¿Por qué el alcohol decolora rápidamente las bacterias Gram negativas?

Cuando se añade etanol a una mezcla de células Gram positivas y Gram negativas
teñidas con cristal violeta, las células Gram positivas quedan teñidas de violeta : no
puede atravesar la gruesa capa de mureína (pueden hacerlo si se prolonga
excesivamente el contacto con el alcohol). La pared de las bacterias Gram negativas
debe su rigidez a una capa de mureína mas delgada, a través de la cual el alcohol
extrae el cristal violeta de estas células. Su citoplasma queda incoloro y puede teñirse
de color rosa con el colorante de contraste: la safranina

Las bacterias Gram negativas pierden un colorante (el cristal violeta) con mayor
facilidad que las Gram positivas. La razón es la menor cantidad de mucopéptido de
las paredes de las bacterias Gram negativas-esquema

¿Qué sucede cuando germina una Endospora?

La germinación es el proceso general que convierte una espora en unacélula

vegetativa, se distinguen 4 etapas:1)Preactivación.2)Activación.3)Iniciación
(germinación).4)Crecimiento
Tamaño: Invisibles al ojo humano, las bacterias se miden en µm que equivale a
10-3 mm. El tamaño de las bacterias varía dependiendo de las especies entre
menos de 1 µm y 250 µm; siendo lo más habitual entre 1 y 10 µm. Una
característica de las células bacterianas es la alta proporción que existe entre el
área de la superficie y el volumen de la célula. Esto significa que poseen una gran
superficie a través de la cual pueden entrar nutrientes para alimentar a un
pequeño volumen; con lo cual pueden realizar muchas reacciones metabólicas y
crecer rápidamente. Así, por ejemplo Escherichia coli tarda 20 minutos en
dividirse mientras que una célula de mamífero en laboratorio tarda de 13 a 24
horas.

B.- Forma: La forma de una bacteria viene determinada por la rigidez de su

pared celular. Las bacterias poseen una de las tres formas fundamentales:
esférica, cilíndrica o espiral. Las células esféricas se denominan cocos y suelen
ser redondeadas aunque pueden ser ovoides o elípticas. A las de forma cilíndrica
se las denomina bacilos. Los extremos de estas células suelen ser redondeados,
rectos, en forma de huso o cuerno. A las de forma espiral o helicoidal se las
denomina espirilos y se caracterizan por su forma de sacacorchos. Existen
modificaciones a estas tres formas fundamentales y aunque la mayor parte de las
bacterias mantienen constante su forma, algunas especies pueden variar la forma
por lo que se les llama pleomórficas. Arthrobacter es un ejemplo de
pleomorfismo debido a que su forma cambia en función de la edad del cultivo.
También exhiben pleomorfismo aquellas bacterias que no poseen pared celular
como es el caso de los micoplasmas. Otro ejemplo son las formas L que son
bacterias que carecen de pared celular debido a una situación de estrés (choque
térmico u osmótico, antibióticos, etc.), pero cuando cesa el estrés sintetizan de
nuevo la pared celular. Debido a que la forma es un carácter taxonómico, el
pleomorfismo puede inducirnos a confusión ya que podemos pensar que un
cultivo está contaminado con otro tipo de bacterias. Sin embargo, el
pleomorfismo no suele ser lo más frecuente.

C.- Disposición: Muchas veces al mirar al microscopio se observan las células

unidas unas a otras. Mientras que las bacterias de forma espiral (espirilos) suelen
ser células separadas, otras especies suelen crecer en una disposición
característica, disposición que va a depender del plano en el que se realice la
división celular y si la célula hija permanece junto a la célula madre una vez
realizada la división celular. Cada una de estas disposiciones es típica de una
especie particular y puede usarse en identificación. Hay que tener en cuenta que
raramente todas las células de una especie se disponen exactamente de la misma
manera; por lo que hay que tener en cuenta la disposición predominante cuando
se estudian las bacterias.

