Proyecto Biofísica:

Determinación del coeficiente de absortividad en macromoléculas y obtención de las

concentraciones molares en una mezcla a partir de ellos.
Iván Amaury Sánchez Domínguez

Objetivos:
● Medir los coeficientes de absortividad molar en macromoléculas, como glucosa, fructosa,
sacarosa y azúcar invertida usando la ley de Beer-Lambert.
● Determinar la concentración de compuestos en una mezcla homogénea de glucosa, sacarosa
y fructosa.

Procedimiento:
Primera parte:
1. Se prepararán soluciones acuosas de distinta concentración para cada sustancia, de 10 mM,
35 mM, 60 mM, 85 mM, 110 mM. La relación en gramos se muestra en la siguiente tabla:

Tabla 1:concentración molar de macromoléculas en distintas soluciones:

10 35 60 85 110
mM mM mM mM mM
gr gr gr gr gr
( L) ( L) ( L) ( L) ( L)

glucosa 1.8 6.3 10.80 15.31 19.81

fructosa 1.8 6.3 10.80 15.31 19.81

sacarosa 3.4 11.98 20.53 29.1 37.65

azúcar invertida 1.8 6.3 10.80 15.31 19.81

clorofila 8.9 31.27 53.61 75.94 98.28

2. las soluciones acuosas se prepararán en contenedores transparentes del mismo tamaño, tal
que a longitud de camino óptico en el análisis espectroscópico sea el mismo.
3. Se analizará la absorbancia de las soluciones usando un espectrómetro, para diferentes
longitudes de onda entre los 200 nm y 500 nm.
4. Usando la ley de Beer-Lambert law se relacionará la absorbancia con el coeficiente de
atenuación molar:
A = εcl
donde A: absorbancia 𝜀: absortividad molar ℓ: longitud de camino óptico y la absorbancia se
define como:
A =− log 10 ( II ) , Donde I es la irradiancia transmitida por la solución y I 0 es la irradiancia
0

incidente
5. De esta manera, se obtendrá una relación lineal de puntos (c, A(λ)) de la cual, por mínimos
cuadrados, se podrá obtener una relación para obtener ε(λ) .
Segunda parte:

1. Se preparará una solución de azúcar hidrolizada (azúcar invertida) calentando la sacarosa en

agua, de esta manera se obtendrá una solución de glucosa, fructosa y sacarosa. Como la
sacarosa está compuesta de 50% glucosa y 50% fructosa, la mezcla tendrá la misma
concentración molar de fructosa y glucosa, pero distinta de sacarosa.
2. Se medirá el coeficiente de absorción para distintas longitudes de onda, de manera que se
obtendrá un sistema de ecuaciones de la siguiente forma:
3
A(λ1 ) = l ∑ εi (λ1 )ci
i=1
3
A(λ2 ) = l ∑ εi (λ2 )ci
i=1
3
A(λ3 ) = l ∑ εi (λ3 )ci
i=1

Donde la i etiqueta a cada compuesto en la mezcla, de esta manera, como las absortividades
εi (λj), j = 1, 2, 3 se conocen gracias a la primera parte, el sistema se puede resolver para ci .

3. De esta manera, se espera comprobar que en una mezcla, el coeficiente de absorción es una
n
combinación lineal de los coeficientes de absorción de sus componentes (A = ∑ Ai )
i