FOSFORILACIÓN OXIDATIVA

a) Reacciones de transferencia de electrones

en las mitocondrias

b) Síntesis de ATP
LOCALIZACIÓN Y ESTRUCTURA DE LAS MITOCONDRIAS
LA FOSFORILACIÓN OXIDATIVA SE LLEVA A CABO EN LA MEMBRANA
INTERNA MITOCONDRIAL

Membrana externa
Espacio
intermembranal PERMEABLE A MOLÉCULAS PEQUEÑAS E IONES

Membrana interna

EXISTEN TRANSPORTADORES ESPECÍFICOS

Y ALOJA A LOS COMPONENTES DE LA CADENA
RESPIRATORIA Y LA ATP SINTASA

Matriz

CONTIENE AL COMPLEJO DE LA PIRUVATO

DESHIDROGENASA Y LOS ENZIMAS DEL CICLO DE KREBS
Y DE OTRAS RUTAS (b-OXIDACIÓN DE ÁCIDOS GRASOS Y
OXIDACIÓN DE AMINOÁCIDOS)
RESPIRACIÓN AERÓBICA: INCLUYE GLUCÓLISIS, CICLO DEL ÁCIDO CÍTRICO
Y FOSFORILACIÓN OXIDATIVA

CICLO DEL ÁCIDO

CÍTRICO FOSFORILACIÓN OXIDATIVA
LA FOSFORILACIÓN OXIDATIVA COMIENZA CON LA
ENTRADA DE ELECTRONES EN
LA CADENA RESPIRATORIA

¿DE DÓNDE VIENEN LOS ELECTRONES?

LA MAYOR PARTE DE LOS ELECTRONES PROVIENEN

DE LA ACCIÓN DE DESHIDROGENASAS
QUE CAPTAN e- DE VÍAS CATABÓLICAS
LOS ELECTRONES GENERADOS DURANTE
LA GLUCÓLISIS Y
EL CICLO DEL ÁCIDO CÍTRICO
SON CANALIZADOS HACIA

LA CADENA
TRANSPORTADORA
DE ELECTRONES
(CADENA RESPIRATORIA)
 LOS ELECTRONES SE CAPTAN A TRAVÉS DE
ACEPTORES UNIVERSALES DE ELECTRONES

REDUCIDO NÚMERO DE
TRANSPORTADORES
DE ELECTRONES
Nucleótidos de
Nicotinamida:
NAD+, NADP+

Quinonas Citocromos
Nucleótidos de
Flavina:
FMN, FAD
Proteínas
Ferro-sulfuradas
LOS NUCLEÓTIDOS DE NICOTINAMIDA.- Las deshidrogenasas ligadas
a NAD+ eliminan dos átomos de hidrógeno de sus sustratos

DESHIDROGENACIÓN

SUSTRATO REDUCIDO + NAD+

SUSTRATO OXIDADO + NADH + H+

TANTO EL NADH COMO EL NADPH SON TRANSPORTADORES

ELECTRÓNICOS HIDROSOLUBLES QUE SE ASOCIAN
REVERSIBLEMENTE CON DESHIDROGENASAS
LOS NUCLEÓTIDOS DE FLAVINA.- La forma oxidada puede aceptar un
Electrón (formando un semiquinona) o dos electrones

Se encuentran fuertemente
unidos a las FLAVOPROTEÍNAS
GRUPOS PROSTÉTICOS
 E’o depende de su entorno
 LOS ELECTRONES SE CAPTAN A TRAVÉS DE
ACEPTORES UNIVERSALES DE ELECTRONES

TRANSPORTADORES UNIDOS A MEMBRANA

(INTERNA MITOCONDRIAL)

Nucleótidos de
Nicotinamida:
NAD+, NADP+

Quinonas Citocromos
Nucleótidos de
Flavina:
FMN, FAD
Proteínas
Ferro-sulfuradas
LA UBIQUINONA, COENZIMA Q, Q
(benzoquinona liposoluble
con una larga
cadena lateral
isoprenoide)
ES HIDROFÓBICA

Puede actuar
como puente
entre un dador
de dos e- y un
aceptor de un
electrón
LOS CITOCROMOS SON PROTEÍNAS QUE TIENEN COMO
COFACTORES A LOS GRUPOS HEMO (Fe)
TRES CLASES DE CITOCROMOS.- De acuerdo a diferencias en su
espectro de absorción de la luz
a 600 nm
No covalente  E’o depende de su
b 560 nm interacción con la proteína
c 550 nm Covalente (Cys)

