IDENTIFICACION DE CARBOHIDRATOS 2010

IDENTIFICACION DE CARBOHIDRATOS

José Bravo (28165246), Yuly de la cruz (28165213), Paola Montenegro

(28165226), Omaira Yama (28165230)

FACULTAD DE INGENIERIA AGROINDUSTRIAL

UNIVERSIDAD DE NARIÑO

DOCENTE: Susana Calpa.

RESUMEN

En esta práctica se pudo realizar la identificación de los diferentes carbohidratos

primero que todo se preparo la solución a estudiar, en nuestro caso una solución
problema (miel de abejas) y la muestra biológica (clara de huevo) en las cuales se
utilizaron diferentes pruebas para su respectivo análisis, en cada demostración se
obtuvo resultados positivos y en otros negativos, se tuvo en cuenta algunas
propiedades en este caso algunas coloraciones y según esto se determina la
reacción para la determinación de los carbohidratos. en la prueba de Molisch con
respecto a la solución problema (miel de abejas) salió positiva ya que se produjo
una coloración violeta indicando así la presencia de carbohidratos, en si se logro
reconocer los carbohidratos por medio de reacciones coloreadas de carácter
cualitativo y así diferenciar Hexosas de pentosas, aldosas de cetosas e identificar
azucares reductores y no reductores con la respectiva prueba.

Palabras claves: carbohidratos, pruebas, azucares, pentosas, aldosas, muestras

biológicas.

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 IDENTIFICACION DE CARBOHIDRATOS 2010
INTROODUCCION
Los carbohidratos también llamados
azúcares, osas o sacáridos, son
polihidróxialdehidos
polihidroxicetonas o compuestos
poliméricos que por hidrólisis
producen polihidróxialdehidos
polihidroxicetonas.
Según el número de unidades de
azúcares sencillos que posean se
clasifican en: monosacáridos o
azúcares sencillos, que a su vez
pueden ser aldosas cuando contienen
el grupo aldehído o cetosas cuando
contienen el grupo cetona. Los
monosacáridos naturales pertenecen
a la serie D de los azúcares y pueden
tener entre tres y hasta siete átomos
de carbono. Los disacáridos que
están formados por dos
monosacáridos unidos entre sí por
enlaces glucosídicos.
Los polisacáridos que son polímeros
naturales con varios miles de
unidades de azúcar sencillo ligadas
entre sí.
De acuerdo con lo anterior, además
de reconocer si un compuesto
pertenece a la familia de los
carbohidratos, es necesario
diferenciar si se trata de un
monosacáridos tipo aldosa o cetosa,
si es fácilmente oxidable o no, es
decir si es un azúcar reductor o no lo
es, si es de cinco átomos de carbono
2
(pentosa) o de seis átomos de
carbono (hexosa), si es disacárido o
polisacárido.
o Ensayo de Molisch: Este ensayo es
un ensayo para reconocimiento
general de carbohidratos en el que
y los polisacáridos y disacáridos se
hidrolizan con ácido sulfúrico
concentrado hasta monosacáridos y
se convierten en derivados del
furfural o 5-hidroximetil furfural los
cuales reaccionan con α-naftol
formando un color púrpura violeta.
Ensayo de Benedict: El ensayo de
Benedict permite el reconocimiento
de carbohidratos reductores, al igual
que el reactivo de Fehling, el de
Benedict contiene ion cúprico en
medio alcalino que se reduce hasta
óxido cuproso en presencia de
azúcares con el hidroxilo
hemiacetálico libre.
Ensayo de Barfoed: Esta prueba
permite diferenciar entre
monosacáridos y disacáridos
reductores, también contiene ion
cúprico que se reduce hasta óxido
cuproso más rápidamente con los
monosacáridos que con los
disacáridos.
Ensayo con Lugol: El reactivo de
Lugol que contiene una mezcla de
yodo y yoduro, permite reconocer
polisacáridos, particularmente el
almidón por la formación de una
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coloración azul violeta intensa y el
glicógeno y las dextrinas por
formación de coloración roja.
Ensayo de Seliwanoff: Este ensayo
es específico para cetosas y se basa
en la conversión de la cetosa en 5-
hidro-metil-furfural y su posterior
condensación con resorcinol
formando así complejos coloreados.
Ensayo de Bial: El reactivo de Bial
contiene orcinol en ácido clorhídrico,
el cual forma complejos de coloración
sólo con las pentosas.
PROCEDIMIENTO
Para realizar las diferentes pruebas
utilizamos dos muestras biológicas:
MIEL DE ABEJAS: se disolvió 10 ml
de miel de abejas en agua destilada
hasta completar 100 ml y para que se
disolviera mejor se la agito en baño
María.
CLARA DE HUEVO: se midió 1ml de
clara de huevo y se agrego cinco
veces su volumen en agua y se agito
con la cual se hará la identificación de
azucares
1. Prueba para carbohidratos
en general: reacción de
Molisch:
3
Carbohidratos: miel de
abejas, clara de huevo,
glucosa, sacarosa y almidón.
A un 1 ml de carbohidrato más
agua se le agrego tres gotas
del reactivo de Molisch y se
agito, luego se dejo resbalar
por las paredes del tubo1 ml
de H2SO4 concentrado.
2. Prueba del acido mucico
para reconocimiento de
galactosa:
Carbohidratos: miel de
abejas, clara de huevo,
glucosa, galactosa y lactosa.
Esta prueba se realizo en la
cabina de extracción de gases.
Se tomo 1ml de solución de
carbohidrato en diferentes
tubos de ensayo y luego se
adiciono acido nítrico
concentrado y se calentó en un
baño María de agua hirviendo
hasta que el volumen del tubo
de ensayo sea la mitad del
original y la solución tome un
color amarillento (1 hora).
Luego se saco los tubos del
agua hirviendo y se dejo
enfriar los tubos al aire libre
por 20 minutos y luego se los
deposito en baño de hielo.
Después de haber pasado 2
horas con un agitador de vidrio
se tomo una pequeña muestra
y se la miro en microscopio.
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3. Prueba de ozasonas para introdujo los tubos en baño de

