MICOLOGÍA

CARACTERÍSTICAS
•Reino fungi.
•Células eucariotas inmóviles (cuerpo o soma:
thallo o talo) y osmótrofos (no poseen tubo
digestivo).
•Pueden ser unicelulares o pluricelulares
(incapaces de formar tejidos, cada célula
micótica aislada tiene independencia
metabólica).
•Requieren material orgánico para
desarrollarse. Son heterótrofos no fotosintéticos.
SAPRÓFITOS: Material orgánico inerte o en
descomposición. SIMBIÓTICOS: Se nutren de
seres vivos de mayor complejidad biológica.
 Utilizan la GLUCOSA como fuente de carbono
más usada y NITRÓGENO ORGÁNICO o
compuestos de AMONIO como fuentes de
nitrógeno.
 Las especies micóticas patógenas para el hombre
son AEROBIAS.
 Llevan a cabo su ciclo de vida en ambiente con
rangos de tº entre 10 y 60ºC (mesófilos: 10-50ºC y
termófilos: 20-58ºC).
 El PH de crecimiento varía entre 4.5 y 8.0 y
necesitan cierto grado de humedad
 ASOCIACIONES SIMBIÓTICAS
 MUTUALISMO.
Asociación obligatoria. Beneficio mutuo. Ej: Líquenes
y micorrizas.
 COMENSALISMO.

Asociación NO obligatoria. Hongo vive a expensas de

otro ser vivo sin perjudicarlo. Ej: Candida,
Trichosporon, Malassezia (flora humana normal en
piel o mucosas). Pueden causar cuadros infecciosos
OPORTUNISTAS.
 PARASITISMO.

Asociación heteroespecífica, no obligatoria. Uno de los

integrantes se hospeda y nutre del otro. Ocasionan
perjuicio. Causan MICOSIS.
 ESTRUCTURA DEL HONGO
 Pared micótica: Constituída por carbohidratos (quitina,
quitosano, glucanos a y b, manano, galactano y N-acetil
glucosamina) y glucoproteínas.
Función: Mantenimiento de la forma celular, protegiendo
al hongo del shock osmótico frente a medios hipotónicos.
 Membrana citoplasmática fosfolipoproteica. Dentro de
los lípidos la conforman los esteroles: ergosterol y
zimosterol.
Función: Participa de la formación de la pared, en la
absorción de nutrientes, el contenido lipídico varía de
una especie a otra y determina la susceptibilidad a
antimicóticos que actúan como detergentes poliénicos.
 Presencia de mitocondrias y retículo endoplásmico en el
citoplasma.
 Tienen membrana nuclear y cromosomas.
 MORFOLOGÍA DE LOS HONGOS
 Unicelulares: (Talo unicelular) o Levaduras.
 Pluricelulares: (Talo filamentoso) o Mohos, formados
por estructuras tubulares denominadas HIFAS. Se
forman a partir de una ESPORA que da lugar a un
TUBO GERMINAL y este a un FILAMENTO
TUBULAR. Cuando se ramifican forman el MICELIO
(masa algodonosa).

Espora Tubo germinal

Filamento tubular: Hifa
Micelio
TUBO GERMINAL DE
Candida albicans.
 Levaduras
Hifa sin tabiques: Cenocítico

Micelio

Levaduras: Gemación Hifa tabicada

 MICELIO

 Vegetativo: Fija al hongo al medio y se responsabiliza

de su nutrición y crecimiento. Asegura la absorción y
asimilación de elementos nutritivos y energéticos.
Hifa del sustrato o sumergida (en medio de cultivo
sólido).
 Aéreo o reproductor: “de fructificación”, son
responsables de la diseminación y conservación de la
especie. Posibilitan su reproducción local y a distancia
(esporos). Hifa rampante o superficial (en medio de
cultivo sólido).
 ESPORAS

 Mecanismo de reproducción (sexuados y asexuados).

 Membrana interna: ENDOSPORIA.

 Membrana externa: EXOSPORIA.

Identificación de hongos:
La estructura, formación y pigmentación de esporas
ayuda mucho.
Algunos hongos se originan a partir de la separación de
parte del micelio – gemación: LEVADURAS.
Otros hongos son DIMÓRFICOS: pueden aparecer en
forma de levaduras o micelial, depende de las
condiciones de desarrollo.
 MECANISMOS DE REPRODUCCIÓN

 Reproducción sexuada.
Reproducción de ESPORAS por fusión de 2 núcleos
haploides sexualmente diferentes. Se forma una
célula diploide: ZIGOTO. Por división meiótica
forma 4 células haploides: ESPORAS.
Se los llama HONGOS PERFECTOS. No es común en
hongos que producen patologías en humanos.
Esporas sexuales: ZIGOSPORAS (gametos similares
en el extremo de las hifas, OOSPORAS (gametos
diferentes en tamaño), ARCOSPORAS (unión de dos
hifas: ASCO con 4 a 8 esporas), BASIDIOSPORAS
(Fusión de 2 núcleos de una hifa, haploides. Forman
basidiosporas).
 OOSPORA
ASCOSPORA

BASIDIOS TETRA Y HEXASPÓRICOS

ZIGOSPORAS
 Reproducción asexuada:
1. No existen fusión de núcleos. Se generan los esporos
por un proceso mitótico de células haploides.
2. Hay un crecimiento de Micelio.

