5.- Limpiar el exterior de la pipeta con ayuda de una gasa o papel (para evitar errores por exceso de
muestra).

6.- Seguir aspirando con el diluyente que habíamos colocado en el vaso de precipitados (líquido de
Hayem) hasta la señal de 101.
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7.- Desconectar el sistema de aspiración de la pipeta, tapando y sujetando sus extremos con los dedos
(es preciso el uso de guantes desechables de laboratorio).

8.- Realizar inversiones a la pipeta

con el objeto de mezclar bien en su
interior la sangre con el diluyente
durante unos 3 minutos.

9.- Desechar las 4 primeras gotas que

salgan de la punta de la pipeta (que
corresponden al diluyente contenido
en la zona del capilar).

10.- Se pueden sustituir los pasos 3 a

9 tomando un volumen de sangre de
20μL con una micropipeta y
diluyéndola en un tubo de ensayo que
contenga 3,98mL de líquido de
Hayem.

11.- Llenar la cámara por capilaridad,

para ello tocar con la punta de la pipeta o de la micropipeta que contenga la sangre diluida, las zonas
situadas entre el cubre y la cámara en las cuáles se encuentran grabados los retículos.

12.- Colocar la preparación en el interior

de la cámara húmeda y dejar unos
minutos para que las células sedimenten.

13.- Poner la preparación en la platina del

microscopio y enfocar el retículo con el
objetivo de 10X para verificar una
distribución homogénea de los eritrocitos.

14.- Buscar los recuadros en los que se

ha de hacer el recuento de hematíes,
cambiar al objetivo de 40X y proceder a
contar y anotar los eritrocitos presentes
en cada uno de ellos. Los cuadros a los
que hacemos referencia quedan
identificados en la siguiente imagen mediante la letra "E":

16.- Para no contar repetidamente las células, procederemos a mover la preparación en zig-zag y
contaremos las células que se encuentren dentro de cada cuadradito y las que estén situadas sobre
sus líneas de demarcación izquierda y superior tal como se muestra en las siguientes imágenes:
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17.- Por todo lo expuesto, al final se habrán

contado un total 5 x 16 = 80 cuadraditos
pequeños.

18.- Realizar los cálculos correspondientes

para obtener el valor final.

Después de contar los hematíes de los

5 cuadrados pequeños, se suman y
con dicha cantidad de hace el
siguiente cálculo:
N° de hematíes x mm3 = altura x dilución x área
N° de hematíes x mm3 = 1/10 x 1/200 x 1/5 = 1/10 000
N° de hematíes x mm3 = hematíes contados x 10 000

En el análisis hecho, el número de eritrocitos fue de 491, que al multiplicarse por 10 000
daba como resultado 4 910 000/mm3, lo que indica un índice normal pues el paciente era
una mujer de 11 años de edad.

VALORES DE REFERENCIA
(Millones de células/mm3)
Hombres:………………………………..4 500 000-5 500 000
Mujeres:…………………………...…….4 000 000-5 000 000
Niños (4 años):……….........................4 200 000-5 200 000
Lactantes (1-6 meses):....…………….3 800 000-5 200 000
Recién nacidos:………………………..5 000 000-6 000 000

CONCLUSIÓN
Los eritrocitos o glóbulos rojos son células de color amarillento, con la forma de un disco
bicóncavo, sin núcleo y contienen un pigmento llamado hemoglobina que les otorga su
característico color.
Estos se forman constantemente en la medula ósea, en el cráneo, las costillas, las
vértebras y el esternón, en un proceso conocido como eritropoyesis. Viven
aproximadamente 120 días y al envejecer son destruidos por las células
reticuloendoteliales del hígado, la medula ósea y el bazo.
La falta de núcleo le confiere la virtud de acarrear oxigeno sin consumir nada de él.

Bibliografias:
1. G. Ruiz Reyes, A. Ruiz Argüelles Fundamentos de interpretación Clínica de los exámenes
de laboratorio. Ed. Panamericana, 2ª. Edición 2010.
2. Carl E Speicher y amit JR. W. Selección de pruebas de laboratorio más convenientes
Editorial El manual Moderno México.