ESPERMATOGRAMA

EXAMEN FISICO

COLOR : blanca, amarillenta etc.

OLOR : se reporta suis generis (cuando es su olor caracteristico a lejia)
VOLUMEN : VN : 2 – 5 cc
PH : 7.2 – 7.8
COAGULACION : se reporta Homogenea no homogenea se lee inmediatamente
después de la eyaculación es el estado de gel hasta antes de 30’
LICUEFACCION : se pone liquido el semen presencia a > de 30’hasta antes de una
hora ( completa, incompleta)

CONSISTENCIA ó VISCOSIDAD: con una alícuota mediante una pipeta Pasteur se

deja caer espontáneamente si cae gota a gota es Normal si la caida es constante está
aumentada si demora esta disminuida por lo tanto se reporta : viscosidad ( normal,
aumentado, disminuida )

EXAMEN MICROSCOPICO :

LAMINA DE ORIENTACION :
20 ul de semen sobre porta objetos y se deposita cuidadosamente un cubreobjeto y
observar a 40X, esto permitirá adecuar el tipo de dilución para el recuento de
espermatozoides, como tambien observar elementos celulares , cristales, tricomonas .
Si observa + de 20 espermatozoide por campo--- dilución 1/100 con solución salina
< de 20 por campo ---- dilución 1/10
Cuando no se observan espermatozoides todo el volumen eyaculado se centrifuga a
3000 rev. Por 10’, se descarta el sobrenadante se homogeniza el boton y se observa al
microscopio.

RECUENTO DE CELULAS :
En la lamina de orientación también se puede apreciar :
LEUCOCITOS : VN : < DE 1’000,000 X ml:
CELULAS : HASTA 5 % ( células epiteliales de la uretra + células espermatogenicas)
HEMATIES : por campo

RECUENTO DE ESPERMATOZOIDES :

En un tubo colocar 10 ml. De diluyente (Cl Na) + 100 ul de Formaldehído (35- 40%)
para inmovilizar espermatozoides, si se observó + de 20 espermatozoides se realiza la
dilución 1/100.
se carga la Cámara y se deja reposar por 3´.
Se comienza contar en las 25 celdillas de GR. Y se le suman :
- 6 ceros cuando se diluyen a 1/100
- 5 ceros cuando se diluyen a 1/10
Ejem. Si la dilución es 1/10 se cuenta en la cámara de Neubauer en los 25 cuadrados
donde se realiza el conteo de glóbulos rojos y se divide entre 10 y se obtiene el n°de
espermatozoides x cm3
Cuando el número es muy bajo se cuenta en los 9 cuadrados y se divide entre 9 se
añaden los ceros correspondientes según la dilución.

Si no se observan espermatozoides centrifugar a 3000 rev. X 10’ y el boton formado

observar microscópicamente.
VN : entre 20 y 250 millones / cm3

VITALIDAD ( VN : > 60% )

- Se prepara una solución al 0.5 % de eosina Y con solución de cloruro de sodio al 9g/L
- Se mezclan una gota de semen fresco con una gota de solución de eosina X 30
segundos luego se carga en un portaobjetos con un cubreobjetos se examinan a 40x
Se utiliza Eosina Y ( los espermatozoides muertos se colorean de rojo, los vivos NO se
colorean blancos).
se cuentan 100 espermatozoides, el resultado se expresa en %
VN : Mayor de 60%

MOTILIDAD ( se realizan en las 2 primeras horas.)

Previa homogenización de la muestra de semen a 37°C se colocan 20 microlitros sobre
un portaobjetos y se cubre con cubreobjetos y se lee a 40x se cuentan los diferentes
tipos de movimientos en 100 espermatozoides .
1- Tipo o grado 0 ( espermatozoide inmóvil )
2- Tipo o grado 1 ( movimiento in situ )
3- Tipo o grado 2 ( movimiento en un pequeño campo progresiva lenta)
4- Tipo o grado 3 ( movimiento rectilíneo rápida puede salir del campo )
Se puede informar también por cruces (+)

