PROCEDIMIENTO

Se inicia tomando una muestra de 10 gramos de suelo los cuales se adicionan a 90mL de
Agua pectinada Estéril (APE). Esta es la solución madre, de donde al tomar 1mL y
depositarlos en 9mL de APE se prepara la primer dilución 10-1, a partir de esta se lleva a
cabo las siguientes diluciones sucesivas hasta llegar a 10-6. Luego, se siembra 0,1mL de las
concentraciones 10-4, 10-5, 10-6, las cuales son concentraciones para (hongos,
actinomicetos y bacterias). Finalmente se lleva a Incubación durante 3-5 días para hongos,
5-8 dias para actinomicetos y a 48 horas para bacterias a 30°C, temperatura óptima para el
crecimiento de microorganismos mesófilos como son la mayoría de Actinomicetos,
(Stanley, 1994; Ramírez, L 2000). En la Figura 6 se presenta un esquema del proceso.

ETIQUETADO DE LA MUESTRA

Nombre Nomb Municip Lote Cultivo Área de Disponibilidad Fertilizant

propietar re de io donde anterior y superfic de residuos es o
io la se cultivo a ie enmienda
finca tomó sembrar s
la aplicadas
muest en el
ra cultivo
anterior
Andres Diana- Villa del Luis aromática 1 Aromáticas(alb Urea y
Gonzale karina rosario carlos s- hectarea aca y látigo
s galán hortalizas altamisas) para
plagas
 Figura 6. Esquema del procedimiento de diluciones seriadas: (fuente: autores)

90 Ml

AGUA PEPTONADA
ESTERIL

90 Ml

AGUA PEPTONADA
ESTERIL 9 ml

10−4

10−4

10−5

10−5 10− 6 10−6

HONGOS

AGAR ROSA DE BENGALA +

CLORANFENICOL

ACTINOMICETOS
BACTERIAS
AGAR ALMIDON AMONIACAL
AGAR GLISERINA
 0.1 ml

10−2

Glucosa sacarosa lactosa manitol xilosa maltosa

90 Ml

AGUA PEPTONADA
ESTERIL
 RESULTADOS

TABLA 1.

ANALISIS DILUCIONES RECUENTO INFORME

MICROBIOLOGICO
HONGOS 10-4 Caja 1: 3 6x104 UFC/g
10-100 Caja 2: 8 suelo CE
ACTINOMICETOS 10-5 Caja 1: 32 31x105 UFC/g
30-300 Caja 2: 30 suelo
BACTERIAS 10-6 Caja 1: 7 7x106 UFC/g
30-300 Caja 2: 7 suelo CE

TABLA 2. DEGRADACION DE COMPUESTOS CARBONADOS DE SUELO

ACIDEZ GAS TURBIDEZ

GLUCOSA + - ++
LACTOSA ++ - ++
SACAROSO ++ ++ ++
XILOSA ++ + ++
MANITOL +++ - +++
MALTOSA ++ - +

TABLA 3: medida de pH del suelo- relación agua: suelo 1:1

pH
Primera muestra 7,04
Segunda muestra 7
Tercera muestra 7,02
Promedio 7,02

TABLA 4: características para hongos

CARACTERISTICAS CAJA 1 CAJA 2

Textura Algodonosa Aterciopelado
Color Blanco Blanco
TABLA 5: características para actinomicetos

CARACTERISTICAS CAJA 1 CAJA 2

Forma Circular Irregular
Color Crema Crema
Borde Entero Ondulado
Elevación Convexa Lente
Superficie Lisa Lisa
Detalle óptico Opaco Opaco

ANALISIS DE RESULTADOS

Los microorganismos son los componentes más importantes del suelo. Constituyen su parte
viva y son los responsables de la dinámica de transformación y desarrollo. La diversidad de
microorganismos que se encuentran en una fracción de suelo cumple funciones
determinantes en la transformación de los componentes orgánicos e inorgánicos que se le
incorporan. Esto permite comprender su importancia en la nutrición de las plantas al
efectuar procesos de transformación hasta elementos que pueden ser asimilados por sus
raíces. La humificación de la materia orgánica es un proceso netamente microbiológico.
(1BURBANO, Hernán.)

