INFORME DE LABORATORIO

DETERMINACION DE LA CONCENTRANCION DE HIERRO EN

UNA MUESTRA LIQUIDA MEDIANTE LA TECNICA DE
ESPECTROSCOPIA DE ABSORCION ATOMICA

DANY ESTER CARABALLO LAZA

PEDRO LUIS VIDAL GONZALEZ
LUIS EDUARDO PALENCIA ANAYA
JUAN DAVID ALVARINO MORALES

M.S.C EDINELDO LANS

CURSO DE QUIMICA ANALITICA II

PROGRAMA DE QUIMICA
FACULTAD DE CIENCIAS BASICAS
UNIVERSIDAD DE CORDOBA
MONTERIA - CORDOBA
2016
1. INTRODUCCIÓN
En el siguiente informe mostraremos como determinar la concentración de hierro en una
muestra a través de la técnica de espectroscopia de absorción atómica. El presente
procedimiento puede aplicarse para la calibración, de otros metales también en unas
condiciones experimentales determinadas, de Espectrofotómetros de Absorción Atómica (con
sus correspondientes accesorios instrumentales: generadores de hidruros, inyectores
automáticos…), tanto los que verifican la atomización por la acción de una llama o mediante
una cámara de grafito. Dicha calibración, por corresponder a un equipo que constituye un
sistema instrumental complejo y por tratarse de una técnica espectrofotométrica, se lleva a
cabo por interpolación sobre la correspondiente recta de regresión. Por otra parte, hay que
tener en cuenta que, para poder aplicar la correspondiente calibración para el desarrollo de la
determinación analítica de un elemento, debe efectuarse un tratamiento análogo de los
patrones y de las muestras y, además, deben coincidir lo más posible las naturalezas químicas
de sus matrices.
2. OBJETIVOS

Objetivo General
Determinar el contenido de un metal en una muestra problema, empleando el método de
absorción atómica.

Objetivos Específicos
Aprender el funcionamiento y uso de un instrumento de absorción atómica.
Analizar la relación que existe entre la absorción de radiación y la concentración de un ion
metálico en solución.
Realizar una curva de calibrado para ciertos estándares de hierro.
3. MARCO TEORICO
a. Espectroscopia de Absorción Atómica: Esta técnica está basada en el fenómeno de
absorción de la luz de determinadas longitudes de onda por parte de átomos vaporizados en
estado de reposo. Las bandas de absorción son muy estrechas, por lo cual el espectro total de
absorción de un átomo se define como espectro de líneas. El elemento en estudio es situado
en una llama, donde es disociado de sus enlaces químicos y, por ganancia de electrones, se
sitúa en un estado atómico base neutro no excitado ni ionizado. La sensibilidad de los métodos
atómicos está dentro de los límites de partes por millón a partes por mil millones, partes por
billón (ppb). Las ventajas adicionales de estos métodos son rapidez, conveniencia,
selectividad inusualmente elevada y costos moderados de los instrumentos. La determinación
espectroscópica de especies atómicas sólo se puede llevar a cabo dentro de un medio gaseoso,
en el cual los átomos individuales están separados unos de los otros. Consecuentemente, el
primer paso en todos los procedimientos espectroscópicos es la atomización, un proceso en el
cual la muestra es volatilizada y descompuesta para producir un gas atómico. La eficiencia y
reproducibilidad del paso de
atomización determina en
gran parte la sensibilidad,
precisión y exactitud del
método, es decir, la
atomización es, con mucho,
el paso más importante en la
espectroscopia atómica.
Descripción de la técnica de EAA.
La técnica de absorción atómica en flama en una forma concisa consta de lo siguiente: la
muestra en forma líquida es aspirada a través de un tubo capilar y conducida a un nebulizador
donde ésta se desintegra y forma un rocío o pequeñas gotas de líquido. Las gotas formadas
son conducidas a una flama, donde se produce una serie de eventos que originan la formación
de átomos. Estos átomos absorben cualitativamente la radiación emitida por la lámpara y la
cantidad de radiación absorbida está en función de su concentración.
La señal de la lámpara una vez que pasa por la flama llega a un monocromador, que tiene
como finalidad el discriminar todas las señales que acompañan la línea de interés. Esta señal
de radiación electromagnética llega a un detector o transductor y pasa a un amplificador y por
último a un sistema de lectura.
Componentes:
 Una fuente de radiación que emita una línea específica correspondiente a la necesaria
para efectuar una transición en los átomos del elemento analizado.
 Un nebulizador, que, por aspiración de la muestra líquida, forme pequeñas gotas para
una atomización más eficiente.
 Un Quemador, en el cual por efecto de la temperatura alcanzada en la combustión y por
la reacción de combustión misma, se favorezca la formación de átomos a partir de los
componentes en solución.
 Un sistema óptico que separe la radiación de longitud de onda de interés, de todas las
demás radiaciones que entran a dicho sistema.
 Un detector o transductor, que sea capaz de transformar, en relación proporcional, las
señales de intensidad de radiación electromagnética, en señales eléctricas o de intensidad
de corriente.
 Un amplificador o sistema electrónico, que como su nombre lo indica amplifica la señal
eléctrica producida, para que en el siguiente paso pueda ser procesada con circuitos y
sistemas electrónicos comunes.
 Por último, se requiere de un sistema de lectura en el cual la señal de intensidad de
corriente, sea convertida a una señal que el operario pueda interpretar (ejemplo:
transmitancia o absorbancia). Este sistema de lectura, puede ser una escala de aguja, una
escala de dígitos, un graficador, una serie de datos que pueden ser procesados a su vez
por una computadora, etc.

