TALLER N° 2

AMINOÁCIDOS Y PUNTO ISOELÉCTRICO

1. Escribir la forma que presenta cada uno de los siguientes aminoácidos a pH 7:

isoleucina (Pka:2,36 y 9,68)
tirosina (Pka: 2,2; 9,11 y 10,07)
treonina (Pka: 2,11; 9,62 y 13,6)
glutámico (Pka: 2,19; 9,67 y 4,25)
arginina (Pka: 2,17; 9,04 y 12,48).

2. Escribir los posibles estados de ionización de los siguientes aminoácidos:

• Ácido glutámico
• Histidina
• Serina
b) Calcular el punto isoeléctrico de cada uno de ellos.

3. Dado el siguiente tripéptido: DKAYM

a) Escribir las diferentes formas de ionización
b) Indicar la estructura que predomina a pH 4.
c) Calcular el pI del tripéptido
d) Indicar la carga del péptido a pH 4 y 12.

4. Se preparó un tampón 30mM a pH semejante al que existe en el interior de la célula hepática

(6,65), para lo cual se utilizó histidina:
a) ¿Cuántos gramos de histidina son necesarios para preparar el tampón? (pm=155,2)
b) ¿Cuáles son las concentraciones de las especies iónicas presentes en la solución tampón?

5. Se llevó a cabo una electroforesis sobre papel de una mezcla de Gli, Ala, Glu, Lis, Arg. Indicar su
estado de ionización y su movilidad electroforética a pH=2, pH=6 y pH=9.

6. Se realiza una cromatografía de intercambio iónico en columna, rellena con una resina de
cargada positivamente. Se le añade una mezcla de Lis, Arg,Asp, Glu, Tir y Ala a pH=10. Predecir el
orden de elución de los aminoácidos por tratamiento de la resina con disoluciones a pH
sucesivamente decrecientes.

7. De un hidrolizado proteico se han separado los siguientes péptidos, de los que se han valorado
los pKa de sus grupos ionizables, obteniéndose los siguientes valores:
Asp-Gli (2.2; 4.5;9.1)
Ala-Lis-Ala (3.3;8.0;10.6)
Gli-Glu-Lis-Ala (3.3;4.1;8.2;10.5)

Calcular su pI e indicar el pH al que debería realizarse una electroforesis para separarlos.