reconocimiento de azucares: agua hirviente durante 5
Carbohidratos: miel de minutos.
abejas, clara de huevo,
glucosa, galactosa, fructosa y 5. Prueba de barfoed para
sacarosa. distinguir entre
Se coloco en diferentes tubos monosacáridos y
0,5 ml de fenilhidrazina y luego disacáridos:
se le agrego 1ml del Carbohidratos: miel de
carbohidrato, luego se agito y abejas, clara de huevo,
se calentó en un baño de agua glucosa, fructosa, maltosa y
hirviente y se dejo enfriar los lactosa.
tubos a temperatura ambiente A 2ml de reactivo de Barfoed
para luego observar los se le agrego 1ml de solución
cristales en el microscopio. de carbohidrato y luego se
agito, se calentó el tubo en
4. Azucares reductores: baño de agua hirviente durante
Pruebas de Fehling y 5 minutos.
Benedict
Carbohidratos: miel de 6. Prueba para el
abejas, clara de huevo, reconocimiento de cetosas:
glucosa, sacarosa y almidón. Carbohidratos: miel de
abejas, clara de huevo,
Prueba de Fehling: en un glucosa, fructosa y sacarosa.
tubo de ensayo se mesclo 2ml Seliwanoff: a 2 ml de reactivo
de solución fehling A y 2 ml de de Seliwanoff se le agrego 1
la solución fehling B y al ml de la solución de
instante se le agrego 1 ml de carbohidrato y se calentó en
solución de carbohidrato, se baño de agua hirviente.
agito y se los coloco los tubos
en un baño María de agua 7. Prueba de Bial para
hirviente durante 15 minutos. reconocer pentosas:

Prueba de Benedict: en un Carbohidratos: miel de

tubo de ensayo se coloco 1ml
de la solución de carbohidrato
más 2ml de reactivo de
benedict, luego se agito y se
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abejas, clara de huevo, xilosa,
arabinosa y glucosa.
A 1ml de solución de
carbohidrato se le agrego 3 ml
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de reactivo de Bial, luego se
agito y se coloco en baño de
agua hirviente.
8. Reconocimiento de
polisacáridos con el reactivo
de lugol:
Carbohidratos: miel de
abejas, clara de huevo,
glucosa, dextrina, almidón y
glicógeno.
A 1ml de carbohidrato se le
agrego dos gotas del reactivo
del Lugol y se agito.
DISCUSIÓN Y RESULTADOS
1. Prueba para carbohidratos
en general: reacción de
Molisch:
Al realizar las diferentes
pruebas observamos que con
los carbohidratos que
reacciono la prueba de Molisch
fue con la sacarosa y la prueba
biología en la cual utilizamos
miel de abejas ya que
observamos un anillo de color
violeta lo cual nos indica la
presencia de carbohidratos, en
las demás reacciones como
fue con el huevo dio como
resultado una coloración rojiza
con un precipitado blanco igual
sucedió con el almidón.
5
2. Prueba del acido mucico
para reconocimiento de
galactosa:
Esta prueba fue imposible
comprobarla ya que no se
formaron los cristales
requeridos para esta
determinación, esto se los
realizaría en el microscopio,
una de las razones más
considerables porque no se
produjo esta reacción es la
estabilidad y calidad de los
reactivos que no fueron
suficientes en el aspecto de
calidad para generan los
objetivos propuesto.
3. Prueba de ozasonas para
reconocimiento de azucares:
En esta prueba las reacciones
positivas fueron con la
fructosa, el huevo y la
miel observando la aparición
de cristales ya que las
ozasonas son compuestas por
la condensación de
fenilhidrazina las cuales tienen
características cristalinas lo
cual nos permitió su
identificación. Con los demás
compuestos como fue con la
glucosa y sacarosa no se
observo reacción alguna ya
que se obtuvo una coloración
amarilla.
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4. Azucares reductores:
Pruebas de Fehling y realizamos
Benedict:
Reacción de fehling:
Se funda en el poder reductor
del grupo carbonilo de un
aldehído. Éste se oxida a ácido
y reduce la sal de cobre (II) en
medio alcalino a óxido de
cobre (I), que forma un
precipitado de color rojo. Un
aspecto importante de esta
reacción es que la forma
aldehído puede detectarse
fácilmente aunque exista en
muy pequeña cantidad. Si un
azúcar reduce el licor de
Fehling a óxido de cobre (I)
rojo, se dice que es un azúcar
reductor.
Se utiliza como reactivo para la
determinación de azúcares
reductores, y es útil para
demostrar la presencia de
glucosa, y también para
detectar derivados de la
glucosa como la sacarosa o la
fructosa.
Al reaccionar con
monosacáridos, se torna
verdoso; si lo hace con
disacáridos, toma el color del
ladrillo.
6
Reacción de benedict:
En las reacciones que
las que dio
positivas fueron: la glucosa, la
miel ya que se observo una
coloraciones de color amarilla
y rojas con baja intensidad, ya
que estos reactivos contienen
sales cúpricas que le dan
coloración en el reactivo como
fue en el caso de la sacarosa,
almidón y el huevo. En medio
alcalino el ion cúprico se
transforma en hidróxido
cúprico y este en presencia de
azúcar reductor se transforma
en hidróxido cuproso que por
acción del calor se transforma
en oxido cuproso el cual es
insoluble en agua por lo cual
produce un precipitado de
color rojo y cuando se
encuentra en bajas
concentraciones su color es
amarillo como en el caso de
las reacciones que nos dieron
positivas ya que pertenecen a
grupos reductores libres.
5. Prueba de barfoed para
distinguir entre
monosacáridos y
disacáridos:
Las pruebas que nos dieron
positivas fueron la fructosa, la
miel, la glucosa y el huevo ya
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que al reaccionar con la
prueba de barfoed nos dio una
coloración roja amarillenta ya
que aquí el cobre está en una
disolución débilmente acida,
en forma de acetato; por efecto
de sustancias reductoras en
caliente, se producen iones
cuprosos que precipitan en
caliente en forma de oxido
cuproso.
6. Prueba para el
reconocimiento de cetosas:
SELIWANOFF:
Al transcurrir un tiempo de
realizar la reacción e que obtuvimos una coloración
introducirla en baño de agua
hirviente se observo que los
carbohidratos que
reaccionaron fueron la miel, el
huevo y la sacarosa ya que
produjeron un color rojo
intenso a los pocos minutos de
haberlo colocados al calor,
comprobando así que hubo la
presencia de cetohexosas,
aldosas. Ya que las cetosas en
presencia de acido clorhídrico
se deshidratan rápidamente
que las aldosas produciendo
derivados del furfural que se
condensa con resorcinol lo
cual da una coloración roja.
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7. Prueba de Bial para
reconocer pentosas:
La pruebas que nos dieron
positivas fueron la xilosa,
arabinosa ya que nos dieron
una coloración azul lo cual
quiere decir que estas
contienen pentosas.
El huevo y la glucosa dieron
una coloración amarilla.
8. Reconocimiento de
polisacáridos con el reactivo
de lugol:
En esta reacción con el
almidón nos dio positiva ya
azul oscura, pero con los
demás carbohidratos nos dio
una coloración roja como fue
con la glucosa, el huevo y la
miel.
Con la dextrina la prueba nos
resulto con una coloración
negra por lo cual pudimos
determinar que la muestra
estaba contaminada y el
glicógeno por ser altamente
ramificado, con segmentos
cortos produjo una coloración
roja.
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PRUEBAS Miel Clara Glucosa Sacarosa Almidón Galactosa Lactosa Fructosa Maltosa xilos Arabinosa Dextrina glicógeno
de a
huevo
MOLISCH + - + -
ACIDO
MUCICO
OZASONAS + + + - - +
FEHLING + + + - - +
BENEDICT + - + - -
BARFOED + + + - + -
SELIWANOFF + + + -
BIAL - - + +
LUGOL - - + ?