Fuente de radiación: La fuente es muy diferente a las utilizadas en espectroscopia

molecular, las bandas son lo suficientemente anchas para permitir el uso de una fuente
continua y un monocromador. La línea de absorción atómica en una llama u horno es más
angosta que la banda. En los instrumentos de absorción atómica se utilizan dos tipos de
lámpara: lámparas de cátodo hueco y lámparas de
descarga sin electrodos.
 Lámparas de descarga sin electrodo: En los
comercios es posible conseguir lámparas de
descarga sin electrodo para diversos elementos. Sin
embargo, su desempeño aparentemente no es tan
confiable como el de la lámpara de cátodo hueco.
 Lámparas de cátodo hueco: la fuente de radiación más útil para la espectroscopia de
absorción atómica es la lámpara de cátodo hueco, que
se muestra en la figura 3. Consiste en un ánodo de
tungsteno y un cátodo cilíndrico sellado en un tubo de
vidrio que contiene un gas inerte, por ejemplo, argón,
a presión de 1 a 5 torr. El cátodo es fabricado con el
metal del analito o puede servir como soporte para un
recubrimiento de ese metal.

Atomizadores de llama: Para conseguir que los átomos absorban radiación hay que
obtener una población de estos al estado basal a partir de la solución de una muestra, cuya
absorbancia esté relacionada en forma sencilla con la concentración del analito en la solución
esto se puede lograr con una llama.
Propiedades de la llama. Cuando una muestra nebulizada se
lleva al interior de una llama, el disolvente se evapora en la
zona de combustión primaria de la llama, la cual está
localizada justamente arriba de la punta del quemador. Las
partículas sólidas finamente divididas resultantes son
llevadas a una región en el centro de la llama, denominada
región interzonal. Aquí, en la parte más caliente de la llama,
se forman los átomos gaseosos y los iones elementales a
partir de las partículas sólidas. En esta región también se
lleva a cabo la excitación del espectro atómico de emisión.
Finalmente, los átomos y los iones son llevados al borde
exterior, o a la zona de combustión secundaria, en donde la oxidación se puede presentar antes
de que los productos de la atomización se dispersen en la atmósfera.