Cuando un coco se divide en un plano forma un diplococo o dos células juntas

(Neisseria). Cuando un coco se divide en un plano y permanece unido después de
varias divisiones formando una cadena se denomina estreptococo
(Streptococcus). Si las células se dividen en más de un plano o dimensión la
disposición es más complicada. Cuando un coco se divide en ángulo recto al
primer plano de división forma tétradas o tetracocos (Pediococcus). Una
posterior división en el tercer plano puede resultar en un paquete cúbico de ocho
células conocido como sarcinas (Sarcina). Si la división en los tres planos es de
forma irregular se forman racimos de uva (Staphylococcus).

Los bacilos generalmente no se agrupan en disposiciones características, aunque

hay excepciones. Por ejemplo, el bacilo de la difteria tiende a agruparse en
empalizada. Las células del género Caulobacter (bacilo acuático) crece en roseta
sobre rocas y superficies similares. Dentro del género Bacillus algunas especies
forman cadenas y se llaman estreptobacilos.
También existen bacterias ramificadas como son los actinomicetos y ya hemos
descrito las formas pleomórficas.

II.- ULTRAESTRUCTURAS BACTERIANAS

Las técnicas de microscopía revelan que una célula bacteriana está formada por
diversas estructuras que funcionan conjuntamente. Algunas de estas estructuras
se encuentran unidas a la superficie de la pared celular, mientras que otras se
encuentran dentro de la célula. Algunas son comunes a todas las células com son
el citoplasma y la membrana citoplasmática; mientras que otras estructuras están
presentes sólo en ciertas especies o aparecen en determinadas condiciones
ambientales.

Una típica célula bacteriana contiene las siguientes estructuras:

1.- Glicocalix: está compuesta de polímeros

2.- Pared celular: separa a la bacteria del medio que la rodea. Suele ser rígida y es
de naturaleza glúcido-lípido-proteica.
3.- Periplasma: espacio entre la pared celular y membrana citoplasmática.
4.- Membrana citoplasmática: separa el citoplasma de la pared celular. Está
compuesta de proteínas y lípidos.
5.- Citoplasma: es una solución coloidal que contiene elementos nucleares,
inclusiones citoplasmáticas (vacuolas, vesículas, etc.) y ribosomas.
6.- Flagelos: nacen en el citoplasma y son estructuras de locomoción. Están
compuestos de proteína (flagelina).
7.- Fimbrias o pili: formaciones piliformes que nacen en el citoplasma. Están
compuestos de proteína (pilina).

GLICOCALIX

Algunas células bacterianas están rodeadas por una capa de material viscoso
llamada glicocalix. Este glicocalix está compuesto por polímeros de azúcares
(polisacáridos). Si el glicocalix está organizado en una estructura definida y está
unido firmemente a la pared celular se denomina cápsula. Si por el contrario está
desorganizado, sin una forma definida y no está firmemente unido a la pared
celular se denomina capa mucilaginosa.
Composición: polisacáridos y en menor proporción polipéptidos.

Función: Existen diferentes funciones dependiendo de la especie bacteriana:

Adherencia: es la principal. Streptococcus mutans se adhiere a través de la

cápsula a la superficie de los dientes originando caries. Sin la cápsula el
microorganismo se elimina fácilmente con la saliva.

Resistencia a la desecación: las cápsulas poseen muchos grupos polares que al

retener moléculas de H2O protegen a la célula frente a la desecación.

Material de reserva.

Patogenicidad y virulencia: los neumococos sin cápsula son avirulentos.

PARED CELULAR

La pared celular de los organismos procariotas es una estructura rígida que

mantiene la forma característica de cada célula bacteriana. Dependiendo de las
especies y de las condiciones de cultivo, la pared celular puede suponer desde el
10% al 40% del peso seco de la célula.

Composición química y propiedades de la pared celular bacteriana: las

paredes celulares no son estructuras homogéneas sino que poseen distintas capas
que varían según el tipo de bacteria, existiendo diferencias tanto en su grosor
como composición. Estas diferencias se utilizan para identificar y clasificar las
bacterias, así como diferenciarlas mediante la tinción de Gram.