3. Se denominan HONGOS IMPERFECTOS.

Existen varios tipos:

 FRAGMENTACIÓN.

Fragmentación de hifas segmentadas dan lugar a una

nueva colonia.
 GEMACIÓN.

Formación de una yema por la célula madre y da lugar

a una célula hija.
 ESPORULACIÓN.

Se forman esporas que germinan posterirmente.

 TIPOS DE ESPORAS ASEXUALES

TALOSPORAS: Si se desarrollan directamente de la

célula vegetativa.
Existen tres tipos:
ARTROSPORAS.
Se forman por segmentación de las hifas.
BLASTOSPORAS.
Se forman por gemación sin separarse. Forman
pseudohifas o pseudomicelios.
CLAMIDOSPORAS.
Esporas grandes rodeadas de una pared gruesa. Son
también formas de resistencia.
 TIPOS DE ESPORAS ASEXUALES

 Otras esporas se originan de estructuras especializadas:

ESPORANGIOSPORAS.
Se forman dentro de estructuras saculares que se
encuentran en los extremos de las hifas no tabicadas.
CONIDIAS.
Se originan a partir de hifas por gemación, separándose
luego de ellas.
ALEURISPORA.
Similares a las anteriores pero se separan por ruptura del
septo.
 ESPORANGIOS

CONIDIOS
 CLASIFICACIÓN
 ZYGOMYCOTINA. Hongos filamentosos no tabicados.
Se reproducen por Zigosporas o por Oosporas. Ej: Mucor
(pan húmedo) y rhizospus (medio ambiente, alergias y
patógeno oportunista).
 ASCOMYCOTINA. Presentan micelios septados con:
Ascosporas sexuales, Conidias como esporas asexuadas.
Ej: Penicillium (saprófito), Microsporum (micosis
superficial), Histoplasma capsulatum (micosis
profunda), etc.
 BASIDIOMYCOTINA. Micelio septado. Produce
Basidiosporas. Ej: Cryptoccocus (en tierra pero puede
causar patología).
 DEUTEROMYCOTINA u HONGOS IMPERFECTOS.
Hongos filamentosos tabicados y levaduras. Se
reproducen de forma asexual por conidios. (algunos
causan patología y otros no).
 HONGOS DE IMPORTANCIA CLÍNICA

 Micosis cutáneas o superficiales (Piel, uñas o pelo).

 Micosis subcutáneas (Tejido subcutáneo).

 Micosis profundas o sistémicas (cualquier órgano,

fundamentalmente Pulmón).
 Micosis oportunistas (pacientes inmunodeprimidos,
causadas por hongos no patógenos en individuos
inmunocompetentes).
 MICOSIS

 MICOSIS CUTÁNEAS O SUPERFICIALES:

Pitiriasis o tiña versicolor. Malasezzia fufur. Dx:
Microscopía de escamas de la piel. Hongo de forma
oval e hifas pequeñas.
Tiña negra. Exophiala werneckii. Lesiones negro-
parduzcas en palmas de mano y pies. Cultivo:
colonias negras y brillantes. Microscopio: células
levuriformes verdes oliva.
Dermatomicosis. Producidas por hongos dermatofitos.
En piel, pelo y uñas. Penetran el tejido subcutáneo y
utilizan como fuente de nitrógeno la QUERATINA.
Tinea capitis, barbarea, unguium, cruris, corporis.
 MICOSIS
MICOSIS SUBCUTÁNEAS: Causadas por hongos que
se encuentran en forma saprófita en la naturaleza y de
forma accidental penetran al hombre.
Esporotricosis. Sporothrix schenckii. Penetra en el
hombre por pinchazos o espinas (esporas). Cultivo:
colonias de color crema, luego pardas o negras.
Crecimiento rápido.
Micetoma. Causada por diferentes especies de hongos
(actinomicetos por ej.). Puede diseminarse a otros
tejidos internos. Puede llegar a la amputación de la
extremidad afectada.
Cromoblastomicosis. Causada por diversos hongos de
pared pigmentada (dermatiáceos). Dermatitis
verrugosa. Afección crónica caracterizada por placas
verrugosas y tumefacciones subcutáneas blandas.
 MICOSIS
 MICOSIS SISTÉMICAS: Afecta a cualquier órgano.
Son DIMÓRFICOS (característica).
Histoplasmosis. Causada por Histoplasma capsulatum.
Afecta fundamentalmente a los pulmones. Inhalación.
Cultivo de crecimiento lento. Colonias blanco-grisáceas y
aspecto cremoso. Hifas pequeñas y entrelazadas.
Blastomicosis. Inhalación de conidios o hifas de
Blastomyces dermatitis. Afecta pulmones, piel y otros
tejidos. Cultivo: colonias blanquecinas con aspecto céreo.
Proyectan penachos hacia arriba (hifas tabicadas).
Coccidiomicosis. Causada por el hongo Coccidioides
immitis. Se transmite por inhalación. Afecta a los
pulmones principalmente. Se visualizan colonias
micelianas, brillantes, grises y húmedas
 MICOSIS
 MICOSIS OPORTUNISTAS: Afecta a personas
inmunosuprimidas.
Candidiasis. Candida albicans. Infección en varios órganos.
Microscopía: células levuriformes y/o pseudohifas.
Aspergilosis. Aspergillus fumigatus. Ampliamente distribuídos.
Ingresan por inhalación. Se disemina por todo el organismo.
Colonias esponjosas o granulares. De crecimiento rápido. Blancas
o azul-verdosas. Al microscopio se ven hifas tabicadas con
conidióforos.
Criptococosis. Cryptococcus neoformans. Produce meningitis en IS.
Ingresa por via inhalatoria. Puede provocar otras infecciones. Dx:
tinción con tinta china. Crecimiento rápido. Colonias blancas.
Zigomicosis. Causada por diversos tipos de hongos del suelo.
Inhalación de esporas. Necrosis de la zona afectada. Microscopía:
hifas sin tabicar. Cultivo: Crecimiento rápido. Colonias
blanquecinas, esponjosas y con hifas grandes, gruesas y
grisáceas.
FROTIS DE MICOSIS SUPERFICIAL DE UNA MUESTRA DE CANDIDIASIS
OROFARÍNGEA Y OTRA DE FLUJO VAGINAL. A LA DERECHA SE VE UN CORTE
HISTOLÓGICO EN EL CUAL SE VEN LEVADURAS; EN EL CENTRO, ABAJO, UN
EXAMEN DIRECTO DE UNA LEVADURA CON CÁPSULA, CON UNA PREPARACIÓN DE
TINTA CHINA, QUE CORRESPONDE A CRYPTOCOCCUS; ES UN CORTE HISTOLÓGICO
REALIZADO CON UNA TINCIÓN ESPECIAL PARA CRYPTOCOCCUS, LLAMADA
MUCICARMIN MAYER.
Corte histológico

Levadura con cápsula Mucicarmin Mayer

HONGO FILAMENTOSO, HIALINO, SEPTADO, EN MUESTRA DE MATERIAL PURULENTO;
SE VEN ELEMENTOS CELULARES POLIMORFONUCLEARES. SE PUEDE VER LA HIFA.
IMAGEN DE TIÑA INFLAMATORIA DEL CUERO CABELLUDO (KERION
DE CELSO) LAS TIÑAS DEL CUERO CABELLUDO, ESPECIALMENTE
EN SU FORMA INFLAMATORIA PUEDEN DAR LUGAR A UNA ALOPECIA
CICATRICIAL.
 MUESTRAS
 Secreciones respiratorias. Esputos, lavados bronquiales, aspirados
traqueales. Sembrar lo que más se pueda en presencia de
antibacterianos y antimicóticos (cicloheximida).
 LCR. Filtrado. Medio de cultivo sin antibacterianos ni antimicóticos.
Si es poco centrifugar y usar sedimento. Revisar todos los días.
 Sangre. Hemocultivos: Sist. Bifásico agar y caldo infusión cerebro
corazón. Lisar los hematíes y leucos y concentrar por centrifugación.
30 días a 30ºC.
 Orina. Frecuentemente contaminada. Centrifugar y sembrar en
medio con antibióticos. Muestra fresca.
 Tejidos. Homogeneizados y sembrados a 30ºC durante 30 días.
 Médula ósea. Se inocula directamente en el medio.
 Líquidos estériles. Concentrar por centrifugación y se siembra al
menos 1 ml.
 Piel, pelo y escamas de uñas. Raspado o pinzas para obtención de
muestras. Muy contaminadas. Incubar en medios con
antibacterianos y antimicóticos (Agar Mycosel) durante 30 días a
30ºC.
 MEDIOS DE CULTIVO
 Para el aislamiento de los Hongos se recomiendan:
1. Medios con y sin sangre.
2. Medios con y sin antimicótico (cicloheximida).
3. Medios con antibióticos.
AGAR SABOURAUD: Muy utilizado.
Se utilizan placas de petri o tubos con agar inclinado. Examinar 2 o 3
veces por semana a 30ºC o TA durante 30 días para informar
NEGATIVOS.
Cultivos más empleados:
Medios para aislamiento primario: Agar cerebro-corazón con
antibióticos y agar extracto levadura. Ailamiento hongos
patógenos (también se usa agar sangre y Sabouraud) excepto
dermatofitos (Agar Mycosel o Sabouraud con atb).
Medios diferenciales: Agar maíz con Tween 80 y azul triptano
(Candidas), agar semilla (criptococos), otros.
 MICROSCOPIA
 KOH. Muy utilizado para detección rápida de hongos. Aclara las
muestras.
 Tinta china. Pone de manifiesto las cápsulas.
 Coloración de mucicarmín. Tiñe de rosa brillante el polisacárido
capsular de algunos hongos.
 Tinción de metanamina plata. Mejor para muestras histológicas.
Tiñe las paredes de los hongos de color marrón oscuro.
 Tinción de ácido peryódico de Schiff. Una de las mejores. Tiñe la
mayoría de los hongos. Distingue entre hifas y levaduras.
 Blanco de calcoflúor. Produce fluorescencia.
 Tinción de Papanicolau. Además de identificar células malignas
también visualiza hongos.
 Tinción de Wright. Histoplasma capsulatum en MO y SP.
 Tinción de Gram. Hongos se tiñen como gram +
 ASPECTOS GENERALES DEL DIAGN.