SON HIDROFÓBICAS, EXCEPTO EL CITOCROMO C

MITOCONDRIAL
PROTEÍNAS FERRO-SULFURADAS.- El hierro está presente
No como grupo hemo sino en asociación con átomos de
Azufre de residuos de Cys

Aconitasa
LA CADENA RESPIRATORIA
(FOSFORILACIÓN OXIDATIVA)

CONSTA DE UNA SERIE DE TRANSPORTADORES

ELECTRÓNICOS QUE ACTÚAN SECUENCIALMENTE,

LA MAYORÍA DE LOS CUALES SON

PROTEÍNAS INTEGRALES CON GRUPOS PROSTÉTICOS

CAPAZ DE ACEPTAR Y DONAR UNO O DOS

ELECTRONES
LA INTERACCIÓN DE LOS TRANSPORTADORES DE ELECTRONES
CON LAS PROTEÍNAS MODIFICA LOS POTENCIALES DE REDUCCIÓN

Transportador
de
electrones
E’o
Transportador
de
electrones E’o

E’o  E’o
LOS TRANSPORTADORES DE ELECTRONES CEDEN,

A SU VEZ, LOS ELECTRONES A ACEPTORES

CON AFINIDAD POR LOS ELECTRONES

MÁS ELEVADA
POTENCIAL DE REDUCCIÓN ESTÁNDAR, E’o (V)

Es un parámetro que permite medir la afinidad del aceptor

por los electrones

FLUJO DE ELECTRONES:

E’O BAJOS E’O MÁS ELEVADOS

A MEDIDA QUE LA GLUCOSA SE OXIDA ENZIMÁTICAMENTE,

LOS ELECTRONES LIBERADOS FLUYEN A TRAVÉS DE UNA
SERIE DE TRANSPORTADORES DE ELECTRONES
INTERMEDIOS HASTA EL O2

DONDE EL O2 TIENE UNA AFINIDAD MAYOR QUE LOS

TRANSPORTADORES INTERMEDIOS
DURANTE LA FOSFORILACIÓN OXIDATIVA SE LLEVAN A
CABO TRES TIPOS DE TRANSFERENCIA DE ELECTRONES:

1. Directamente como electrones.- Tal como sucede

en la reducción de Fe3+ a Fe2+

2. En forma de átomos de hidrógeno

3. En forma de ion hidruro (:H-) portador de 2 e-

LA OXIDACIÓN DE GLUCOSA A DIÓXIDO DE CARBONO
REQUIERE DE TRANSPORTADORES DE ELECTRONES
ESPECIALIZADOS

10 NADH + 2FADH2
GAL3PDH
PiruvatoDH
isicitratoDH
a-cetog DH
succDH
malDH
DG°’=-2840 kJ/mol
POTENCIALES DE REDUCCIÓN ESTÁNDAR DE LOS
TRANSPORTADORES DE LA CADENA RESPIRATORIA
 LOS TRANSPORTADORES DE ELECTRONES SE
ENCUENTRAN EN COMPLEJOS MULTIENZIMÁTICOS

(+) Espacio
intermembranal
E°’

-0.4
NADH NAD+ (-0.315 V)
ADP+Pi
-0.2 Complejo I (DG°’= -69.5 kJ/mol)
ATP
(+0.03V)
0 Succ FADH2 Complejo II CoQ (0.045V)
ADP+Pi
Fum Complejo III (DG°’= -36.7 kJ/mol)
0.2 ATP
CytC (0.235V)
0.4
ADP+Pi
0.6 Complejo IV (DG°’= -112 kJ/mol)
ATP
0.8 2H+ + ½ O2 H2O (0.815 V)
REACCIÓN GLOBAL CATALIZADA POR LA CADENA
RESPIRATORIA MITOCONDRIAL
NADH
E’O (v) -0.4 Rotenona

Q
-0.2
Cyt b
Antimicina A
0
Cyt c1

0.2
Cyt c
0.4
Cyt (a + a3)
0.6 CN- o CO
O2
0.8
COMPLEJO MASA No. de Grupo(s)
ENZIMÁTICO/PROTEÍNA (kDa) subunidades transportador(es) e-

I NADH deshidrogenasa 850 43 (14) FMN, Fe-S

II Succinato deshidrogenasa 140 4 FAD, Fe-S

III Ubiquinona-citocromo c 250 11 Hemos, Fe-S

oxidorreductasa

Citocromo c 13 1 Hemo

IV Citocromo oxidasa 160 13 (3-4) Hemos, CuA, CuB

COMPLEJO I: NADH a Ubiquinona
Espacio
4H+ intermembranal
43 subunidades

Membrana
FMN (4) Fe-S Q (2) QH2 interna

2H+ Matriz

NADH
 FAD: Acil graso-CoA (b-oxidación)
Glicerol-3-fosfato (hidrólisis de TG/ Glucólisis)