VN : si el grado 2 +3 es > del 50 % ó si el grado 3 es > del 25 % a 37°C

Valores inferiores corresponden a ASTENOZOOSPERMIA

MORFOLOGIA :
- con una alícuota se toma 200 microlitros de semen en un tubo y se reliza 2 lavados
con 300 microlitros de cloruro de sodio a 1000 rev. x 5’
- Del boton formado se mezcla con 10 microlitros de formaldehído para su fijación x 5
minutos
- se prepara la extención con 50 microlitros de la muestra.
- Se realiza la extención de semen sobre el porta objeto .
- se seca al aire y se fijaron solución de partes iguales de ( etanol 95%+ éter) x 10’
- Se realiza tinción con colorante de Papanicolao o Giemsa
- se monta con resina neutra (DPX) aceite inmersión y con un cubreobjetos y se observa
a 100x sobre 200 células.
LECTURA :
ANOMALIAS DE LA CABEZA : ( anucleada , Macrocefalica, Microcefalica,
alargada, Amorfa, Bicefalica). Como tambien alteraciones del Acrosoma, ausencia ,
pequeño rotado etc.
ANOMALIAS DEL CUELLO : (implantación Axial,no implantado, encorvado,
engrosado etc.)
ANOMALIAS DE LA COLA : ( Ausencia total, parcial, enrollado, doble, multiple,
engrosado, angulado)

TEST HIPO OSMOTICO :

REACTIVOS : BUFFER HIPOOSMOTICO
- FRUCTOSA ( 1351 mg )
- Citrato de sodio .2H20 (735 mg )
- 100 ml de agua destilada
- PROCEDIMIENTO :
- Mezclar 0.9 ml de Buffer + 0.1 ml. De Semen
- Incuvar a 37 °C 30’-60’
- Se coloca una gota en una lamina y con un cubre lamina se cuentan 100
espermatozoides.

VN : > 60% de espermatozoides con la cola hinchada .

PRUEBA BIOQUIMICA :

TEST DE LA FRUCTOSA : Se mide de 1 a 3 horas después de la eyaculación

VN : 1.2 a 4 mg./ ml.
> en Normozoospermia
< en Oligozoospermia

LECTURA :

LEUCOCITOSPERMIA : > 1’000,000 de leucocitos x ml. ó > de 5 x campo.

HEMOSPERMIA : presencia de hematíes en el semen se lee por campo
NORMOZOOSPERMIA : concentración de espermatozoides > de 20’000,000
OLIGOZOOSPERMIA : concentración de espermatozoides < de 20’000,000
TERATOZOOSPERMIA : > 30 % de formas anormales
ASTENOZOOSPERMIA : disminución de la movilidad (motilidad) < 50 % (3+2) ó <
25 % de 3.
AZOOSPERMIA : ausencia de espermatozoides en el eyaculado.
ASPERMIA : ausencia de eyaculado externo.

Ejemplos de lectura :
- Oligoastenozoospermia : si hay disminución del Numero y Movilidad
(Motilidad)
- Oligoteratozoospermia : si hay disminución del Numero y formas Normales
- Oligoastenoteratozoospermia : se lee disminución en Numero,Movilidad
(Motilidad) y formas Normales.
- Astenoteratozoospermia : si hay disminución en movilidad (Motilidad) y formas
Normales.

MARCADORES DE LA FUNCION GLANDULAR : se realizan los siguientes

exámenes :

FRUCTOSA Y PROSTANGLADINAS :para ver la función de las vesiculas seminales

ACIDI CITRICO Y FOSFATASA ACIDA : para ver la próstata
L- CARNITINA LIBRE Y GLICEROFOSFOCALINA : para ver el Epidídimo
MICROORGANISMOS QUE DEBEN BUSCARSE : Bacterias aeróbicas
(neisseria,Aemophilus, pseudomonas, Gardnerella,Estafilococos,Estreptococos)
Levaduras,Micoplasma , Chlamydias, Protozoos(tricomonas).

FROTIS URETRAL :Chlamydias trichomatis.

CULTIVO : La siembra se realiza diluyendo semen +agua destilada proporción 1:1
El cultivo de semen debe realizarsea partir de la presencia de más de 106LPMN / ml.
El cultivo se considera positivo si hay mayor de 103 UFC/ml.
UFC = N° colonias x 40
MEDIOS DE CULTIVOS : se cultivan en atmosfera de CO2 a 37 °C
-Thayer Martin ; Agar Chocolate ; Agar Mac Conkey ; Agar Sangre,Diamond.