La microflora del suelo está compuesta por bacterias, actinomicetos, hongos, algas, virus y
protozoarios.

La mayor concentración de microorganismos se encuentra en la zona cercana a las raíces en

lo que se conoce como en nombre de rizosfera.

Las bacterias del género Azotobacter tienen movimiento y forman quistes cuando
encuentran condiciones difíciles. Pueden fijar 40 kilogramos de nitrógeno por hectárea se
han encontrado en suelos ácidos (5.5 de pH) y alcalinos, pero prefieren los neutros.

Las bacterias del genero Azospirillum son móviles y crecen en suelos con pH cercanos a
neutro. En gramíneas actúan muy bien A. lipoferum y A. brasilense.

Las bacterias del genero Clostridium pasterianum son anaerobias y se reproducen por
esporas cuando encuentran condiciones difíciles. Crecen en suelos anegados, compactados
y en sitios donde se dificulta la circulación de aire en el suelo. Toleran una acidez alta
(hasta 4) y fijan entre 3 y 10 miligramos de nitrógeno por gramo de fuente de carbono
consumido. Son importantes en suelos saturados de agua como el cultivo del arroz donde
suministran nitrógeno en el anegamiento.

Los Rhyzobium son bacterias noduladoras que fijan simbióticamente el nitrógeno en

algunas leguminosas. Los actinomiceto Frankia y Actinomyces nodulan en plantas de porte
arbustivo o arbóreo. El crecimiento óptimo entre 20 y 30 grados centígrados. El pH donde
se desarrollan mejor está entre 4,5 y 7,5. Son aerobios aunque toleran escasez de oxígeno
por un tiempo moderado.

Las urobacterias son aerobias y actúan con la alcalinización que causa la urea al aplicarse al
suelo. Los géneros más importantes son: Bacillus, Clostridium, Pseudomonas,
Micrococcus, Acromobacter y Sarcina.

Las bacterias Bacillus megaterium, Bacillus mesentericus y Pseudomona putida solubilizan

las formas orgánicas del fósforo (ortofósfato) y las transforman a fosfatos asimilables por
las plantas.

Las bacterias del género Thiobacillus oxidan a sulfato el sulfuro que produce en
condiciones de anegamiento y que es tóxico para las plantas. Además oxidan a sulfato el
azufre elemental, compuestos de azufre como tiosulfato, tetrationato y sulfito a sulfato. Se
desarrollan en medios aerobios con pH ácidos y extremadamente ácidos (2-3), forman
ácido sulfúrico en la oxidación para aumentar la acidez.

Las bacterias de los géneros Bacillus, Pseudomonas, Artrobacter convierten el azufre

elemental y el tiosulfato a sulfato. Los hongos del género Aspergillus oxidan el azufre en
polvo.

Bacterias de los géneros Bacillus, Pseudomonas, y Clostridium y hongos como Aspergillus,

Penicillium y Mucor solubilizan el potasio mediante la liberación de ácidos orgánicos o
inorgánicos que reaccionan con los minerales que los contienen. (3GRAHAM, P. H. and
HARRIS, S. C)

En nuestra muestra se logró observar la poca proliferación de colonias de bacteria como se

nota en la figura 1; al momento del conteo su crecimiento fue mínimo (tabla 1), esto debido
al pH y a la nutrición del suelo (pH: 7,02) ya que las bacterias requieren ciertos niveles de
elementos inorgánicos para su nutrición y un pH óptimo para su completo desarrollo,
porque la mayoría se inclinan más hacia los pH ácidos ya que tienen la capacidad de
neutralizar el suelo donde se están desarrollando para cumplir su función.

Hongos: Las micorrizas son muy importantes, sobre todo para los árboles, para los que no
sólo intervienen como aporte de fósforo sino también de otros elementos, incluso de agua.
Los árboles dependen mucho más de las micorrizas que las otras plantas. Los hongos del
género Aspergillus, Penicillium y Rhizopus degradan ácidos nucleicos y glicerofósfatos a
fosfatos simples. Las levaduras del género Saccharomyces y Rhodotorula cumplen la
misma función que los hongos. (2Marulanda Aguirre, A. (2006).)