Quemador de flujo laminar o de pre mezcla:

la muestra es nebulizada por el flujo de
oxidante, una vez pasado el extremo del capilar.
El aerosol resultante se mezcla con el
combustible y pasa a través de una serie de
deflectores, que eliminan las gotas que no sean
muy finas. Debido a estos deflectores la mayor
parte de la muestra se reúne en el fondo de la
cámara de mezcla, de donde se envía a un
recolector de deshechos. El aerosol, el oxidante
y el combustible, se queman en la ranura de un
quemador, que produce una llama que
generalmente tiene 5 ó 10 cm de longitud. Los quemadores de flujo laminar producen una
llama relativamente estable y un recorrido mayor, lo cual aumentan la sensibilidad. Además,
la obstrucción rara vez constituye un problema.
Monocromador: Los de uso más frecuente en absorción atómica son los prismas y rendijas.
Instrumento de lectura: Puede ser un galvanómetro sencillo, un voltímetro digital, un
potenciómetro registrador, una computadora con salida digital del amplificador. Un
instrumento de absorción atómica contiene los mismos componentes básicos que un
instrumento diseñado para las mediciones de absorción molecular: una fuente, un contenedor
de la muestra, un selector de longitud de onda y un detector/sistema para la lectura. Algunos
fabricantes ofrecen instrumentos tanto de simple haz como de doble haz.
b. Instrumento de EAA utilizado en la experimentación:

Thermo S Series AA Spectrometer

c. Método del estándar externo o calibración sencilla:

La calibración se consigue al obtener la señal de respuesta (absorbancia, altura del pico, área
del pico) en función de la concentración conocida del analito. Una curva de calibración se
prepara con una gráfica de los datos o ajustándoles una ecuación matemática aceptable, como
la ecuación de la recta dada por la pendiente y la ordenada al origen que se usa en el método
de los mínimos cuadrados lineales.
El paso siguiente es la etapa de predicción, en la que se obtiene la señal de respuesta para la
muestra y se usa para predecirla concentración desconocida del analito, Cx, a partir de la curva
de calibración o de la ecuación de mejor ajuste. La concentración del analito en la muestra
original se calcula luego mediante Cx aplicando los factores de dilución convenientes tomados
de los pasos que se siguieron para preparar la muestra.
El análisis de regresión proporciona los medios para obtener en forma objetiva dicha recta, y
también para especificar la incertidumbre asociada con el uso posterior. Esta incertidumbre se
relaciona con los residuos que se muestran en la figura anterior, los cuales son una medida de
qué tan lejos de la recta de mejor ajuste quedan los datos.

La relación matemática que representa esta suposición se llama modelo de regresión, y se

podría representar con

y = mx + b
donde b es la ordenada al origen o intersección con el eje y, es decir, el valor de y cuando x
es cero, y m es la pendiente de la recta

Para determinar una concentración desconocida cx a partir de la recta de mínimos cuadrados,

se obtiene el valor de la respuesta del instrumento yc para la incógnita, y la pendiente y la
ordenada al origen se usan para calcular la concentración desconocida cx como se muestra en
la siguiente ecuación:
yx − b
Cx =
m
En los casos en que los datos no se ajustan a un modelo lineal, entonces se puede recurrir a
los métodos de regresión no lineal. Algunos de éstos utilizan modelos polinomiales o
procedimientos de regresión múltiple.

Para la construcción del modelo de regresión se utilizó el software Microsoft Office: Excel
2016.
4. PROCEDIMIENTO

Materiales
4 balones aforados de 25 ml.
1 balón aforado de 50 ml.
2 pipetas transfer de 1000 µl y 200 µl
Sln madre de 1000 mg Fe/L

Preparación de Estándares:
Se preparan una solución intermedia de 5 mg/L apartir de una solución madre de 1000mg
Fe/L para preparar una solución de 0,1 mg/L.
Para concluir el proceso de preparación de soluciones se tabula el procedimiento.