COMPLEJO II: Espacio

intermembranal
Succinato a Ubiquinona
Membrana
Fe-S Q QH2 interna

FAD
2H+ Matriz

Succinato
COMPLEJO II

4 subunidades

MATRIZ
COMPLEJO III:Ubiquinona a citocromo c “Complejo
Citocromo bc1

4H+
Cyt c Espacio
intermembranal
Q (2) QH2
Cyt c1 Membrana
Fe-S interna
Cyt b
QH2 .Q -

Matriz

2H+
COMPLEJO III:Ubiquinona a citocromo c “Complejo
Citocromo bc1

EL UBIQUINOL (QH2) SE OXIDA A Q AL TIEMPO

QUE SE REDUCEN DOS MOLÉCULAS DE CITOCROMO c
COMPLEJO IV: Citocromo c al O2 “Citocromo oxidasa”

2H+

Cyt c Espacio
intermembranal
CuA
Cyt a
Membrana
Cyt a3 interna

CuB
Matriz

O2
2H2O
FLUJO DE ELECTRONES Y PROTONES A TRAVÉS DE LA
CADENA RESPIRATORIA
4H+ 4H+ 2H+ +
Espacio
Cyt c intermembranal
III IV
Q Membrana
interna
I
Matriz
II
1
O2 + 2H+ H2O
-
NADH + H+ NAD+ Succinato 2

 [H+] y en carga

ENERGÍA ALMACENADA FUERZA PROTÓN-MOTRIZ

a) Energía química potencial ΔpH
b) Energía eléctrica potencial Δ
FOSFORILACIÓN OXIDATIVA

Energía del flujo de e- síntesis ATP

transducción de energía

Hipótesis quimiosmótica

Energía se conserva por bombeo protones al espacio

intermembranal: gradiente electroquímico.

Fuerza protón-motriz: síntesis ATP

Espacio
+ + + + + + + + + + ++ + + + + intermembranal

Membrana
Fo interna

- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - Matriz
H+
F1

ADP + Pi ATP
 HIPÓTESIS QUIMIOSMÓTICA

EXPLICA EL MECANISMO POR EL CUAL SE ACOPLA

EL FLUJO DE PROTONES CON LA FOSFORILACIÓN

1) LOS PROTONES GENERADOS DURANTE EL

PASO DE ELECTRONES POR LA CADENA RESPIRATORIA
(COMPLEJOS I AL IV)

2) DAN LUGAR A LA
FUERZA PROTÓN-MOTRIZ (ΔpH, Δ)

3) QUE IMPULSA LA FOSFORILACIÓN DEL ADP

PARA FORMAR ATP
COMPLEJO DE LA ATP SINTASA MITOCONDRIAL

Es una ATPasa tipo F (factor de acoplamiento de energía)

Complejo V
Dos componentes: F1, una proteína periférica de membrana
Fo, una proteína integral de membrana

F1

Fo
F1 Fo de la ATP sintasa

9 Subunidades
F1 de cinco tipos
distintos
a3 b3   

3 Subunidades
Fo a b2 c10-12
MODELO DE UNIÓN Y CAMBIO DE LA ATP SINTASA
La catálisis rotacional es clave en el mecanismo
de unión y cambio de la síntesis de ATP Conformación b-ADP
impulsada por el Une ADP y Pi
bombeo de H+

Conformación b-ATP
Une fuertemente ATP

Conformación b-vacía
Baja afinidad por
ATP

ESPACIO
INTERMEMBRANAL
(10 H+)
En F1: tres sitios con diferente conformación
(INTERCONVERTIBLES)

L(oose) : unión débil a sustratos (ADP y Pi)

T(ight) : unión fuerte (síntesis ATP)

O(pen) : sin unión (abierto: salida ATP)

SÍNTESIS ATP:

1. Translocación protones : Fo

2. Formación enlace fosfoanhídrido de

ATP: F1
 Glucosa

Glucosa6P 1 glucosa: 2 ATP

2 GALD3P 10 NADH
2 NADH 2 FADH2
2 1,3BiPglicerato 1 GTP
2 piruvato 1 NADH : 3 ATP
1FADH2 : 2 ATP
2NAD+

PDH
10 NADH X 3 ATP= 30 ATP
2 FADH2 X 2 ATP = 4 ATP
Glucólisis = 2 ATP
TCA = 1 GTP
2 2
TOTAL 36 ATP
1 GTP
2
2