CONCLUSIONES acetal o cetal no dan pruebas

positivas con estas soluciones
 Los carbohidratos tienen una y se llaman azúcares no
estructura definida pueden ser reductores.
monosacáridos, disacáridos,
trisacáridos, oligosacáridos y
polisacáridos. y se los puede
identificar mediante las  La glucosa, dextrosa y
pruebas realizadas galactosa son monosacáridos
anteriormente en donde y la lactosa, maltosa y
dependiendo de su estructura sacarosa, disacáridos.
indican una coloración.

 El uso del yodo no es buen

 Los monosacáridos reaccionan determinante para la
de acuerdo a los grupos determinación de
hidroxilo y carbonilo que polisacáridos.
poseen. Los disacáridos y los
polisacáridos se pueden
hidrolizar para producir
monosacáridos. Los azúcares  Comparada Con La Muestra
que dan resultados positivos Biológica Con La Muestra
con las soluciones de Problema
Benedict ó Fehling se conocen
como azúcares reductores, y
todos los carbohidratos que
contienen un grupo hemiacetal
o hemicetal dan pruebas
positivas. Los carbohidratos
que solo contienen grupos

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(clara de huevo) fueron

PRUEBAS Muestra Muestra positivas lo que indica,
problema biológica
Miel Clara de Positivo: Aldehídos alifáticos y
huevo α-hidroxialdehidos
MOLISCH + - Negativo: Aldehídos
ACIDO aromáticos y cetonas
MUCICO Reacción de oxidación de
OZASONAS + + azúcares por iones cúpricos
FEHLING + + Un ejemplo típico de azúcares
BENEDICT + - reductores serían la glucosa y
+ +
BARFOED la maltosa, y de azúcares no
+ +
SELIWANOFF reductores, el disacárido
-
BIAL sacarosa (O-β-D-
- -
LUGOL fructofuranosil-(2-1)-α-D-
glucopi… Las cetosas, que no
son azúcares reductores,
EL ENSAYO DE MOLISH sufren, sin embargo,
reacciones de oxidación típicas
En el caso de la muestra de los aldehídos; para ello
problema (miel de abejas) la necesitan un medio básico, ya
prueba fue positiva dando que a valores altos de pH se
lugar a derivados de color produce una isomerización a la
púrpura. Es una prueba correspondiente aldosa.
general de azúcares.
BENEDICT
OZASONAS
Tanto la Muestra problema
En el huevo y la miel se (Miel) y muestra biológica
observo la aparición de (clara de huevo) fueron
cristales ya que las ozasonas positivas lo que indica,
son compuestas por la
condensación de fenilhidrazina Positivo: miel precipitada de
las cuales tienen color rojo ladrillo
características cristalinas lo Negativo: clara de huevo
cual nos permitió su
identificación. Lo que indica que:

FEHLING Cu + + OH - → Cu (OH)
(precipitado amarillo)
Tanto la Muestra problema
(Miel) y muestra biológica El hidróxido pierde agua

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2Cu (OH) → Cu2O
(precipitado rojo ladrillo) + H2O
La aparición de un precipitado
amarillo, anaranjado, o rojo
ladrillo evidencia la presencia
de un azúcar reductor.
BARFOED
La aparición de un precipitado,
en la Muestra problema (Miel)
y muestra biológica (clara de
huevo). Fueron positivos.
Aparece un precipitado blanco
de ácido múcico. ó indica que no Es pentosas.
galactérico.Sirvio para
identificar la galactosa ó los
azúcares que la contiene. se
diferencia a los mono de los
disacáridos. Estos últimos
reaccionan más lentamente
con el acetato cúprico, debido
probablemente al tamaño
molecular, aunque también
pueden estar implicados otros
factores tales como una
interacción más compleja con
los dos anillos monosacáridos.
SELIWANOFF
la Muestra problema (Miel) y
muestra biológica (clara de
huevo) fueron positivas lo que
indica, derivados de color rosa-
rojo. Es una prueba específica
10
de hexosas. Las cetosas en
medio ácido se deshidratan
más rápidamente que las
aldosas, por lo que ambos
grupos pueden diferenciarse
en función del tiempo que
tarda en aparecer el producto
coloreado.
BIAL
Se realizo la prueba solamente
en la muestra biológica (clara
de huevo), la cual resulto
negativa y no dio lugar a
derivados de color azul. Esto
LUGOL
Tanto la Muestra problema
(Miel) y muestra biológica
(clara de huevo) fueron
negativas lo que indica, que no
hubo la presencia de almidón
al no cambiar su color de
caramelo a azul.
BIBLIOGRAFIA:
1. Química Orgánica. McGraw
Hill. Novena edición. España.
1997.
2. J. Química Orgánica. Quinta
edición, Thomson editores,
México, 2001