 En general son de crecimiento lento.

 No se puede usar como único criterio de identificación la
caracterización macroscópica de las colonias.
 Microscópicamente se puede procesar la muestra de
diferentes maneras:
1. Examen en fresco. Porta y cubre – objetos (desventaja).
Gota de azul de lactofenol.
2. Cinta adhesiva de celofán. Portaobjeto, cinta adhesiva
y azul de lactofenol. Permite ver la forma microscópica
del cultivo.
3. Cultivo microscópico. Porta y cubre – objetos y pedazo
de agar con la colonia.
 IDENTIFICACIÓN DE LEVADURAS
 Métodos convencionales:
1. Prueba del tubo germinativo.
2. Morfología en el agar harina de maíz. Permite ver
blastoconidios.
3. Utilización de carbohidratos.
4. Detección de fenol oxidasa con agar semilla de níger (la
mayoría de Cryptococcus neoformans la produce).
 Métodos rápidos:
1. Ureasa (Detecta levaduras que producen ureasa:
Cryptococcus, Rhodotorula).
2. Nitrato reductasa.
3. Levodopa-citrato férrico (Cryptococcus neoformans da
positivo).
 Sistemas comercializados:
La mayoría se basan en utilización de sustratos. Otros se basan
en la degradación de carbohidratos o hidrólisis de sustancias.
COLONIAS DE HONGOS FILAMENTOSOS, LOS QUE SE IDENTIFICAN
PRINCIPALMENTE POR MICROMORFOLOGÍA. EN EL MICROCULTIVO SE
VE LA ESTRUCTURA.
IDENTIFICACIÓN DE HONGOS FILAMENTOSOS.
 Cultivos de levaduras que originan distintos tipos de colonias. Se muestra
el medio agar cromogénico; en este caso, es una fotografía del cromoagar,
donde algunas especies presentan colores particulares, característica muy
importante cuando se quiere determinar si más de una especie causa el
cuadro clínico o coloniza a un paciente. El tiempo en relación al agar
Sabouraud es el mismo, pero es mucho más fácil de trabajar.
Flujograma para Cryptococcus.
 La visualización y el aislamiento del hongo son el gold
standard.
 El examen microscópico directo es rápido, tarda
media hora y la sensibilidad depende del observador.
 El cultivo permite obtener mayor positividad, pero es
más lento; si es levadura demora 24 horas y, si es
filamentoso, varios días. Es importante la correlación
entre exámenes directos y cultivos; si se ven hifas,
deben crecer hongos peludos y, si se ven pseudohifas,
deben crecer levaduras.
 El diagnóstico molecular y PCR para hongos estarán
disponibles en un futuro próximo. Hasta ahora no hay
ningún sistema comercial, pero van a ser una
herramienta más de apoyo diagnóstico; no van a
reemplazar lo anterior. En cuanto a la visión de
futuro, lo ideal es que se pueda llegar a hacer de
inmediato inmunodiagnóstico o PCR en el paciente y
complementarlos con lo que tenemos disponible hoy
en nuestro laboratorio.