Estándar Vol. a extraer(µl) Sln a extraer C. de estándares(mg/L)

1 125 Sln intermedia de 5 mg/L 0,1
2 25 Sln madre de 1000 mg/L 1
3 50 Sln madre de 1000 mg/L 2
4 75 Sln madre de 1000 mg/L 3

Posteriormente se dispone a hacer el análisis de absorción atómica de la muestra, en

supervisión del auxiliar.
5. ANÁLISIS Y RESULTADOS
Parámetros del Análisis de Hierro (Fe)
Para la determinación de hierro por el método de llama por absorción atómica se adoptaron
parámetros instrumentales, los cuales ayudan a eliminar posibles interferencias para una
normal medición del analito de interés. Estos parámetros son los siguientes:
Longitud de Onda(λ): 248.2 nm
Ancho de Banda: 0,2
Tipo de llama: Aire/Acetileno

Curva de calibración de estándar de absorción atómica

Una vez realizados los estándares requeridos de la manera que se indica en el procedimiento,
el equipo de absorción atómica S Series AA Spectrometer mostro los siguientes resultados
después de hacer realizar las gráficas pertinentes.

Hierro
De acuerdo a los datos de absorbancia medidos a una longitud de onda de λ= 248,2nm, se
reportan en la tabla 1, la curva de calibración se muestra en la figura 1.
Tabla 1. Curva de calibración para análisis de Hierro

Análisis de Fe
ID Muestra mg/L Abs
Blanco 1 0 -0,004
Blanco 2 0 -0,0018
Estándar 1 0,1 0,005
Estándar 2 1 0,072
Estándar 3 2 0,144
Estándar 4 3 0,221
Muestra N°2 X 0,152
Figura 1. Curva de calibración para análisis de Hierro

0.25

0.2 y = 0,0745x - 0,0033

R² = 0,9999
ABSORBANCIA

0.15

0.1 Series1

0.05
Linear
0 (Series1)
0 1 2 3 4
-0.05
CONCENTRACION DE FE(MG/L)
Esta es una curva de calibración representativa de múltiples ensayos realizados para
determinar éste, como rango de trabajo único.
Con el fin de obtener siempre la linealidad de la curva de calibración se optimización
parámetros del espectrofotómetro como son la altura del quemador y el flujo de gas para
obtener una sensibilidad mayor en el método así:
Altura del quemador: 9,4 mm
Flujo de gas: 0,9 L/min
Para dar como aceptada una curva de calibración el ajuste lineal de la misma no debe ser
inferir a 0,9950 con lo que se está garantizando una adecuada correlación entre patrones que
componen la curva y asegurando como cuantificación correcta al momento de leer cualquier
muestra.

Determinación de la concentración de la muestra problema.

En este caso se empleó para el cálculo de las concentraciones la ecuación 1, resultante del
despeje modelo de regresión lineal aplicado a los datos reportados de hierro.
𝐴𝑏𝑠 + 0,0033
𝐶=
0,0745
Ecuación 1. Concentracion de Hierro
C: Concentración en mg Fe/L
Abs: Absorbancia de la muestra = 0,152
𝟎, 𝟏𝟓𝟐 + 𝟎, 𝟎𝟎𝟑𝟑
𝑪= = 𝟐, 𝟎𝟖𝟒𝟓 𝒎𝒈 𝑭𝒆/𝑳
𝟎, 𝟎𝟕𝟒𝟓
La concentración de Fe en la muestra problema es de 2,0845 mg/L y de acuerdo al factor de
correlación (R2) resultante de los datos con un valor de 0,9999; se puede concluir que los
resultados arrojados por el equipo de absorción atómica con este estándar son confiables.

Análisis Estadístico
Error de estimación del método de curva de calibrado:

x y x2 y2 xy
0,1 0,005 0,01 0,000025 0,0005
1 0,072 1 0,005184 0,072
2 0,144 4 0,020736 0,288
3 0,221 9 0,048841 0,663
Suma 6,1 0,442 14,01 0,074786 1,0235
Ecuación 2. Desviación estándar de Y y X en el modelo de regresión: 𝑺𝒚,𝒙 :

∑ 𝑌 2 −𝑏 ∑ 𝑌−𝑚 ∑ 𝑋𝑌
𝑆𝑦,𝑥 = √ = 0,001424
𝑛−2

Ecuación 3. Desviación estándar de la pendiente(m) en el modelo de regresión: 𝑺𝒎 :

𝑛
𝑆𝑚 = 𝑆𝑦,𝑥 √𝑛 ∑ 𝑋 2 −(∑ 𝑋)2 = 0,000764

Ecuación 4. Desviación estándar del intercepto(b) en el modelo de regresión: 𝑺𝒃 :