La pared celular de las bacterias Gram (-) es más delgada (10 - 15 nm) que la de
las Gram (+) (20 - 25 nm). Tanto las bacterias Gram (+) como las Gram (-)
poseen un heteropolímero conocido como peptidoglucano o mureína, responsable
de la rigidez y fuerza mecánica de la pared celular, de la forma bacteriana y de la
resistencia a la lisis osmótica. Es una red bidimensional que rodea a la célula a
modo de saco. Existe prácticamente en todas las bacterias y es exclusivo de
procariotas. Si bien existen más de 100 peptidoglucanos distintos, su estructura
básica está compuesta por tres componentes:

1.- N-acetilglucosamina (NAG)

2.- Acido N-acetilmurámico (NAM)
3.- Péptido de 4 aminoácidos o tetrapéptido, algunos de los cuales son D-
aminoácidos.

Para formar una estructura rígida alrededor de la célula, el tetrapéptido de una

cadena se une al de otra a través de un enlace peptídico entre la D-alanina y el
ácido meso-diaminopimélico. Algunas zonas del peptidoglucano son abiertas por
enzimas bacterianos llamados autolisinas para que así se puedan añadir más
polímeros y la célula pueda crecer y dividirse.

A parte de dar forma a la célula bacteriana, la pared celular sirve como barrera
para algunas sustancias impidiendo que penetren dentro de la célula y
permitiendo el paso a otras. La importancia de la pared celular se comprende en
parte gracias a experimentos usando enzimas que la degradan. La pared celular
de una bacteria Gram (+) se destruye completamente con el uso de estos enzimas
obteniéndose unas células esféricas llamadas protoplastos. La pared celular de las
Gram (-) es más resistente a este tratamiento, manteniendo restos de su pared
celular originando esferoplastos. Tanto los protoplastos como los esferoplastos se
lisan si los colocamos en un medio hipotónico.

Pared celular de las bacterias Gram (+): Contiene una sola capa compuesta de
peptidoglucano y ácidos teicoicos que son polímeros de glicerol o ribitol fosfatos
que se unen al peptidoglucano o a la membrana citoplasmática. Al estar cargados
(-) pueden ayudar en el transporte de iones (+).

Pared celular de las bacterias Gram (-): Contiene dos capas, una membrana
externa y una capa de peptidoglucano. El espacio que existe entre la membrana
citoplasmática y la membrana externa se denomina espacio periplásmico. La
capa característica de las Gram (-) es la membrana externa que actúa como
barrera selectiva al paso de algunas sustancias. Su estructura básica es una bicapa
lipídica que contiene fosfolípidos (capa interna), lipopolisacáridos y proteínas
(capa externa). Esta bicapa está unida al peptidoglucano a través de lipoproteínas.
De todos estos componentes, los lipopolisacáridos (LPS) son característicos de
las bacterias Gram (-) y sólo se encuentran en la membrana externa. Los LPS
están compuestos de tres partes unidas covalentemente:
1.- Lípido A, localizado en la parte interna; compuesto por un disacárido de
glucosamina fosforilado con ácidos grasos de cadena larga.
2.- Núcleo polisacarídico, localizado en la superficie de la membrana; compuesto
por azúcares y KDO (ketodeoxioctónico).
3.- Antígeno O, localizado fuera de la membrana; compuesto por polisacáridos
que contienen azúcares comunes como galactosa y otros exclusivos de bacterias
como la abecuosa.

Germinación | Contenidos

El proceso por el cual las esporas pasan a formar células vegetativas se

denomina germinación. Ocurre cuando se las coloca en el medio
adecuado y se requiere en muchos casos la disponibilidad, entre otros,
de glucosa, aminoácidos y nucleósidos. Es posible elevar el porcentaje
de esporas que germinan con un shock térmico.

Entre los fenómenos de la germinación destaquemos:

perdida de la resistencia térmica

aparición de la respiración
aparición de actividad enzimática
excreción de ácido dipicolínico, péptidos y aminoácidos
ruptura de las cubiertas y aparición del "tubo germinativo"(origen de la célula
vegetativa)

A este punto

la pared celular de la célula emergente esta incompleta

la coloración de Gram por lo tanto no es la definitiva
hay permeabilidad a moléculas como el ADN (lo cual facilita fenómenos de
transformación)