Se notaron poca cantidad (figura 2), encontrándose fuera del rango en donde se
determinaron las siguientes características como se ve en la tabla 4, en este caso los hongos
obtuvieron un rango menor, esto debido a las características y al pH que presentaba el
suelo, ya que estos son importantes degradadores aerobios de material vegetal en
descomposición en suelos ácidos. Producen enzimas y metabolitos que contribuyen al
ablandamiento y a la transformación de sustancias orgánicas. También estas enzimas
forman parte de la actividad de otros microorganismos.

Los actinomicetos son numerosos y están ampliamente distribuidos no solamente en el

suelo, desde su superficie hasta grandes profundidades, sino en abonos, cieno de los ríos y
fondo de los lagos. En general prefieren los medios alcalinos y son predominantemente
saprófitos aunque se conocen patógenos de plantas, animales domésticos e incluso
humanos. Las técnicas empleadas para su investigación ecológica son múltiples y muestran
que el número de formas viables no difiere mucho de unas a otras, de lo que se infiere que
pueden servirse de nutrientes muy variados. El tipo de suelo, el contenido en materia
orgánica y el pH modifican la población cuantitativamente. En zonas templadas, existen de
100.000 a 100 millones por gramo, siempre que el pH no baje de 5. El actinomiceto
Streptomyces destruye las moléculas orgánicas fósfatadas liberando así el fósforo.
(Edafología. Ciencias Ambientales).

En nuestra muestra se notó una gran variedad de actinomicetos como se representa en la

tabla 1. Con características diferenciales (tabla5). Se notaron trozos compactados de
almidón en el agar y un hongo de contaminación por ambiente en el momento del sembrado
(anexo: figura 3). Esta gran variedad de actinomicetos ya que estos se desarrollan bien en
suelos con pH desde 5 hasta 7. Se reproducen por conidios y estas son resistentes a
condiciones difíciles de temperatura, acidez y humedad. Esto les permite germinar cuando
se restablecen las condiciones favorables para su desarrollo. En suelos secos los
actinomicetos se comportan muy bien.

En el análisis de compuestos carbonados se puede determinar que todos los

microorganismos fueron degradadores de azucares, solo en los tubos de sacarosa y xilosa se
presentó gas, pero en todas hubo turbidez como se puede notar en la tabla 2; ya que la
campana de durhan no lograba vislumbrar de forma clara. (Figura 4), para la acidez, el
mayor contenido lo presento el carbohidrato manitol la cual actúan como un efectivo agente
quelante para los micronutrientes y contribuyen a desarrollar la estructura del suelo.
 CONCLUSIONES

Se conocieron las técnicas básicas (zigzag, diagonales y cuadricula) para la obtención de la

toma de muestra necesaria llevándolas a cabo para el análisis microbiológico del suelo
ubicado en el municipio de villa del rosario-finca: Diana Karina.

Se realizaron recuentos de los microorganismos presentes en el suelo utilizando el método

de recuento en placa profunda mediante la técnica de diluciones en serie (10-1, 10-2, 10-3,
10-4, 10-5,10-6); las cuales te tomaron para sembrar a partir de 10-4 para hongos y levaduras,
10-5 para actinomicetos,10-6 para bacterias, presentándose un mayor recuento para
actinomicetos

Se conocieron mediante actividades bioquímicas de los microorganismos del suelo su

acción sobre los compuestos carbonado los cuales fueron glucosa, sacarosa, lactosa,
maltosa, manitol y xilosa presentando mayor acidez y turbidez el manitol y mayor
presencia de gas en sacarosa.

BIBLIOGRAFIA

1. BURBANO, Hernán. El suelo: una visión sobre sus componentes

biorgánicos.1989.423p.
2. Marulanda Aguirre, A. (2006). Estudio de los mecanismos implicados en la
resistencia de las plantas a estreses osmóticos inducidos por microorganismos
autóctonos promotores del crecimiento vegetal (hongos micorrícico arbusculares
y rizobactrerias). Tesis doctoral.
3. GRAHAM, P. H. and HARRIS, S. C. Biological nitrogen fixation. 1982. 768 p
- Edafología. Ciencias Ambientales. El suelo como hábitat. Microorganismos del
suelo. Actinomicetos. Se puede ver en el siguiente link:
https://www.eweb.unex.es/eweb/edafo/ECAP/ECAL6MActinomicetos.htm.