∑ 𝑋2
𝑆𝑏 = 𝑆𝑦 √ =0,002453
𝑛 ∑ 𝑋 2 −(∑ 𝑋)2

Sensibilidad: La sensibilidad de la espectrometría de absorción atómica de llama se define

como la concentración de metal que produce una absorción de 1% (una absorbancia de
aproximadamente 0,0044)
Para determinar la sensibilidad se utiliza la siguiente ecuación:
𝟎, 𝟎𝟎𝟒𝟒
𝑺=
𝒎
Ecuación 5. Sensibilidad del método
S: Sensibilidad.
m: Pendiente de la curva de calibración
0,0044: es la mínima señal que produce un 1% de concentración del analito
0,0044
Entonces: 𝑆 = 0,0745 = 0,05906 𝑚𝑔 𝐹𝑒/𝐿

Este valor correspondería al factor de respuesta del instrumento en función de la

concentración.
Límite de Detección Instrumental: La definición cuantitativa más aceptada para el límite de
detección es la mínima concentración o la mínima masa de analito que se puede detectar para
un nivel de confianza dado. Este límite depende de la relación entre la magnitud de la señal
analítica y el valor de las fluctuaciones estadísticas de la señal del blanco.
Tabla 2. Datos para el límite de detección.

Blanco Abs del Blanco

1 -0,004
2 -0,0018
Promedio -0,0029
D. Estándar 0,001556
Para determinar el límite de detección se emplean las siguientes formulas
𝑆𝑚 = 𝑆𝑏𝑙 + 𝑘𝑆𝑏𝑙
Ecuación 6. Mínima señal distinguible
𝑆𝑚 − 𝑆𝑝𝑟𝑜𝑚𝑒𝑑𝑖𝑜(𝑏𝑙)
𝐶𝑚 =
𝑚
Ecuación 7. Límite de detección
Donde:
𝑆𝑚 : Mínima señal distinguible.
𝑆𝑏𝑙 : Señal promedio del blanco
K : Constante de nivel de confianza igual a 3
𝑠𝑏𝑙 : Desviación estándar de las mediciones del blanco
m: Pendiente de la curva
Cm : Limite de detección

Entonces:
𝑆𝑚 = −0,0029 + 3(0,001556) = 0,001766 𝑈𝐴
0,001766 − (−0,0029)
𝐶𝑚 = = 0,062 𝑚𝑔 𝐹𝑒/𝐿
0,0745
Para el límite de detección instrumental se obtuvo una concentración de 0,062 mg Fe/L, lo
que corresponde a la cantidad de analito que da una respuesta significativamente diferente al
blanco o al ruido de una solución que no contiene el analito.
Se tabulan todos los parámetros estadísticos obtenidos para simplificar el análisis:

PARAMETRO
Desviación estándar de Y y X 0,001424
Desviación estándar de la pendiente 0,000764
Desviación estándar del intercepto 0,002453
Sensibilidad 0,05906 mg/L
Límite de Detección Instrumental (L.D.I) 0,062 mg/L
6. Conclusión
A través de los métodos usados podemos decir que se llegó al objetivo de cuantificar el Fe
presente en la muestra de estudio. La técnica de EAA proporciono resultados exactos en la
cuantificación de hierro obteniéndose un factor de correlación aceptable de 0,9999, se infiere
que para poder validar el método analítico mediante EAA es necesario mejorar la forma en
que se emplea el método, de manera que se debe minimizar al máximo los errores humanos,
como posible error la preparación de soluciones, efectos de matriz (en caso de ser matrices
complejas), lavado de recipientes, entre otros factores.

7. Bibliografía
 Principios de análisis instrumental. Skoog Holler 6°Ed –Espectroscopia de Absorción
Atómica Pag 260-268
 Validación de la metodología por el método estándar 3111ª – Absorción Atómica para el
análisis de metales pesados en muestras de aguas y aguas residuales – Escuela
tecnológica de química
http://repositorio.utp.edu.co/dspace/bitstream/11059/3141/1/5430858G633.pdf